骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠大脑中动脉缺血再灌注的研究
缺血性脑损伤的骨髓间质干细胞移植治疗研究
制 作 成 年雄 性 ＳｒｇｅＤ ｗｅｅ 鼠脑 缺 血 再灌 注模 型 ４ ｐａｕ －ａ ｌｙ 大 ０例 ， 随机 分 成 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ Ｂ ） 照 组 和 ＭＳ ｓ ＰＳ 对 Ｃ 移 植治疗组。在 ｌ Ｗ后 分 别 经 颈 外 动 脉 将 标 记 ５溴 脱 氧 尿 嘧 啶 （ ｒｕ 的 ２ｘ１‘ Ｃ 悬 液 和 等 体 积 Ｐ Ｓ液 － Ｂｄ ） ０ ＭＳ ｓ Ｂ
ＢＵ ｎ ・ ａ Ｘｉ ｇ ｙ ｏ，ＺＨＡＮＧ ｎｇ，ＺＨＡＮＧ ｈｅ ｇ ＸＵ，ＬＩＺｈ ・ ｉ ｇ， Ｌ Ｕ ｅ Ｆｅ Ｓ ｎ・ ｉｙ ｎ Ｉ Ｍ ｎｇ
（ ｅａ ｔ ｅ ｔ Ｎｅｒｓ ｒｅ ，Ｈ ｎ ｎＰ ｏｉｃ ｌ ｅ ｌ’ ， ｈ ｎ ｄ ｏ ５ ０ ３ ｈｎ ） Ｄ ｐｒ ｎ ｍ ｕｏｕｇ ｒ ｙ ｅ ａ ｒｖ ｉ ｏ ｅ ｓ Ｚ ｅｇ ｔｕ４ ０ ０ ，Ｃ ｉａ ｎａＰ ｐ
大鼠局灶性脑缺血再灌注芯片数据挖掘及生物信息学分析
大鼠局灶性脑缺血再灌注芯片数据挖掘及生物信息学分析2广西医科大学基础医学院生理学教研室广西南宁 530021）摘要：目的运用生物信息学方法分析局灶性脑卒中大鼠正常对照组和模型组的差异表达基因及涉及信号通路，为研究缺血性脑卒中的病理生理机制提供生物信息学的依据。
方法选用CEO数据库中编号为GSE61616的基因芯片数据，经过整理，假手术组和模型组各5个样本，分别进行基因筛选、差异表达基因分析及功能富集、相关信号通路分析。
结果与假手术组比较，模型组22个基因表达明显改变。
GO分析表明这些基因在生物学功能方面主要涉及氧化应激、炎症反应、细胞代谢、细胞凋亡等几个方面。
蛋白质互作网络分析进一步证实在炎症反应和细胞凋亡两个方面出现基因差异性表达显著。
通路涉及PI3K-Akt、EGF-ERBB2-RAS-ERK等。
结论脑缺血再灌注损伤后涉及多种蛋白和基因发生显著改变，通过控制炎症反应，减少细胞凋亡以及阻断氧化应激通路等干预是临床治疗局灶性脑卒中的有效策略。
关键词：缺血性脑卒中，生物信息学，基因芯片Bioinformatics Analysis of Chip Data of Focal Cerebral Ischemia-Reperfusion in RatsXU Ke-bei1,Wanxiang Hu21Department of neurosurgery,the People’s Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region,2Department of Physiology,School of Basic Medical Sciences, Guangxi Medical University, Nanning 530021, ChinaAbstract:Objective To bioinformatics analyze the differentially expressed genes and related pathway between control group and modelgroup in focal cerebral ischemia-reperfusion rat animal model, and provide bioinformatics basis for the study of the pathophysiological mechanism of ischemic stroke. Methods The gene chip data of GSE61616 was downloaded from Gene Expression Omnibus(GEO) database. After rearranging the data, each 5 samples from the sham and model group were used for gene screening, differential gene analysis, pathway enrichment analysis. Results Compared with the sham group, the expression of 22 genes in the model group was significantly changed. GO analysis showed that these genes mainly involved in oxidative stress, inflammatory response, cell metabolism, and apoptosis in biological functions. Furthermore, Protein interaction network analysis confirmed that differentially expressed genes wassignificantly both in inflammation and apoptosis, which involves several pathways such as PI3K-Akt, EGF-ERBB2-RAS-ERK and so on. Conclusions Many proteins and genes changed significantly after cerebral ischemia-reperfusion injury. Applying different intervention methods in controlling inflammation, reducing apoptosis or blocking oxidative stress pathway will provide effective therapeutic strategies for ischemic stroke.Keywords:ischemia stroke, bioinformatics, gene chip1.前言缺血性脑卒中，俗称“脑梗死”，是指脑部血供突然中断而引起不同程度脑损伤的一类疾病，其致死率和致残率居高不下[1]，严重威胁人类生命健康，为家庭、社会造成严重的经济负担。
间充质干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内胶质细胞源性神经营养因子含量的影响
ｍａ ｏ ｓ ｆ Ｄｒｔｗ ｒ ｏ ｔ ｎ ｕｔｒｄ ｅｎｔ ｔ ｏ７ｄｙ ｆ ｇ ｅｅｓｂｅｔ ｃｅ ａａｄｈｐｘ ｊｒ ￣ ｗ ｓ ｅ ｉ ｌｅ ａｄｃｌ ｅ．Ｎ ｏａ ｌａｓ ｆ ａｓ ｅ ｒ ｊｃ ｄｔ ｉ ｈｍｉ ｎ ｙｏｉ ｉ ｕｙ ｏＳ ａ ｅｓ ａ ｄ ｕ ａｒ ｏａ ｗ ｕ ｅ ｏｓ ａｎ ｂ ｇｔ ｎｏ ｌ ａｏｄａ ｅ ．ＭＳ ｓａｄＰ Ｓｗ ｒ ｄ ｉｉｒｔ ｔ ＭＳ ｓｔ ｎｐ ｎ ｔ ｎｇ ｕ （ ２ ｎｄＰ Ｓ ｙｌ ａｏ ｆ ｅ ｃｒ ｉ ｄ ｒ ｉ ｉ ｆ ｔ ｔ ｙ Ｃ ｎ Ｂ ｅ ａｍ ｎｓａｅ ｉ ｏ Ｃ ａｓｌ ｔｉ ｒ ｐ ｎ＝ ０）ａ Ｂ ｅ ｔ ｄ ｎ ｒ ａ ａｏ ｏ ｃｎｒｌ ｒｕ （ ２ ） ｒｓｅｔ ｅ ， ４ｈ ｕｓ ｔ ｒｅ ； ｈ ｅｎ ｅｔ ｎ ｗ ｓ ｖｎｉ ｏｍ ｌ ｒｕ ｎ＝ ０ ｎ ｏｔ ｏｐ ｎ＝ ０ ， ｅｐｃｉ ｌ ２ ｏｒ ａ ｅ ｓ ｇｒ ｗ ｉ ｏｔ ａ ｏｇ ｖｙ ｒｕ ｙ ｆ ｌ ｒ ｍｅｔ ａ ｅ ｎｒ ａ ｇ ｐ（ ２ ）ａｄ ｎ ｏ ＨＩＤ ｏｅａｏ ｒｕ ｎ： ０ ．Ｍ ｄｆ ｄｎｕｏ ｇ ａ ｓｖｒｙｓｏｅ（ Ｎ Ｓ ａ ｓｅｓｄｉ ａ ｔ ａ １ ３ ７ａｄ１ Ｂ ｐｒｔｎｇ ｐ（ ２ ） ｏ ｉｅ ｅｒ ｏｉ ｌ ｅｅ ｔ ｃｒ ｍ Ｓ ）ｗ ｓ ｓｓｅ ｌｒ ｓ ｔ ， ， ｎ ４ ｉ ｏ ｉ ｌ ｃ ｉ ａ ｎ ｌａ
