桃子和油桃中芳香性物质的顶空固相微萃取气相色谱分析质谱分析

<文献翻译一：译文>
杂交柑橘汁中挥发性成分的顶空固相微萃取/气相色谱/质谱分析
Toussaint Barboni a,Francois Luro b,Nathalie Chiaramonti a,Jean-Marie Desjobert a,Alain
Muselli a,*,Jean Costa a
a Université de Corse, CNRS–UMR 6134, Laboratoire de Chimie des Produits Naturels, BP
52,20250 Corti, France
b Institut National de la Recherche Agronomique,20273 San-Giuliano,France
【关键词】克莱门氏小柑橘、柑橘汁、杂交体、顶空固相微萃取、气相色谱/质谱分析、柠檬烯、松油烯
【摘要】柑橘汁中挥发性化合物通过顶空固相微萃取后用气相色谱和质谱分析。

这项研究涉及65种杂交的水果和它们的母本：柑橘和克莱门氏小柑橘。

可鉴别出的44种组分构成了挥发性成分的90.2至99.8％，其中柠檬烯（56.8-93.3%）和松油烯（0.1-36.44%）为主要成分。

克莱门氏汁的特点是柠檬烯（90.0%）和少量松油烯（1.2%），而柑橘果汁柠檬烯（66.3%）和松油烯（21.1%）。

结果显示所有杂交果汁成分类似，但含量不同。

主成分分析（PCA）和判断表明，杂交种样品均匀的遗传了双亲的特点。

如果说寻找对普通柑橘果汁进行的一些研究文献，就我们所知，这项工作是第一次研究对克莱门汁和大量杂交品种的挥发性化合物的研究。

1.简介：普通柑橘和克莱门汀柑橘杂交的目的有两个：一是为了增强树的抗病能力，二是使其口味更加适合消费者的需求和生产出保留有机成分的果汁。

新鲜水果的特点在于气味和口味（甜度和酸度）。

果汁的分析需要一个简便快捷的分析过程，这种方法必须能够定性定量的检验出影响果汁嗅觉品质的组分。

在挥发性化合物的化学组成和嗅觉特性间建立联系是很困难的，独立的芳香组分和混合的芳香组分其嗅觉特性是不同的[1]。

一些技术应用于食品风味的抽样中[2]，其中，以固相顶空微萃取的富集过程是一种无溶剂化、简单、快速、可靠的方法，它不会引起挥发性化合物因温度或溶剂影响而发生变化[3]。

顶空固相微萃取直接和气相色谱或气-质联用，用于气味分析，如：番茄、杏、梨、桃子、草莓、苹果和桔子。

挥发性组分试样要求顶空固相微萃取各因素的优化，包括纤维涂层、试样量、解吸附温度、平衡和萃取时间，根据现有的桔子和普通橘子的文献数据[4]，固相微萃取装置表层涂覆单一聚合物或混合高聚物，用于挥发性成分的富集。

萃取在搅拌下进行，以1：1的比例在顶部空间加入了盐(NaCl或CaCl2)。

由于在热处理和储藏中风味的流失，对桔子汁的挥发性成分研究很多[5]-[10]，然而在普通橘子的研究只有四项。

本论文这样做的目的是表征67种从克莱门
氏小柑橘和普通柑橘杂交品种果汁里的挥发性化合物，使用的是顶空固相微萃取和气相来测相对含量，气相/质谱联用的方法来确定其组成。

据我们所知，克莱门汀果汁和杂交克莱门汀-普通柑橘果汁的研究为首次报告。

2.材料和方法
2.1.对原料水果的要求
2.2.顶空固相微萃取的条件
果汁溶解在顶空固相微萃取顶部空间，条件优化使用2.5，5，10，12.5，15 mL样品装入20毫升小瓶，它是根据总峰面积的总和。

