苯丙胺类药物的分析

盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).
O R1HN C OR2
( OCH2CH2N(C2H5)2 NHCH2CH2N(C2H5)2 )
化学性质(Feature)
1. 芳伯氨基：重氮化－偶合反应；与芳醛缩合成Schiff 碱；易氧化变色等 2. 水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因→BABA， 其余药物→PABA 3. 弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂 滴定 4. 溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水， 易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点， 易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。
(一)对乙酰氨基酚
NO2 NaOH 水解 NO2 Fe, HCl NH2 C2H5OH, 乙酰化
对乙酰氨基酚
Cl
OH
OH
1、酸度 （1）来源：①生产过程引进酸性杂质 ②贮存过程水解产物醋酸 （2）适宜pH为5.5-6.5(本品1％的水溶液） 偏酸或偏碱易发生水解，从而影响质量。
2.乙醇溶液的澄清度与颜色：
第七章
芳香胺类药物的分析
Analysis of Aromatic amines
内容:
1
芳胺类
2
苯乙胺类
苯丙胺类
3
第一节 芳胺类药物的分析
一、对氨基苯甲酸酯类
H2N COOC2H5
苯佐卡因(benzocaine)
盐酸普鲁卡因 (procaine hydrochloride) 盐酸氯普鲁卡因 (chloroprocaine hydrochloride)
2、羟肟酸铁盐反应 具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺 盐酸普鲁 卡因胺
浓过氧化氢
三氯化铁
/加热至沸 3、与汞离子反应
羟肟酸
羟肟酸铁 （紫红色）
a.芳酰胺类，如盐酸利多卡因
盐酸利 多卡因
硝酸汞/硝酸 煮沸
黄色
b.对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因
红色或橙黄色
(四)水解产物反应
1、盐酸普鲁卡因＋10％NaOH溶液→白色↓(普鲁卡因)
OH
H2N2(NC)5FeNa2
OH +H2O
(二)盐酸普鲁卡因注射液
H2N 水解 HCl COOCH2CH2N(C2H5)2 · H2N COOH -CO2 H2N O
O
O
黄色
限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过1.2%。 检查方法：TLC法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨 基苯甲醛溶液显色。
(二)非水滴定法(non-aqueous titrimetry)
盐酸丁卡因 盐酸利多卡因 侧链烃胺的叔胺氮 弱碱性 高氯酸非水滴定 指示剂：结晶紫 盐酸布比卡因 侧链哌啶环的叔胺氮 指示剂：萘酚苯甲醇 注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰
盐酸丁卡因－加醋酐以突出终点
CH3 2 NHCOCH2N(C2H5)2· HCl +Hg(Ac)2 CH3 CH3 NHCOCH2N(C2H5)2· HAc +HClO4 CH3 2 CH3 NHCOCH2N(C2H5)2· HAc +HgCl2 CH3 CH3 NHCOCH2N(C2H5)2· HClO4 +HAc CH3
至100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，
照紫外－可见分光广度法（药典Chp2005版附录ⅣA），在257nm的 波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（
1 % 计算， ）为 715 E1 cm
即得。
(四)HPLC
对乙酰氨基酚泡腾片的含量测定
(五)体内药物分析
HPCE研究人血浆中的普鲁卡因、利多卡因、 丁卡因和布比卡因
盐酸布比卡因 (bupivacaine hydrochloride)R3OR1N H R4
C O
R2
HO
N C CH3 H O
H3COCHN
S O
NHCOCH3
paracetamol acedapsone
化学性质 (Feature)
1.水解→芳伯胺基 2.水解产物(醋酸)+乙醇/硫酸→醋酸乙酯
3. 对乙酰氨基酚→三氯化铁反应
第二节 苯乙胺类药物
一、基本结构与性质
R1
肾上腺素(adrenaline)
R1
H H C ① C② N R2 H OH R3
R2 R3
盐酸克伦特罗
