抗原抗体的最佳反应
抗原抗体反应
第二节 抗原抗体反应的特点
1.特异性 2.比例性 3.可逆性 4.阶段性
一、 特异性（specificity）
1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后
产生的抗体结合，这种抗原与抗体结合 反应的专一性称为特异性。
特 异 性 示 意 图
2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间
空间结构的互补性决定的。
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
二、抗原抗体的结合力
不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
3、根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例 关系绘制反应曲线。
看书上76表7-1
5、一组概念
最适比(optimal ratio)：是指形成沉淀物最多， 上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体 浓度比。 等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的 抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量， 形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或 抗原的现象。 带现象包括 前带(prozone)抗体过量时称为。
1、概念：是指抗原与相应抗体结合成复合物后，在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特 性称为抗原抗体结合的可逆性。
2、原因：抗原抗体的结合是分子表面的非共价键 结合，因此形成的复合物不牢固。
3、抗原抗体反应动态平衡式如下：
4、决定抗原抗体解离的因素
抗原抗体的反应
无专一性抗原受体
学物质、吸引白血球
自然杀手细胞(NK)
属于白血球中的淋巴球 辨识肿瘤细胞及被病毒感染细胞，释出穿孔素、 颗粒酶，破坏
目标细胞
第 二 道 防 线
保护性蛋原体细胞
调理作用：黏附病原体后与吞噬细胞受体结
防御方式
合⇨促进吞噬作用 清除作用：与抗原抗体复合物结合，以利吞
讲义 P135
病原体 入 侵 免疫系统
执 行
免疫作用 失 常 免疫失调
免疫细胞
吞噬性免疫细胞 不具吞噬能力的免疫细胞
免疫器官
初级淋巴器官：骨髓、胸腺 次级淋巴器官：扁桃腺、淋巴结、脾脏
皮膜屏障
先天免疫 (非专一性防御)
吞噬作用及发炎反应（红、肿、热、痛反应） 补体作用：补体属于血浆蛋白，多数由肝脏合成 干扰素作用：干扰素为被病毒感染细胞所分泌的抗病毒蛋白质
自然杀手细胞作用
后天获得免疫 (专一性防御)
体液免疫：由Ｂ细胞主导 细胞媒介型免疫：由Ｔ细胞主导
过敏反应：需再次接触相同抗原才会引发肥大细胞释出组织胺，造成发炎反应
自体免疫疾病：辨识用的 MHC 蛋白质发生异常，Ｔ细胞或抗体攻击自体的细胞
免疫缺失症
先天免疫缺失：免疫系统基因缺陷或发育不良 后天免疫缺失：因药物、辐射线、癌症或病毒（如 HIV）引起
时效长
时效短
目的 举例
预防 注射疫苗、病原体感染
治疗或预防
注射血清、单株抗体 或哺喂母乳
增殖方式 分为 无套膜病毒的增殖：破坏宿主细胞 有套膜病毒的增殖：以出芽方式释出
特征
与宿主具专一性 不具酵素系统，需采绝对寄生
构造
入 侵 免疫系统
细菌
分类
依形态区分：杆菌、球菌、螺旋菌 依染料呈色区分：革兰氏阳性菌（G＋）、革兰氏阴性菌（ G─ ）
抗原抗体的最佳反应
第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区的沟槽分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力抗原抗体间结合为非共价键结合，有四种分子间引力参与。
(1)静电引力：是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越强。
(2)范登华引力：是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时，因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结合，这种引力的能量小于静电引力。
(3)氢键结合力：是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时，相互间可形成氢键，使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范登华引力强。
(4)疏水作用力：是抗原表位与抗体超变区靠近时，相互间正、负极性消失，亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，使抗原抗体进一步相互吸引，促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的，对维系抗原抗体结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数K 来表示：K=K1/K2，K 值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如IgG 为两价，亲合力为单价的103倍，IgM 为5～10 价，亲合力为单价的107倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反之即容易解离。