骨髓间充质干细胞研究与应用概况
骨髓间充质干细胞研究与应用概况于雷;高俊玲【摘要】骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
【期刊名称】《华北理工大学学报：医学版》【年(卷),期】2018(020)002【总页数】5页(P164-168)【关键词】骨髓间充质干细胞;肺纤维化;缺血性脑卒中【作者】于雷;高俊玲【作者单位】[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells，BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞，但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究，发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群，在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长；1987年，又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell，MSC)。
神经科论文神经内科医学论文神经内科论文：脑缺血恢复期骨髓间充质干细胞移植对神经功能和促血管生成素-1、
神经科论文神经内科医学论文神经内科论文：脑缺血恢复期骨髓间充质干细胞移植对神经功能和促血管生成素-1、2及其受体表达的影响【摘要】目的探讨脑缺血恢复期骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对神经功能和促血管生成素(Ang)-1、Ang-2及酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)表达的影响。
方法42只SD大鼠随机分为脑缺血对照组(对照组，12只)、BMSC移植组(15只)及假手术组(15只)，各组又分为缺血后28 d、35 d、42 d 3个亚组。
用线栓法制作脑缺血大鼠模型，用改良黏附物移除试验(MST)评估大鼠神经功能。
在脑缺血后21 d，给BMSCs 移植组大鼠尾静脉注射BMSCs，对照组大鼠注射等体积PBS。
在脑缺血后28 d、35 d、42 d(移植后7 d、14 d、21 d)，用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western Blotting法检测大鼠缺血周围脑组织Ang-1、Ang-2及Tie-2 mRNA和蛋白的水平。
结果BMSCs移植组大鼠各时间点亚组的MST评分均显著高于对照组(均P＜0.05);BM-SCs移植组及对照组各时间点亚组脑组织的Ang-1、Tie-2 mRNA和蛋白水平明显高于假手术组(P＜0．05～0.01)，脑缺血后28 d、35 d，BMSCs 移植组脑组织Ang-1、Tie-2 mRNA及蛋白水平均明显高于对照组(均P＜0.01)，而脑缺血后42 d两组之间的差异无统计学意义;3组各时间点亚组脑组织Ang-2 mRNA及蛋白水平的差异均无统计学意义。
结论脑缺血恢复期BMSCs移植能改善神经功能，并使缺血周围脑组织Ang-1、Tie-2的表达水平明显增高，而对Ang-2表达无明显影响。
【关键词】骨髓间充质干细胞;脑缺血;促血管生成素-1;促血管生成素-2;酪氨酸激酶受体-2促血管生成素(Ang)-1、Ang-2及酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)是介导脑缺血后血管源性水肿、血管生成和血管成熟稳定的关键因子。
骨髓间充质干细胞对脑缺血大鼠神经干细胞分化的影响
脑血管 疾 病 （ ｃ ｅ ｒ ｅ ｂ ｒ ａ ｌ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ， Ｃ Ｖ Ｄ） 严 重 威 胁 着人类 的生命 ， 我 国每 年 约 有 １ ５ ０万 新 发 脑 血 管 病患 者 ， 最常见 的类 型 为局 灶性脑 缺 血 ， 给 国家 和社 会
ｃ ｏ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｎ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ＭＣ Ａ Ｏ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｔ ｈ ａ ｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ｅ ｉ ｎ Ｃ Ｏ Ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ （ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） ． Ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ Ｗ ａ ｓ ｎ ｏ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｔ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｎ ｕ ｍ ｂ ｅ ｒ ｏ ｆ ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｎ ｓ ｂ ｅ ｔ ｗ ｅ ｅ ｎ Ｐ Ｂ Ｓ ａ ｎ ｄ ＭＣ Ａ Ｏ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ （ 尸＞ ０ ． ０ ５ ） ． Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｗ ｅ ｒ ｅ ｍｏ ｒ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ａ ｃ ｔ ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｎ ｓ ｉ ｎ ｉ ｓ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ — ｌ ａ ｔ ｅ ｒ ａ ｌ ｂ ｒ ａ ｉ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｔ ｈ ａ ｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ
ｍａ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ， ｔ ｈ ｕ ｓ ｒ ｅ ｐ ａ ｉ ｒ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｂ ｒ ａ ｉ ｎ ｄ ａ ｍａ ｇ ｅ ｉ ｎ ｆ ｏ ｃ ａ ｌ ｉ ｓ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ａ ｒ ａ ｔ ｓ ．
［ ＫＥ Ｙ ＷＯＲ Ｄ Ｓ ］ Ｂ ｏ ｎ ｅ ｍｅ ｓ ｅ ｎ ｃ ｈ ｙ ｍａ ｌ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ； Ｂ ｒ ａ ｉ ｎ ｉ ｓ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ａ ； Ｎ ｅ ｕ ｒ ａ ｌ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ； Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ； Ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的研究
