真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达

真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与
表达
艾敏;张巧;赵国强;杨胜利
【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2008(043)005
【摘要】目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-
B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达.方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达.结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功.该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达.
【总页数】5页(P943-947)
【作者】艾敏;张巧;赵国强;杨胜利
【作者单位】郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;郑州大学基础医学院食管癌研究室,郑州,450001
【正文语种】中文
【中图分类】Q782
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