三、亲水胶体转化为疏水胶体大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基，在溶液中这些残基带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层，由于电荷的相斥，就避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
初级临床医学检验技士基础知识历年真题1-(2)
初级临床医学检验技士基础知识历年真题1-(2)一、每道题下面有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案。
1. 血小板的止血功能不包括A.黏附功能B.聚集功能C.释放功能D.促凝功能E.促纤维功能E[解析] 血小板的止血功能包括黏附功能、聚集功能、释放功能、促凝功能、血块收缩功能，维护血管内皮的完整性。
无促纤维功能。
2. 关于血管壁的止血功能叙述错误的是A.收缩反应增强B.血小板被激活C.促止血物质释放增多D.局部血流变慢E.局部血黏稠度降低E[解析] 血管壁的止血功能：①血管收缩，血管壁受损时，局部小动脉和细小动脉立即发生收缩，管腔变狭窄，使经过损伤部位的血流减慢。
同时，由于血管内皮下弹性蛋白、胶原的暴露，血小板黏附在血管损伤的部位并被激活，发生血小板聚集反应，血小板聚集成团形成血小板止血栓。
②损伤的血管壁释放出组织因子，直接激活血液凝固系统，形成凝血块，使血小板形成的初期止血栓得以加固。
③正常的内皮细胞能合成一种抗血栓和抗血小板聚集的因子前列环素(PCI2)及纤维蛋白溶解激活因子(纤溶酶原激活物，又称血浆素原激活物)，两者具有抗凝性，使血栓形成减慢或阻止血栓形成。
故局部血黏稠度会增高。
3. 肾小球滤过功能主要取决于A.有效滤过压B.有效渗透压C.被动扩散D.逆流倍增E.主动转运A[解析] 肾小球滤过由肾小球滤过膜的滤过作用来完成。
肾小球滤过膜具有一定的通透性，一般而言，分子量为60000以上的物质如血清白蛋白很难通过；血浆球蛋白分子量在90000以上，则完全不能通过。
肾小球滤过膜对物质的滤过除了受物质分子量大小的影响，也与物质所带电荷有关。
在肾小球滤过膜上覆盖有1种带负电荷的酸性唾液蛋白，由于白蛋白也带有负电荷，同性相斥，所以白蛋白很难被滤过，可见正常尿中的蛋白是很少量的。
肾小球滤过作用的强弱，主要受有效滤过压的大小控制，有效滤过压决定于肾小球毛细血管压、囊内压、血浆胶体渗透压。
第一章抗原抗体反应讲解学习
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极 化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化 程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。 这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引 力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和 羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳 和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离 的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由 于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水 作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间正、负极性消失， 由静电作用形成的亲水层立即失去，从而 促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水 作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要 的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。
抗原抗体知识点
抗原抗体知识点一、什么是抗原和抗体1.1 抗原抗原指的是能够引起免疫系统产生应答的物质。
它通常是一种蛋白质或多糖分子，也可以是一些化学物质或微生物。
1.2 抗体抗体是一种由免疫系统产生的特异性蛋白质，也被称为免疫球蛋白。
它能够与抗原结合，通过多种机制来中和或清除抗原，从而保护机体免受感染。
二、抗原与抗体的识别2.1 抗原识别抗原识别是指抗体通过其特异的结构与抗原相互作用。
抗原通常具有多个决定簇，也称为表位，而抗体则具有与之对应的可识别的抗原决定簇。
2.2 抗体识别抗体通过其可变区域与抗原结合，形成稳定的抗原抗体复合物。
这种结合是基于亲和力和特异性。
亲和力是指抗体与抗原之间的结合力，而特异性是指抗体只与特定的抗原发生结合。
3.1 抗原抗体结合抗原和抗体结合通常发生在抗体的可变区域与抗原的表位之间。
这种结合可以是非共价的，也可以是共价的。
