第三章出血、血栓与止血检测

（四）血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试 验 [原理]在受检的血浆中加入硫酸鱼 精蛋白溶液，如果血浆中存在可溶 性纤维蛋白单体与纤维蛋白降解产 物复合物则鱼精蛋白使其解离析出 纤维蛋白单体，纤维蛋白单体自行 聚合成肉眼可见的纤维状物，此为 阳性反应。
[临床意义] 阳性：见于DIC早中期 本试验是鉴别原发性纤溶和继 发性纤溶的试验之一。
[临床意义]阴性是排除深静脉血栓 和肺血栓栓塞重要试验；阳性是诊 断DIC和观察溶血栓治疗的有用试 验，凡有血块形成的出血，本试验 均可阳性。
（三）血浆纤维蛋白（原）降解产物定 性试验 [原理]于受检血浆中加入血浆蛋白降解 产物，若血液中FDP浓度多，胶乳颗粒 发生凝集。 [临床意义]FDP增高见于原发性纤溶和继 发性纤溶，后者如DIC,恶性肿瘤，急 性早幼粒白血病，肺血栓栓塞，深静 脉血栓形成，肾脏疾病，肝脏疾病， 器官移植排斥反应，溶血栓治疗等。
第六节
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
血液流变学检测
血液流变学是应用物理和化学的手
段研究血液中细胞成分与血浆成分 在宏观和微观下的变形和流动特性， 也是研究与血液直接接触的血管结 构的流变特性。
一、全血粘度测定
[临床意义}
增多 : 见于血浆球蛋白和 ( 或 ) 血脂
增多的疾病，如多发性骨髓病、原 发性巨球蛋白血症、糖尿病、高脂 血症 减低：见于贫血，重度纤维蛋白原 和其他凝血因子缺乏症。
第四节 抗凝系统检测 （一）血浆凝血酶时间 [原理]TT是在受检血浆中加入“标准化” 凝血酶溶液，测定开始出现纤维蛋白丝 所需要的时间。 [临床意义] 延长：见于低（无）纤维蛋白原血症， 和异常纤维蛋白原血症，血中FDP增高， 血中有肝素或类肝素物质存在。
（二）甲苯胺蓝纠正试验 [原理]甲苯胺蓝呈碱性，有中和肝 素的作用，在TT延长的受检血浆中 加入少量甲苯胺蓝，再测定TT。若 延长的TT恢复到正常或明显缩短， 则表示受检血浆中有类肝素物质存 在或肝素增多，若不缩短，则表示 受检血浆中存在其他抗凝血酶类物 质或缺乏纤维蛋白原。
（四）血浆因子ⅩⅢ定性试验 [原理]在受检血浆中加入Ca++溶液， 使纤维蛋白原变成纤维蛋白凝块， 将此凝块置入5mol/L尿素溶液中， 如果受检血浆缺乏因子ⅩⅢ，则形 成的可溶性纤维蛋白凝块易溶于尿 素溶液中。
[临床意义]若纤维蛋白凝块在24h内 完全溶解，则表示因子ⅩⅢ缺乏， 见于先天性因子ⅩⅢ缺乏症和获得 性因子ⅩⅢ明显减低，如肝病， SLE，DIC，原发性纤溶症，恶性肿 瘤，恶性贫血，溶血性贫血以及抗 ⅩⅢ抗体等。
（三）血小板粘附试验
血小板粘附 (PAgT) 试验常用玻璃柱法、
玻璃球法和玻璃器法。 [原理] 血小板具有粘附损伤的血管表面或异物 表面的特性。当一定数量的血小板粘附 于异物表面上，测定粘附前与粘附后血 小板总数的百分率，即为血小板粘附率 (％)。
[参考值]玻璃柱法:62.5％±8.61％
（二）血管性血友病因子抗原测定 [原理] 在含血管性血友病因子抗 体的琼脂凝胶板中加入一定量受 检血浆，在电场作用下泳动一定 时间出现抗原-抗体反应形成的 火箭样沉淀峰，其高度与受检血 浆中VWF浓度呈正相关，计算血 浆中血管性血友病因子抗原的含 量。
VWFAg是血管内皮细胞促凝指标 之一，它由血管内皮细胞合成和分 泌，参与血小板的粘附和聚集反应， 起促凝作用。
[参考值]32～43S，较正常对照值延 长10S以上异常 [ 临床意义 ] 是目前推荐应用的内源 凝血系统的筛选试验，又是监测肝 素治疗的首先指标。
延长，见于因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、 Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、PK，HMWK和纤维蛋白 原缺乏。 缩短，见于血栓性疾病和血栓前状 态。
（二）血浆凝血酶原时间测定 [原理] 血浆凝血酶原时间 (PT) 测定，在 受检血浆中加入组织凝血活酶和 Ca2+ ， 使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤 维蛋白原转变为纤维蛋白，观察血浆 凝固所需要的时间。PT是反映外源性 凝血系统的筛选试验