(clenbuterol ydrochloride)
硫酸沙丁胺醇
(salbutamol sulfate)
盐酸麻黄碱 (ephedrine
hydrochloride)
(sodium nitrite method)
非水溶液滴定法
(non-aqueous titrimetry)
分光光度法 ( spectrometry ) 色谱法( chrometography )
(一)亚硝酸钠滴定法(sodium nitrite method)
H+ Ar-NH2+RCOOH Ar-NHCOR+H2O △ Ar-NH2+NaNO2+2HCl Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O
O R1 NH R4 O HO NHCOCH3 CH3COHN S O NHCOCH3 C R2
二、酰胺类
对乙酰氨基酚(paracetemol)
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3 . HCl
醋氨苯砜(acedapsone)
CH3 NHCO CH3 C4H9 N . HCl
CH3
盐酸利多卡因 (lidocaine hydrochloride)
1% E1 cm
备注 BP， ChP用于含量测定 USP对照品法，相 差不超过3.0% USP对照品法，相 差不超过2.0% BP， ChP用于片剂和注 射剂鉴别 ChP
860～980 715
(七)、IR
盐酸普鲁卡因
COOCH2CH2N(C2H5)2
盐酸普鲁卡因胺
CONHCH2CH2N(C2H5)2
(三)UV
对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典2005
1% ）法，测定对乙酰氨基酚的含 版采用百分吸收系数（ E1 cm 量。例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、
胶囊、颗粒剂
【含量测定】 取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，
H H R1 C C N * H OH R3
弱碱性： 烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性。 R2 游离碱难溶于水，易溶于有机溶 剂；其盐可溶于水
酚羟基特性： 邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色； 在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深； 在碱性溶液中更易变色。
光学活性：手性碳原子，具有旋光性
苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；紫外、红 外吸收特性
R
1.芳伯胺基
H2N COOC2H5
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 · HCl
苯佐卡因
H2N
盐酸普鲁卡因
CONHCH2CH2N(C2H5)2 · HCl
盐酸普鲁卡因胺
橙黄到猩红色沉淀↓
2.潜在芳伯胺基
红色沉淀↓
盐酸或硫酸水解
O
HO
NHCOCH3
H3COCHN
S O
NHCOCH3
对乙酰氨基酚
4. 弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀 5. 酰胺氮原子与金属离子络合显色
三、鉴别试验
(一)重氮化-偶合反应
分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可 与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘 酚偶合生成有色的偶氮染料。
NH 2
+ NaNO2
R
H+
N2 +Cl-
+Na + +H2O
醋氯苯砜
区别盐酸丁卡因
C4H9HN COOCH2CH2N(CH3)2
+ HNO2
C4H9N
COOCH2CH2N(CH3)2
H2O +
NO
白色沉淀
(二)三氯化铁反应
NHCOCH3 NHCOCH3
3
+
FeCl3
Fe + 3HCl
OH
O 3
（蓝紫色）
(三)金属离子反应
1、与铜和钴离子反应 （具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡 因） 硫酸铜/碳酸钠试液→蓝紫色配合物→氯仿层显黄色 氯化钴/酸性溶液→亮绿色细小钴盐沉淀↓
4.对氨基酚
乙酰化不完全或贮藏不当引起水解－毒性较大并有色泽 检查方法： 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml 溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置 30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚 50μg用同一方法制成的对照液比较，不得更深 （0.005%）。
