HPLC法测定抗敏灵滴鼻液中盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明含量93

HPLC法测定抗敏灵滴鼻液中盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯
海拉明含量
摘要】目的采用高效液相色谱法，建立同时测定抗敏灵滴鼻液中盐酸麻黄碱、
呋喃西林和盐酸苯海拉明含量的检测方法。

方法采用Waters Sunfire?C18色谱柱(150 mm x4.6 mm，5μm)；甲醇（A）-磷酸盐缓冲液（B）流动相，梯度洗脱
(0~4min, 20%A; 4~6min, 20%~50%A; 6~10min, 50%~70%A; 10~13min, 70%~20%A;
13~18min,20%A)；柱温：35℃；流速1.0 mL/min；检测波长：220nm（检测盐酸
麻黄碱、盐酸苯海拉明）和374nm（检测呋喃西林）。

结果盐酸麻黄碱、呋喃
西林、盐酸苯海拉明平均回收率分别为, 104.84％（RSD=1.52%），98.43％
（RSD=1.30%），96.27％（RSD=1.51%），盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉
明分别在716.8256ng～17920.64ng、19.68ng~492.0ng和31.168ng~779.2ng范围内
与峰面积呈良好线性关系。

结论该方法简便、快速和准确，可用于该药的质量
控制。

【关键词】HPLC 抗敏灵滴鼻液盐酸麻黄碱呋喃西林盐酸苯海拉明抗敏灵滴鼻液是我院复方制剂（由盐酸麻黄碱0.1克、地塞米松0.84毫克、
苯海拉明3.33毫克、呋喃西林2毫克溶于适量沸蒸馏水中，添加蒸馏水至1000
毫升，搅匀，过滤，分装即得），临床用于过敏性鼻炎，鼻塞等症状。

据文献检索，关于抗敏灵滴鼻液主要成分的含量测定方法，曾采用旋光法（盐酸麻黄碱）、紫外分光光度法（呋喃西林），尚未见有采用高效液相含量测定的报道。

本文采
用高效液相色谱法（HPLC）对该制剂中的盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明和呋喃西林
三个成分同时进行含量测定，结果表明，对照品及供试品分离效果均良好。

方法
学考察结果也显示，此方法可靠、操作简便、准确性强、重现性好，可更好地用
于控制该制剂的质量。

1. 仪器与试药
1.1 仪器
液相色谱仪：Waters 2695 alliance HPLC 、Waters 2996二极管阵列检测器、Waters Empower色谱工作站（Waters公司）、Mettler Toledo XS105D电子天平
（摸索）
液相色谱仪：Waters 2695 alliance HPLC 、Waters 2489 紫外检测器、Waters Empower色谱工作站（Waters公司）、Mettler Toledo XS105D电子天平
1.2 试药
抗敏灵滴鼻液（批号090129、091022、100209）；盐酸麻黄碱对照品（赤峰
艾克制药科技股份有限公司，批号081027）；地塞米松磷酸钠对照品（天津天药
药业股份有限公司，批号DNa080412）；盐酸苯海拉明（北京太洋药业有限公司，批号070713）；呋喃西林（苏州第五制药有限公司，批号090505）；甲醇、乙
腈为色谱纯；水为纯化水；磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸和氢氧化钠都为分析纯。

2. 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Waters Sunfire?C18色谱柱(150 mm x4.6 mm，5μm)；流动相：以甲
醇为流动相A，以磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8g，三乙胺5mL，磷酸4mL，加
水至1000mL，用氢氧化钠试液或稀磷酸调pH3.0）为流动相B，按表1进行梯度
洗脱；柱温：35℃；流速：1.0 mL/min；波长切换检测：6min前检测波长为
220nm，6min到10min检测波长为374nm，10min后检测波长为220nm；进样量：
5μL。

2.2 盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明对照品溶液制备
精密称取盐酸麻黄碱对照品1120.04mg，置25mL量瓶中，用适量沸蒸馏水溶解后，添加蒸馏水至刻度，摇匀，作为盐酸麻黄碱对照品储备液。

