肾移植术后尿液中巨细胞病毒DNA的定量测定

肾移植术后尿液中巨细胞病毒DNA的定量测定
于青;谢匡成;姚建;徐琴君
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】2001(019)003
【摘要】@@人类巨细胞病毒(CMV)感染能引起移植物的慢性排异，正确诊断及
治疗CMV感染可有效提高移植物的存活率，减少医疗费用。

然而在众多CMV感染的实验室检查中，究竟哪一种方法最可靠一直存有争议。

本项目采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测CMV DNA，报道如下。

rn1 材料和方法rn1.1 92名1997年1月至2000年5月在我院接受肾移植的患者，移植时间2个月～40个月。

收集中段晨尿，临床上有感染症状的患者在抗病毒治疗后反复留取尿标本，共收集标本112份。

rn1.2 TagMan和CMV DNA荧光定量试剂由达安基因诊断中
心提供。

rn1.3 PE5700荧光定量PCR仪和计算机自动荧光检测仪(PE公司)。

rn1.4 标本处理留取中段晨尿10 ml密封送检，取1 ml至1.5 ml离心管中，12 000 r/min离心10 min，弃上清，沉淀加生理盐水打匀，15 000 r/min离心5 min，沉淀加50 μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10 min,10 000 r/min离心5 min,取上清液2 μl做PCR反应。

rn1.5 PCR扩增及荧光测定取CMV PCR反应管，直接加入处理后样品2 μl，振荡器振荡2～3s混匀，将反应管放入PCR仪，93℃ 2 min预变性，93℃ 45s,55℃ 120 s,共做40个循环。

然后通过计算机自动荧光
检测CMV DNA含量，结果以基因拷贝数/ml表示。

【总页数】1页(P180)
【作者】于青;谢匡成;姚建;徐琴君
【作者单位】上海市第一人民医院肾脏科,;上海市第一人民医院肾脏科,;上海市第一人民医院肾脏科,;上海市第一人民医院肾脏科,
【正文语种】中文
【中图分类】R692.5
【相关文献】
1.尿液DNA的检测在肾移植术后急性排斥反应诊断中的应用 [J], 洪泉;王伟刚;周洪澜;傅耀文
2.母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用 [J], 谢而付;黄珮珺;陈丹;张丽霞;戎国栋;潘世扬
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