动物生理学实验二鱼类采血技术与血细胞生理

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④脆性鉴定 再将新鲜血液滴入蒸馏水 中,观察细胞的形态。
【注意事项】
1.麻醉实验鱼时不要过度麻醉,会对 血液的流动产生一定的影响,最终导致采 血困难。同时,麻醉的时间也不能过短, 否则影响采血操作。
2.肝素钠溶液处理注射器时,一定要 将注射器内部全部湿润,否则仍可能会产 生凝血。
3.下针的位置有要准,一定要刺到脊 柱腹侧,且针头不能轻易变动位置,不然 血液很难抽出,若出现位置失误,应该重 新再试一次。
3.观察红细胞在不同浓度生理盐水中的细胞形 态,进一步认识红细胞的渗透脆性。
【实验原理】
【实验对象】 鲫鱼
【实验药品】 肝素钠溶液、MS-222溶液,生理盐水
(1%,0.65%,0.3%)、蒸馏水。 【仪器与器材】
解剖盘1个、毛巾1块,1 mL注射器5个、 烧杯(200 mL)、1.5 mL 离心管(10个)、 显微镜、载破片5片、滴管2支、拭镜纸。
4.未经肝素钠处理的注射器,抽出的 血液要尽快注入到离心管中,避免血液在 注射器中凝固。
【实验方法与步骡】 1、血液采集
(1)实验鱼的麻醉 将鲫鱼先放入MS222溶液的桶中,进行实验鱼的麻醉,当鲫 鱼在麻醉剂溶液中缓慢运动或在桶中侧翻 时,这时表明麻醉的程度比较适中。
鱼类麻醉前后对比示意图
(2)取血的准备 将准备好的1mL注射器 ,一只不作任何处理,一只抽动活塞用肝 素钠溶液将注射器内湿润,为血液的采集 做好准备工作。
②渗透失水 用滴管吸1%的生理盐水, 吸1mL左右滴入1只新的离心管中,再将刚 采取的新鲜血液(或去纤维蛋白血)用注 射器轻轻推1-2滴到该生理盐水中,待轻轻 颠倒混匀后,用吸管滴1滴到载玻片上,放 于显微镜下观察细胞的形态。
③渗透吸水 用滴管吸0.3%的生理盐水 ,将1mL左右生理盐水滴入1只新的离心管 中,再将刚采取的新鲜血液(或去纤维蛋 白血)用注射器轻轻推1-2滴到该生理盐水 中,待轻轻颠倒混匀后,用吸管滴1滴到载 玻片上,放于显微镜下观察细胞的形态。
动物生理学实验二 鱼类采血技术与血
细胞生理
血液组成
红细胞脆性与溶血:红细胞具有选择透过性,高渗 失水பைடு நூலகம்低渗吸水,低渗条件下或其他原因致使红细胞易破 裂导致血红蛋白逸出称溶血。
【实验目的】
1.学习鱼类采血的主要方法,掌握鱼类尾柄动 脉采血技术;
2.了解血液的组成,进一步深刻认识血浆与血 清的主要区别。
②血浆的制备 经肝素钠溶液处理的注 射器所采集的血样,注入离心管后放置1小 时,或者3000 转/分钟转速下离心5分钟, 获得的上层淡黄色液体即为血浆。
③比较血浆和血清两者存在的区别。
3、红细胞的渗透脆性
①等渗观察 用滴管吸0.65%的生理盐水 ,吸1mL左右滴入1只新的离心管中,再将 刚采取的新鲜血液(或去纤维蛋白血)用 注射器轻轻推1-2滴到该生理盐水中,待轻 轻颠倒混匀后,用吸管滴1滴到载玻片上, 放于显微镜下观察细胞的形态。
(3)血液的采集 注射器的针头从臀鳍 基部下针,将针头沿着垂直于尾柄的方向 推进,使针头刚好尾部脊柱的下侧,此时 保证针头的位置不随意挪动,右手大拇指 和食指带动活塞向外运动,经大气压力将 血液压入注射器中。
2、血清、血浆的制备 ①血清的制备 用未经肝素钠溶液处理的
注射器所采集的血样,注入离心管后让其 静止放置20分钟,待血液凝结后所析出的上 清液即为血清。
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