精密称取呋喃西林对照品6.15mg、盐酸苯海拉明对照品9.74mg，置50mL量
瓶中，用适量沸蒸馏水溶解，精密添加盐酸麻黄碱对照品储备液5mL，加蒸馏水
至刻度，摇匀，配制成盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明浓度分别为
4880.16μg/mL、123μg/mL、194.8μg/mL的混合对照品储备液。

精密量取混合对照品浓溶液4mL，置25mL量瓶中，用甲醇-磷酸盐缓冲液
（磷酸二氢钾6.8g，三乙胺5ml，磷酸4ml，加水至1000ml，用氢氧化钠试液或
稀磷酸调pH3.0）稀释至刻度，摇匀，配制成盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海
拉明浓度分别为780.8256μg/mL、19.68μg/mL、31.168μg/mL的混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备
精密量取抗敏灵滴鼻液2mL，置25mL量瓶中，用甲醇-磷酸盐缓冲液（磷酸
二氢钾6.8g，三乙胺5mL，磷酸4mL，加水至1000mL，用氢氧化钠试液或稀磷
酸调pH3.0）稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4 阴性对照溶液制备
精密称取地塞米松磷酸钠对照品9.31mg，置100mL量瓶中，用适量沸蒸馏水溶解后，添加蒸馏水至刻度，摇匀，作为地塞米松磷酸钠对照品储备液。

精密量取地塞米松磷酸钠对照品储备液2mL，置25mL量瓶中，用甲醇-磷酸
盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8g，三乙胺5mL，磷酸4mL，加水至1000mL，用氢氧
化钠试液或稀磷酸调pH3.0）稀释至刻度，摇匀，即得。

2.5 系统适应性试验
分别吸取2.3项下供试品溶液、2.4项下阴性对照溶液及2.2项下盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明混合对照溶液5μL，注入色谱仪，按上述色谱条件测定，供试品溶液中盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明峰保留时间与相应对照品峰
的保留时间一致，分离度较好，邻近位置无干扰峰出现，阴性对照无干扰。

理论
塔板数按盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明峰计算均大于5000。

2.6 线性关系考察
精密吸取含盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明浓度分别为
780.8256μg/mL、19.68μg/mL、31.168μg/mL的混合对照溶液1、2、5、15、25μL，注入色谱仪，按上述色谱条件测峰面积，以进样量为横坐标（X）、峰面积为纵
坐标（Y），进行线性回归，得回归方程分别为：
Y盐酸麻黄碱=161.0839X+10142.23，r=0.9994
Y呋喃西林=4780.028X-30072.23，r=0.9999
Y盐酸苯海拉明=2098.099X-24373.63，r=0.9999
结果表明：盐酸麻黄碱在进样量716.8256ng-17920.64ng范围内，呋喃西林在
进样量19.68ng-492.0ng范围内，盐酸苯海拉明在进样量31.168ng-779.2ng范围内，与峰面积呈良好线性关系。

2.7 精密度试验
精密吸取含盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明浓度分别为
780.8256μg/mL、19.68μg/mL、31.168μg/mL的混合对照溶液，按上述色谱条件进
样5μL，连续进样5次，测得盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明峰面积RSD
分别为1.1%、0.5%、0.6%（n=5）。

2.8 重复性试验
取同一批次抗敏灵滴鼻液6份，照供试品溶液制备方法制备，按上述色谱条
件进样5μL，测定相应峰面积，测得盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明峰面
积RSD分别为1.18%、1.32%和0.89%（n=6），表明方法重复性较好。

2.9 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，间隔不同时间测定，在0、1、2、4、8、12h各进样5μL，按上述色谱条件测定峰面积，测得盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉
明峰面积RSD分别为3%、0.7%和1.1%（n=6）。

说明供试品溶液在12h内稳定。

2.10 加样回收率测定
精密量取已知盐酸麻黄碱含量为10000μg/mL、呋喃西林含量为200μg/mL、
盐酸苯海拉明含量为333μg/mL的抗敏灵滴鼻液1mL，置25 mL量瓶中，精密添
加2 mL混合对照品储备液，用甲醇-磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，平行试验
6份。

按上述色谱条件，进样5μL，测定相应峰面积，计算含量和回收率。

结果：盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明平均加样回收率分别为；RSD分别为
1.52%、1.30%和1.51%（n=6）。

