乳酸菌活菌数的测定

乳酸菌活菌数的测定
1、乳酸菌的定义：一类可发酵糖主要产生大量乳酸菌的细菌的通称。

乳酸菌主
要为乳杆菌属，双歧杆菌属和链球菌属。

2、实验用品：恒温培养箱：35℃-37℃
冰箱：2℃-5℃
均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳鉢
天平：感量0.1g
无菌试管：18mm×180mm 每人6支，共30支
无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）每人7支，共35支
无菌锥形瓶：250mL 共5个
无菌培养皿：每人7个，共35个（包括空白的5个）
涂布棒：共5个
MRS琼脂：700mL
生理盐水：300mL分装于试管中，每支试管9mL
固体样品处理：以无菌操作称取1g样品，置于装有9mL生理盐水的无菌均质杯内，于8000r／min置于9mL-10000r／min均质1min-2min，制成1：10的样品匀液，或置于9mL生理盐水的无菌均质袋中，用拍击均质器拍打1min-2min制成1：10的样品匀液。

3、实验步骤：
a.用1mL无菌吸管吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于装有
9mL生理盐水的无菌试管中，振摇试管，制成1：100的样品匀
液。

b.另取1mL无菌吸管，按上述操作顺序，做10倍递增样品匀液，
直至制成1：1000000的样品匀液。

c.选取1：1000，1：10000，1：100000的样品匀液，每个稀释度
吸取0.1mL样品匀液分别置于2个MRS琼脂平板，使用涂布棒
进行表面涂布。

（从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成）
d.在35℃-37℃，厌氧培养46h-50h后计数平板上的所有菌落数。

4、工作分配：洗器材全部人
包扎吸管，培养皿，试管和锥形瓶：张燕梅张美玲黄雪玲
配培养基及分装：杨延静配生理盐水及分装：杨晓玲。