萃取使用了五种纤维：聚二甲基硅氧烷（PDMS）中，聚乙二醇/二乙烯苯（CW/DVB）的,碳分子筛/聚二甲基硅氧烷（CAR/PDMS），聚二甲基硅氧烷/二乙烯基硅氧烷（PDMS/DVB）和二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷（DVB/ CAR/ PDMS）。

该纤维处于气相色谱注射器端口环境中，该纤维的优化选择进行已在同一个比率（1/1）样本/顶空气环境温度，平衡和萃取时间分别为固定在1h。

平衡时间选定时间变化（30分钟至24小时）依据环境温度时间和温度，提取测定试验相结合四种不同的温度：20，30，40，50℃和10，20，30，60，120，180和240分钟7个不同的时间。

萃取时盐的浓度的选择，依据硫酸钠浓度变化（0-50％的果汁总质量）。

采样后，固相微萃取纤维插入到GC注射器在260℃解吸（5分钟）。

所有果汁进行3次上述程序。

2.3. 气相色谱分析
气相色谱分析利用珀金-埃尔默自动加大码气相色谱仪器（马萨诸塞州沃尔萨姆，美国），配备了双火焰离子化检测器（FID）系统和熔融石英毛细管柱子（60m,0.22mm内径，膜厚0.25μm，Restek,法国），聚二甲基硅氧烷和RTX聚乙二醇。

两种毛细管柱子的使用适用与两种不同的稳定相：1.解决重叠的化合物相同的保留时间，2.通过计算一些化合物的RI 值来更好区分它们。

色谱以2℃/min的速度由60-230℃程序升温，在230℃保温35min，进样装置和检测器温度保持在280℃。

试样进样，用氦气做载气（1mL/min）。

挥发性组分在具有特殊的高效液相色谱衬里入口(0.75 mm. i.d., Supelco Co.)的气相色谱进样装置中解吸。

使用[11]方程和Perkin–Elmer的软件，保留值是相对由直链烷烃（C5-C30）保留时间决定的。

组分的相对含量是基于气相色谱的峰面积来计算的，不使用修正系数。

2.4. 气相色谱-质谱联用
气相色谱分析利用珀金-埃尔默自动加大码气相色谱仪器（马萨诸塞州沃尔萨姆，美国），系统配置熔融石英毛细管柱子。

载气：氦气（1mL/min）的，离子源温度定为150℃，烘箱温度从60℃-230℃程序控温2℃/分钟，然后等温230℃（35分钟），注射装置温度：280℃，不分流，离子化能量：70ev，电子电离质谱范围35-350Da，挥发性成分的解吸在气相色谱注射器内部进行(0.75mm.i.d.,Supelco Co.)。

2.5.组分鉴定
组分鉴定是基于:（1）它们在非极性和极性柱上的气相色谱保留值的比较，由一系列直链烷烃的保留时间决定。

这些可信的化合物或是文献报道的数据[12]-[14],或是实验室研究出的谱图。

这些化合物中的大部分是商业标准的组分，其他很少的部分是先前鉴别出的存在于香精油中的或通过CC方法获得的一点儿量，通过与文献色谱数据、保留值，通过13CNMR表征。

