山绿茶醇提物对小鼠血糖水平双向调节作用的研究

山绿茶醇提物对小鼠血糖水平双向调节作用的研究
陈晶;吴燕春;李萍
【摘要】目的探讨山绿茶70％乙醇提取物(Ilex hainanensis Merr 70％alcohol extract,IHAE)对血糖的双向调节作用.方法 1.采用肾上腺素(Adrenaline,AD)诱导小鼠高血糖模型,GOD-PAP法检测血糖(Blood Glucose,BG)水平,观察IHAE对BG水平的影响;2.采用葡萄糖(Glucose,Glu)诱导小鼠高血糖模型,葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP)检测BG水平,观察IHAE对BG水平的影响;3.GOD-PAP法检测正常小鼠BG水平,观察IHAE对BG水平的影响.结果与模型组比较,IHAE显著性降低AD、Glu诱导的高血糖小鼠的BG水平(P<0.05),显著性升高正常小鼠BG水平(P<0.05).结论 HAE对AD、Glu诱导的高血糖小鼠有较好的降糖作用,对正常小鼠有较好的升糖作用.
【期刊名称】《牡丹江医学院学报》
【年(卷),期】2019(040)003
【总页数】3页(P29-31)
【关键词】山绿茶;血糖;高血糖
【作者】陈晶;吴燕春;李萍
【作者单位】莆田学院药学与医学技术学院,福建莆田 351100;广西中医药大学科学实验中心;广西中医药大学药学院,广西南宁 530001
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
山绿茶为广西少数民族民间常用的中草药，使用历史悠久，已收载于《广西中药材标准》(1990年版)[1]和《广西壮药质量标准》(2008年版第一卷)[2]。

其由冬青科植物海南冬青(Ilex hainanensis Merr)的干燥叶加工炮制而成。

山绿茶性味苦、甘、平，具有清热解毒、平肝潜阳、活血通脉、消肿止痛等功效。

目前，主要用于高血压、高血脂、高胆固醇、冠心病、扁桃体炎等病症。

本研究采用AD、Glu诱导高血糖模型小鼠和正常小鼠，观察山绿茶70%乙醇提取物(IHAE)对小鼠BG水平的影响。

1 材料与方法
1.1 试验药物和试剂 IHAE：广西中医药大学药理学实验室提取；盐酸肾上腺素注射液：天津金耀氨基酸有限公司；格列本脲：天津太平洋制药有限公司；葡萄糖：广东达濠精细化学品公司；葡萄糖GOD-PAP法检测试剂盒：四川省迈克科技有限责任公司。

1.2 试验动物昆明种小鼠，雌雄各半，体重17～23 g。

试验动物合格证号：桂动字第11004号；使用许可证号：SYXK桂2003-0001。

由广西中医药大学实验动物中心提供。

1.3 主要仪器 LG16-W型离心机，北京医用离心机厂；TU-1901双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；微量移液器：大龙医疗设备(上海)有限公司。

1.4 试验方法
1.4.1 IHAE对AD致高血糖小鼠BG水平的影响取正常小鼠60只，随机分为正常对照组、模型对照组、格列本脲(优降糖
2.5mg/kg，下同)组和IHAE高、中、低(15g药材/kg、10g药材/kg、5g药材/kg)剂量组，以下分别简称“IHAE-H、IHAE-M、IHAE-L”剂量组。

每组10只，每天灌胃(ig)给药1次，给药容量
20mL/kg。

正常对照组和模型对照组给予等体积蒸馏水，连续7d。

末次给药前小鼠禁食不禁水12h，于末次给药后1h，正常对照组腹腔注射(ip)生理盐水(NS)，
其余各组均ip AD 240μg/kg，ip容量10 mL/kg。

