不同保存时间人羊膜来源的间充质干细胞增殖能力比较

不同保存时间人羊膜来源的间充质干细胞增殖能力比较
常克亮;关方霞;杨波;杜英;李祥生;宋来君;胡祥
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2008(012)025
【摘要】背景:以往利用羊膜提取间充质干细胞的研究多将注意力放在新鲜的羊膜标本上,由于地域和时间的限制,对羊膜进行保存是必须面对的实际问题.目的:实验拟比较从不同保存时间人羊膜标本中分离培养的羊膜间充质干细胞的增殖能力.设计、时间及地点:体外进行的细胞对照观察,于2007～01/2008-02在郑州大学医学院和生物工程系完成.材料:正常剖宫产的健康产妇志愿捐献的羊膜12份,孕38周,检测
乙肝5项、HCV、HIV、梅毒等其他相关传染性指标均呈阴性.方法:无菌条件下将
每份新鲜完整的羊膜平均分成3组,即新鲜1 h组、4℃放置24～36 h组、4℃放
置48～60 h组.将3组标本剪碎,胰蛋白酶,胶原酶联合消化,过滤后收集单细胞悬液,以2×108 L-1密度接种,加入含胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子的
DMEM/F12培养基,贴壁法纯化扩增细胞.主要观察指标:倒置昆微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线.取第3代细胞进行免疫组织化学检测和流式细胞仪鉴定.结果:①3组标本消化后都含有多种单个细胞成分,呈圆形、菱形、短梭形、多角形,细胞折光
性良好,此外还有多个上皮细胞聚集所成的细胞团.接种后1～3 d各组细胞均为潜
伏期;4～7 d新鲜1 h组与4℃放置24～36 h组进入对数生长期,细胞增殖活跃,细胞数目旱指数级递增,4℃放置48～60 h组仍处于潜伏期;7 d后前两组细胞已铺满瓶底,4℃放置48～60 h组刚开始指数级递增.②各组细胞神经元烯醇化酶、神经丝蛋白、巢蛋白均呈阳性表达,胶质纤维酸性蛋白呈阴性.各组细胞CD29,CD44均呈
阳性表达.结论:保存时间在60h内的人羊膜都可以分离出具有增殖能力的间充质干细胞,但36h内的羊膜标本所分离的间充质干细胞具有较快的增殖能力.
【总页数】5页(P4877-4881)
【作者】常克亮;关方霞;杨波;杜英;李祥生;宋来君;胡祥
【作者单位】郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市420052;郑州大学生物工程系,河南省郑州市450001;郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市420052;郑州大学基础医学院生物与免疫学研室,河南省郑州市450052;郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市420052;郑州大学第一附属医院神经外科,河南省郑州市420052;深圳市北科细胞程研究所,广东省深圳市518000
【正文语种】中文
【中图分类】R394.2
【相关文献】
1.不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较 [J], 肖盼;陈剑;王彦平;吴静;郭娴吟;杨筱曦
2.人羊膜间充质干细胞不同移植方式治疗大鼠脊髓损伤疗效比较 [J], 马晶晶;廖旭勇;赵玉洁;喻皇飞
3.不同传代倍数人羊膜来源的间充质干细胞成骨成脂分化平衡的研究 [J], 陈霞;尹晓娟
4.不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养 [J], 王兆福;焦红亮;李建斌;单泓;郑文迪;谷晨熙;杜英;关方霞;杨波
5.人羊膜和牙周膜来源间充质干细胞免疫表型与干性标志基因表达的比较分析 [J], 陈辉;杨琨;蒋珊珊;林风琴;何青;方宁;余丽梅
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。