两种香花植物叶、花提取物抑菌活性的研究

两种香花植物叶、花提取物抑菌活性的研究
黄素华;陈小红;林标声
【摘要】研究桂花、夜来香两种校园常见香花植物叶、花乙醇提取物对不同微生物的抑菌作用,结果表明:桂花、夜来香花提取样品的抑菌效果均要比叶的好,它们对不同微生物种类的抑菌能力强弱不同.总体上,夜来香叶、花不同提取样品对不同菌种的抑菌效果要强于桂花.
【期刊名称】《龙岩学院学报》
【年(卷),期】2011(029)002
【总页数】3页(P73-75)
【关键词】桂花;夜来香;提取物;抑菌
【作者】黄素华;陈小红;林标声
【作者单位】龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364012;福建医科大学附属龙岩市第一医院妇产科,福建龙岩,364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364012【正文语种】中文
【中图分类】S68
桂花（Osmanthus fragrans），又名“月桂”、“木犀”，俗称“桂花树”，为我国传统的十大名花之一，具有上千年栽培历史。

桂花为常绿灌木或小乔木，温带树种。

叶对生，多呈椭圆或长椭圆形；花簇生，花冠分裂至基乳，有乳白、黄、橙红等色。

桂花又因其具有药用、观赏、食用等价值，长久以来就是优良的园林绿化
树种。

[1]夜来香（Cestrum nocturnum L.），又名夜丁香、洋丁香。

叶对生，叶宽卵形、心形至矩圆状卵形；花冠5裂，矩圆形，黄绿色，有清香气，夜间更甚，故名“夜来香”、“夜香花”。

据报道，夜来香提取物有抗心律失常、局部麻醉、中枢抑制、镇痛、抑菌等作用，民间有用夜来香驱蚊。

[2，3]桂花和夜来香均是校园常见的绿化香花植物，对改善校园的生态环境发挥着重要的作用，但其抑菌作用在生态环境中的价值一直未曾受到重视。

因此，本论文意在通过研究这两种香花植物叶和花不同乙醇提取物对空气中常见微生物的抑菌作用，为校园绿化的选择提供参考依据。

1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品材料
桂花、夜来香均采自龙岩学院校园，叶和花分开处理。

叶、花经除杂等清理后室温晾干、加石英砂研磨，分别得叶、花碎末样品，留待进一步处理。

1.1.2 菌种
蜡样芽胞杆菌（G+）、枯草芽孢杆菌（G+）、金黄色葡萄球菌（G+）、大肠杆
菌（G-）、绿脓杆菌（G-）、青霉（霉菌）、白色念珠菌（酵母）
1.1.3 培养基
细菌：牛肉膏蛋白胨培养基；霉菌：马铃薯培养基（PDA）；酵母：酵母培养基（YPD）
1.1.4 主要仪器
仪器：回流提取装置、RE52-9型旋转蒸发器、牛津杯
1.2 方法
1.2.1 样品材料提取
分别取桂花、夜来香叶、花干粉各4g，用95%乙醇回流提取24h，提取液经旋转
蒸发器减压浓缩至10mL，收集待用，所得的样品初始浓度为0.4g/mL，再分别
稀释 5、10 倍，得 0.08、0.04g/mL。