（．黑龙江省 医院南 岗院区神经内科 ， １ 黑龙 江 哈尔滨 １０ ０ ； ５ ０ １ ２ ．哈尔滨 医科大学 附属第 四医院病理 科 ， 黑龙江 哈尔滨 １ 究探 讨 骨髓 间充质 干 细胞 （ ＭＳ ｓ 对 Ｓ 大鼠脑梗 死 的治 疗效果 。 方 法 分 离培 养 Ｓ 目的 Ｂ Ｃ） Ｄ Ｄ 大鼠 Ｂ Ｃ ， 建立 大脑 中动脉栓 塞 实验 动物模 型 ； 静 脉 注射 Ｂ Ｃ 并 设 立 Ｐ Ｓ对 照组 ， 察 大 鼠神 经 ＭＳ ｓ 并 尾 ＭＳ ｓ Ｂ 观
Ｂ Ｃ ａ ｓｌ ｔｄｇｏｐ（ ０ ０ ） Ｉ ＭＳ ｓｔ ｎｐａｔ ｉｎｇｏｐ ｃｒｂａ ｉ ａ ｔ ｎａｅ ９ ＭＳ ｓｔ ｎｐａ ｅ ｒｕ Ｐ＜ ． ５ ； ｎＢ Ｃ ａ ｓｌｎａ ｏ ｒｕ ， ｅｅｒｌｎ ｒ ｉ ｒａ（ ５±１ ） ｍ ， ｒ ｎ ｒ ｔ ｆｃｏ ｍ ８
ｃ ｓ ｎａ ｉ ａ ｍｏｅ ｗ ｓ ｓ ｂｉ ｅ ； ｎｒｖｎ ｕ ｊｃｉ ｆ ＭＳ ｓｉ Ｐ Ｓｃｎｒｌ ｒｕ ．ｒｔ ｅｖ ｎｕ ｎ ｌ ｉ ｎｍ ｌ ｄ ｌ ａ ｔ ｌｈ ｄ ｉｔ ｅｏ ｓｉ ｅｔ ｎｏ ｕｏ ｅａ ｓ ａ ｎ ｏ Ｂ Ｃ Ｂ ｏｔ ｏ ｐ ａ ｎｒｅｉ ｒ ａ ｄ ｎ ｏｇ ｊｙ
ｆｒ ｔ ｎ ｔ ｅ ｒ ｐ ｕ ｉ ｆ ｃ． ｅ ｈ ｄ Ｂ Ｃ ｆＳ ａ ｓｗｅｅ ｉｏａ ｅ ｎ ｕｔ ｒ ｄ ｈ ｄ ｌ ｅｅ ｒ ｌ ｒ ｒ Ｃ ａ ｃ ｉ ｈ ａ ｅ ｔ ｅｆ ｔ Ｍ ｔ ｏ ｓ ｏ ｃ ｅ ＭＳ ｓｏ Ｄ ｒ ｔ ｒ ｓ ｌ ｔｄ ａ ｄ ｃ ｌ ｅ ．ｔ ｅ ｍｉ ｄ ｅ ｃ ｒ ｂ ａ ｔ ｙ Ｏ － ｕ ａ ｅ
ｂａ ｉ ａ ｔ ｎｒｔ ｂ ｔ ｖｎ ｕ ｊ ｔ ｎ ｔ ｒｖ ｅ ｘ ｅｉ ｎａ ｂ ｓ ｒ ｈ ｌ ｉａ ｔ ａｍ ｎ ｏ ｒｂａ ｉ－ ｒ ｆｒ ｉ ａ ｙｉ ｒ ｅ ｏ ｓ ｎｅ ｉ ．Ｉ ｐｏｉ ｄｅｐ ｒ ｔｌ ａｉ ｆ ｅｃ ｎｃｌｒ ｔ ｅ ｔ ｆ ｅｅ ｒｌｎ ｌ ｎ ｃｏ ｓ ｎａ ｉ ｃｏ ｄ ｍｅ ｓ ｏ ｔ ｉ ｅ ｃ
骨髓间充质干细胞对大脑中动脉缺血再灌注大鼠治疗作用的研究
中华 老年 心脑 血管 病 杂志 ２ ０ ０ ８年 ５月 第 １ ０卷 第 ５期
Ｃ ｉＪＧｅｉ ｒＨｅｒ ｒｉ ｅｓｌ ｉ， ｙ２ ０ ， ｏ ０，ｏ ５ ｈｎ ｒｔ ａｔ ａ Ｖ ｓｅ ＤｓＭａ ０ ８ Ｖ ｌ Ｎ ・ ａ Ｂ ｎ １
只， 以线 栓 法 制 成 缺 血 再 灌 注 模 型 ， 功 大 鼠 ２ 成 ３只 ， 机 分 为 ３组 ， 期 ＭＳ 治 疗 组 （ 随 早 Ｃ ８只 ） 晚 期 ＭＳ 治 疗 组 （ 、 Ｃ ８
只） 对 照 组 （ 和 ７只 ） 术后 每 ３天 对 各 组 大 鼠进 行 神 经 功 能 评 估 ， ８天 后 处 死 大 鼠 ， 。 ２ 荧光 倒 置 显 微 镜 下 观 察 ＭＳ Ｃ 进 入 大 鼠 体 内后 神 经 元 特 异 性 烯 醇 化 酶 的 表 达 。 结 果 早 期 ＭＳ 治 疗 组 大 鼠 神 经 功 能 恢 复 较 对 照 组 明显 提 前 ， Ｃ ＭＳ 治 疗 ｌ Ｃ ４天后 与 对 照 组 比较 无 显 著 差 异 。ＭＳ 治 疗 ２ Ｃ ８天 后 梗 死 灶边 缘 可 见 少 量神 经 元 特 异 性 烯 醇 化 酶 和 ５ 溴脱 氧尿 嘧啶 双 染 细胞 。 晚 期 ＭＳ Ｃ治 疗 组 大 鼠神 经 功 能 恢 复 与 对 照 组 比 较 无 显 著 差 异 。 结 论 大 鼠 大 脑 中动 脉 缺 血 再 灌 注后 早期 静 脉 注射 ＭＳ Ｃ治 疗 可 明显 加 速神 经 功 能 的 恢 复 。 关 键 词 ： 缺 血 ； 质 干 细胞 ； 灌 注 ； 经 元 脑 间 再 神 中 图分 类 号 ： ７ ３ Ｒ ４ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ９０ ２ （ ０ ８ ０ — ３ ９０ １０ —１ ６ ２０ ）５０ ７ ３
MMP-9在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究的开题报告
MMP-9在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究的开题报告一、研究背景和意义近年来，脑缺血再灌注损伤已成为临床上普遍的神经疾病，其发病率逐年增加，治疗难度也逐渐加大。
局灶性脑缺血再灌注损伤是指脑缺血后再启动血流灌注时，血管内皮细胞的通透性增加导致的脑水肿和血管生成等多种神经功能障碍，进而导致脑血管疾病、神经退行性疾病等疾病的发生。
MMP-9是一种金属蛋白酶，属于胶原酶家族，所在位置主要是细胞膜和胞质，是炎症反应和组织剪切的主要酶之一。
MMP-9的升高可以促进血管新生和血管内皮细胞的总体通透性增加，在脑缺血再灌注损伤中发挥重要的作用。
因此，深入研究MMP-9在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制对于治疗脑缺血再灌注损伤有重要的参考价值。
二、研究目的和内容本研究旨在探究MMP-9在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制及其可能的治疗作用。
具体研究内容包括：1. 制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型；2. 采用免疫荧光和Western blot等方法检测MMP-9表达水平；3. 评估MMP-9对神经元形态和生长的影响；4. 通过神经元保护试验探讨MMP-9对大鼠神经系统的治疗作用。
三、研究方法和技术路线1. 实验动物：健康雄性Sprague-Dawley大鼠；2. 制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型；3. 采用免疫荧光和Western blot等方法检测MMP-9表达水平；4. 利用病理学方法评估MMP-9对大鼠神经元形态和生长的影响；5. 通过神经元保护试验探讨MMP-9对大鼠神经系统的治疗作用。
四、预期成果和意义本研究将通过探究MMP-9在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制，为深入挖掘神经系统疾病的分子机制提供基础数据。
同时，本研究也将为临床治疗局灶性脑缺血再灌注损伤提供新的治疗策略和方法。
干细胞移植治疗脑梗塞研究现状
多 能 干 细 胞 ，主要 存 在 于 全 身 结 缔 组 织 器 官 间 质
中 ，骨 髓 组 织 中 所 含 的 间 充 质 干 细 胞 称 为 骨 髓 间
间 充 质 干 细 胞 加 脑 源 性 神 经 生 长 因 子 ：ｉ Ｌ 等
１将 加 入 脑 源 性 神 经 生 长 因 子 间 充 质 干 细 胞 ， 立 ３ １ 用
充 质 干 细胞 。它 能 够 自我 更 新 和 多 向分 化 ， 够 分 能
化为成骨 细胞 、 肪 细胞 、 脂 内皮 细 胞 等 ， 其 是 能 尤
体 定 位 注 射 给 脑 缺 血 大 鼠，对 照 组 仅 注 射 间充 质
干 细 胞 ，结 果 两 组 鼠 的 间充 质 干 细 胞 可 同 时表 达
胶 质 细 胞 ， 达 胶 质 纤 维 酸 性 蛋 白 ； 果 分 化 为 神 表 如 经 元 ，早 期 神 经 元 标 志 神 经 元 特 异 性 核 蛋 白 ， 正 在 成 熟 神 经元 标 志 物 神 经 纤 维 丝 蛋 白 。
来 自动 物 试 验 的 证 据 表 明 ，间 充 质 干 细 胞 移
Ｃ ７ 、 Ｄ１ Ｄ ９ Ｃ ９和 Ｈ Ａ Ｄ Ｌ — Ｒ等 表 面分 子 ；间 充 质 干 细胞在体外 培养 条件下 能够 分化为 成骨 细胞 、 脂