单个组分的相对含量是基于它们在毛细管Rtx-1和Rtx-Wax色谱柱气相色谱的峰面积，不使用FID响应校正系数。

2.6．数据分析
主要成分分析（PCA），相关性分析被报道过了。

数据图表公司的Wingdows图表软件在这些不同的检测中得到了使用。

3.结果和讨论
3.1．SPME参量的优化
顶空固相微萃取实验样品参量的优化是用克莱门氏小柑橘和普通柑橘的果汁来进行的,它是基于总的气象色谱峰面积。

三种纤维(DVB/CAR/PDMS)被选择作为所有果汁样品挥发性组化合物的分析，因为其定量和定性的萃取容量。

萃取平衡时间的优化是周围温度有最大
FID-响应在平衡时间120min后被检测。

结合时间和温度变化时，最优提取条件建立在40℃（图1）提取时间为120分钟。

与文献报道[10],在我们的试验中，对果汁中的挥发性化合物在不加盐的情况下进行中更好地提取。

事实上，使用各种不同量的硫酸（0-50%果汁量）涉及挥发性物质数量的减少。

此外，在无盐情况下，由于酶降解作用，没有新的化合物。

对67个样本（9.8%<变异系数<15.2%），根据从FID检测器信号上总面积，计算变异系数，得到结论是我们的仪器和方法是可信的。

同样的，主要化合物的变异系数总是少于8%。

标准偏差分别载于表1。

3.结论
由HS-SPME/GC和/或G C/MS分析的挥发性成分分析，完成了44个化合物的鉴定。

克莱门汀柠檬烯含量卓越（90%），而松油烯（1.2%）含量较低。

所有杂交品种果汁性质近乎相同，但在量上有区别。

参考文献：
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<文献翻译二：译文>
桃子和油桃中芳香性物质的顶空固相微萃取/气相色谱分析/质谱分析王毅举abe，杨春祥a，李少华b，杨柳c，王友年c，赵建波d，蒋权d
a中国科学院植物研究所，中国北京
b中国科学院武汉植物园，中国武汉
c北京农业大学，中国北京
d林业和果树研究所，北京农林科学院
e中国科学院研究生院
【关键词】桃子，油桃，芳香，挥发性，HS-SPME-GC-MS,PCA
【摘要】用HS-SPME-GC-M S检测了50种桃子和油桃挥发性成分，鉴定了84种化合物，挥发性成分是相对稳定的，但是挥发性化合物总量和特定单一组分一直有改变。

而且，挥发性化合物的组成和含量取决于遗传基因和胚质来源。

1.简介
芳香气味是果实品质的重要组成部分之一。

香气挥发物对桃子和油桃的味道的影响经许多研究人员研究，100多种化合物已被确定。

[1-10]桃子和油桃的挥发物包括C6化合物，醇类，醛类，酯类，萜类化合物，酮类及内酯，其中内酯，尤其是γ-和δ–癸内酯s，已报告是影响芳香气味的主要的贡献者[11-14]。

确定在此课题中，顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用应用于研究挥发性成分，比较了芳香成分,尤其是对胚质来源没有进行过深入研究的品种，包含了中国当地栽培品种和许多和国外品种，以求改善栽培水果的品质。

对10种栽培品种进行了20年的连续研究，以求调查出气候对挥发性成分及其含量的影响。

2.实验方法
2.1 实验样品材料
2.2挥发性成分的分离和富集
顶空取样，SPME纤维头被二甲基硅氧烷-二乙烯基苯（65微米）涂覆，这是先前研究工作[15]的最优化实验装置。

根据制造商的说明，纤维是有活性的。

顶空固相微萃取的方法应用于挥发性成分的分离和富集。

每次萃取，将2g果肉粉末和0.6gNaCl，10微升3-辛醇（0.814g/mL）置于4mL的小瓶子里，小瓶子置于45℃水浴中，搅拌桨搅拌，恒温，SPME 纤维暴露于样品的顶部空间，吸附30min。

然后将纤维插入色谱的注射器进样口，解吸附温
度220℃，解吸2min。

线性指数依正构烷烃标准(C6-C30)按照已用方法[16]计算。

2.3 GC-MS实验条件
用安捷伦5973质量选择检测器，联合安捷伦6890气相色谱，装备30m×0.25mm×1.0umHP-5MS(5%苯基聚硅氧烷)毛细管柱测定挥发性成分，氦气做载气，线速度1.0ml/min。

进样器口速度保持在220℃，检测器温度280℃。

通过优化先前的研究方法[17-18]，从40℃程序升温（2min），以3℃/min的速度升至150℃（2min）,然后以10℃/min的速度升至220℃，保持2min。