抗原抗体结合的力量取决于抗体的亲和力和特异性，以及抗原的表位结构。
3.2 抗原抗体反应类型抗原抗体反应可以分为可溶性抗原抗体反应和固相抗原抗体反应。
可溶性抗原抗体反应是指抗原和抗体在溶液中发生结合，而固相抗原抗体反应是指抗原或抗体固定在固体表面，另一方在溶液中发生结合。
四、抗体的功能4.1 中和抗原抗体可以通过中和抗原来阻止其进入或感染细胞。
这种中和作用通过抗体与抗原结合形成的复合物来实现，从而阻止病原体的进一步传播。
4.2 清除抗原抗体可以通过与抗原结合促使其被巨噬细胞、自然杀伤细胞或其他免疫细胞摧毁。
这种清除作用有助于清除机体内的感染和病理物质。
4.3 激活免疫系统抗体可以激活免疫系统，引发免疫细胞的反应，包括炎症反应、细胞毒性反应和细胞增殖反应。
通过这些机制，抗体有助于消除抗原并增强免疫应答。
5.1 免疫检测原理免疫检测是一种利用抗原和抗体相互作用原理进行的检测方法。
它可以通过检测体液中的抗原或抗体来判断是否存在某种疾病或感染。
5.2 免疫层析法免疫层析法是一种常用的免疫检测方法，它通过把抗原或抗体固定在固体膜上，利用抗原抗体相互作用的特异性来检测样品中的目标物质。
抗体抗原反应缓冲液
尿素、乙醇、丙酮：它们可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键，从而破坏了蛋白质中原有的氢键，使蛋白质变性。但氢键不是化学键，因此在变化过程中没有化学键的断裂和生成，所以是一个物理变化。
加热、紫外线照射、剧烈振荡等物理方法：主要是破坏蛋白质分子中的氢键，在变化过程中也没有化学键的断裂和生成，没有新物质生成，因此是物理变化。
二、影响抗原抗体反应的因素
1.自身因素
抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体
抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面：
来源：不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。
浓度：抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现可见的反应结果
特异性与亲合力：特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因素，它们共同影响试验结果的准确度。试验试剂应尽可能选择高特异性、高亲合力的抗体，以保证试验的可靠性。
2.抗原抗体的亲合性和亲合力
亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数 K 来表示：K=K1/K2 ，K值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如 IgG 为两价，亲合力为单价的 103 倍， IgM 为 5～ 10 价，亲合力为单价的 107 倍。由于抗原抗体的结合应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反之即容易解离。
初级临床医学检验技士专业知识模拟试卷13(题后含答案及解析)
初级临床医学检验技士专业知识模拟试卷13(题后含答案及解析) 题型有：1. A1型题 2. B1型题 3. X型题1．最常见的肠外阿米巴病是A．脑脓肿B．肝脓肿C．肺脓肿D．脾脓肿E．皮肤脓肿正确答案：B解析：肠外阿米巴病主要通过血液传播，肠道静脉血液回流一般首先到达肝脏。
2．生吃淡水鱼虾有可能感染A．钩虫B．蛲虫C．绦虫D．血吸虫E．肝吸虫正确答案：E解析：淡水鱼虾可作为肝吸虫的第二中间宿主，体内容易含有其的感染阶段囊蚴，生吃或半生吃淡水鱼虾后囊蚴在消化道内孵出，从而感染人体。
3．最可能检出溶组织内阿米巴包囊的检测物是A．成形粪便B．肠壁溃疡灶活检组织C．黏液便D．脓血便E．肝脓肿穿刺液正确答案：A解析：滋养体只有在体内比较干燥的环境下才能脱水形成包囊。
4．实验室多采用何种动物血清作为补体来源A．小鼠B．豚鼠C．家兔D．绵羊E．马正确答案：B解析：豚鼠血清中补体含量最高，故实验室多采用豚鼠血清作为补体来源。
5．抗原抗体反应需要合适的温度才有利于二者结合，其范围一般为A．4～101℃B．11～15℃C．16～20℃D．21～40℃E．41～50℃正确答案：D解析：抗原抗体最佳反应温度为37℃，但某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求，如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好，20℃以上反而解离。
6．间接凝集试验阳性A．红细胞溶解B．红细胞不溶解C．红细胞凝集D．红细胞不凝集E．乳胶颗粒不凝集正确答案：C解析：间接凝集试验以发生凝集判断为阳性，以红细胞作为载体的间接血凝试验则红细胞发生凝集。
7．125I标记物检测的放射线为A．α射线B．β射线C．χ射线D．γ射线E．μ射线正确答案：D解析：记忆型题。
不同的放射线检测仪器不一样。
8．下列何种测定属于凝胶扩散试验A．透射比浊法B．双向扩散试验C．环状沉淀试验D．絮状沉淀试验E．散射比浊法正确答案：B解析：凝胶扩散试验主要分为单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验及免疫电泳、对流免疫电泳和火箭电泳等。
抗原抗体反应及应用