2.11 样品测定
取抗敏灵滴鼻液3批，每批平行试验2份，按2.3项下制备供试品溶液，精
密吸取供试品溶液5μL，注入色谱仪，按上述侧普条件测定峰面积，按外标法计
算盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明含量。

3. 讨论
3.1 抗敏灵滴鼻液的药效学讨论
抗敏灵滴鼻液是我院复方制剂，由盐酸麻黄碱、地塞米松磷酸钠、盐酸苯海
拉明、呋喃西林制成，临床用于治疗过敏性鼻炎，鼻塞等症状。

盐酸麻黄碱为抗敏灵滴鼻液的主要成分，为拟肾上腺素药，可直接激动血管
平滑肌的α、β受体，使皮肤、黏膜以及内脏血管收缩，其作用时间较长。

用于
鼻部可作为减鼻充血剂，缓解因感冒等引起的鼻塞症状。

用药过量时易引起精神
兴奋、失眠、不安、神经过敏、震颤等症状。

有严重器质性心脏病或接受洋地黄
治疗的患者，也可引起意外的心律紊乱。

大剂量抑制心脏。

呋喃西林能干扰细菌的糖代谢过程和氧化酶系统而发挥抑菌或杀菌作用，主
要干扰细菌糖代谢的早期阶段，导致细菌代谢紊乱而死亡。

其抗菌谱较广，对多
种革兰阳性和阴性菌有抗菌作用，对厌氧菌也有作用，对绿脓杆菌和肺炎双球菌
力弱，对假单孢菌属及变形杆菌属有耐药性，对真菌，霉菌无效，但对因霉菌引
起的细菌感染仍有相当效力。

呋喃西林临床仅用作消毒防腐药，用于皮肤及粘膜
的感染，如化脓性中耳炎、化脓性皮炎、急慢性鼻炎、烧伤、溃疡等。

对组织几
无刺激，脓，血对其消毒作用无明显影响。

盐酸苯海拉明为乙醇胺的衍生物，有局麻、镇吐和抗M-胆碱样作用。

盐酸苯
海拉明的毒性主要是使中枢神经系统先抑制后兴奋，最后产生衰竭性抑制，严重
程度视用量而定。

表现为厌食、恶心、呕吐、便秘或腹泻，口渴、尿频或排尿困难、血尿，听觉障碍、视力模糊，运动失调，呼吸浅表，心动过速，发热及胸骨
下疼痛；严重时可出现惊厥、昏迷、心脏抑制、呼吸麻痹。

用药过量可能引起精
神错乱、抽搐、震颤、呼吸困难、低血压。

婴儿与儿童用药过量可致激动、幻觉、抽搐，甚至死亡。

3.2 检测波长的选择
应用紫外检测器在190-400nm对盐酸麻黄碱、呋喃西林、盐酸苯海拉明对照
品溶液和供试品溶液进行扫描，呋喃西林对照品溶液吸收光谱特征在374nm处有一个强特征吸收峰。

在此范围内对盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明对照品溶液进行波
长扫描，发现2种溶液紫外吸收光谱特征在220nm处都有一个强特征吸收峰。

故本实验采用波长切换检测：6min前盐酸麻黄碱检测波长为220nm，6min到
10min呋喃西林检测波长为374nm，10min后盐酸苯海拉明检测波长为220nm。

3.3 流动相的确定
曾用乙腈-磷酸盐缓冲液（10：90）、甲醇-水（50：50）、甲醇-磷酸盐缓冲
液（50：50）等为流动相，因盐酸麻黄碱、呋喃西林、盐酸苯海拉明三者极性相
差太大，保留时间过长，均达不到满意的分离效果，故选用梯度洗脱方法。

4. 小结
通过实验研究，本文建立了同时测定抗敏灵滴鼻液中盐酸麻黄碱、呋喃西林
和盐酸苯海拉明含量的HPLC测定法，并具有良好的准确性和重复性，可用于该
药品中盐酸麻黄碱、呋喃西林和盐酸苯海拉明的质量控制，达到控制该药品质量
的目的。