1 植物生理学实验操作

操作步骤：
2.用移液管从浓度各试管中吸出1ml注 入对应的指形管内，各管均加塞，并 贴上标签。
操作步骤：
3.将女贞叶片在叠在一起，沿中脉两边 用钻孔器打取10片小圆片，分别放入 小指形管内，放置20min(期间摇动2~3 次）后，加甲烯蓝2滴摇匀。
操作步骤：
4.用长滴管吸取着色溶液放入原相应的 蔗糖溶液中，慢慢放出一滴蓝色溶液， 在白色纸片上观察小液滴升降情况， 并作记录。
作业：
1.记录小液流在试管内的移动方向
溶液浓 （mol/ L）
小液流 方向 解释
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
作业：
2.按下列公式计算组织的水势： Ψ W (细胞水势) =Ψ s = — CRT 式中： Ψ s —— 溶液的渗透势，以 MPa 为 单位。 R —— 气 体 常 数 ， 为 0.008314 MPa· L/ （mol· K ）。 T ——绝对温度，即 273 + t ℃, 单位为K。 C ——溶液的摩尔浓度，以 mol/L 为单位。
操作步骤：
1. 酶液提取：取叶片0.5 g（或茎）加 入少量蒸馏水，加 CaCO3 粉及石英砂 少许，研磨成匀浆，再加蒸馏水至总 量25ml，在室温下浸提10分钟，不时 摇动，用脱脂棉过滤于 50ml 锥形瓶 中, 静置上清液即为过氧化氢酶的粗 提液。
操作步骤：
2.吸取5ml酶提取液放入一试管中，置沸水中加热 5分钟，使酶失活。 3.取50ml三角瓶2个（1个测定,另1个为对照） 失活酶液(对照) CAT酶液 +20ml蒸馏水+1% 1ml H2O2 摇匀 40 度水浴反应（ 10min ） +2ml10%H2SO4 终止 反应 0.1mol/LKMnO4滴定
操作步骤： 1. 取10粒萌动的小麦种子放入研钵中， 用量筒取10ml蒸馏水作为淀粉酶提 取液总量（包括研钵清洗、种子研 磨），分三次加入，将小麦研成浆 状，用脱脂棉过滤于试管中,摇匀。 滤液静置5-10min ,上清液为淀粉酶 的提取液。
操作步骤： 2. 取2只刻度试管做标记A管、B管 A管：2ml 2%淀粉液+2ml蒸馏水 B管：2ml 2%淀粉液+2ml淀粉酶提取液 加I-KI 2~3滴 变化。
材料与实验器具：
植物材料：
女贞、海桐叶片 实验器具： 分光光度计；电子天平； 研钵； 试管； 小漏斗；滤纸； 吸 水纸； 移液管 ；量筒； 剪刀 试 剂： 95％乙醇（或80％丙酮）； 石英砂；碳酸钙粉
操作步骤：
1.称取剪碎的新鲜样品0.1g 左右，放 入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉 及3～5ml 95％乙醇，研成均浆，继 续研磨至组织变白。静置3～5min。
操作步骤：
2. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润， 沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到 10ml试管中，用少量乙醇冲洗研钵、 研棒及残渣数次，最后连同残渣一起 倒入漏斗中。
操作步骤：
3.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿 体色素全部洗入漏斗中。直至滤纸和 残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容 至10 ml ，摇匀。
作业：
1.计算并比较两种植物叶绿素含量。
思考题： 为什么提取叶绿素时干材料一定要用 80％ 的丙酮，而新鲜的材料可以用无水丙酮提 取？
实验六 过氧化氢酶活力测定
原理：
过氧化氢酶（catalase）属于血红蛋白酶， 含有铁，它能催化H2O2分解为水和O2 ，可 根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶 的活力大小。用标准高锰酸钾溶液（在酸 性条件下）滴定多余的过氧化氢。即可求 出消耗的H2O2的量。
38℃
20min
观察并比较两管颜色
操作步骤： 3.B管+3ml 斐林试剂 观察颜色变化 作业： 1.记录观察结果并作必要的分析。 沸水浴 2~5min
实验二 植物组织水势的测定
原理：
根据渗透作用的原理，用小液滴法测 得蔗糖溶液与植物组织中之间的等渗 浓度，根据公式 Ψ W (细胞水势) =Ψ s = — CRT 求得溶液的水势，从而得知植物组织的 水势。
KMnO4与H2O2反应方程式如下：
5H2O2+2KMnO4+3H2SO4→K2SO4+ MnSO4+8H2O+5O2
材料与实验器具：
植物材料：海桐茎、叶片等 实验器材： 研钵；电炉；水浴锅； 酸式滴定管； 量 筒；锥形瓶；漏斗 ；试管；移液管 试 剂： 0.1mol/L 高 锰 酸 钾 标 准 液 ； 1% H2O2 ； 10%H2SO4；CaCO3 粉
操作步骤：
4. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的 比色杯内。以95％乙醇为空白，在波 长663nm、645nm下或652nm测定吸光 度。
操作步骤：
5. 计算公式： 叶绿素的含量（ mg/g ） = [(O.D652/34.5)× 提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重（或干 重）。 Ca=13.95A663－6.88A645； Cb=24.96A645－7.32A663
植物生理学实验操作指南
植物生理实验室 2011，3
实验一 淀粉酶的提取及作用
原理：
1.淀粉 淀粉酶水解 蓝色糊精 红色 糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 2.葡萄糖+斐林试剂 Cu2O↓(砖红色）
植物材料与实验器具：
植物Fra Baidu bibliotek料：
萌动的小麦 实验器具： 试管 ；玻棒；量筒； 研钵；漏斗；电炉；水浴锅 试 剂： 2%淀粉溶液；稀I-KI 溶液（原液稀释5倍）；斐林试剂
材料与实验器具： 植物材料：女贞叶片 实验器具：细滴管；试管及指形管； 烧杯；镊子、剪刀；移液管；标签 纸 试 剂：1 mol/L蔗糖溶液；甲烯蓝 溶液
操作步骤：
1.用短滴管吸取1M蔗糖溶液取0.5ml、 1ml、 2ml、 3ml 、4ml 分别放入 10ml 刻度试管中，加蒸馏水至10ml， 盖上塞子上下倒转混匀，配成0.05M、 0.1M、0.2M、0.3M、0.4M的糖液。
思考题： 1. 用小液流法测定植物组织水势时，为 什么应强调所用试管、毛吸管应保持 干燥 2. 打取小圆片并投入试管中时动作应迅 速，加入甲烯蓝不能太多？
实验三 叶绿素含量的测定

原理：
根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸 光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L 成正比 。 叶绿素在652nm(混合）、663nm、645nm 有最大吸收峰。 根据在分光光度计下测定的吸光度，求 得叶绿素的含量。