分别在ip后0.5h和1h，从
小鼠眼眶静脉丛取血，血凝后3500r/min离心15min，分离血清，测定BG水平。

1.4.2 IHAE对Glu致高血糖小鼠BG水平的影响取正常小鼠60只，随机分为正
常对照组、模型对照组、格列本脲组和IHAE-H、IHAE-M、IHAE-L剂量组。

每
组10只，每天ig给药1次，给药容量20mL/kg。

正常对照组和模型对照组给予等体积蒸馏水，连续7d。

末次给药前小鼠禁食不禁水12h，于末次给药后1h，正常对照组ip NS，其余各组均ip Glu溶液(2g/kg)，ip容量10 mL/kg。

分别在ip 后0.5h，1h，2h从小鼠眼眶静脉丛取血，血凝后3500r/min离心15min，分离血清，测定BG水平。

1.4.3 IHAE对正常小鼠BG水平的影响取正常小鼠50只，随机分为正常对照组、格列本脲组和IHAE-H、IHAE-M、IHAE-L剂量组，每组10只，每天ig给药1次，给药容量20mL/kg。

正常对照组给予等体积蒸馏水，连续7d。

末次给药前小鼠禁食不禁水12h，于末次给药后1h，从小鼠眼眶静脉丛取血，血凝后
3500r/min离心15min，分离血清，测定BG水平。

1.5 统计学方法采用PEMS
2.1统计软件进行t检验，数据资料以“均数±标准差”表示，组间比较以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果
2.1 IHAE对AD致高血糖模型小鼠BG水平的影响 ip AD 后0.5h和1h，模型组
小鼠BG水平显著性升高(P<0.01)，且小鼠BG值均≥7.6mmol/L，提示该AD致高血糖小鼠模型稳定可靠。

与模型组比较，格列本脲组小鼠BG水平显著性降低(P<0.01)；ip AD后0.5h，IHAE-H、IHAE-L降血糖作用有显著性差异(P<0.05)，IHAE-M有一定的降血糖作用；ip AD后1h，IHAE-H、IHAE-M、IHAE-L均显
著性降低BG水平(P<0.05)。

见表1。

表1 IHAE对AD致高血糖小鼠BG水平的影响组别剂量(g/kg)血糖值
(mmol/L)0.5h1h正常组蒸馏水2.08±0.482.22±0.52模型组蒸馏水
11.86±2.35△△12.22±2.06△△格列本脲2.5mg8.11±1.46∗∗8.96±1.20∗∗IHAE-
H159.57±1.07∗10.17±1.18∗IHAE-M1010.32±1.1810.22±2.03∗IHAE-
L59.62±1.33∗9.92±1.80∗
注：与正常组比较,△P<0.05,△△P<0.01；与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。

2.2 IHAE对Glu致高血糖模型小鼠BG水平的影响 ip Glu后0.5h、1h、2h，模
型组小鼠BG水平显著性升高(P<0.01)，且小鼠BG值均≥7.6mmol/L，提示该Glu致高血糖小鼠模型稳定可靠。

与模型组比较，格列本脲组小鼠BG水平显著性降低(P<0.01)；ip Glu后0.5h和1h，IHAE-H、IHAE-L降血糖作用有显著性差
异(高剂量P<0.05，低剂量P<0.01)，IHAE-M有一定的降血糖作用；ip Glu后
2h，IHAE-H、IHAE-M降血糖作用显著(P<0.05)，IHAE-L有一定的降血糖作用。

见表2。

表2 IHAE对Glu致高血糖小鼠BG水平的影响组别剂量(g/kg)血糖值
(mmol/L)0.5h1h2h正常组蒸馏水2.80±0.462.35±0.603.01±0.69模型组蒸馏水13.28±2.16△△11.99±2.51△△10.13±2.41△△格列本脲
2.5mg6.62±1.33∗∗7.08±1.51∗∗5.97±1.52∗∗IHAE-
H1510.96±1.96∗9.47±2.04∗8.08±1.63∗IHAE-
M1011.39±1.8010.09±2.307.82±1.91∗IHAE-
L510.54±2.54∗∗8.74±2.05∗∗8.17±2.22
注：与正常组比较,△P<0.05,△△P<0.01；与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。

2.3 IHAE对正常小鼠BG水平的影响与正常组比较，格列本脲组小鼠BG水平显
著性降低(P<0.05)；IHAE-H升糖作用显著(P<0.05)，IHAE-M、IHAE-L有一定
的升糖作用。

见表3。

表3 IHAE对正常小鼠BG水平的影响组别剂量(g/kg)血糖值(mmol/L)正常组蒸馏水1.97±0.55格列本脲2.5mg1.31±0.21△IHAE-H152.83±0.74∗IHAE-
M102.69±0.71IHAE-L52.93±0.99
注：与正常组比较,△P<0.05,△△P<0.01；与模型组比较 *P<0.05,**P<0.01。