第七章抗原抗体反应及应用不论天然的还是人工合成的分子，只要能被机体的免疫系统识别的都可以诱导机体的免疫应答，产生相应的抗体。
大多数抗体和抗原本身是既有免疫原性(诱发产生特异抗体)，又有反应原性(与特异的抗体相结合)。
抗原与抗体的特异性反应不仅可以在体内进行，而且可以在体外进行。
一切利用血清学技术方法所进行的各种测试都是基于这一根本的特性。
抗体反应技术的应用之广泛已经远远超出了免疫学、医学、甚至生命科学的范围，成为—类微量，灵敏，快速的检测分析方法。
本章着重介绍抗体制备，抗体抗原反应原理及技术方法的应用。
第一节抗体的制备环境中的大部分生物(包括病原生物)及其产物分子和一些化合物对哺乳动物的免疫系统而言是外源抗原，这些抗原能通过侵染或其他的途径刺激免疫系统，产生以抗体为主的体液免疫应答。
同样用抗原人工免疫实验动物，可以获得含有特异性抗体的血清，称为抗血清(antiserum)，因血清中抗体是多个抗原决定簇刺激不同B细胞克隆而产生的抗体，所以称多克隆抗体(polyclonal antibody)。
一个B细胞克隆所分泌的抗体即为单克隆抗体。
用免疫动物的B细胞与骨髓瘤细胞融合，在体外可以分离出许多单个B细胞克隆，以此方法可制备单克隆抗体(monoclonal antibody)。
随着分子生物学技术的发展，已经可以用抗体基因文库(antibody combinatorial library)筛选制备单克隆抗体。
应用基因工程技术，根据需要对抗体进行改造，获得基因工程抗体(engineering antibody)，以及催化性抗体(catalytic antibody 或abozyme)等的全新的抗体。
一、抗血清的制备1．免疫动物(1)抗原：免疫动物是制备抗血清的第—步。
免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必须与大分子载体连接，连接剂见表7—1。
抗原的用量视抗原种类及动物而异，—次注射小鼠可以少至几个微克，免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加，从几百μg／次至几mg／次。
ELISA 技巧
抗原和抗体最佳工作浓度的确定抗原抗体反应要求在最适比例条件下进行，ELISA反应试剂多，其工作浓度不同对结果影响较大，因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行最佳工作浓度的滴定和选择，以达到最佳的测定条件。
1）方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释(1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。
按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。
加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。
选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。
方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg／L、lmg／L、0.1mg／L三个浓度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的第一、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l 000、l:5000、l:10000三个浓度，分别加入每个浓度包被的第一、二、三列中。
加底物显色，加酸终止反应，分别读取A 值。
以强阳性抗原液A值在0.8左右，阴性参考A值<0.1的条件为最适条件。
据此选择包被抗体和酶标抗体的最佳工作浓度。
抗体的稀释度稀释液及稀释度的测定方法抗体的稀释度包括特异性抗体，中间抗体及标记抗体。
任何一种免疫组化方法要想得到令人满意的染色效果，必须将抗体进行最佳稀释。
一般来说，抗体的稀释度取决于下列因素。
(一)抗体的浓度(亦称滴度)每毫升溶液内所含抗体分子越多，滴度就越高，该抗体可高度稀释，尤其是特异性一抗的稀释度。
一般商品化抗体只知道每毫升含多少抗体蛋白量，不知道所含抗体分子。
自己制备抗体可通过琼脂糖双扩散或放射免疫法进行测定。
商品化抗体一般告知大约的稀释度，例如用PAP法可1：100～1：200稀释。
但往往购买到一种新抗体后，需要利用组织切片进行最佳稀释度的测定。
抗原抗体反应
2016 第二章抗原抗体反应一、A11、抗原抗体反应的环境影响因素包括A、电解质、温度和酸碱度B、抗原抗体浓度、反应体积和温度C、抗原分子量和抗体效价D、温度、电解质和反应体积E、酸碱度、温度和抗原抗体浓度2、抗原抗体反应最适PH为A、6.2～7.4B、7.2～7.4C、6.2～8.4D、7.2～8.4E、6.0～9.03、对抗原抗体反应叙述正确的是A、抗原抗体结合特异性指抗原表位与抗体铰链区结合B、抗原越多肉眼可见免疫复合物越多C、抗体越多肉眼可见免疫复合物越多D、抗原抗体复合物在一定条件下可发生解离E、抗原抗体结合是一种共价结合4、关于抗原抗体反应特点的叙述错误的是A、抗原抗体只有在适当比例时才形成肉眼可见的凝集团块B、抗原抗体反应依赖于两种的特异性结合C、抗原抗体反应具有可逆性D、抗原过量称为前带E、抗原抗体比例合适反应充分，称为等价带5、抗原抗体反应中，何种条件形成肉眼可见的免疫复合物A、抗原显著多于抗体B、抗体显著多于抗原C、抗原略多余抗体D、抗体略多于抗原E、抗原抗体比例适当6、抗原特异性主要取决于抗原分子的A、物理性状B、结构的复杂性C、分子量大小D、表面的特殊化学结构E、异物性7、抗原抗体反应的特点不包括A、特异性B、可逆性C、可见性D、比例性E、阶段性8、根据抗原抗体反应的特点，以下说法正确的是A、抗原抗体结合牢固不易受环境影响B、解离后的抗体结构活性改变C、解离后抗体不能再与抗原结合D、抗体与抗原结合后仍可与其他抗原结合E、解离后抗体的活性和特异性不变9、不属于抗原抗体反应的是A、放射免疫技术B、免疫电泳技术C、酶联免疫技术D、免疫比浊技术E、淋巴细胞转化试验10、体外抗原抗体反应，最适合的条件是A、0.65%NaCl、PH2～6、35℃B、0.85%NaCl、PH6～8、37℃C、0.85 %NaCl、PH2～6、35℃D、0.85%NaCl、PH2～6、37℃E、0.65%NaCl、PH6～8、37℃11、抗原抗体反应中，抗体的合适浓度是A、固定的B、规定的C、与抗原相对而言D、随便设定的E、人为规定的12、抗原抗体反应最适宜的温度（℃）是A、25℃B、30℃C、33℃D、37℃E、40℃13、影响抗原抗体反应的因素下列说法不正确的是A、抗原的理化性质和分子量B、抗体的浓度、特异性和亲和力C、抗原决定簇的种类和数目D、电解质和酸碱度E、湿度14、在抗原抗体反应中，通常被用作抗原抗体稀释液的溶液是A、0.70% NaCl溶液B、0.60% NaCl溶液C、0.75% NaCl溶液D、0.85% NaCl溶液E、0.95% NaCl溶液15、有关交叉反应的描述，正确的是A、为非特异性抗原抗体反命B、由于不同抗原分子上存在公共抗原表位所致C、对免疫学诊断结果判断无影响D、利用交叉反应进行诊断典型例子是肥大试验E、抗原分子大小相似可导致交叉反应16、人类ABO血型抗原属于A、异种抗原B、异嗜性抗原C、同种异性抗原D、自身抗原E、半抗原17、抗原的特异性取决于A、抗原的化学组成B、抗原结构的复杂性C、抗原表位的数量D、抗原决定簇的性质及空间构型E、抗原分子量的大小18、抗原抗体结合过程中，下面哪种力所起作用最小A、静电引力B、范德华引力C、氢键结合力D、疏水作用力E、共价键19、必须与蛋白质载体结合才具有免疫原性的是A、超抗原B、变应原C、半抗原D、完全抗原E、耐受原20、人体血清中的抗原、抗体等分子不会发生自然沉淀，主要原因是A、带有大量的氨基和羧基残基形成水化层B、周围电荷的相吸作用C、亲水肢体转化为疏水胶体D、抗原抗体比例合适E、静电引力21、供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力是A、静电引力B、范德华引力C、氢键结合力D、疏水作用力E、分子间结合力22、抗原抗体反应中为促进沉淀物或凝集物的形成，常用下列何种作为抗原抗体的稀释液A、0.85%NaClB、0.95%NaClC、0.75%NaClD、0.70%NaClE、0.80%NaCl23、抗原抗体特异性反应时，若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成，称为A、后带B、前带C、带现象D、等价带E、拖尾24、免疫学技术中的亲和层析是利用的抗原抗体反应的哪种特点A、特异性B、比例性C、可逆性D、结合性E、不可逆性25、抗原抗体反应的pH值一般为A、5.0～6.0B、6.0～9.0C、6.0～7.0D、6.0～8.0E、5.0～7.026、抗原与抗体结合的哪种特性，是其应用于临床诊断的基础A、特异性B、可逆性C、比例性D、阶段性E、交叉反应性27、根据抗原抗体反应的特点，以下提法哪一点是错误的A、特异性B、最适比例C、反应分阶段D、反应都不可逆E、最适反应温度为37℃28、完全抗原的特钲是A、有反应原性，无免疫原性B、有免疫原性，无反应原性C、无免疫原性和反应原性D、有免疫原性和反应原性E、必须与载体结合才具有免疫原性29、沉淀反应中抗体过量的现象称为A、后带B、前带C、带现象D、等价带E、拖尾30、下列哪种不属于抗原抗体反应的特点A、特异性B、敏感性C、比例性D、可逆性E、存在交叉反应31、可以用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原，是由于抗原抗体反应的A、特异性B、比例性C、可逆性D、亲和性E、带现象二、B1、A.沉淀反应B.凝集反应C.补体参与的反应D.中和反应E.溶血反应<1> 、琼脂凝胶扩散试验的反应类型A B C D E<2> 、抗球蛋白试验的反应类型A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】A【答案解析】影响抗原抗体反应的环境因素包括电解质、温度和酸碱度。
免疫学检验期末常考选择题(附带标准答案)
免疫学检验期末常考选择题(附带答案)————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：1. 免疫监视功能低下时易发生（）。
A．自身免疫病B．超敏反应C．肿瘤D．免疫缺陷病E．移植排斥反应【答案】C【解析】免疫系统的功能之一是对自身偶尔产生的有癌变倾向的细胞进行清除，此即免疫监视功能，免疫监视功能低下时易发生肿瘤。
2. 免疫自稳功能异常可发生（）。
A．病毒持续感染B．肿瘤C．超敏反应D．自身免疫病E．免疫缺陷病【答案】D【解析】免疫系统的功能之一是对自身衰老的组织细胞进行清除，此即免疫自稳功能，免疫自稳功能异常可发生自身免疫病。
3. 免疫应答过程不包括（）。
