缺氧微环境调控Twist促进人肝癌细胞株SMMC-7721的上皮间质转化
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局解手术学杂志 ＪＲＥＧＡＮＡＴＯＰＥＲＳＵＲＧ ２０１８，２７（６） ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｊｓｓｘｚｚ．ｃｎ
ｄｏｉ：１０．１１６５９／ｊｊｓｓｘ．１２Ｅ０１７０４２
·基础研究·
缺氧微环境调控 Ｔｗｉｓｔ促进人肝癌细胞株 ＳＭＭＣ７７２１的上皮间质转化
郭莉娜１，黄小梅１，马 燕２，李 灿１，严伟恒２，刘漪沦２，邓峰美１ （１．成都医学院基础医学院，四川 成都 ６１０５００；２．成都
［关键词］肝癌；低氧；上皮间质转化；侵袭 ［中图分类号］Ｒ７３５．７ ［文献标识码］Ａ ［收稿日期］２０１７１２１４
Ｈｙｐｏｘｉａｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｐｒｏｍｏｔｅｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌ ｌｉｎｅＳＭＭＣ７７２１ｖｉａｉｎｄｕｃｉｎｇＴｗｉｓｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ＧＵＯＬｉｎａ１，ＨＵＡＮＧＸｉａｏｍｅｉ１，ＭＡＹａｎ２，ＬＩＣａｎ１，ＹＡＮＷｅｉｈｅｎｇ２，ＬＩＵＹｉｌｕｎ２，ＤＥＮＧＦｅｎｇｍｅｉ１ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃ
ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｅｎｇｄｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＣｈｅｎｇｄｕＳｉｃｈｕａｎ６１０５００，Ｃｈｉｎａ；２．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｅｎｇｄｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｅｎｇ ｄｕＳｉｃｈｕａｎ６１０５００，Ｃｈｉｎａ）
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医学院第一附属医院，四川 成都 ６１０５００）
［摘 要］ 目的 探讨缺氧条件下，Ｔｗｉｓｔ基因的表达及其在人肝癌 ＳＭＭＣ７７２１细胞株上皮间质转化中的作用机制。方法 模拟缺氧微环境，分别在常氧（２１％Ｏ２）和缺氧（１％Ｏ２）条件下培养 ＳＭＭＣ７７２１细胞 ２４ｈ。在倒置光学显微镜下检测 ＳＭＭＣ７７２１ 细胞形态学的改变；ＲＴＰＣＲ和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测细胞中 ＨＩＦ１α、Ｔｗｉｓｔ、上皮表型标记蛋白 Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ及间质表型标记蛋白 Ｖｉｍｅｎ ｔｉｎ的表达；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室侵袭实验检测缺氧条件和常氧条件下细胞侵袭能力的变化。使用 Ｔｗｉｓｔ１靶向 ｓｉＲＮＡ抑制其表达后，进一 步采用 ＲＴＰＣＲ和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测 ＨＩＦ１α、Ｔｗｉｓｔ、Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ和 Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达水平，Ｔｒａｎｓｗｅｌ法检测细胞侵袭能力变化。结果 在缺氧模拟条件下，人肝癌 ＳＭＭＣ７７２１细胞中 Ｔｗｉｓｔ基因表达水平显著升高，同时细胞发生上皮间质转化和侵袭能力增强。靶向 沉默 Ｔｗｉｓｔ基因后，低氧诱导的上皮间质转化过程被逆转，同时细胞侵袭能力显著减弱。结论 低氧条件下 Ｔｗｉｓｔ基因异常激活，进 而促进 ＳＭＭＣ７７２１细胞上皮间质转化的发生和侵袭能力的增强。
局解手术学杂志 ＪＲＥＧＡＮＡＴＯＰＥＲＳＵＲＧ ２０１８，２７（６） ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｊｓｓｘｚｚ．ｃｎ
ｄｏｉ：１０．１１６５９／ｊｊｓｓｘ．１２Ｅ０１７０４２
·基础研究·
缺氧微环境调控 Ｔｗｉｓｔ促进人肝癌细胞株 ＳＭＭＣ７７２１的上皮间质转化
郭莉娜１，黄小梅１，马 燕２，李 灿１，严伟恒２，刘漪沦２，邓峰美１ （１．成都医学院基础医学院，四川 成都 ６１０５００；２．成都
［关键词］肝癌；低氧；上皮间质转化；侵袭 ［中图分类号］Ｒ７３５．７ ［文献标识码］Ａ ［收稿日期］２０１７１２１４
Ｈｙｐｏｘｉａｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｐｒｏｍｏｔｅｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌ ｌｉｎｅＳＭＭＣ７７２１ｖｉａｉｎｄｕｃｉｎｇＴｗｉｓｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ＧＵＯＬｉｎａ１，ＨＵＡＮＧＸｉａｏｍｅｉ１，ＭＡＹａｎ２，ＬＩＣａｎ１，ＹＡＮＷｅｉｈｅｎｇ２，ＬＩＵＹｉｌｕｎ２，ＤＥＮＧＦｅｎｇｍｅｉ１ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃ
ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｅｎｇｄｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＣｈｅｎｇｄｕＳｉｃｈｕａｎ６１０５００，Ｃｈｉｎａ；２．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｅｎｇｄｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｅｎｇ ｄｕＳｉｃｈｕａｎ６１０５００，Ｃｈｉｎａ）
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医学院第一附属医院，四川 成都 ６１０５００）
［摘 要］ 目的 探讨缺氧条件下，Ｔｗｉｓｔ基因的表达及其在人肝癌 ＳＭＭＣ７７２１细胞株上皮间质转化中的作用机制。方法 模拟缺氧微环境，分别在常氧（２１％Ｏ２）和缺氧（１％Ｏ２）条件下培养 ＳＭＭＣ７７２１细胞 ２４ｈ。在倒置光学显微镜下检测 ＳＭＭＣ７７２１ 细胞形态学的改变；ＲＴＰＣＲ和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测细胞中 ＨＩＦ１α、Ｔｗｉｓｔ、上皮表型标记蛋白 Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ及间质表型标记蛋白 Ｖｉｍｅｎ ｔｉｎ的表达；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室侵袭实验检测缺氧条件和常氧条件下细胞侵袭能力的变化。使用 Ｔｗｉｓｔ１靶向 ｓｉＲＮＡ抑制其表达后，进一 步采用 ＲＴＰＣＲ和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测 ＨＩＦ１α、Ｔｗｉｓｔ、Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ和 Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达水平，Ｔｒａｎｓｗｅｌ法检测细胞侵袭能力变化。结果 在缺氧模拟条件下，人肝癌 ＳＭＭＣ７７２１细胞中 Ｔｗｉｓｔ基因表达水平显著升高，同时细胞发生上皮间质转化和侵袭能力增强。靶向 沉默 Ｔｗｉｓｔ基因后，低氧诱导的上皮间质转化过程被逆转，同时细胞侵袭能力显著减弱。结论 低氧条件下 Ｔｗｉｓｔ基因异常激活，进 而促进 ＳＭＭＣ７７２１细胞上皮间质转化的发生和侵袭能力的增强。