中药制剂含量测定技术—气相色谱法

气相色谱内标法的定量依据、测定方法和测定步骤 气相色谱内标法在中药制剂含量测定中的应用实例
气相色谱内标法与高效液相色 谱外标法相比，哪个在中药制剂含 量测定中应用范畴更广？为什么？
气相色谱法的原理和仪器构成
PRINCIPLE AND INSTRUMENT COMPOSITION OF GAS CHROMATOGRAPHY
酒后驾车是导致交通事故的重要危险因素之一。统计发现，即使在少量饮酒的状态下，交通事故 的危险度也可达到未饮酒状态的2倍左右。对路面驾驶者的血液中酒精含量的监测能够有效减少酒后 驾车引起的交通事故的发生。除了现场快检方法外，快速且能精准定量驾驶者血液中酒精浓度的方法 也至关重要
本品是由樟脑、干姜、大黄、小茴香、肉桂、辣椒和桉油加工而成的软胶囊 采用气相色谱法进行含量测定，每粒含樟脑和桉油精的量应符合规定 测定法 配制环己酮内标溶液，再分别取樟脑对照品和桉油精对照品，精密加入内标溶液，吸取1µl 注入气相色谱仪，计算校正因子。再配制供试品溶液。吸取1µl，注入气相色谱仪，测定，即得
案例中提到了内标物和校正因子，分别是何意义? 运用气相色谱内标法如何计算十滴水软胶囊中樟脑和桉油精的含量？
一、概述
气相色谱法的定量分析方法有内标法、外标法、面积归一化法以及内标法加校正因子法等 《中国药典》一部收载的中药制剂多采用内标法测定含量 主要介绍气相色谱内标法的定量依据、内标物选择原则、测定方法步骤以及应用实例
气相色谱法的原理和常用测定方法 气相色谱仪的仪器组成 气相色谱仪各系统的结构与功能
从原理、含量测定法、仪器组 成以及在中药制剂含量测定中的应用 等几个方面，对比气相色谱法和高效 液相色谱法的异同。
中药制剂含量测定技术——气相色谱内标法
CONTENT DETERMINATION TECHNOLOGY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE PREPARATIONS– GAS CHROMATOGRAPHY INTERNAL STANDARD METHOD
一、概述
气相色谱法是以气体为流动相（载气），带动气化的色谱分析方法
本法适用于具有适当的挥发性、且在操作温度下具有良好的稳定性的化合物的含量测 定。局限之处在于对挥发性差、遇热易分解破坏及不具挥发性的物质则难以分析
以气体为流动相（载气）
气相色谱法的含量测定方法有内标法、外标法、面积归一化法和标准溶液加入法。《中国药 典》一部多采用内标法测定含量
含量测定方法 中药药味
冰片
气相色谱内标法
樟脑 薄荷脑
莪术油
代表中药制剂 西瓜霜润喉片、冰硼散、麝香舒活搽剂等
麝香舒活搽剂、十滴水软胶囊等 麝香舒活搽剂、川贝枇杷糖浆等
保妇康栓等
二、仪器组成与工作原理
器、气体流量调节阀、转子流量计、气化室、色谱柱、检测器，最后排出整个系统
（2）进样系统 气相色谱的进样系统包括进样器、气化室和温度控制装置 气化室的作用是将液体或固体样品瞬间气化为蒸汽
进样方式包括手动进样、自动进样和顶空进样。手动进样使用的注射器是尖头的微量注射器， 有别于高效液相色谱的扁头注射器。手动进样或自动进样时，进样口温度应高于柱温30~50℃， 进样量一般不超过数微升，采用毛细管柱时，一般应分流以免过载
（4）检测系统 气相色谱检测系统由检测器、微电流放大器等部件组成。检测器将流出色谱柱的载气中被测组
分的浓度或质量转化为电信号的变化 浓度型检测器：热导检测器 TCD、电子捕获检测器ECD等 质量型检测器：氢火焰离子化检测器FID、火焰光度检测器FPD等
（5）数据分析和处理系统 由放大器、记录仪、积分仪和色谱工作站等组成。色谱工作站接收处理经放大的供试品浓度或
应 用 实 例 川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定
（1）色谱条件和系统适用性试验
①固定相：改性聚乙二醇毛细管柱 柱温110℃ ②分流进样，分流比为25﹕1 理论板数按萘峰计算应不低于5000
（2）校正因子测定
配制萘的内标溶液，浓度为CS；配制薄荷脑对照品溶液，浓度为CR
应
用
实
例
川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定
（3）分离系统
气相色谱仪的核心部分，包括色谱柱、柱室和柱温箱 色谱柱按柱内径的大小和长度，可分为填充柱和毛细管柱。毛细管柱的材质为玻璃或石英，
内壁经涂渍或交联固定液，柱长一般在5-60米 柱温箱是控制色谱柱温度的装置。柱温应精确控制在±1℃，且波动每小时不超过0.1℃。温度
