巴西橡胶树树皮环氧树脂组织切片及染色技术

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巴西橡胶树HbCytb561的克隆及表达分析

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ｈｉｇｈｅｓｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｆｌｏｗｅｒｓ．ｔｈｅｎｉｎｌｅａｖｅｓａｎｄｌａｔｅｘ．Ｎｏｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｆ０ｕｎｄｉｎｔｈｅｂａｒｋ．Ｄｒｏｕｇｈｔ，ｍｅｃｈａｎｉｃａｌｗｏｕｎｄｉｎｇａｎｄｐｏｗｄｅｒｙｍｉｌｄｅｗｉｎｆｅｃｔｉｏｎｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｔｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｅｖｅ１．ＴｈｅｓｅｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔＨｂＣｙｔｂ５６１，ｉｎｄｕｃｔｅｄｂｙｓｔｒｅｓｓｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ｐｌａｙｒｏｌｅｓｉｎｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
ＡｂｓｔｒａｃｔＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅｂ５６１ｔａｋｅｓｐａｒｔｉｎｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｓｃａｖｅｎｇｅｓ，ｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｓｗｅｌｌａｓ
热带作物学报２０１５，３６（１１）：１９６５ — １９７０

巴西橡胶树HbRALF34的克隆及表达分析

湖南农业大学学报(自然科学版) 2017, 43(6):597–603. DOI:10.13331/ki.jhau.2017.06.004 Journal of Hunan Agricultural University (Natural Sciences) 投稿网址：巴西橡胶树 HbRALF34 的克隆及表达分析聂智毅，黎瑜，康桂娟，蔡海滨，曾日中*(中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室，海南儋州 571737)摘要：依据橡胶树胶乳转录组数据，利用 RT–PCR 技术鉴定了一个快速碱化因子(rapid alkalinization factor,RALF)家族基因 cDNA 序列。

该 cDNA 长度为 767 bp，开放阅读框长度为 411 bp，编码 136 个氨基酸。

序列比对显示该 RALF 基因与 AtRALF34 有较高相似性，因而命名为 HbRALF34。

以热研 7–33–97 无性系橡胶树为材料，采用实时荧光定量 PCR 对不同组织及乙烯、茉莉酸、伤害、过氧化氢、高盐、低温、干旱等处理下 HbRALF34 的表达模式进行分析。

结果表明：HbRALF34 在橡胶树叶片、花、树皮以及胶乳中均有表达，其中胶乳中表达量最高；与健康橡胶树相比，HbRALF34 在死皮橡胶树胶乳及树皮中的表达量显著上调；乙烯、茉莉酸、过氧化氢及伤害处理能诱导该基因表达，而低温、干旱及高盐处理则抑制该基因表达，表明 HbRALF34 可能参与橡胶树的信号传导、产排胶调控以及胁迫响应。

关键词：巴西橡胶树；HbRALF34；快速碱化因子；基因克隆；表达分析文献标志码：A 文章编号：1007−1032(2017)06−0597−07中图分类号：S794.1Cloning and expression analysis of HbRALF34 from Hevea brasiliensisNIE Zhiyi, LI Yu, KANG Guijuan, CAI Haibin, ZENG Rizhong* (Rubber Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree, Ministry of Agriculture, Danzhou, Hainan 571737, China) Abstract: Based on the latex transcriptome date, a cDNA sequence of rapid alkalinization factor (RALF) family gene was identified by RT–PCR. The cDNA is 767 bp in size with a 411 bp open reading frame and encodes 136 amino acids. BLASTX searches of GenBank showed that the deduced amino acid sequences of RALF gene was similar to AtRALF34，thus was named as HbRALF34. Expression profiles of HbRALF34 in different tissues of Hevea brasiliensis clone Reyan 7–33–97 and in response to ethylene (ET), jasmonic acid (JA), wounding, hydrogen peroxide (H2O2), high salt, low temperature and drought were assayed via real–time quantitative PCR (RT–qPCR). The results suggested that HbRALF34 was ubiquitously expressed in the leaves, flowers, barks and latex of rubber tree, and its highest expression was in latex. Compared with healthy rubber tree, the expression level of HbRALF34 was increased in latex and bark of tapping panel dryness rubber tree. Moreover, the expression of HbRALF34 was induced by ET, JA, H2O2 and wounding treatments, but was inhibited by high salt stress, low temperature and drought treatments. All these results suggest that HbRALF34 is likely involved in signal transduction, regulating rubber biosynthesis and latex flow, as well as responding to stress in Hevea brasiliensis. Keywords: Hevea brasiliensis; HbRALF34; rapid alkalinization factor; gene cloning; expression analysis巴西橡胶树(Hevea brasiliensis Muell. Arg.)是一种重要的热带经济林木，其树皮乳管中的胶乳是天然橡胶的重要商业来源。

