猪圆环病毒病的血清学调查
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进 行 了检 测 。
3 7 ℃ 温育 3 0 mi n 。
( 5) 倒 掉 板孑 L 中溶液 ,用 洗 涤液 洗板 5 次 ,2 0 0 l / 孑 L ,每次 1 . 2 猪 圆环 病毒抗体检测试剂盒 由 华 中 农 业 大 学 动物 医 学 院 动 物 病 毒 室 研 制 ,武 汉 科 前 动 静 置 3 m i n 倒 掉 ,每 次在 干净 吸水纸 上拍 干 . 每 孔 加底 物A 液 、B 液各 物 生 物 制 品有 限 责任 公 司 生产 ,云南 省 动 物疫 病 预 防控 制 中心 提 1 滴 ( 约5 0 u 1 ),混均 ,室温 避 光显 色 1 0 分钟 ;每孔 加 终 止液 1 滴 供。 ( 约5 0 u 1 ),并 在 1 0 分钟 内测定结 果 。
方 法 以及措猪 圆环 病毒
血 清 学调 查
( 1 )实验 准备 猪 圆环病 毒 病 是 猪 圆病 毒 ( 圆环 病 毒科 )引起 的一种 新 型传 染 病 ,病 毒 抵 抗力 较 强 ,不 易 被灭 活 ,可长 时 间存 活 ,该 病 毒 分 A _ 将 试剂 恢复 到室 温 ,避免 强光 直射 ; 、 为P C V 一 1 和P C V 一 2 两 型 ,P C V 一 1 型无 致 病性 ,该 病 主要 由P C V 一 2 型 B . 将 洗 涤液 作2 O 倍稀 释 ; 引 起 ,病 主 要感 染 8—1 3 周 龄 猪 ,临床 诊 断 为 体 质下 降 ,消 瘦 、 c . 取 出样 品稀 释板 ,A1 、B l 两孑 L 作 为阴性 对 照孔 ,c 1 、D1 作 皮 发 白 ,腹 泻 ,呼 吸困 难 ,有 的 猪有 黄 胆 。但 不会 引 起 免疫 抑 制 为 阳性 对 照孑 L ,在稀 释 板 的检 3 孑 L 加入1 9 5 l 样 品稀 释液后 加 入5 性 ,降低 饲料 转化 率 ,从 而影 响养 猪经 济效 益 。 l 待 检 血清 ,将 血清 做4 O 倍稀 释 ,在对 照孑 L 加人 1 8 0 l 样 品 稀释 水 富 县 是 云 南 的北 大 门 ,与 四 川 交 界 ,交 通 发 达 ,畜 禽 流 液 后加 入6 0 l 对 照血清 ,将 对照 血清 做4 倍稀释; ( 2 )取 出抗原 包被 板 ,每孔 加入 稀释好 的洗 涤液 2 0 o 1 ,静 动 性 较 大 ,猪 圆环 病 毒 防控 工 作难 度 较 大 。 只有 真实 了解 水 富 县 这 几 年 的猪 圆环病 毒 的 感染 情 况 ,提 出合理 的防 控建 议 ,才 能 更 置 3 a r i n 倒掉 液体 ,并 拍干 ,共 计洗 涤2 次; ( 3)向板 中加 入 1 0 0 l 以上 相 对应 的 已稀 释血 清 ( 阴性 和 好 地 做好 猪 圆环病 毒 的 防控 工 作 ,从 根 本上 消 灭 猪 圆环 病毒 的 发 阳性 对 照各 两 孑 L )轻轻 振 匀孔 中样 品 ( 注意 不要 溢 出孑 L 外 ),封 生。 膜 ,放 入 湿盒 中置 3 7 ℃温育3 0 m i n ; 1 材料和方法 ( 4)倒 掉 板 孔 中溶 液 ,用 洗 涤液 洗 板 5 次 ,2 0 0 l / 孔 ,每 1 . 1 被检血清 分 别于2 0 1 3 年至2 0 1 6 年 采 自云 富 街 道 办 、向 家 坝 镇 、太 平 次 静 置 3 m i n 倒 掉 ,每 次在 于 净吸 水 纸上 拍 干 ,然后 每孑 L 加 酶标 二 镇 、两碗 镇 和3 个 规模 养猪 场 ( 站) 及 散养 户 1 0 0 户 的猪 血 清3 3 2 份 抗 ( 抗 猪I g G — HR P 结 合 物 )1 0 0 l ,封 膜 ,将 板 放 入湿 盒 中 ,置
1 . 3 检 测仪 器 检测 仪器 为酶 标仪 ,单道 、多道移 液 器等 。 1 . 4 检 测方 法 猪 圆环 病 毒病 试 验 操作 步 骤及 判 定 标 准 ,按 照诊 断试 剂 盒 内 说 明书对 被检 血清 进行 检 测 ,并记 录检 测 结果 。 1 . 5 操作步骤
[ 摘 要 ] 酶联 免 疫吸 附试验 是 调 查和 了解 猪 病毒 感 染 的基本 方 法措 施 ,为 了解 2 0 1 3 年 ~2 0 1 6 年 水富 县辖 区 内猪 圆环 病毒 病 的感 染 情 况 ,对 全 县进 行 了酶联 免 疫吸 附试 验 的血 清学调 查 。结 果 :2 0 1 3 、2 0 1 4 、2 0 1 5 、2 0 1 6 年 感 染率 为8 0 % 、 6 5 . 2 % 、5 0 % 、5 1 . 2 % ,本 文 详细介 绍了酶联免疫吸 附试验对猪 圆环病毒的血 清学调 查试验操作方法、结果的判定,提出了如何提 高水富县对猪 圆环病毒 病的防控
中国畜牧兽 医文摘
2 0 1 6 年
3 2 卷
第1 1 期
疫 病 防 控
猪 圆环病 毒病 的血清学调查
郑爱丽’ 杨质超
( 1 . 云南省水 富县 畜牧兽 医技术推广站 ,云南 水富 2 . 云南省水富县两碗镇农业综合服务 中心,云南 水富 6 5 7 8 0 0 ; 6 5 7 8 0 3 )
2 结果判定
用 空 白孑 L 调零 ,在酶 标 仪 上检 测 各 ̄ L O D 6 3 0 值 。在 在 阳性孔
O D 6 3 0 值 ≥1 . 0 ,阴性 对 照孑 L 平均 O D 6 3 0 值 必须 <O . 2 的前 提下 ,样
品 ̄ L O D 6 3 0 值 <0 . 3 8 则 判 为 阴性 ,待 检 ̄ L O O 6 3 0 值> O . 4 2 判 定 为 阳
性 ;样 品 ̄ L O D 6 3 0 值在 0 . 3 8 No . 4 2 之 间判 为 可疑 ;具体 检 测结 果表 见 附表 1 。