A．T细胞在胸腺内分化成熟B．B细胞对抗原的特异性识别C．巨噬细胞对抗原的处理和提呈D．T细胞和B细胞的活化、增殖和分化E．效应细胞和效应分子的产生和作用【答案】A【解析】免疫应答过程指免疫系统针对抗原的反应过程，不包括免疫细胞的发育过程。
4. 既具有抗原加工提呈作用又具有杀菌作用的细胞是（）。
A．树突状细胞B．巨噬细胞C．中性粒细胞D．B细胞E．T细胞【答案】B【解析】树突状细胞、巨噬细胞和B细胞都有抗原加工提呈作用，但只有巨噬细胞兼有吞噬杀菌作用。
5. 关于外周免疫器官的叙述，不正确的是（）。
A．包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织B．发生发育的时间晚于中枢免疫器官C．是免疫应答发生的场所D．是免疫细胞发生和成熟的场所E．是所有淋巴细胞定居的场所【答案】D【解析】免疫细胞发生和成熟的场所在中枢免疫器官，故D项不正确。
6. 细胞因子不包括（）。
A．单核因子B．淋巴因子C．生长因子D．抗体E．集落刺激因子【答案】D【解析】细胞因子是生物活性的小分子多肽，抗体不是。
7. 在正常血清中，含量最高的补体成分是（）。
A．C1B．C3C．C4D．C5E．C4Bp【答案】B【解析】在正常血清中含量最高的补体成分是C3。
免疫学 小题
1.（巨噬）细胞在递呈微生物抗原中是功能最活跃的；一般大量抗原初次进入时，（树突状）细胞为APC；少量抗原再次进入时，（B）细胞为主要的APC2.Tc致死性攻击靶细胞的途径有：1）（穿孔素/颗粒酶）途径；2）（Fas/FasL）途径3.CD4+T细胞对抗原的识别：（CDR1）和（CDR2）识别MHC-11类分子，（CDR3）识别抗原肽的T细胞表位。
10.专职抗原提呈细胞包括：（树突状细胞）、（单核吞噬细胞系统）、（B细胞）11.（DC）能够显著刺激初始T细胞增殖12.（DC）也被视为连接固有免疫和适应性免疫的“桥梁”13.（B淋巴）细胞在低浓度可溶性抗原的提呈中起到重要作用14.以下哪项不是CD4+Th1细胞介导的特异性免疫效应？（D）A诱导巨噬细胞活化---介导迟发型过敏反应； B辅助CTL活化增殖C辅助B细胞产生调理抗体； D辅助前体CD8+CTL的分化15.以下哪项不是Li的作用？（A）A封闭MHC-11类分子的肽结合区B促进MHC-11类分子二聚体的形成（组装、折叠）C促进MHC-11类分子从内质网向高尔基体的转运D阻止MHC-11类分子与内源性多肽结合1. Ab2α抗Ab1V（骨架）部分，（抑制）相应B细胞克隆的活化。
2. Ab2β抗Ab1V（CDR）部分，可模拟抗原与相应B细胞克隆受体结合并使之激活，故称为抗原的（内影像）。
3. 细胞凋亡包括（半胱天冬蛋白酶/Caspase）参与Fas和（线粒体）相关的信号转导两种方式。
4. 细胞因子的作用方式：1.（自分泌）作用。
2.（旁分泌）作用。
3.（内分泌）作用。
5. 多糖类抗原一般仅诱导产生（IgM）.6. 蛋白质类抗原既可诱导（体液）免疫，也可诱导（细胞）免疫。
7. 可溶性抗原通常主要诱导（体液）免疫。
8. 细胞型抗原主要引起（细胞）免疫。
填空1.系统的功能包括：（1）免疫（防御）；（2）免疫（监视）；（3）免疫（自稳）2．（胸腺小叶）是胸腺的基本结构单位，其外周是（皮质），中心是（髓质）3.在骨髓中发育的未成熟B细胞通过（克隆清除）、（受体编辑）和（失能）等机制形成了对自身抗原的中枢免疫耐受4.CD80（B7.1）和CD86（B7.2）其相应受体是表达于T细胞（CD28）和（CTLA-4）5.B细胞共受体中，（CD19）胞质区可传递活化信号；通过（CD21）与C3d结合，发挥B细胞共受体的作用6、CD40与活化T细胞表面的（CD40L）结合，对B细胞分化成熟和抗体产生起十分重要的作用。
抗原抗体反应
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第一节 抗原抗体反应原理
抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子 超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特 异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极 短距离内才能发生效应。因此抗原抗体结合反 应的最重要的先决条件是抗原与抗体间的特定 部位的空间结构必须相互吻合，具有互补性;其 次，抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触， 才能有足够的结合力，使抗原抗体分子结合在 一起。
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概述
本章叙述的抗原抗体反应，主要是指抗原 和抗体在体外结合所表现的反应。由于抗体主 要存在于血清中，并且临床上多用血清做试验， 所以体外实验中的抗原抗体反应曾称作血清学 反应（ serological reaction) 。但是随着免 疫学的发展，血清学的含义已不能概括目前的 研究内容，现在多以抗原抗体反应代替血清学 反应一词。
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2.范德华引力