质谱由70eV电子轰击（EI）后记录。

四级质谱检测器，离子源，线性转换温度分别设置为150，230，280℃。

质谱扫描以1s的间隔，m/z范围从30-350。

挥发性化合物的鉴定通过比较质谱与数据系统库（NIST：美国国家标准及技术研究所）、线性保留指数来实现。

2．4统计学分析
每个品种的数据都是重复三次的平均值。

由于个人差异，2006年萜含量分析方法的使用Kruskal-Wallis检定分析。

单向方差分析用于确定2006年组的其他挥发性物质显著差异。

K ruskal-Wallis的自由度和单方向方差为48。

配对符号秩和检验是通过使用研究了10个品种的连续两十年数据来确定在2006年至2007年，香气含量的显着性差异。

主成分分析（PCA）做的目的是对2006年检测集群样品和挥发性化合物之间建立关系。

3.结果和讨论
3.1挥发物鉴定
鉴定和量化了84种挥发性化合物，其中一些只在这项研究中发现。

这些化合物包括7个C6化合物型2号，19种酯类化合物，14种醛类，8种内酯，14种萜类化合物，4种酮类，7种醇和11种其他化合物（包括一些羰基化合物）。

3.2 挥发性成分
3.3.1总述
如上所述，‘Wutao'是一个非常特殊的品种，含有非常高水平挥发性物质。

挥发物的组成和其内容随着基因型和主要挥发性化合物的内容（全波高于5μg/kg）变化而变化，一些特殊的挥发性化合物种类单独列出。

3.3.2 C6化合物
七种C6化合物包括己烷（C1），己醛（C2）的，2-己醛（C3），（z）-3-己烯-1-醇（C4）的，（E）-2-己烯醛（C5）,（E）-2-己烯-1-醇（C6），1-己醇（C7）被发现。

己醛（C2）和2 -己烯醛（C3）为主要的C6化合物。

作为主要成分，所有C6化合物对总计挥发性物质含量贡献57.4-67.9％，虽然而在‘Wutao'中达81.1％。

C w组C6化合物含量比其他组显著的高，同样CF比Cb，J和AE也要显著的高，C6化合物含量最低的在J组。

3.3.3 脂类
酯被认为是水果和花卉香味主要贡献者，酯含量高使桃子和油桃有令人愉快的味道[19]。

酯是第二丰富的化合物，占有7.9-17.8％的总挥发物量。

在6组中，酯总量在C w组最高J 组最低。

然而，显著较高的总酯含量在Cw组发现，而不是在C l、C b和J组。

虽然共有19种酯在桃和油桃的研究中发现，乙酸乙酯（E1），（z）-3-己烯酯（E5）,乙酸己酯（E6）和2-己烯酯（E7）占总酯九成以上。

‘Guizhoumaotao'（4）酯含量最高，178.5μg/kg，而NJN76（48）最低，只有33.9μg/kg.至于个别酯含量,最丰富的醋酸乙酯（E1）在’Luxiang’（20）中发现，一个中国地方品种，含量89.1μg/kg，紧接着是一个AE栽培品种‘Vesuvio’(39)。

几个类群，‘Guizhoumaotao'（4），‘Jincheng'（28），’Babygold 8'（44）,‘Red Skin'（46）和‘Early Red2'（50），有较高含量（z）-3-己烯酯，从62.8到84.0μg/kg。

含乙酸己酯（E6）最丰富的是‘Yixianhong'（13），一种中国本土栽培品种，含量91.9μg/kg，随后是‘Guizhoumaotao'（4）和‘Wutao'（5）。

高含量的2 -己烯酯（E7）在一个CF [‘Jincheng'（28）和两个AE品种[‘Babygold 8'（44）和‘Cahgahckuei'（45）发现，含量28μg/kg。

对于其他15种酯，含量一般低于水平5μg/kg，除了在‘Yixianhong'（13）中，邻苯二甲酸二丁酯（E17的）和棕榈酸异丙酯（E19）比较丰富，分别达到17.4和19.6μg/kg。

4.结论
挥发性化合物组成和含量取决于基因。

几乎所有的特征性挥发性化合无在Cw和‘Wutao’组显著性高于其他。

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