Ｇ Ｎ Ｄ Ｆ基 因 的 间 充 质 干 细 胞 移 植 人 大 脑 中动 脉 闭 塞 鼠 ， 察 到 其 神 经 功 能 恢 复 好 于 对 照 组 。Ｈ ｒａ 观 ｏｉ ｔ 等 【利 用 腺 病 毒 将 Ｇ Ｎ ６ １ Ｄ Ｆ基 因 导 人 人 骨髓 间 充 质
干 细 胞 ，然 后 将 其 通 过 静 脉 移 植 人 永 久性 大 脑 中
对 比 ， 血 间 充 质 干 细 胞 有 着 来 源 广 泛 ， 化 能 力 强 ， 宿 主 病 发 生 率 低 的优 势 。 脐 分 抗
骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠大脑中动脉缺血再灌注的研究
ＭＳ ｓ Ｃ 的来 源及 特性
主要 是 骨髓 ， 同时 还 存 在 于 肠 、 、 、 肪 、 髓 和 肺 肝 脂 牙 牙周 膜 等器 官组 织 中 。在 外周 血 和脐 带 血 中亦 有 存 在…。
主病 （ ｒｆ ｖｒ ｓ ｏｔ ｉ ａｅ Ｇ Ｈ ， Ｇ ａ —ｅｓ — ｓ ｄｓ ｓ ， Ｖ Ｄ） 已取 得 良好 ｔ ｕｈ ｅ 的效果 Ｊ 。研 究认 为 ＭＳ ｓ Ｃ 免疫 调 节 和免 疫抑 制 机
Ｃｏ ｒｓｏｎ ｉ ｇ ａ ｔ ｏ ｒｅｐ ｄ ｎ ｕ ｈ ｒ：ＺＨＡＮＧ ｎ— ｎ，Ｅｍａｉ：ｋ ８＠ １ ．ｃ ｎ Ｋｕ ｎ ａ ｌｚｎ ６３ ｏ
【 ｂｔ ｃ】 Ｔａｓｌ ｔｉ ｆ ｅ ｎｈｍ ｌ ｔ ｅｓｃｎｓ ｎ ｃ ｔｌ ｉｐｏ ｅｎｕ ｌ ｉ ｌ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｒ ｐ ｎ ｔｎｏ ｍ ｓ ｃｙ ａ ｓｍ ｃ ｌ ａ ｉ ｉ ａ ｉ ｙ ｍ ｒ ｅｔ ｅｒ ｏ ｃ ｎ ａ ａｏ ｅ ｅ ｌ ｇ ｆ ｎｎ ｉ ｖ ｈ ｏｇ ａ
一
Ｍ Ｃ 之 多 向分 化 潜 能 使 得 人 们 对 其 用 于 治 疗 器 官 给免 疫 抑 制 剂 ， 不 出ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ现 免 疫 清 除 。有 研 究 表 明 Ｓｓ 并
Ｍ Ｃ 在刺激后（ Ｓｓ 如体 内创伤） 对免疫系统表现较强
的抑 制 作 用 ｊ 因而 ＭＳ ｓ 被 尝试 应 用 于减 少移 。 Ｃ正 １ ＭＳ ｓ 源 ： Ｃ ． Ｃ来 ＭＳ ｓ来 源 于 中胚 层 和 神 经 外 胚 植 免 疫排 斥 ， 疗 相 关 免 疫 失 调 症 。用 ＭＳ ｓ 疗 治 Ｃ 治 层 的非 造血 细 胞 。 它存 在 于许 多 器 官 和结 缔 组 织 ， 移植肠 和肝脏 所 致重症 难 治 型 四级 急 性移 植 物抗 宿
骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤:外泌体及因子的作用机制
骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤：外泌体及因子的作用机制张长江;梁贵友【摘要】背景:心肌缺血再灌注损伤是缺血心肌病及心内直视手术中最常见的并发症之一.骨髓间充质干细胞的发展, 为临床预防与治疗心肌缺血再灌注损伤提供了新的方法.目的:综述骨髓间充质干细胞对心肌缺血再灌注损伤的治疗作用和潜在机制, 旨在为骨髓间充质干细胞指导临床应用提供理论依据.方法:检索中国期刊全文数据库 (CNKI) 、万方、PubMed等数据库2000年1月至2018年10月期间关于骨髓间充质干细胞应用于心肌缺血再灌注损伤的文献, 检索词分别为\"骨髓间充质干细胞, 心肌缺血再灌注损伤, 研究进展\"和\"bone marrow mesenchymal stem cells, myocardial ischaemia/reperfusion, cell therapy, clinical trial studies\".排除旧的、重复的观点, 对检索的文献进行整理, 共纳入56篇文献进行分析探讨.结果与结论: (1) 总结了骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤中旁分泌的因子、外泌体miRNA及其作用, 例如抗炎、抗凋亡、抗纤维化、修复心肌和促新生血管等; (2) 总结骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤可能涉及的分子机制, 例如介导线粒体融合蛋白2的作用、心肌自噬调节、AMPK/mTOR信号通路的调节作用; (3) 为骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤指导临床应用提供理论依据.%BACKGROUND: Myocardial ischemia/reperfusion injury is one of the most common complications in ischemic cardiomyopathy and open heart surgery. The development of bone marrow mesenchymal stem cells provides a new method for clinical prevention and treatment of myocardial ischemia/reperfusion injury. OBJECTIVE: To review the therapeutic effect and potential mechanisms of bone marrow mesenchymal stem cells in thetreatment of myocardial ischemia/reperfusion injury, in order to provide a theoretical basis for the clinical application of bone marrow mesenchymal stem cells. METHODS: Chinese Journal Full-text Database (CNKI), WanFang, and PubMed were retrieved for articles related to the use of bone marrow mesenchymal stem cells for myocardial ischemia-reperfusion injury published from January 2000 to October 2018. The search terms were \"bone marrow mesenchymal stem cells; myocardial ischaemia/reperfusion; research process\" in Chinese and \"bone marrow mesenchymal stem cells; myocardial ischaemia/reperfusion; cell therapy; clinical trial studies\" in English. Old and repetitive viewpoints were excluded, the searched literatures were sorted out, and finally 56 articles were included for further analysis and discussion. RESULTS AND CONCLUSION: (1) In this paper, we summarize paracrine factors, exosomes miRNA and their effects in the treatment of myocardial ischemia/reperfusion injury with bone