抗原和抗体相互接近时，由于分子的极化作 用而出现的引力，称范德华引力。结合力的大 小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正 比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能 约为4.2---12·5kJ/mol。这种引力的能量小 于静电引力。
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3.氢键结合力
供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 在抗原抗体反应中，羧基、氨基和羟基是主要 供氢体，而羧基氧、羧基碳和肽键氧等原子是 主要受氢体，能的大小取决于方向即氢键具有 高度的方向性，因此范德华力更具有特异性。 氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次 方成反比，键能约20·9kJ/m的特异性结合反应称为抗 原抗体反应(antigen-antibody reaction)。 抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的 效应机制自然发生，也可在体外作为免疫学实 验的结果出现。在体内，可表现为溶菌、杀菌、 促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免 疫病理损伤，在体外，依相应抗原物理性状 (颗粒状或可溶性)以及反应的条件 (电解质、 补体等)不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解 和补体结合等反应。
抗原抗体反应的一般规律
抗原抗体反应的一般规律1、抗原抗体的作用规律A.抗原为免疫系统启动自身免疫应答的刺激因素，抗体可以结合和捕获抗原，促进抗原被清除，从而减少对机体的伤害。
B.抗原抗体反应是以特异性的方式发生的，有特异性的抗原分子识别有特异性的抗体分子，形成复合物，使相应抗原把抗体分子结合起来，实现抗致病毒或细菌的细胞生物学效应。
C.免疫反应的强度与抗原和抗体的浓度、类型和特异性有关，当浓度越大、抗体特异性越强时，抗体与抗原互相结合越多，产生的免疫反应强度就越大。
D.抗体可以干扰抗原与细胞表面受体的结合和活性，可以激活各种机体的免疫反应，使抗原被细胞因子激活，从而促使细胞毒性、凋亡功能和溶酶体释放等一系列信号，最终发挥免疫效应。
2、抗原抗体的一般规律A.当机体遭受外来抗原入侵时，机体的免疫系统就会出发并分泌抗体，以便捕获和结合抗原，形成抗原抗体复合物，从而实现抗致病毒或细菌的细胞生物学效应。
B.抗原抗体反应的效应产生的可以分成三个环节：先是初级免疫反应，在此环节，细胞膜受体的相互作用使细菌被抗体识别，从而实现外界抗原的捕获；第二个环节属于抗原复性捕获，此时抗体可以通过Fc受体和细胞表面受体的相互作用实现抗原抑制；最后，第三个环节属于细胞因子激活，抗体可以促使抗原和细胞表面受体之间形成复合物，从而促进抗原被细胞因子激活，最终达到被免疫的目的。
C.抗原抗体反应的强度也是受抗原和抗体的浓度、类型和特异性的控制的，当抗体的特异性和浓度越大时，抗体与抗原结合越多，产生的免疫反应就越强，甚至可以被体内抗坏血酸抑制，达到抗原被清除的目的。
D.最后，抗原抗体反应对机体有重要作用，能有效减少对机体的伤害，从而有效抗击外源性病原，促进机体的免疫应答，为维护机体的正常生理功能和卫生活动提供强有力的支持。
临床免疫学：抗原抗体反应
• 前带(prezone)：抗体过量
• 后带(postzone)：抗原过量
三、可逆性（reversibility）
• 是指抗原与抗体结合成复合物后，在一定 条件下可解离为游离抗原与抗体的特性
第二节抗原抗体反应的原理
一、空间互补关系: • 抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补
性与亲和性 • 抗原表位与抗体超变区密切接触 • 高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力 • 亲水胶体转化为疏水胶体
二、抗原抗体结合力：抗原抗体是非共价键 结合，弱结合力
●静电引力(eletrostatic forces):是抗原抗体分子 中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力 ,两个电荷距离越近,静电引力越大.
• 抗原大都是多价，抗体多 为二价，等价带结合时， 抗体的两个Fab段可分别与 两个抗原分子表面的抗原 表位结合，相互交叉连接 成具有立体结构的巨大网 格状聚集体，形成肉眼可 见的反应物。
• 等价带（equivalence zone)：抗原抗体比例合适的 范围
• 最适比(optimal ratio):抗原抗体复合物形成最多 ，上清液中几乎无游离的抗原与抗体存在
●范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相 互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .
●氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体 上的氢原子与受氢体原子间的引力
●疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团 在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向 聚集的力.