1.2.2 提取样品的生物活性成分性质测定
分别将所得的样品溶液进行生物活性成分性质测定，包括皂苷、酚类、黄酮类、蒽醌类、生物碱、糖类。

各成分测定参照刘建文[4]等方法。

1.2.3 提取样品的抑菌试验
各实验菌种经传代、活化后，配置成浓度为105～106个/mL，取0.1mL涂布于
各菌生长培养基上。

采用牛津杯抑菌实验法研究各样品提取液对不同菌种的抑菌效果。

各平板牛津杯中加入样品溶液100uL，无菌蒸馏水为对照。

样品溶液加好后，放置于培养箱中培养，细菌37℃，酵母、霉菌30℃，均培养24h。

测定各样品形成的抑菌圈大小，取平均值。

比较分析桂花、夜来香叶、花不同提取样品抑菌能力强弱。

1.2.4 不同提取样品最小抑菌浓度（MIC）实验
桂花、夜来香叶、花不同提取样品初始浓度为0.4g/mL，采用试管二倍稀释法进
行梯度稀释。

研究各样品的最小抑菌浓度（MIC），方法如下所示。

取10支试管，第1支无菌加入9mL、第2-10支加入5mL各菌生长适合的液体
培养基。

另取各提取样品溶液分别加1mL至第1管，混合均匀后取5mL至第2管，如此类推至第8管，第8管取5 mL舍去。

所得的各试管样品浓度分别为40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.313mg/mL。

第 1-8 管中各加入实验菌种
（浓度为 105～106个/mL）菌液5.0μL（各微生物菌龄为16-18h）。

第9管为不加提取样品、加菌液作为阳性对照，第10管为不加提取样品、不加菌液作为阴性对照。

各样品溶液混合均匀后，细菌37℃，酵母、霉菌30℃培养24h。

肉眼观察各试管是否有无菌生长（阳性可见浑浊，阴性可见澄清），以不出现菌生长的最后一管中的样品浓度作为该样品提取液对不同菌的最小抑菌浓度（MIC）。

同时，配置80mg/mL的苯甲酸钠作为阳性对照，测定苯甲酸钠的最低抑菌浓度（MIC）。

[5]
2 结果与分析
2.1 不同提取样品生物活性成分的性质测定
桂花、夜来香叶、花不同提取样品性质测定结果如表1所示。

实验结果表明，桂
花和夜来香花、叶中所含活性成分相差较大。

桂花叶中主要含有皂苷和糖类，桂花花中主要含有酚类、生物碱和糖类；夜来香叶中主要含有皂苷和蒽醌类，夜来香花中主要含有皂苷和生物碱。

表1 桂花、夜来香叶、花不同提取样品性质测定成分注：“+”表示阳性，“-”
表示阴性?
2.2 不同浓度提取样品抑菌试验结果
桂花、夜来香叶、花三种不同浓度提取样品的抑菌试验结果如表2、表3所示。

结果表明：桂花、夜来香花提取样品的抑菌效果均要比叶的好。

桂花叶、花提取样品对G-和霉菌抑菌效果比G+和白色念珠菌效果好；夜来香叶、花提取样品对G+、霉菌、白色念珠菌抑菌效果比G-效果好；随着各样品提取液浓度的增加，各样品
对不同微生物的抑菌效果也随之增强。

总体上，夜来香叶、花不同提取样品对不同菌种的抑菌效果要强于桂花。

表2 不同浓度桂花叶、花提取样品抑菌试验结果桂花样品叶（g/mL）花（g/mL）0.4 0.08 0.04 0.4 0.08 0.04蜡样芽胞杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌绿脓杆菌青霉白色念珠菌11.5 10.5 11.0 12.0 13.5 12.5无10.0 9.0 10.0 11 11.5 10.5无8.7无8.7 9 9.5 9.0无12.0 12.0 11.5 13.0 14.5 13.0无11.0 11.0 10.5 12.5 13.0 12.5无9.8 10.0 10.0 12.0 12.0 9.7无
表3 不同浓度夜来香叶、花提取样品抑菌试验结果夜来香样品叶（g/mL）花
（g/mL）0.4 0.08 0.04 0.4 0.08 0.04蜡样芽胞杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球
菌大肠杆菌绿脓杆菌青霉白色念珠菌15.0 13.5 12.0 10.0 8.5 11.5 17.0 12.5 13.0 11.0 9.5无11.0 16.0 11.0 12.5 10.0 9.0无10.0 15.0 16.0 14.5 12.5 12.0 10.0 14.0 21.5 13.5 14.0 12.0 11.5无10.0 16.0 13.0 13.0 11.0 10.7无8.6 15.5 2.3 不同提取样品最小抑菌浓度（MIC）实验结果
桂花、夜来香叶、花不同提取样品最小抑菌浓度（MIC）试验结果如表4所示。