Na2[Fe(NO)(CN)5] +H2O Na2[Fe(CN)5H2O] + H2N Na2[Fe(CN)5H2O] +NO
△
油状物(普鲁卡因) △ 油状物 消失 放冷 盐酸酸化
蒸气（二乙氨基乙醇）↑
(使润湿的红色石蕊试纸变蓝)
△
白色↓（对氨基苯甲酸） （能溶于过量的盐酸）
2、苯佐卡因
H2N COOC2H5
+
NaOH
H2N
COONa
+
C2H5OH
C2H5OH
+
4 I2
+
6 NaOH
CHI3
+
5 NaI
+
HCOONa
+
5 H2O
NaNO2 + HCl → HNO2 + NaCl HNO2 + HCl → NOCl + H2O
Ar NH2 Ar NH NO Ar N N OH Ar N2Cl
NO
HBr生成NO+的速度≫ HBr生成NO+的速度
注意事项
1）滴定温度：室温10～30℃。若温度过高，使HNO2逸失， 并且重氮盐分解。 [Ar-N≡N]Cl- + H2O → Ar-OH + N2↑+ HCl 2）酸度：加入盐酸有利于①重氮化反应速度加快 ②重氮盐在酸性液中稳定③防止偶氮氨基化合物的生成。 3）滴定速度：重氮化反应为分子反应，应缓缓加入NaNO2, 不断搅拌。 4）滴定管尖端插入液面下2/3处：防止HNO2挥发分解。 5）加入KBr：加快反应 6）指示终点方法：永停滴定法、外指示剂法(碘化钾-淀粉)
(五)制备衍生物测定熔点
1、盐酸利多卡因 三硝基苯酚 盐酸布比卡因 三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 三硝基苯酚布比卡因 （mp. 194℃） 丁卡因硫氰酸盐 （ mp. 131℃ ）
25％硫氰酸铵溶液 2、盐酸丁卡因 5％醋酸钠溶液
(六)UV
药物 对乙酰氨基酚 苯佐卡因 盐酸丁卡因 溶剂 稀HCl-甲醇(1:99) 0.4%NaOH 氯仿 pH6磷酸盐缓冲液 0.1M NaOH 盐酸普鲁卡因胺 水 醋氨苯砜 无水乙醇 5 5 280 256,284 10 10 浓度 (μg/ml) 10 8 λmax (nm) 249 257 278 310 273 580～160
深绿色，滴加新制5%碳酸 棕色，暗紫色 氢钠液，显蓝紫色，红色 墨绿色，滴加1%氨溶液， 显紫红色
(二)氧化反应 酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化 呈现不同颜色。
肾上腺 素
碘或过氧化 氢 中性或酸性
肾上腺素 红
碘
放置
棕红色多聚体
硫代硫酸 盐酸异丙肾上腺 异丙肾上腺素钠 偏酸性条件 素 红
中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或 棕色。（比浊，比色）
3.有关物质：
中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙 酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、 苯醌和醌亚胺等） 药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，TLC限度检查。
判断：置紫外灯(254nm)下检视，供试品如显杂质斑点， 与对照溶液的主斑点比较，不得更大，更深。
二、鉴别试验
(一)与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应
药物 肾上腺素 Adrenaline 重酒石酸去甲肾上腺素 Noradrenaline bitartrate 盐酸去氧肾上腺素 Phenylephrine hydrochloride 盐酸异丙肾上腺素 Isoprenaline hydrochloride 盐酸多巴胺 Dopamine hydrochloride 三氯化铁 甲醛－硫酸 0.1mol/L盐酸液中显翠绿 红色 色，加氨试液显紫色，紫 红色 翠绿色，加碳酸氢钠试液 淡红色 显蓝色，红色 紫色 玫瑰红，橙红，深 棕红
· HCl
· HCl
NH2
NH2
波数cm-1
波数cm-1
酯羰基υC=O 1692
－
酯基υC-O 1271, 1170, 1115
二乙胺盐υN-H － － 2585
－
2645（略向高波数） 1550（ δN-H 酰胺Ⅱ带） 1280（ υN-H酰胺Ⅲ带 ）
酯基
二乙胺盐， 高波数移动
四、特殊杂质的检查
(三)盐酸氯普鲁卡因注射液 (四)盐酸罗哌卡因注射液
H N
*
O
N
罗哌卡因为氨基酰胺类局 麻药，广泛应用于外科麻醉、 急性止痛等。其有效构型为 S型，R型为无效构型，因此 必须对罗哌卡因对映体纯度 进行检查和控制。
罗哌卡因 (ropivacaine)
五、含量测定
亚硝酸钠滴定法 容量分析方法
(volumetric analysis)