marrow mesenchymal stem cells, such as anti-inflammation, anti-apoptosis, anti-fibrosis, repair of myocardium and neovascularization. (2) We also summarize the possible molecular mechanisms of bone marrow mesenchymal stem cells involved in the treatment of myocardial ischemia/reperfusion injury, such as the role of mitochondrial fusion protein 2, regulation of myocardial autophagy, and regulation ofAMPK/mTOR signaling pathway. Overall, we attempt to provide a theoretical basis for the clinical application of bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of myocardial ischemia/reperfusion injury.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2019(023)009【总页数】6页(P1455-1460)【关键词】骨髓间充质干细胞;心肌缺血;再灌注损伤;干细胞;外泌体;细胞因子【作者】张长江;梁贵友【作者单位】遵义医学院附属医院心血管外科,贵州省遵义市 563000;遵义医学院附属医院心血管外科,贵州省遵义市 563000【正文语种】中文【中图分类】R459.9;R394.2文章快速阅读：文题释义：心肌缺血再灌注损伤：是由各种原因引起的心肌缺血(比如心脏外科手术、心脏移植、心肌梗死等)，无血液流向心脏组织而致氧失衡，产生心脏功能紊乱或心肌组织受损，及时有效恢复心肌缺血部位的血液灌注，能够减少缺血心肌损伤及坏死，但是会引起组织进一步损伤的现象。
《2024年脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经再生的Notch信号通路机制研究》范文
《脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经再生的Notch信号通路机制研究》篇一一、引言脑缺血是一种常见的神经系统疾病，其发病机制复杂，涉及多种细胞和分子间的相互作用。
近年来，神经干细胞移植技术为脑缺血治疗提供了新的可能。
在移植过程中，Notch信号通路起着关键作用，能够调控神经再生和神经细胞分化。
本研究旨在探讨脑缺血大鼠接受神经干细胞移植后，Notch信号通路在神经再生过程中的机制和作用。
二、材料与方法1. 实验材料本实验所使用的动物为成年SD大鼠，选用C57小鼠来源的神经干细胞进行移植。
实验所需试剂、仪器等均经过严格筛选和质量控制。
2. 实验方法（1）建立脑缺血模型：采用线栓法建立大鼠脑缺血模型。
（2）神经干细胞移植：将C57小鼠来源的神经干细胞移植至缺血区。
（3）Notch信号通路检测：通过免疫组化、Western Blot等方法检测Notch信号通路相关蛋白的表达情况。
（4）行为学评估：通过神经功能评分等方法评估大鼠神经功能恢复情况。
三、实验结果1. Notch信号通路相关蛋白表达变化通过免疫组化和Western Blot等方法检测发现，移植神经干细胞后，缺血区Notch1、Jagged1等关键蛋白表达水平显著提高，表明Notch信号通路被激活。
2. 神经再生情况移植后的神经干细胞参与了缺血区域的神经再生过程，表现为新生神经元和突触的生成增多。
同时，大鼠的神经功能评分也得到了显著提高，表明神经功能得到了恢复。
3. Notch信号通路在神经再生中的作用研究发现，Notch信号通路在神经再生过程中起着重要的调控作用。
通过激活Notch信号通路，可以促进神经干细胞的增殖、迁移和分化，从而加速神经再生。
此外，Notch信号通路还能够抑制神经元凋亡，保护缺血区域的神经元。
四、讨论本研究表明，在脑缺血大鼠接受神经干细胞移植后，Notch 信号通路被激活，参与了神经再生的过程。
Notch信号通路通过调控神经干细胞的增殖、迁移和分化，促进了缺血区域的神经再生。
骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血损伤的治疗作用
２ ５
１２ １ Ｍ Ｃ 的分离 、 ．． Ｓｓ 培养及诱导
断颈法处死大
鼠， 取股骨及胫骨 ， Ｍ Ｃ 标准培养液 冲洗骨髓腔 ， 用 Ｓｓ 冲洗液离心， 弃上清 ， 叠加到 Ｆｃ １ ａｕ 淋巴细胞分 ｉ ｌＰｑｅ ｏ． 离液上层 ， 取单 个核 细胞 层 ， １。 ｃ 接种到培 以 ０ ＋／ｍ 养瓶中， １全量换液。待原代细胞生长至瓶底 的 隔３ ８％ ～ ｏ 时 ， ０ ９％ 用胰 蛋 白酶 液 和 Ｅ Ｔ Ｄ Ａ液 消化 ， 心 离
健康成年雄性 ｓ Ｄ大鼠 ４ ０
以提尾时大鼠右前肢屈曲、 内收或行走时向右侧转
圈或倾倒为造模成功。造模成功后第 ７天 ， 将模型 大 鼠分成 Ａ组 ｌ 、 ６例 Ｂ组 ｌ ６例 、 照 组 ８例 ， 对 Ａ组 通过立体定 向仪定位大 鼠左侧纹状体， 注射 １ １。 × ０
个 Ｂｄ 记 的 ＭＳ ｓ 下 设 Ａｌ组 和 Ａ ｒｕ标 Ｃ（ ２组 各 ８例 ，
径 移植 效果优于尾静脉途 造血 干细胞移植 ； 脑缺血 ［ 中图分类号 ］ １ ４ ． １ ３３ ７ ［ 文献标识码］ Ｂ ［ 文章编号 ］ １０ －６Ｘ（０８ ４ －０ ５０ ０ ２２ ６ ２ ０ ）２０２ －３
干细胞移植是近年来 医学领域的研究热点 ， 骨 髓间充质干细胞（ Ｓ ｓ 存在于骨髓问充质 中， Ｍ Ｃ） 具有 多项分化潜能， 临床应用前景 良好。２０ ０７年 １ ～ 月 ２０ ０ ８年 ４月 ， 我们 通 过 观 察 不 同途 径 移 植 ＭＳ ｓ Ｃ 对
只 ， 质量 分别 为 １０—１０ ｇ 用 于分 离 和培养 体 ４ ６ （ Ｍ Ｃ ） ６ — ８ （ 于造模 ） 由中国军事医学 Ｓ ｓ 和２ ０ ２０ｇ 用 ，
骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死大鼠的研究
ｐ ｔｎ ４ ， Ａ ４ ）神经丝蛋 白２０ ｎｕ ｆａ ｅｔ ０ ， Ｆ０ ） ｒｅ 一 ３ Ｇ Ｐ一 ３ 、 ｏｉ ０ （ ｅｒ ｌ ｎ ２０ Ｎ ２０ 和巢蛋 白的表达， ｏ ｍ ｉ 注射后 ｌ２ ３４ ５ ６ 、 、 、、 、
周， 进行 评 分 。结果 移植后 ２ ３ ６周 ， ｒＵ 阳性 的 Ｂ Ｃ 、、 Ｂｄ ＭＳ ｓ主要 分 布 于脑梗 死周 围 区。计 数发 现 ， 移植 后 ２周 ， Ｕ阳性 的 Ｂ Ｃ 约 占移 植 细胞数 的 ５ ９ ， Ｂ ＭＳ ｓ ． ％ ３周 占５ ３ ， ． ％ ６周 占３ ９ ； ． ％ 移植后 ２周 ， ＭＳ ｓ 态 大 Ｂ Ｃ 形
多变为 圆形 或 椭 圆形 ， 分 阳性 标 记 的 细胞 长 出神 经 元 样 突起 ， ｌ．％ 表 达 胶 质 纤 维酸 性 蛋 白 （ ｉｌ 部 约 ２６ ｄａ ｆｂｉａｙａｉｉ ｐｏ ｉ ， Ａ Ｐ ， ６ ３ 表 达神 经元特 异性核 蛋 白（ ｅ ｒｎｌ ｕ ｌ ｒａｔ ｅ ， ｅＮ） 移植 后 ｒ ｒｌｒ ｃ ｃ ｒｔ ｎ Ｇ Ｆ ） 约 ． ％ ｉ ｌ ｄ ｅ ２ ３６周 ， 、、 Ａ组 Ｇ Ｐ一 ３ Ｎ ２０ 巢蛋 白的表 达 ， Ａ ４ 、Ｆ０、 明显 高于 Ｂ、 （ ００ ） 移 植后 ３周 开始 ， 组 的评 分 ｃ组 Ｐ＜ ．５ ； Ａ 在 各观察 时 间点明 显 高于 Ｂ Ｃ组 （ ０ ０ ） 、 Ｐ＜ ． ５ 。结论 通过静 脉 注射 的 Ｂ Ｃ ＭＳ ｓ能 向梗 死 病灶 内迁徙 、 活 。 存