二、血浆黏度测定 [临床意义]见于血浆球蛋白和血脂 增高的疾病，如多发性骨髓瘤，原 发性巨球蛋白血症，糖尿病，高脂 血症，动脉粥样硬化等。
第七节 检测项目的选择和应用 血栓与止血的检测主要用于临 床有出血倾向、出血病患者以及血 栓前状态、血栓病患者的临床诊断、 鉴别诊断、疗效观察和预后判断等， 也用于抗血栓和溶血栓药物治疗的 监测等。
（三）纤溶亢进筛检试验的选择和 应用 纤溶亢进性出血指纤维蛋白 （原）和某些凝血因子被纤溶酶降 解所引起的出血。可选用FDPs和DD作为筛检试验，大致由以下四种 情况：
1、FDPs和D-D均正常 表示纤溶活性正 常，临床的出血症状可能与纤溶症无 关。 2、FDPs阳性，D-D阴性 理论上只见于 纤维蛋白原被降解，而纤维蛋白未被 降解，即原发性纤溶。实际上这种情 况多属于FDPs的假阳性，见于肝病、 手术出血、重型DIC、纤溶早期、剧烈 运动后、类风湿关节炎、抗Rh（D）抗 体存在等。
第五节 纤溶活性检测
纤溶酶可将已形成的血凝块加 以溶解，产生纤维蛋白（原）的降 解产物，从而反映纤溶活性。纤溶 活性增强可致出血，纤溶活性降低 可致血栓
（一）优球蛋白溶解时间 血浆优球蛋白组分含有纤维蛋白原 ,纤 溶酶原和组织型纤溶酶原激活物等 ,但 不含纤溶酶抑制物。将受检血浆加入 到PH4.5的酸性溶液中使优球蛋白沉淀, 经离心除去纤溶抑制物,并将沉淀溶于 缓冲溶液中,再加入钙或凝血酶使其凝 固。在 37℃下观察凝块完全溶解所需 时间
实验诊断课件教学
第三章 出血、血栓与止血检测
生理状态下，血液在血管内流动，它 既不会溢出血管外引起出血，也不会 在血管内凝固形成血栓，这主要是由 于机体内存在着完善的止凝血与抗凝 血机制，这种机制呈动态平衡状态。 机体的止血机制包括，①血管壁和血 小板的止血作用②凝血因子和抗凝血 因子的止血作用③纤维蛋白溶解因子 和抗纤溶因子的溶栓作用等。
[参考值]血小板聚集图像的参考值见表
[临床意义]
1.PAgT 减低:见于血小板无力症、 巨大血小板综合征。 2.PAgT 增多:鉴于血液高凝状态和 血栓性疾病，如心肌梗塞。

第三节
凝血因子测定
（一）活化部分凝血活酶时间测定 [原理]活化部分凝血活酶时间(APTT) 测定，在受检血浆中加入部分凝血 活酶磷脂悬液，在 Ca2+ 的作用下观 察血浆凝固所需要的时间，是内源 性凝血系统的筛选试验。
病理状态下，止凝血和抗凝血机制 的动态平衡失调，若止凝血机制亢进 或抗凝血机制减退便会形成血栓，临 床上出现血栓性疾病。反之，若止凝 血机制减退，或抗凝血机制亢进，便 会引起出血，临床上出现出血性疾病， 本章重点介绍血栓与止血的检测以及 检测项目的选择和应用。
第一节
第二节
第三节 第四节 第五节 第六节 第七节
[临床意义]
1.PAgT增多:见于血凝状态和血栓性疾
病，如心绞痛 2.PAgT减低:见于血小板无力症、血友 病、巨大血小板综合征。
（四）血小板聚集试验
[ 原理 ] 采用血小板聚集仪比浊法
进行血小板聚集试验 (PAgT): 在富 血小板血浆 (PRP) 中加入诱导剂时， 由于血小板发生聚集，悬液的浊 度就发生相应的改变，透光度增 加。
[临床意义]血中类肝素物质增多， 见于严重肝病，DIC，过敏性休克， 使用氮芥类药物，放疗后，肝叶切 除后，肝移植后等。
（三）APTT交叉试验 本试验是用于鉴别凝血因子缺乏 或有抗凝物质的存在，延长的APTT， 若能被1/2量的正常新鲜血浆所纠 正，表示受检血浆中可能缺乏凝血 因子，若不能纠正则表示受检血浆 中可能存在抗凝物质。
血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 抗凝系统检测 纤溶活性检测 血液流变学检测 检测项目的选择和应用
本章重点、难点内容及习题
第一节
血管壁检测
（一）出血时间 [原理]将毛细血管刺破，血液自然 流出到自然停止所需的时间。 [参考值]测定器法：6.9±2.1min， 超过9min为异常。
