卒中得生丸治疗脑缺血大鼠的药效学研究

世界最新医学信息文摘 2019年 第19卷 第09期93
投稿邮箱：sjzxyx88@
·基础研究·
卒中得生丸治疗脑缺血大鼠的药效学研究
李迪1，胥丽丽1，罗玉斌1，吴红娟1，许贵军1（通讯作者），隋金婷2
（1.黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001；2.哈尔滨市食品药品检验检测中心，黑龙江 哈尔滨 150025）
0　引言
脑缺血又称脑供血不足是指人脑某一局部的血液供应不足而引起脑功能的障碍。

颈椎疾病、血压降低、血液粘稠度增高、微血栓形成等是脑缺血病的主要原因。

临床表现为精神意识异常、运动神经功能障碍、感觉功能障碍并反复出现头晕、头昏、头痛症状，伴有心烦、耳鸣、烦躁易怒、失眠多梦、记忆力减退、注意力不集中、健忘等症状[1]。

脑缺血如不及时治疗很可能引起脑梗死，甚至痴呆。

本实验采用大鼠分离结扎双侧颈总动脉引起大鼠大脑中动脉血供阻断模型，考察卒中得生丸对脑缺血大鼠神经功能，脑组织含水量，脑组织病理形态以及脑血管、心电图、血压等指标药效学方面的研究[2]。

1　实验材料
1.1　实验动物。

SD 健康雄性大鼠，体重300-350 g （购自黑龙江中医药大学实验动物中心）
1.2　药物、试剂、仪器。

卒中得生丸（由葛根，川芎，生山楂，三七，红花，地龙，丹参，益母草，赤芍，当归，水蛭等组成的中药复方制剂）；银杏叶片（石家庄以岭药业股份有限公司）。

KDC-160HR 高速冷冻离心机（科大创新股份有限公司）；BL-420F 生物机能实验系统（成都泰盟软件有限公司）；LBY-NJ2血小板聚集仪（北京普利生仪器有限公司）；DK-98-11A 电热恒温水浴箱（天津市泰斯特仪器有限公司）；AL204电子天平（梅特勒－托利多仪器上海有限公司）。

2　实验方法
2.1　大鼠分组、给药与模型建立。

60只SD 大鼠喂养适应环境一周后，大鼠用
3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉（35 mg/100 g 体重），分离双侧颈总动脉并结扎，具体操作如下：大鼠仰卧位固定于手术台上，常规消毒，颈部正中切口，暴露右侧颈总动脉和颈外动脉，小心分离与颈总动脉伴行的迷走神经，用5/0丝线结扎颈总动脉和颈外动脉，在距离分叉处0.5 cm 左右用眼科剪将颈总动脉剪一小切口，将备用线栓送入切口，向内推行，将线栓沿颈总动脉颈内动脉顺行至中动脉，遇到阻力时停止，从颈总动脉分叉处计算插入深度（1.8±0.5）cm ，造成大鼠大脑中动脉血供阻断。

假手术组只手术不结扎颈总动脉，手术后伤口缝合后回笼饲养。

实验及饲养室温均为25℃。

术后4h 根据神经功能评份，模型成功的大鼠按体重随机分组，分为模型组，阳性药对照，卒中得生丸高、中、低剂量组，假手术组共6组，保证每组造模成功的动物数为8只。

造模后第2 d 开始灌胃给药治疗14 d ，卒中得生丸高、中、低剂量组分别以10.8 g/kg 、5.4 g/kg 、2.7 g/kg 大鼠体重灌胃给药，阳性药对照组给银杏叶片0.54片/kg 大鼠体重灌胃给药，模型组和假手术组给予等量生理盐水[3]。