第３ ４卷 ８ ４ ２１ ２ ００年第 １ 期 １
黑
龙
江
医
学
Ｖｏ． ４， ． １ １３ Ｎｏ １ Ｎ ｖ２ ｌ ｏ． ＯＯ
ＨＥ ＯＮＧ ＪＡＮＧ ＭＥ Ｃ Ｌ Ｊ ＩＬ Ｉ ＤＩ Ａ ＯＵＲＮ ＡＬ
骨髓间充质干细胞移植脑梗死模型后的CT、MRI特征分析
骨髓间充质干细胞移植脑梗死模型后的CT、MRI特征分析杨廷双【摘要】背景：研究表明骨髓间充质干细胞可通过多种途径发挥促进脑组织功能恢复的作用。
目的：分析骨髓间充质干细胞移植脑梗死模型大鼠的CT、MRI特征。
<br> 方法：将40只脑梗死模型大鼠随机分为2组，梗死组通过尾静脉注射1 mL PBS、移植组通过尾静脉注射1 mL细胞浓度为2.0×109 L-1的细胞悬液。
于移植后1，2，3周进行神经功能缺损评分(mNSS)，评价神经功能恢复情况；于移植后的6 h，1，3，5，7 d对各组大鼠行CT及MRI扫描，观察脑梗死区TIWI、T2WI、FLAIR、DWI序列的信号改变特征，梗死体积大小。
测量脑梗死区域T1WI、T2WI、FLAIR、DWI序列的信号强度比(SIR)及其相对变化率(∆SIR)，并与正常对侧相应解剖区域进行比较。
<br> 结果与结论：移植后1，2，3周，移植组的神经功能缺损评分明显低于梗死组(P<0.05)；移植后3，5，7 d时移植组脑梗死体积较梗死组显著减少(P<0.05)，移植组T1WI序列SIR均明显高于梗死组，T2WI、FLAIR序列SIR较梗死组显著降低，差异有显著性意义(P<0.05)；移植后7 d时移植组DWI序列SIR较梗死组明显降低(P<0.05)。
移植组T1WI序列∆SIR与梗死组比较差异无显著性意义(P>0.05)，移植组T2WI、FLAIR及DWI序列∆SIR较梗死组显著增高，差异有显著性意义(P<0.05)。
结果显示MRI可显示大脑任意角度的切面像，对骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死的疗效评价起重要作用。
%BACKGROUND:Studies have shown that bone marrow mesenchymal stem cel s can play a catalytic role in brain function recovery through a variety of ways. OBJECTIVE:To analyze the CT and MRI features of rats with cerebral infarction undergoing bone marrow mesenchymal stem cel transplantation. METHODS:Forty rats with cerebral infarction wererandomized into two groups:model group was treated with 1 mL PBS and transplantation group was injected with 2.0×109/L cel suspension. Modified neurological severity score was detected at 1, 2, 3 weeks after transplantation for neurological function evaluation. CT and MRI scans were performed at 6 hours, 1, 3, 5, 7 days after transplantation to observe the changing features of T1WI, T2WI, FLAIR, DWI sequences in the infracted area as wel as infarction size. Signal intensity ratios (SIR) of T2WI, FLAIR, DWI sequences and relative rates of change (∆SIR) were determined and compared with the normal values. RESULTS AND CONCLUSION:After transplantation 1, 2 and 3 weeks, the modified neurological severity scores were significantly lower in the transplantation group than the model group (P<0.05). After transplantation 3, 5, 7 days, the infracted size was reduced significantly in the transplantation group compared with the model group (P<0.05). Compared with the model group, SIR value of T1WI sequence was higher, but the SIR values of T2WI and FLAIR sequences were lower in the transplantation (P<0.05). There were significant differences in the∆SIR values of T2WI, FLAIR and DWI (P<0.05) rather than T1WI (P>0.05) between the two groups. These findings indicate that MRI can show the brain sections at any angle, and play an important role to assess the therapeutic efficacy of bone marrow mesenchymal stem cel transplantation on cerebral infarction.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)036【总页数】5页(P5795-5799)【关键词】干细胞;移植;骨髓间充质干细胞;大鼠;脑梗死;CT;MRI;特征分析;细胞移植【作者】杨廷双【作者单位】天津医科大学总医院滨海医院放射科，天津市 300480【正文语种】中文【中图分类】R394.2文章亮点：1骨髓间充质干细胞移植对恢复脑梗死大鼠神经功能，减轻脑组织水肿和脑梗死体积起到促进作用。
大鼠胎血间充质干细胞移植对局灶性脑缺血治疗作用的研究
大鼠胎血间充质干细胞移植对局灶性脑缺血治疗作用的研究鞠秀丽;黄志伟;魏欣冰;侯怀水;时庆;李栋;孙念政【期刊名称】《山东大学学报：医学版》【年(卷),期】2007(45)6【摘要】目的:研究大鼠胎血间充质干细胞(MSCs)移植入大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型后大鼠神经功能的恢复情况。
方法:线栓法建立左侧大鼠MCAO模型,随机分为3组:手术组、MSCs移植组、生理盐水组。
5溴-2脱氧尿核苷(BrdU)标记的MSCs移植后,采用改良神经功能损伤评分系统(mNSS)评价大鼠神经功能恢复情况;应用免疫组织化学双染技术检测MSCs的存活、迁移及其巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。
结果:MSCs增殖能力强,并能在体外诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞。
