小鼠心梗模型的制备及其心功能检测课件

Jitka A.I. Virag et al.J Journal of Visualized Experiments2011 1-5
A. K. M. Tarikuz Zaman et al.J Exp Biol Med (Maywood) 2009 234: 246
心梗模型的心功能检测
超声心动图 PV-Loop
验证结果：最直接的是心电图
1) Staining: Evan ’ s Blue
dye and TTC after MI or I/R .
2) Calculate the area at risk .
Cross section:Evans blue dye (Blue), TTC staining of metabolically viable tissue (red). Necrotic areas do not stain ( pale)
三、术前准备 器械消毒 动物麻醉
异氟醚
手术步骤
当小鼠对痛觉没有反应时，可 将润滑剂涂抹在小鼠的双眼上
以免干燥，脱去颈部、胸部的
体毛。
用75%酒精或温水清洗掉体毛，然后用75%酒精消毒手术视 野。将小鼠固定在暖垫上，然后用粘胶固定四肢。用粗线 牵拉上齿固定。
切开颈部皮肤，分离皮下组织和肌肉，露出气管。 牵拉舌头，利用PE tubing(20号)进行气管插管， 插好后连接好呼吸机。
麻醉机调节 Isofluran：2
氧流量：2
呼吸机调节 呼吸频率(Respiratory Rate)：30 to 350 µl
输出量(stroke volume)：0-130ul
开胸 沿着胸骨左缘自下而上切开皮肤约1.5cm，剪开或者分立
Baidu Nhomakorabea
胸大肌，暴露第四肋间，切开肋间约1.0cm,用微型拉钩
清洁与玩耍
熟悉动物的生物学特性、进行正确的实验操 作，减少动物痛苦
正确的抓取与固定，让动物舒适、有安全感
简介
在心血管疾病研究中，心肌梗死动物模型的建立对于研
究冠心病、心力衰竭等疾病的病理生理变化、心电生理改变、 评价各种治疗方法以及预防冠心病的发生发展具有重大价值。 今天，与大家一起讨论小鼠心肌梗死模型的制备及其心功能 的检测。
超声心动图是应用超声波回 声探查心脏和大血管以获取 有关信息的一组无创性检查 方法。包括M型超声、二维
超声 、彩色多普勒血流显
像等。
LV performance:
CO,ml/m:cardiac output EF,%:ejection fraction HR,bpm:heart rate FS,%:fractional shortening
小鼠心梗模型的制备及其心功能检测
动物权利
动物拥有生存，享受生命，免受痛苦权利
医学研究中实验动物的伦理原则 —“3R”原则
减少（Reduction）
代替（Replacement）
优化（Refinement）
减少动物实验中的应激因素
建造自然舒适的环境
有躲避的安全场所（设置黑洞）
实验中的动物爱护
SV,ul:stroke volume
Volume,systole,ul Volume,distole,ul
LVAW,mm:left ventricular anterior wall
LVPW,mm:left ventricular poster wall LVID,mm:left ventricular interior diameter
录下来. 它能更明确的检测出左室功能，不依赖左室的负荷
状态.
P-V Loop
P-V Loop
dP/dtmin & dP/dtmax: represent the minimum and maximum rate of pressure change in the ventricle .
谢 谢！
对动物模型的要求
如何建立具有稳定性高，重复性好的心肌梗死模型对于心 肌梗死的基础研究有着重要的应用价值。
• 大动物：其解剖结构、心脏血管分布和心脏/体重比等方 面与人的心脏很相似。试验周期长、成本高、操作难度大。 • 小动物：繁殖快易饲养、试验周期短，成本低小鼠生命力 相对弱，手术耐受性差，术后评估效果相对难。
Papillary muscle as the marker
Marker:Papillary, Aortic artery, Left atrium
例子
血液动力学检测（P-V Loop） 压力-容积环技术:提供随心室随时间而变化的压力容积输出 的模拟信号. 在稳定的时期血液动力学和压力容积环会被记
（retractor）分离肋骨，暴露心脏。用弯钳提起心包膜 ，用有齿镊子轻轻的撕裂开心包膜，暴露出心脏，找到 左心耳，确定前降支。
结扎
用8.0线结扎左前降支后，退出分离器，用6号线缝合肌 肉层，4号线缝合皮肤。停止麻醉，脱离呼吸机，一旦确
信小鼠有自主呼吸，就可以拔管。随后可皮下注射无菌
生理盐水0.5ml。将小鼠放置在暖水袋上保持约1小时后 放回动物房。
• 选择小鼠作为心梗模型可以大大降低成本，缩短实验周 期，有利于实验的重复性和数据的稳定性，对于研究人 类心肌梗死的发生，发展及转归具有重要价值。
心梗模型制备
一、器械准备
1.麻醉机
2.呼吸仪 3.显微镜 4.保温垫 5.洁净手术台
6.显微手术器械
二、小鼠准备 小鼠年龄：﹥6w
体重：﹥18g