3 讨论
据《新华本草纲目》记载：“山绿茶，又名海南冬青，性寒，味苦，入肝、脾、肺、肾经，平息肝风，用于肝风头痛及肝阳上亢头痛、头晕等症。

”《中国药典》2015版收录了其制剂“山绿茶降压片”[3]。

近年来，对其化学成分进行研究发现：山绿茶富含黄酮类、咖啡酰奎宁酸类、半萜苷、三萜及其皂苷类成分[4-6]。

刘宗
洋[7]测定了冬青皂苷A1与冬青素A 在药材中含量之和占总三萜50% 以上。

张丽敏[8]检测了山绿茶药材中的22个无机元素。

我们的前期研究证实了：IHAE能降
低正常麻醉猫血压[9]，降低实验性高脂血症鹌鹑的血脂水平[10]，对四氧嘧啶诱
导的糖尿病小鼠降糖作用明显[11]。

而作为机体内神经递质之一的肾上腺素和重要的供能物质葡萄糖对血糖水平的影响至关重要。

因此，我们研究了IHAE对肾上腺素、葡萄糖致高血糖模型小鼠血糖水平的影响。

目前认为，肾上腺素可兴奋机体多种靶细胞上的β受体，使糖异生增加、糖元分解，减少外周组织细胞对葡萄糖的摄取利用，同时增加胰高血糖素的分泌，减少胰岛素的分泌，促进葡萄糖的吸收，从而升高血糖水平[12]。

本研究腹腔注射肾上腺素诱导小鼠高血糖模型。

试验结果表明：IHAE能降低腹腔注射肾上腺素小鼠的高血糖水平，拮抗肾上腺素的升糖效应。

我们推测IHAE可能通过阻断肾上腺素的升糖作用途径而发挥降糖作用，其作用机制可能与增强胰岛的分泌功能、促进胰岛β细胞的修复与再生，以及相关活性成分对机体细胞的保护作用有关。

餐后高血糖以及降糖药物引发的低血糖，是Ⅱ型糖尿病患者血糖波动的主要原因。

波动性高血糖能增强蛋白激酶C(PKC)活性，激活氧化应激反应，促进内皮细胞凋
亡[13]，加速了细胞形态和功能的损害[14]。

同时，显著性增加Ⅱ型糖尿病患者的微血管病变和心血管死亡危险[15]。

而糖尿病患者由于血糖调节机制受损，加之饮食控制不佳、治疗依从性差、用药不当等因素导致血糖波动明显，餐后血糖水平上升尤为显著。

试验结果显示：IHAE能降低腹腔注射葡萄糖诱导的小鼠高血糖水平；拮抗机体吸收葡萄糖引起的升糖效应。

因此，我们推测：IHAE能降低糖尿病小鼠的餐后高血糖水平，减少血糖的波动范围，减缓血糖波动对机体细胞的损伤作用。

其作用机制可能与阻碍葡萄糖的吸收，促进外周组织对葡萄糖的利用，增加糖原的合成有关。

西药降糖作用疗效肯定，但会导致低血糖、乳酸中毒等不良反应[16]。

而低血糖往往提示过大的血糖波动[17]。

目前的临床应用证实中草药的降糖作用平稳，较少引起低血糖、乳酸中毒等不良反应。

因此，我们研究了IHAE对正常小鼠血糖水平的影响。

试验结果显示：IHAE能升高正常小鼠的血糖水平，其中IHAE-H有显著的升糖作用(P<0.05)。

因此，IHAE较少会导致血糖水平过低。

我们以山绿茶药材的70% 乙醇提取物作为研究对象，其富含的糖类物质可能升高了正常小鼠的血糖水平。

本研究表明：IHAE对血糖有双向调节作用，可降低高血糖水平，对正常血糖水平有一定的升高作用。

进一步验证了中草药对机体的双向调节作用。

今后，我们可以进一步研究山绿茶中冬青皂苷A1、冬青素A 和无机离子对血糖水平的影响，为山绿茶的降血糖作用提供更有力的支持。

参考文献
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