MSCs移植后显著提高局灶性脑缺血大鼠神经功能的恢复。
移植的MSCs细胞可在大鼠脑组织中存活,并向缺血区域迁移,有不同比例MSCs细胞分别表达Nestin、GFAP、NSE。
结论:大鼠胎血中含有MSCs,体外扩增纯化后可促进局灶性脑缺血大鼠神经功能的恢复,移植细胞可在大鼠脑缺血区域中存活、迁移并向星形胶质细胞或神经元分化。
【总页数】5页(P604-608)【关键词】胎血;干细胞;缺氧缺血,脑;移植;大鼠,Wistar【作者】鞠秀丽;黄志伟;魏欣冰;侯怀水;时庆;李栋;孙念政【作者单位】山东大学齐鲁医院儿科;山东大学医学院药理学研究所;山东大学齐鲁医院低温医学研究室【正文语种】中文【中图分类】R329.21【相关文献】1.骨髓间充质干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠缺血皮质神经元核抗原和神经元素1表达的影响 [J], 牟青杰;赵岩松;王晓莉;王芳;蔡立珍2.人脐血间充质干细胞静脉移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究 [J], 陈晓岚;黄仁彬;汤银娟;莫艳秀;刘科峰;刘运海3.骨髓间充质干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠星形胶质细胞的影响 [J], 杨晓帆;韩鹏飞;臧兆萍;陈培4.人骨髓间充质干细胞定向移植对局灶性脑缺血大鼠行为学的影响 [J], 马学玲;刘亢丁;江新梅;文佳媚;李桂玉;李楠5.立体定向移植人骨髓间充质干细胞对局灶性脑缺血大鼠海马区α-微管蛋白表达的影响 [J], 马学玲;杨薇;李福春;江新梅;李楠;叶琳琳;杨子超;刘亢丁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠大脑中动脉局灶性缺血再灌注单胺类递质的变化
大鼠大脑中动脉局灶性缺血再灌注单胺类递质的变化贾丹辉;李辉;姬汴生;胡香杰;张贵卿【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2003(038)006【摘要】目的:观察大鼠大脑中动脉(MCA)局灶性缺血再灌注期间脑内单胺类递质的变化.方法:Wistar大鼠60只,随机分为:①正常组,②假手术组,③缺血1 h组,④缺血2 h组,⑤缺血2 h再灌1 h组,⑥缺血2 h再灌2 h组.采用线栓法制作大鼠MCA局灶性缺血再灌注模型,用荧光分光光度计测定大脑皮层和纹状体多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)含量.结果:与②组比较,③组大脑皮层和纹状体DA含量明显降低(P<0.05);④、⑤组大脑皮层和纹状体DA、NE、5-HT含量均显著降低(P<0.01);⑥组DA、NE、5-HT含量与②组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:MCA缺血再灌注时,大鼠大脑皮层和纹状体DA、NE、5-HT含量显著降低,降低程度与缺血时间长短有关,其中DA降低较明显.提示DA、NE、5-HT参与局灶性缺血再灌注的病理生理过程.【总页数】3页(P952-954)【作者】贾丹辉;李辉;姬汴生;胡香杰;张贵卿【作者单位】郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州,450052;郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州,450052;郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州,450052;郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州,450052;郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R743【相关文献】1.大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化 [J], 王祎媛;方莹莹;周小龙2.雷公藤多甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织单胺类递质含量的影响 [J], 张艳;贾丹辉;刘宗文;何美霞;张钦宪3.插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型 [J], 张晓彪;王建伟;胡卫星;戴建础;崔尧元4.线栓法大脑中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注鼠模型的脑水肿和脑梗死比的变化 [J], 赵涓涓;柯国平;汤俊;黄娟;黎莉5.大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障通透性变化及对Occludin、ZO-1和PKCδ蛋白水平的影响 [J], 周红军;王彬;沈光建;张云东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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・综述・骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠大脑中动脉缺血再灌注的研究刘世民 张昆南 【摘要】 间充质干细胞(Mesenchy mal stem cells,MSCs)用于治疗大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(m iddle cerebral artery occlusi on,MCAO)能够获得明显的神经功能恢复。
本文对MSCs移植途径、类型、数量、时间点以及作用机制进行了综述。
【关键词】 间充质干细胞;大脑中动脉缺血再灌注;细胞移植Tran spl an t a ti on of marrow stroma l cell for the trea t m en t of ische m i c stroke L I U Shi2m in,ZHAN G Kun2nan.D epart m ent of N eurology,The J iangxi Provincial Peo2 ple’s Hospital,J iangxi330006,ChinaCorresponding author:ZHAN G Kun2nan,Em ail:zkn8@163.co m【Abstract】 Trans p lantati on of mesenchy mal stem cells can significantinly i m2 p r ove the neurol ogical fucti on of rates with m iddle cerebral artery occlusi on(MSCs). In this view,we will address the key points of MSCs trans p lantati on,such as type, quantity,ti m e,and mechanis m s.【Key words】 MSCs;MCAO;Cell trans p lantati on 脑血管病是人类三大死亡病因之一,缺血性疾病则占脑血管病的80%。
其治疗主要是通过溶栓和介入,但临床可适用范围不大,疗效欠佳,约50%～70%的患者遗留不同程度的瘫痪和失语等严重残疾。
MSCs给脑血管疾病带来了新的治疗方法。
MSCs之多向分化潜能使得人们对其用于治疗器官损伤性疾病、衰老等充满期望。
一、MSCs的来源及特性1.MSCs来源:MSCs来源于中胚层和神经外胚层的非造血细胞。