巴西橡胶树产胶能力的生理生化基础的研究的开题报告

巴西橡胶树产胶能力的生理生化基础的研究的开题报告一、研究背景巴西橡胶树，又称为橡胶树，即墨西哥橡树，是热带橡胶树种中的一种。

它是一种寿命长、高产胶乳及蓬勃生长的植物，是全球最重要的天然橡胶产地之一，也是制造天然橡胶的主要来源。

然而，巴西橡胶树的产胶能力与环境条件、橡胶树生理生化特征等因素相关，但相关研究还相对较少。

因此，通过对巴西橡胶树产胶能力的生理生化基础的研究，可以为提高其橡胶产量、优化其种植管理等提供科学依据。

二、研究内容本研究旨在探究巴西橡胶树产胶能力的生理生化基础，具体研究内容包括：1. 巴西橡胶树的生理生化特征分析，包括橡胶树根系、叶片、茎皮的组织结构、生理指标（如光合作用速率、呼吸作用速率、蒸腾速率等）的测定等。

2. 巴西橡胶树在不同生育阶段的橡胶乳生产能力的测定及分析，包括橡胶乳的比重、干胶含量、橡胶乳中胶原蛋白含量等。

3. 巴西橡胶树产胶能力与环境因素的相关性分析，包括温度、湿度、降雨量等因素对橡胶树产胶能力的影响。

三、研究意义巴西橡胶树的产胶能力对天然橡胶的生产和质量至关重要。

而对橡胶树产胶能力的生理生化基础的深入研究，不仅可以为提高其产胶能力提供科学依据，还可以为制定更加科学的巴西橡胶树种植管理措施提供依据，加快巴西橡胶树的产胶技术创新和推广，促进巴西橡胶树产业的可持续发展。

四、研究方法1. 样本采集：在选取的巴西橡胶树种植区域内，采集不同树龄、不同生长阶段的巴西橡胶树样本。

2. 样品处理：对采集的巴西橡胶树样品进行处理和计量，包括橡胶树各部分组织结构的切片制备、生理指标测定等。

3. 数据统计与分析：对研究得到的生理生化参数等数据进行分析和统计，探究其对巴西橡胶树产胶能力的影响，分析其与环境因素的相关性。

五、研究进度安排阶段一：文献调研与综述阶段二：巴西橡胶树样本采集和处理阶段三：生理生化参数测定及数据分析阶段四：分析巴西橡胶树产胶能力与环境因素的相关性阶段五：论文撰写、提交和答辩六、预期成果本研究预期将揭示和确定巴西橡胶树产胶能力的生理生化基础，并对其与环境因素之间的相互关系进行探究。

一种优化的橡胶树木质部石蜡切片制作方法

一种优化的橡胶树木质部石蜡切片制作方法作者：蔡海滨涂敏等来源：《热带农业科学》2015年第06期摘要针对常规石蜡切片方法无法制得橡胶树木质部切片的问题，优化了橡胶树木质部切片制作方法并进行了验证评估。

以3龄和30龄的橡胶树木材为材料，经FAA固定、乙醇预处理后，增加了以冰醋酸软化木质部这一步骤，用正丁醇取代二甲苯进行组织透明，其余步骤参考常规方法。

结果表明，优化的石蜡切片方法可制作出完整、高质量的木质部切片，其木纤维的长度、宽度与硝酸离析所得到的木纤维一致度高，为橡胶树成龄木材的解剖学研究提供了方法。

关键词橡胶树；木质部；石蜡切片；木纤维分类号 S794.1An Improved Method for Paraffin Section Preparation of Hevea XylemCAI Haibin TU Min HU YanshiCHENG Han AN Zewei HUA Yuwei HUANG Huasun（Rubber Research Institute /Ministry of Agriculture Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree /State Center for Rubber Tree Breeding， CATAS， Danzhou， Hainan 571737）Abstract In this paper， we improved and evaluated paraffin section method of Hevea xylem compared to the conventional method. 3-year-old and 30-year-old rubber tree woods were collected，fixed in FAA， pretreated by ethanol， softened by acetic acid and transparentized by n-butanol replacing xylene. The remaining steps referenced conventional method. The result indicated that the improved method could produce complete， high quality paraffin section of Hevea xylem. The length and width of wood fiber by paraffin section had high consistency with those obtained by nitrate segregation， which provided a method for the study of mature Hevea wood anatomy.Keywords Hevea brasiliensis ； xylem ； paraffin section ； wood fiber中国位于太平洋西岸，海南和广东等沿海地区橡胶生产经常遭受台风的严重危害[1]。