第四节 抗原抗体反应的影响因 素
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第一节抗原抗体反应的原理
抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）与抗体超变区的沟槽分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力
抗原抗体间结合为非共价键结合，有四种分子间引力参与。
（1）静电引力：是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越强。
（2）范德华引力：是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时，因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结合，这种引力的能量小于静电引力。
（3）氢键结合力：是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时，相互间可形成氢键，使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范德华引力强。
（4）疏水作用力：是抗原表位与抗体超变区靠近时，相互间正、负极性消失，亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，使抗原抗体进一步相互吸引，促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的，对维系抗原抗体结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力
亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数K来表示：K=K1/K2，K值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如IgG为两价，亲合力为单价的103倍，IgM为5～10价，亲合力为单价的107倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反之即容易解离。
二、亲水胶体转化为疏水胶体
大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基，在溶液中这些残基带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层，由于电荷的相斥，就避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
当抗原抗体结合后，使水化层表面电荷减少或消失，水化层变薄，电子云也消失，蛋白质由亲水胶体转化为疏水胶体。
再加入电解质，如NaCl，则进一步使疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。
第二节抗原抗体反应的特点
一、特异性
抗原抗体的特异性是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性，由两者之间查问结构互补决定的。
抗体分子VH区和VL区上各自具有的三个高变区共同组成抗原结合部位，该部位形成一个与抗原决定簇互补的槽沟，决定了抗体的特异性。
因此，在抗原抗体反应的免疫学实验中，可以用已知的抗原或抗体来检测相应的抗体或抗原。
但较大分子的蛋白质常含有多种抗原表位。
如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位，或抗原、抗体间构型部分相同，皆可出现交叉反应。
二、比例性
比例性是指抗原抗体特异性结合时，生成结合物的量与反应物浓度的关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见的反应。
因此在进行抗原抗体试验时，抗原抗体反应比例最合适的范围，称为抗原抗体反应的等价带。
当抗体过量时，称为前带，抗原过量时，称为后带。
三、可逆性
抗原与抗体结合形成复合物后，在一定条件下，有可以解离为游离的抗原与抗体，这种特性称为抗原抗体反应的可逆性（renersibility）。
抗原抗体的结合是分子表面的非共价键结合，形成的复合物是不牢固的，在一定条件下可以解离，因此抗原抗体反应形成复合物的过程是一个动态平衡。
抗原抗体复合物解离取决于两方面的因素：一是抗体对应抗原的亲合力；二是环境因素对复合物的影响。
高亲合力抗体的抗原结合点与抗原表位的空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离；反之，低亲合力抗体与抗原形成的复合物较易解离。
环境因素中pH过高或过低均可破坏离子间静电引力，降低抗原抗体的结合力，促使其解离。
免疫技术中的亲合层析法，常用改变pH和离子强度促使抗原抗体复合物解离，从而纯化抗原或抗体。
四、反应阶段性
抗原抗体反应可分为两个阶段。
第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅须数秒至数分钟，但不出现可见反应；第二为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在环境因素（如电解质、pH、温度、补体）的影响下，进一步交联和聚集，表现凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。
此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。
实际上这两个阶段难以严格区分，所需时间亦受多种因素和反应条件的影响，如反应开始时抗原抗体浓度较高，且两者比例恰当，则很快能形成可见反应。
第三节影响抗原抗体反应的因素
影响抗原抗体反应的因素很多，主要有两个方面：一是抗原抗体本身的因素；另一方面是反应环境因素。
一、反应物自身因素
抗原抗体反应中，抗原和抗体是反应的主体，所以它们的特性直接影响其结合情况。
（一）抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体反应的结果。
（二）抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面：
（1）来源：不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。
如家兔等大多数动物的免疫血清，由于具有较宽的等价带，与相应抗原结合易出现可见的抗原抗体复合物。
马、人的免疫血清等价带窄，抗原不足或过剩，均易形成可溶性复合物。
而单克隆抗体一般不用于沉淀或凝集反应。
（2）浓度：抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现可见的反应结果，所以在试验前应先进行预试验，滴定抗原抗体最佳反应浓度。
（3）特异性与亲合力：特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因素，它们共同影响试验结果的准确度。
试验试剂应尽可能选择高特异性、高亲合力的抗体，以保证试验的可靠性。
二、环境条件
（一）电解质
抗原与抗体发生结合后，由亲水胶体变为疏水胶体的过程中须有电解质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷，水化层破坏，复合物相互靠拢聚集，形成大块的凝集或沉淀。
若无电解质参加，则不出现可见反应。
为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用O.85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液。
但电解质的浓度不宜过高，否则会出现盐析现象。
（二）酸碱度
蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。
抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行，pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质。
抗原抗体反应一般在pH为6～9进行。
（三）温度
抗原抗体反应必须在合适的温度中进行，一般以15～40℃为宜，最适反应温度为37℃。
某些特殊的抗原抗体反应，对温度有一些特殊的要求，例如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好，20℃以上反而解离。
此外，适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触，加速反应，其作用与反应物粒子大小成正比。
第四节抗原抗体反应的类型
随着免疫学技术的飞速发展，在原有经典免疫学实验方法的基础上，新的免疫学测定方法不断出现，使免疫学实验技术更特异、更敏感和更稳定。
目前根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别，抗原抗体反应出现的现象和结果不同，以及反应时参与的其他条件不同，可将抗原抗体反应分为五种类型：
① 颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应（agglutination）；
② 可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应（precipitation）；
③ 抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应（cytolysis），细菌抗原表现为溶菌反应，红细胞抗原表现为溶血反应；
④ 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；
⑤ 免疫标记的抗原抗体反应等。