炮制对槐米中芦丁含量的影响

炮制对槐米中芦丁含量的影响
赵红丹;王卓;王巍;林长旭;刘永生
【摘要】目的研究炮制对槐米中芦丁含量的影响.方法采用HPLC法测定芦丁的
含量.结果随着炮制温度的升高,炮制时间的延长,芦丁的含量逐渐降低.结论炮制时间及炮制温度的变化对槐米中芦丁的含量有较大影响.
【期刊名称】《吉林医药学院学报》
【年(卷),期】2010(031)006
【总页数】3页(P330-332)
【关键词】槐米;炮制;芦丁
【作者】赵红丹;王卓;王巍;林长旭;刘永生
【作者单位】沈阳双鼎制药有限公司,辽宁,沈阳,110179;沈阳双鼎制药有限公司,辽宁,沈阳,110179;辽宁中医药大学,辽宁,大连,116600;沈阳双鼎制药有限公司,辽宁,
沈阳,110179;大连市沙河口区泽汇街综合门诊部,辽宁,大连,116029
【正文语种】中文
【中图分类】R283.1
槐米为豆科植物槐(Sophra japonicaL.)的干燥花蕾，具有“凉血止血，清肝泻火”的功效，其主要成分为芦丁。

传统用药经验认为，槐米炒炭后能缓和其寒性，增强止血作用[1]。

本研究采用HPLC法测定槐米生品及不同条件下的炮制品中芦丁的
含量，研究炮制对槐米中芦丁含量的影响，以其探讨槐米炒炭止血的炮制原理。

高效液相色谱仪(Agilent 1100)，电子天平(ALC-110.4德国艾科勒)；超声波清洗器(HS6150宁波新芝生物科技有限公司)；甲醇为色谱纯，水为纯净水，盐酸、丙酮为分析纯。

2.1 芦丁含量测定方法的建立
2.1.1 色谱条件
Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm)色谱柱；流动相：甲醇-1%冰醋酸(32∶68)；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：257 nm。

在此条件下，以芦丁色谱峰计算，理论塔板数不低于4 000。

2.1.2 对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的芦丁对照品适量，以甲醇制成每1 mL含0.172 mg的溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备
取经适当粉碎(过4号筛)的槐米粉末0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加
甲醇50 mL，密塞，超声处理30 min，取出，放冷，称定重量(必要时补足减失
的重量)，摇匀，滤过，精密吸取续滤液2 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇定容，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，备用。

2.1.4 测定法
精密吸取对照品与供试品溶液各5 μL，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱峰
面积，计算芦丁含量。

2.1.5 方法学考察
线性范围考察。

精密吸取芦丁对照品溶液1、3、5、7、9、11 μL，注入高效液相色谱仪，测定色谱峰面积。

以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，回归方程为：y=4 818.9x+0.096 2，r=0.999 7。

可知芦丁在0.086～0.946 μg范围内线性关系良好。

稳定性考察。

取槐米粉末，按供试品溶液制备方法操作，制得供试品溶液。

分别在
放置0、2、4、8、16 h时，精密吸取5 μL，注入高效液相色谱仪测定，记录色
谱峰面积，其RSD=1.4%，提示供试品溶液在制备后16 h内测定，色谱峰面积无明显变化，样品稳定性良好。

精密度考察。

取槐米粉末，按供试品溶液制备方法操作，制得供试品溶液。

精密吸取5 μL，连续进样6次，测定色谱峰面积，其RSD=1.3%，表明仪器精密度良好。

重复性考察。

取槐米粉末6份，按供试品溶液制备方法操作，制得供试品溶液。

分别精密吸取5 μL，注入高效液相色谱仪测定，计算芦丁含量，其RSD=0.72%，表明方法重复性良好。

加样回收率考察。

取已知准确含量的槐米粉末(193.1 mg/g)6份，每份0.05 g，
精密称定，分别加入浓度为9.67 mg/mL的芦丁对照品1 mL，按供试品溶液制备方法操作，按含量测定项下方法测定，结果平均回收率98.4%，RSD 1.6%(见表
1)。

实验结果提示，方法回收率符合有关规定。

2.2 炮制对槐米中芦丁含量的影响
2.2.1 不同炮制温度对芦丁含量的影响
取净槐米，置炒制容器内，用中火加热，控制不同温度，不断翻动，炒制6 min，取出，放凉。

按芦丁含量测定方法制备供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，计算芦丁含量，结果见表2。

从实验结果可知，随着炮制温度的升高，槐米中芦丁的含量逐渐降低。

2.2.2 槐米不同时间炮制品中芦丁的含量测定
取净槐米，置炒制容器内，控制180 ℃，不断翻动，炒制不同时间，取出，放凉。

按芦丁含量测定方法制备供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，计算芦丁含量，结果见表3。

从实验结果可知，随着炮制时间的延长，槐米中芦丁的含量逐渐降低。

由实验结果可见炮制时间及炮制温度对槐米中芦丁的含量有较大影响。

目前有文献
报道芦丁可以抑制血小板激活因子(PAF)诱导的血小板聚集，而PAF是迄今发现的最强的血小板聚集激活剂[4]。

槐米炒炭后能够增强凉血止血的作用，应与炒炭后
芦丁含量降低有关。

本实验结果表明炮制温度越高，芦丁含量越低；炮制时间越长，芦丁含量亦降低。

由于槐米炒炭止血的功效还与其中鞣质的含量有关，鞣质含量越高，止血作用增强，而随着炮制温度增高、炮制时间增长，鞣质含量有所降低。

鉴于此，本实验拟定槐米炒炭的炮制工艺为180 ℃炒制6 min。

关于槐米炒炭止血
的功效与芦丁含量降低之间的具体关系，尚需进一步的实验加以研究。

【相关文献】
[1] 赵新芝，郭长强，韩莉,等.槐米炮制研究进展[J].时珍国医国药，2000，11(2)：183-184.
[2] 邓富良,陈本美,陈国华,等.高效液相色谱法测定槐米中的芦丁含量[J].湖南医科大学学报，2000，25(6)：597-598.
[3] 刘小柔，严启新，王存芳,等.槐米的高效液相色谱指纹图谱研究[J].时珍国医国药，2005，16(2)：118-119.
[4] 韩英华，秦元璋.芦丁研究现状[J].山东中医杂志，2003，22(10)：635-637.。