一种提取橡胶树树皮组织全蛋白的方法

一种提取橡胶树树皮组织全蛋白的方法本发明属于植物生物化学领域，涉及一种从橡胶树树皮组织中提取蛋白质样品的方法。

特点是：采用改进的三氯醋酸（ＴＣＡ）－丙酮沉淀法（先抽提后沉淀）结合双乙法提取植物树皮组织中的全蛋白，不仅可以提高样品的得率，还可以有效去除酚和色素等杂质。

本发明可以为与树皮有关的研究提供高质量的蛋白质样品。

一种提取橡胶树树皮组织全蛋白的方法一种高效提取橡胶树树皮组织中总蛋白的方法，包括树皮样品采集和预处理、蛋白质提取和定量，其特征是：１）树皮样品的采集和预处理选择待采集样品的植株，用锋利的小刀刮去采集部位的树皮周皮，然后将树皮分割为若干小块，划割深度到木质部；用刀片撬起树皮，并用锡箔纸包住，做好标记，然后迅速冰浴或者置液氮中，带回实验室，用刀将树皮切成薄片，－７０－８０℃保存备用；２）蛋白质提取采用改进的三氯醋酸－丙酮沉淀法结合双乙法提取植物树皮组织中的总蛋白；具体操作流程为：（１）将干净研钵、包含１０％ＴＣＡ的丙酮溶液Ａ以及丙酮置于－２０℃预冷；（２）称取一定量的样品置于液氮中冷却；（３）用液氮荡洗研钵１－２次，然后将样品置入研钵中，加入样品的质量的０．５％－２％ＰＶＰＰ，然后加液氮研磨树皮样品１０－３０ｍｉｎ，至细粉末状，将粉末盛装于离心管；（４）按１∶１０－２０（ｗ／ｖ）的比例向粉末中加入蛋白抽提液１，ｗ是重量，单位为克、ｖ是体积，单位是毫升，蛋白抽提液１ｐＨ＝８．５、配方为：４－７Ｍ尿素，０．５－２Ｍ试剂Ａ，０．５－２％ＣＨＡＰＳ，０．５－２％两性电解质载体（ｐＨ３．５－９．５），４０ｍＭＴｒｉｓ，％均为质量百分比，Ｍ为摩尔，ｍＭ为毫摩尔；然后加入ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ，ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ的终浓度均为１－２ｍＭ，涡旋混匀，冰浴５－１０ｍｉｎ；（５）加入ＤＴＴ至终浓度为１０ｍＭ，超声５ｍｉｎ，室温放置１ｈ或者３７℃孵育１ｈ，其间不断混匀样品，以充分溶解蛋白；（６）４－１０℃，３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，收集上清液；（７）向上清液中加入相当于５－１０倍体积（ｗ／Ｖ）的溶液Ａ，再加入ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ，ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ的终浓度均为１－２ｍＭ，涡旋混匀，冰浴５ｍｉｎ；加ＤＴＴ至终浓度１０ｍＭ，超声１ｍｉｎ，于－２０℃下静置２－１５ｈ后，４－１０℃、３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，弃上清得到沉淀Ａ；（８）沉淀Ａ用冰浴丙酮重悬浮，冰浴丙酮体积是沉淀Ａ的５－１０倍，再加入ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ，ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ的终浓度均为１－２１０ｍＭ，摇匀，于－２０℃下静置０．５－２ｈ后，４－１０℃、３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，弃上清得到沉淀Ｂ；（９）重复步骤８一至两次，得到沉淀Ｃ；（１０）取出沉淀Ｃ真空干燥或置超净工作台风干５－１０ｍｉｎ，以除尽有机溶剂；所得干粉末置－７０－－８０℃保存备用或接下一步；（１１）按１∶１０－２０（ｗ／ｖ）的比例向干粉末中加蛋白抽提液２，蛋白抽提液２ｐＨ＝８．５、配方：７－９Ｍ尿素，０．５－４％ＣＨＡＰＳ，０．５－２％两性电解质载体、ｐＨ３．５－９．５，４０ｍＭＴｒｉｓ，然后加入ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ至终浓度为１－２ｍＭ，涡旋混匀，冰浴５－１０ｍｉｎ；加ＤＴＴ至终浓度１０ｍＭ，超声１－５ｍｉｎ，室温放置１－２ｈ或者３７℃孵育１－２ｈ，其间不断混匀样品，以充分溶解蛋白，４－１０℃、３０，０００ｇ－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，上清为蛋白溶液Ａ；（１２）向蛋白溶液Ａ中加入ＴＣＡ粉末至终浓度为１２％，充分摇匀使ＴＣＡ溶解，４－１０℃放置３０ｍｉｎ－２ｈ；（１３）４℃、３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，得到沉淀Ｄ，取沉淀Ｄ用４℃预冷的１０－２０倍体积样品的乙醇∶乙醚（１∶１）重悬，于－２０℃下静置０．５－２ｈ；（１４）４℃、３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，弃上清；得到沉淀Ｅ，取出沉淀Ｅ真空干燥或置超净工作台风干５－１０ｍｉｎ，以除尽有机溶剂；（１５）按１∶５－２０（ｗ／ｖ）的比例，向干粉末中加入蛋白抽提液２，然后加入ＰＭＳＦ和ＥＤＴＡ至加ＤＴＴ至终浓度１０ｍＭ，超声２－５ｍｉｎ，然后４－１０℃、３０，０００－４０，０００ｇ离心１０－３０ｍｉｎ，上清即为所需的蛋白溶液Ｂ；（１６）蛋白溶液Ｂ用１．５ｍＬｅｐｐｅｎｄｏｒｆ离心管分装，－７０－－８０℃保存备用；３）蛋白质定量采用Ｂｉｏ－ｒａｄ公司的蛋白质定量试剂盒对所获得的样品进行定量。