它存在于许多器官和结缔组织,主要是骨髓,同时还存在于肠、肺、肝、脂肪、牙髓和牙周膜等 基金项目:十一五国家科技支撑计划资助项目(2008BA I68B03) 作者单位:330006 南昌,江西省人民医院神经内科 通讯作者:张昆南,E mail:zkn8@器官组织中。
在外周血和脐带血中亦有存在[1]。
2.多向分化潜能:在体外培养条件下MSCs可分化为中胚层多种间质细胞如:在32异丁基212甲基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素等条件下可分化为脂肪细胞;在无血清的条件下加入转化生长因子2β3可分化为软骨细胞,在合适的条件下可分化为成骨细胞等[2]。
MSCs还具有跨胚层横向分化能力,能分化为外胚层神经细胞、胶质细胞以及内胚层肝卵圆性细胞,在体内也可分化为神经元细胞、星型胶质细胞、内皮细胞[3]。
3.免疫原性弱动物实验显示MSCs移植时未给免疫抑制剂,并不出现免疫清除。
有研究表明MSCs在刺激后(如体内创伤)对免疫系统表现较强的抑制作用[4]。
因而MSCs正被尝试应用于减少移植免疫排斥,治疗相关免疫失调症。
用MSCs治疗移植肠和肝脏所致重症难治型四级急性移植物抗宿主病(Graft2versus2 host disease,G VHD),已取得良好的效果[5]。
研究认为MSCs免疫调节和免疫抑制机制可能是通过以下几方面来发挥作用的:(1)抑制T淋巴细胞的增殖;(2)抑制B细胞的增殖和趋化性;(3)影响NK细胞的增殖、细胞毒作用和细胞因子的分泌;(4)影响抗原递呈细胞的成熟、活化和抗原递呈;(5)促进Treg产生[6]。
4.免疫表型:因为MSCs没有特殊的细胞表面标志分子,只能通过多种细胞表面标志分子来鉴别,国际细胞治疗协会(I nternati onal Society for Cellular Thera2 py,I SCT)认定MSCs表面标志分子[7],(表1)。
表1 I SCT推荐的最低标准的免疫表型MSCs表达阳性MSCs表达阴性CD105、CD73、CD90CD45、CD34、CD14or CD11b、CD79αor CD19、HLA2DR用于分离MSCs的其它抗体不能用于分离MSCs的其它抗体Str o21、CD49α/CD29、CD106、CD146、NGFR、P DGFR、EGFR、I GFR21Glycophorin A 注:EGFR(ep ider mal gr owth fact or2recep t or);I GFR(insulin2like2gr owth fact or2recep t or);NGFR(nerve gr owth fact or2recep t or);P DGFR, (p latelet2derived gr owth fact or2recep t or). MSCs具有类似胚胎干细胞(e mbryonic stem cell,ESC)的高度分化能力,而且避开了ESC来源缺乏、存在伦理学障碍、免疫排斥和非定向性分化等多方面的问题,具有取材简单、来源丰富,更易于实验与临床开展。
二、MSCs的移植1.MSCs的移植途径:MSCs移植的途径有三种:(1)动脉:这是一种高效的移植途径[8210]。
研究发现通过颈动脉移植Y染色体标记的MSCs,能够表达星形胶质细胞的表面抗原GFAP(22.3%±1.95%)和神经元表面抗原MAP22(16.8%±2.13%),而其它器官仅有少量的分布,如:心脏、肺、肝脏、脾和肾脏[8]。
(2)静脉:是最常用的实验移植途径[11219],研究发现MSCs可以上调抗凋亡因子生成素和Bcl22,从而获得抗凋亡的作用[18]。
静脉移植Y染色体标记的MSCs,表达的星形胶质细胞表面标记物GF AP为(2.35±0.8)%,神经元表面标记物NeuN为2.57%±0.6%[19]。
(3)立体定向移植[20222]:用立体定向仪向MCAO后纹状体移植MSCs,28d后和对照组相比出现明显的功能恢复,并且表达了Neu N和GF AP[20]。
然而立体定向直接将MSCs移植入脑内,MSCs利用效率最高,几乎没有MSCs的丢失,其不足之处为:①穿刺容易造成脑组织新的损伤;②移植的MSCs分布较为局限,多集中在注射部位,只可迁移约2.2mm[20];③直接移植的MSCs溶液量有限,以防颅压过高。
动脉途径移植安全有效,MSCs通过动脉直接到达梗塞周边,其他器官分布少,更符合临床应用。
而静脉途径操作简便,但是经过一些组织器官后分布广泛,到大局部的数量不足,需要更多数量的MSCs,增加了MSCs的来源难度。
2.移植MSCs的类型:目前用于移植的MSCs有单纯MSCs移植,也有转基因MSCs。
单纯MSCs移植可以明显改善MCAO后所引起的神经功能缺失[8211,13,16220,23]。
MR I检查证实单纯移植MSCs后可使MCAO后梗塞面积明显缩小[11]。
但是有实验显示梗死面积虽有缩小趋势但无统计学显著性[8,13,16,20]。
与单纯MSCs相比转基因MSCs移植更加有效。
MCAO大鼠接受BDNF(B rain de2 rived neur otrophic fact or)2MSCs移植后,与单纯MSCs移植比较,可更加明显地缩小梗死面积,改善缺损的神经功能,增加BDNF的分泌[14.21]。
MCAO后24h,通过立体定向仪FGF22(Fibroblast Gr owth Fact or22)2MSCs移植进入MCAO大鼠纹状体周围区域,6d后就明显改善了缺损的神经功能,13d显著缩小了梗塞面积[22]。
移植P LGF(p lacental gr owth fact or)2MSCs不仅能显著改善功能缺损、缩小梗塞面积,而且能够减少细胞凋亡,增强诱导血管再生[24]。
从上述学者们的研究可以证明基因修饰的MSCs治疗效果好于单纯MSCs,然而不同细胞因子修饰的MSCs疗效未见同步研究,至于何种细胞因子修饰的MSCs更有效仍需进一步对比研究。
但是原则上是对于神经组织不同细胞类型和血管生成具有更广泛的生物学功能作用的细胞因子疗效理论上应该更具有价值。
3.移植MSCs的时间点:MSCs移植时机与治疗效果之间的关系仍无明确结论。
MCAO后1d和7d移植都能显著改善神经功能缺损[8,13,17]。
MCAO后14d移植同样能够发挥治疗作用[21]。
目前最长的移植时间窗是1个月。
在大鼠MCAO1个月后通过静脉移植MSCs,移植的细胞仍能集中分布在梗塞半球,并且明显改善缺损的神经功能,表达GF AP和神经元表面标志(MAP22)[16]。
而另有研究比较了1d和30d两个时间点移植MSCs的影响,结果发现30d移植组和MCAO对照组在神经功能缺损恢复上并没有统计学差异[25]。
根据上述文献报告作者认为各个学者模型动物制备与条件不完全一致,梗死严重程度也可能存在着很大差异,脑组织损伤程度不一。
由于脑组织损伤程度的差异导致脑组织修复时间不一,修复后的组织结构也不尽相同。
损伤程度轻,梗塞面积小,修复时间短,以自身修复为主,因此晚期移植MSCs表现出无显著性差异。
损伤程度严重,梗塞面积大,修复时间长,晚期移植MSCs就有明显的疗效。
故在脑缺血性卒中起病急性期,亚急性期移植能够发挥治疗作用,然而在发病慢性期移植是否有效还需进一步研究确定。
4.移植MSCs的细胞数量:目前MSCs移植的细胞数量变化很大,不同学者使用量相差50倍之多,分别报道有2×510至1×107[9,10,14219,21223,26]不等。
有报道大鼠在MCAO后24h经尾静脉移植3×106的MSCs其神经功能恢复明显优于1×106组,1×106组与MCAO未处理组对比神经功能恢复无统计学差异[13]。
但是,也有报道显示,大鼠MCAO后24h通过静脉移植1×106的MSCs,移植组梗塞区周围微血管数量、血管厚度及VEGF的表达都明显高于MCAO无处理组,并且增加了VEGFR2的免疫反应[15]。
细胞数量相关的CBF(cerebral bl ood fl ow)和BBB (B l ood2brain barrier)的重建也已有报道。