2.2　检测指标。

术后4 h 、给药中期及给药末期，采用单盲法按神经学标准观测各组动物神经症状，并进行行为综合评分。

末次给药1 h 时断头处死动物，迅速取出脑组织，每只取半脑用千分之一电子天平称重后置烘箱中70℃烘24 h ，冷却后称干脑组织重量，分别计算脑组织含水量。

末次给药1 h 时，断头取脑，每只取半脑用甲醛固定，石蜡切片进行常规 HE 染色，光学显微镜下观察各组大鼠脑组织结构变化。

3　结果
3.1　神经学评分测定
3.1.1　评分标准：0分：无神经功能缺损症状；l 分：轻度局灶性神经功能缺损，即提尾悬空不能伸展左侧前爪；2分：中度局灶性神经功能缺损，即行走向左侧转圈；3分：重度局灶性神经功能缺损，即行走困并向左侧倾倒；4分：不能自发行走，无意识或昏迷。

0分、4分为模型失败，1-3分为模型成功，2-3分为稳定模型。

3.1.2　实验结果：根据评分标准，术后4h 模型成功，给药中期和给药末期，各给药组的评分与模型组比较有统计学意义，各给药组对脑缺血的神经功能均具有改善作用。

组间比较用t 检验表示，结果以±s 表示，结果见表1。

3.2　脑组织含水量测定。

脑组织含水量测定，可观察脑缺血损伤后胶原组织水肿情况，用以下公式计算：含水量（%）＝（湿重-干重）/湿重×100%。

组间比较用t 检验表示，结果以±s 表示。

结果见表2。

模型组与空白组比较，脑组织含水量明显增加，各给药
摘
要：目的 考察卒中得生丸对实验性脑缺血大鼠治疗影响，研究其治疗脑缺血的药理作用，为临床应用及药物开发提供参考依据，并完善药理方面实验内容。

方法 对大鼠分离结扎双侧颈总动脉引起大鼠大脑中动脉血供阻断试验，观察卒中得生丸对脑缺血大鼠神经功能，脑组织含水量，脑组织病理形态以及脑血管、心电图、血压等指标的影响。

结果 利用神经学评分测定方法卒中得生丸高剂量组（10.8 g/kg ）、中剂量组（5.4 g/kg ）、低剂量组（2.7 g/kg ）对脑缺血大鼠的神经功能均具有改善作用，治疗组与模型组比较神经元细胞形态较规整，凋亡数量明显减少，中心区少见神经纤维网格状结构，炎细胞明显减少；卒中得生丸高剂量组（10.8 g/kg ）、中剂量组（5.4 g/kg ）、低剂量组（2.7 g/kg ）可明显减少缺血大鼠脑组织含水量，治疗组与模型组比较均有显著性差异（P <0.05）。

结论 卒中得生丸对脑缺血的症状有显著的改善和治疗作用。

关键词：卒中得生丸；脑缺血；药效学研究
中图分类号：R743.31 文献标识码：B DOI ：10.19613/ki.1671-3141.2019.09.063
本文引用格式：李迪,胥丽丽,罗玉斌,等.卒中得生丸治疗脑缺血大鼠的药效学研究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(09):93-94.
基金项目：
本文系黑龙江省中医药管理局科研项目（No.2HY16-104）
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2019 Vo1.19 No.09
94投稿邮箱：sjzxyx88@
组中卒中得生丸的高、中剂量组可明显减少脑组织含水量。

表1　卒中得生丸对大鼠神经功能的影响
组别例数术后4h 给药中期
给药末期
空白组8000模型组8 2.62±0.52 2.34±0.52 2.34±0.52高剂量组8 2.34±0.52 1.50±0.53*0.63±0.52#中剂量组8 2.50±0.53 1.50±0.53*0.63±0.52#低剂量组8 2.63±0.52 1.63±0.52* 1.25±0.46#阳性药组
8
2.63±0.52
1.63±0.52*
0.75±0.46#
注：与模型组比较，*P <0.05，#P <
0.01。

表2　卒中得生丸对大鼠脑组织含水量的影响
组别例数湿脑重（g）干脑重（g）差值（g）含水量（%）空白组80.80±0.110.22±0.030.58±0.0872.29±0.92模型组80.93±0.120.22±0.040.70±0.1175.75±3.42*高剂量组80.74±0.060.22±0.020.52±0.0570.67±2.88#中剂量组80.72±0.060.20±0.010.51±0.0571.77±1.44#低剂量组80.72±0.040.19±0.010.52±0.0372.96±1.80阳性药组
8
0.71±0.06
0.20±0.01
0.51±0.05
71.93±1.46#
注：与空白组比较，*P <0.05，与模型组比较，#P <0.05。