结果表明：苯甲酸钠作为阳性对照，不同提取样品的MIC值较小或一致，表明各提取样品能达到甚至优于山梨酸钾的抑菌效果；桂花叶、花提取样品对G-和霉菌的MIC值要比G+和白色念珠菌小，夜来香叶、花提取样品对G+、霉菌、白色念珠菌的MIC值要比G-小。

上述结果与牛津杯抑菌圈大小试验结果一致。

表4 桂花、夜来香叶、花不同提取样品最小抑菌浓度（mg/mL）桂花夜来香苯甲酸钠叶花叶花蜡样芽胞杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌绿脓杆菌青霉白色念珠菌20 20 20 10 10 10无20 20 20 10 5 10无551 0 551 0 20 20 5 1.25 20 20 5 1.25 20 20 20 20 10 10 40
3 讨论
绿化植物美化校园，同时还对环境起着重要的调节作用。

近年来，对植物叶、花等成分抑菌作用已逐渐地引起了人们的关注。

郭阿君[6]等人认为，植物对不同微生物的抑制作用与植物自身生理特性、植物种类、季节等诸多因素有关；胡仁火[7]等人对8种校园绿化植物挥发性物质的抑菌杀菌作用进行了系统的研究，并认为从环境生态学的角度来看，选择抑菌、杀菌作用强的植物用于高校的绿化，有利于绿色高校建设。

桂花、夜来香是校园常见的两种香花植物，对它们的研究目前主要集中在活性物质的提取和药用功能等方面的研究，对其抑菌活性方面的报道较少。

[8-9]本论文试验结果表明：（1）桂花和夜来香花、叶中所含活性成分相差较大，这可能是造成两者抑菌效果差异的原因。

（2）总体上，桂花、夜来香花提取样品的抑菌效果均
要比叶的好。

夜来香叶、花不同提取样品对不同菌种的抑菌效果要强于桂花。

各样品对不同微生物的抑菌效果也随着样品浓度的增加而增强。

（3）与阳性对照苯甲酸钠相比，不同提取样品的MIC值较小或一致，表明各提取样品能达到甚至优于山梨酸钾的抑菌效果。

本论文通过测定桂花、夜来香乙醇提取物所含的活性成分和其对不同微生物的抑菌效果，旨在为高校校园绿化植物品种的选择提供参考依据，而且也希望能为植物病害防治、环境保护开辟一条新的途径。

【相关文献】
[1]邓荣艳，向其柏，黄莹.广西桂花品种资源与园林利用调查[J].南京农业大学学报，2004，28(9)：30-34.
[2]曾靖，黄贤华，赖飞，等.夜来香根茎水提取液局部麻醉作用的研究[J].赣南医学院学报，2003，23(1):1-3.
[3]郭清龙，王小丽，江丽霞，等.夜来香提取物抑菌活性的初步研究[J].赣南医学院学报，2006，
26(4)：495-496.
[4]刘建文，贾伟.生物资源中活性物质的开发与利用[M].北京：化学工业出版社，2005.
[5]李京晶，籍保平，周峰，等.丁香和肉桂挥发油的提取、主要成分测定及其抗菌活性研究 [J].食品科学，2006，27(8)：64-68.
[6]郭阿君，王志英.9种室内植物对4种微生物抑制作用的研究[J].北方园艺，2007，27(8)：128-130.
[7]胡仁火，蔡朝晖，任国祥，等.8种校园绿化植物挥发性物质的抑菌杀菌作用 [J].安徽农业科学，2007，35(29)：9128-9129.
[8]靳熙茜，汪海波.桂花总黄酮提取及其体外抗氧化性能研究[J].粮食与油脂，2009，32(11)：42-45.
[9]曾靖，李坊贞，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物的中枢抑制作用[J].赣南医学院学报，2003，
23(3)：237-239.。