控制系统分为恒温控制和程序升温两种
本法中引入了相对校正因子f， f是指某组分i与内标物s的绝对校正因子之比。内标物不得与 待测组分为相同物质，一般是根据检测器的种类选择内标物
f= fi fs
Wi Ws
/ Ai / As
内标物选取原则：理化性质与待测组分相近；不存在与样品中，且不与样品中的组分发生化 学反应；与待测组分能够完全分离，但又不能相距太远；与待测物的峰面积比为0.7-1.3为宜
交管部门依据我国公共安全行业标准《GA/T 842-2019 血液酒精含量的检验方法》，采用顶空气相 色谱法，以叔丁醇为内标物，FID为检测器，对血液中乙醇含量进行测定，该法具有法庭证据效力
气相色谱法如何进行中药制剂中目标成分的测定? 气相色谱仪由哪些部分组成？对于不同组件的温度要求有何不同？为什么？
1.仪器组成 气相色谱仪由气流控制系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。
2.仪器构造与功能 （1）气流控制系统
包括气源、气体净化装置、气体流速控制和测量装置等 常用载气有氮气、氦气、氢气、氩气等，空气一般作为辅助气，要求纯度高于99.9% 气流控制系统是一个连续运行的密闭管路，载气由高压阀释放出来后经减压阀、压力表、净化
二、气相色谱内标法
1.定量依据 根据待测组分与内标物的峰面积之比与其浓度比在一定浓度范围内成线性关系，对组分进行
含量测定。选用与检测器相对应的纯物质作内标物，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量 的内标溶液，在相同条件下分别测定内标物和待测组分的峰面积，从而进行定量计算
2.测定方法 内标法加校正因子法（内标对比法）
中药制剂中有效成分或特征性指标成分含量的 测定对于评价中药质量的优劣具有重要意义，同时 也是药品质量检验中的关键环节。本讲内容既是知 识体系中的重点内容，也是岗位工作中的重要技能
作为一名药品检验人员，须牢固树立“质量第 一、安全操作”的意识，牢固掌握气相色谱内标法 测定药物含量的操作方法和注意事项，细致准确的 记录检验结果，确保检验结果的真实可靠
质量信号，打印出操作条件，由积分仪给出分析结果
中药制剂中有效成分或特征性指标成分含量的 测定对于评价中药质量的优劣具有重要意义，同时 也是药品质量检验中的关键环节。本讲内容既是知 识体系中的重点内容，也是岗位工作中的重要技能
作为一名药品检验人员，须牢固树立“质量第一 、安全操作”的意识，牢固掌握气相色谱仪的组成 结构与各组件的功能，正确操作仪器，确保检验结 果的真实可靠
3.测定步骤
内标物溶液配制
根据各品种正文项下含量测定中的要求进行配制
对照品溶液配制
按规定取对照品，用相应溶液溶解，加入内标溶液，再次溶解稀释
成一定浓度，进样，测得峰面积并记录
供试品溶液配制
按各品种项下要求，精密称取供试品，配成溶液，加入内标溶液，
再次溶解稀释成一定浓度，进样，测得峰面积并记录
4.应用实例
f
AS ’/ C S AX / C X
由于在相同色谱条件下，待测组分与内标物的峰面积之比与其浓度比在一定浓度范围内成线 性关系，所以已知对照品中待测组分的峰面积和浓度以及内标物的峰面积和浓度，供试品中待测 组分的峰面积以及内标物的峰面积和浓度，就可以求出供试品溶液的浓度，进而计算出供试品溶 液中待测组分的含量
升温使供试品气化，由载气带入色谱柱
根据峰面积进行定量计算
各组分在固定相与载气间作用不同， 在色谱柱中移动速度不同，从而得到 分离
再依次被载气带入检测器，将各组分 的浓度转换为电信号变化并记录成色 谱图
气相色谱法在中药制剂分析中主要用于含挥发油及其他挥发性组分的含量测定，还可用于中 药及其制剂中含水量、含醇量的测定和农药残留量的检测等
向含有待测组分的对照品溶液中加入内标物，则校正因子为内标物的峰面积AS比浓度CS与对
照品溶液的峰面积AR比浓度CR之比
对照品溶液
f
AS AR
/ CS / CR
在相同条件下，将一定量的内标物加入到供试品溶液中，则校正因子为此时内标物的峰面积AS’ 比浓度CS与供试品溶液的峰面积AX比浓度CX之比
供试品溶液
（3）测定法
配制供试品溶液，VX=50ml，V供=20ml AS=851302，AR=798023.5 AS’=841603.2，AX=814180.5
（4）含量要求
本品每1ml含薄荷脑（C10H20O）应不少于0.2mg
应
用
实
例
川贝枇杷糖浆中薄荷脑的含量测定
＞0.2mg，所以本品中薄荷脑含量合格