3.3　脑组织病理形态学观察。

正常组：脑组织神经元细胞形态尚规整，无炎细胞浸润
和少量充血。

模型组：缺血区可见出血周围区神经元固缩、水肿，大量炎细胞出现，中心区可见神经纤维呈现网格状结构，大量
神经细胞凋亡，消失。

治疗组：卒中得生丸各治疗组与模型组比较，神经元细胞形态较规整，凋亡数量明显减少，中心区少见神经纤维网格状结构，炎细胞明显减少，水肿程度明显减轻，与正常对照组比较无明显差别，且高剂量组优于低剂量组。

3.4　卒中得生丸对大鼠心电图、血压的影响。

通过实验观察模型组与空白组及各给药组与模型组比较，心电图未见显著性差异，结果见表3；与模型组比较，卒中得生丸各给药组可以使左室收缩压、峰峰值呈升高趋势，但未出现显著性差异，结果见表4。

表4　卒中得生丸对大鼠血压的影响
组别左心室收缩压（mmHg）左心室舒张压（mmHg）峰峰值（mmHg）空白组58.19±11.49 3.51±2.2254.67±11.35模型组52.39±11.35 3.94±4.1245.56±11.20高剂量组69.15±17.21 5.52±4.3163.63±13.34中剂量组71.73±8.119.66±3.7662.07±5.93低剂量组77.01±10.249.50±7.2767.51±11.42阳性药组
64.34±12.60
6.32±3.35
58.02±10.83
注：与空白组比较，*P <0.05，与模型组比较，#P <0.05。

4　结论
实验中各给药组与模型组比较，能明显改善神经功能评
分，高、中剂量效果较好；能降低脑缺血模型的脑组织含水量，高、中剂量组效果较好；能明显改善脑缺血大鼠出现的缺血区神经元固缩、水肿，大量炎细胞出现，神经纤维网格状结构，大量神经细胞凋亡，消失等病理形态；但对大鼠心电图与血压等影响不大。

从以上实验结果可以说明：卒中得生丸对大鼠的脑缺血模型的相关指标，具有很好地改善和治疗作用[4-5]。

参考文献
[1]　许贵军,王文芝,胥丽丽,等.御风胶囊抗脑缺血的药效学研究[J].
中医药信息,2017,34(6):45-47.
[2]　王涛,刘宏祥,王颖,等.清热化痰解毒汤对缺血性脑卒中大鼠
脑组织含水量、血脑脊液屏障通透性及神经功能缺损评分的影响[J].医学研究与教育,2018,35(1):13-18.
[3]　曾晓莉,张文娟,赵博,等.慢性脑缺血神经保护机制及药物研究
进展[J].中国脑血管病杂志,2017,34(11):607-611.
[4]　吴建明,王玮,付伟,等.舒肝解郁胶囊对实验性缺血脑卒中的防
治作用[J].华西药学杂志,2016,31(1):45-47.
[5]　张雯,宋俊科,杜立达,等.急性脑缺血治疗药物研究进展[J].
神经药理学报,2014,4(4):50-58.
表3　卒中得生丸对大鼠心电图改变的影响
组别心率（次/分）最大值（mV）最小值（mV）峰峰值（mV）最大上升速度（mV/m）最大下降速度（mV/ms）空白组330.78±46.290.40±0.19-0.18±0.160.58±0.210.10±0.03-0.16±0.07模型组291.25±61.150.45±0.15-0.15±0.070.59±0.160.09±0.04-0.15±0.05高剂量组331.78±35.090.44±0.12-0.16±0.120.59±0.190.09±0.02-0.12±0.05中剂量组335.57±52.260.42±0.27-0.30±0.100.71±0.310.09±0.03-0.17±0.09低剂量组337.71±42.640.40±0.10-0.15±0.120.56±0.120.09±0.02-0.11±0.06阳性药组
332.63±60.68
0.52±0.12
-0.20±0.04
0.72±0.14
0.10±0.03
-0.20±0.05
注：与空白组比较，*P <0.05，与模型组比较，#P <0.05。