[临床意义] BT延长见于： 1、血小板明显减少，如血小板减 少性紫癜； 2、血小板功能异常； 3、血管异常，如遗传性出血性毛 细血管扩张症； 4、药物，如服用乙酰水杨酸等。
[参考值]加钙法＞120min
加凝血酶法为(123±24)min
[临床意义] 本实验敏感性低，特异性
高 1、纤维蛋白凝块70min内完全溶解 2、纤维蛋白凝块在超过120min还不溶解
（二）D-二聚体定量试验 [原理] D-二聚体是交联纤维蛋白降 解产物之一，为继发性纤溶特有的 代谢物。将D-二聚体单抗包被在酶 标反应板，加入受检血清，血浆中 的D-二聚体与包被在反应板D-二聚 体单抗结合，然后再加酶标记的D二聚体抗体，与包被的D-二聚体结 合，最后加入底物显色，显色深浅 与血浆中D-二聚体含量呈正相关。
1、减低：见于血管性血友病 （VWD），是诊断VWD及其分型的指 标之一。 2、增高：见于血栓性疾病，如急 性冠状动脉综合症ACS，心梗，心 绞痛，脑血管病变，DM，妊高症， 肾小球疾病，大手术后，恶性肿瘤， 免疫性疾病，感染性疾病，MDS等。
第二节 血小板检测
（一）血小板计数 （二）血小板相关免疫球蛋白测定（PAIg） 7 [参考值]PAIgG为0~78.8ng/10 血小板； PAIgM为0~7.0ng/107血小板； PAIgA为0~2.0ng/107血小板。 [临床意义]增高：主要见于ITP患者。也见 于输血后紫癜、SLE等。 观察病情：治疗有效，PAIg水平下降；复发 则升高。
2、APTT延长,PT正常 多数是由内 源性凝血途径缺陷所引起的出血病， 如遗传性和获得性因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、 Ⅻ缺陷症等。 3、APTT正常，PT延长 多数是由外 源性凝血途径缺陷所引起的出血病， 如遗传性和获得性因子Ⅶ缺陷症等。
4、APTT和PT都延长 多数是由共同凝血 途径缺陷所引起的出血病，如遗传性 和获得性因子Ⅹ、Ⅴ、凝血酶原（因 子Ⅱ）和纤维蛋白原（因子Ⅰ）缺陷 症。 此外，临床应用肝素治疗时，APTT 也相应延长；应用口服抗凝剂治疗时， PT也相应延长；同时应用肝素、华法 林以及纤溶综合症、抗磷脂抗体时， APTT与PT可同时延长。
3、BT延长、PLT增多 多数是由血小 板数量增多所致的血小板增多症。 临床上多见于原发性和反应性血小 板增多症。 4、BT延长、PLT正常 多数是由血小 板功能异常或某些凝血因子严重缺 乏所致的出血病，如血小板无力症、 贮藏池病以及低（无）纤维蛋白原 血症、血管性血友病（vWD）等。
（二）二期止血缺陷筛检试验的选 择和应用 二期止血缺陷是指凝血因子缺 乏或病理性抗凝物质存在所致的出 血病。选用APTT和PT作为筛检试验， 大致有以下四种情况： 1、APTT和PT都正常 除正常人外， 仅见于遗传性和获得性因子ⅩⅢ缺 陷症。
（一）一期止血缺陷筛检试验的选 择和应用 一期止血缺陷是指血管壁和血 小板缺陷所致出血病。选用血小板 计数(PLT)和出血时间（BT）作为 筛检试验，根据筛检试验的结果， 大致由以下四种情况：
1、BT和PLT都正常 除正常人外， 多数是由单纯血管壁通透性和（或） 脆性增加所致的血管性紫癜所致。 临床上常见于过敏性紫癜、单纯性 紫癜和其他血管性紫癜等。 2、BT延长，PLT减少 多数是由血 小板数量减少所致的血小板减少症。 临床上多见于原发性和继发性血小 板减少性紫癜。
[参考值] PT正常值为11～13S,病人测定值超过 对照值3s以上为异常 [临床意义] 1.PT延长:见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、 Ⅶ、Ⅹ及纤维蛋白原缺乏 2.PT缩短:见于血液高凝状态和血栓性 疾病如DIC早期 3.口服抗凝剂的监测
（三）血浆纤维蛋白原测定 [原理]在受检血浆中加入一定量凝血酶，后 者使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白。 [ 临床意义 ] 增高：见于 DM ，急性心梗，急 性传染病，风湿热，急性肾小球肾炎，肾 病综合症，灼伤，MM，休克，大手术后， 妊高症，急性感染，恶性肿瘤以及血栓前 状态，部分老年人等。 减低：见于DIC，原发性纤溶症，低（无） 纤维蛋白原血症，重症肝炎和肝硬化。