一种快速高效适于橡胶树叶片AFLP分析的DNA提取方法

一种快速高效适于橡胶树叶片AFLP分析的DNA提取方法钟淦彬;李维国;郑学项;李海林;颜园园;易晓洁;陈祖兴【摘要】以近200个巴西橡胶树种质材料(品种及无性系)幼嫩叶片为材料,采用改良的CTAB法对其基因组总DNA的提取进行了研究.结果表明,该方法提取的DNA 溶液无色透明,OD260/OD280的比值均为1.8～2.0,1%琼脂糖凝胶电泳为清晰的一条带,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析(引物EcoRI-TA/MseI-CTT)条带清晰,多态性好,说明此方法提取的巴西橡胶树幼嫩叶片基因组总DNA较适于AFLP分析.【期刊名称】《热带农业科学》【年(卷),期】2010(030)005【总页数】5页(P1-5)【关键词】巴西橡胶树;AFLP分析;DNA提取【作者】钟淦彬;李维国;郑学项;李海林;颜园园;易晓洁;陈祖兴【作者单位】中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学环境与植物保护学院,海南儋州,571737;中国热带农业科学院橡胶研究所,海南儋州,571737;海南大学农学院,海南儋州,571737【正文语种】中文【中图分类】S794.1;Q781AFLP(amplified fragment length polymorphism，扩增片段长度多态性)技术由于具有不受环境条件影响、所得带纹丰富、多态性检出率高、灵敏度高、可靠性和重复性好等优点而被认为是最有效的分子标记方法，近年来在植物的品种鉴别及分类、遗传图谱构建和分子标记辅助育种等方面得到了广泛的应用[1～5]。

巴西橡胶树树皮厚壁组织结构和发育研究

巴西橡胶树树皮厚壁组织结构和发育研究史敏晶;李言;王冬冬;田维敏【摘要】植物中的厚壁组织对植株起着重要的支持和保护作用,但目前对橡胶树树皮中该组织的研究较少.以无性系RY7-33-97不同发育阶段的萌条以及无性系PB86、PR107、RY8-79定植7年的树干树皮为材料,利用光学显微技术对树皮中厚壁组织的结构和发育进行较为系统的研究.结果表明,幼嫩萌条的树皮中仅有纤维组织,根据其所在位置可分为皮层纤维和初生韧皮纤维.皮层纤维数量较少,分散分布在皮层中;而初生韧皮纤维常由2～3层纤维细胞形成完整的纤维带围绕在初生韧皮部外侧.成龄大树树皮中仅观察到短石细胞,常成团分布,这些石细胞由薄壁细胞通过同心环的方式木质化加厚细胞壁发育形成.石细胞的内腔中常积累红褐色物质和结晶体,有的石细胞外包有晶鞘.在PB86、PR107、RY8-79三个无性系中,石细胞在树皮中的分布和石细胞壁的厚度具有明显的品系特征.最早出现的石细胞列到砂皮外层这一范围内,石细胞团排列最紧密的是PR107,面积比例为28.9％;其次是PB86,为27.4％;RY8-79中的石细胞团少而稀疏,仅12％,极显著低于PR107和PB86.在PR107中,石细胞壁的厚度最大,约为14 μm;PB86和RY8-79则分别为9和7.8 μm,可见,石细胞壁的厚度PR107极显著高于PB86和RY8-79.这些石细胞的特征可能与不同品系树皮的抗压、抗风能力、割胶难易程度相关,对橡胶树树皮厚壁组织尤其是石细胞的研究将为橡胶树选育种中副性状的选择提供依据.【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2016(037)002【总页数】6页(P311-316)【关键词】橡胶树;厚壁组织;纤维;石细胞;发育【作者】史敏晶;李言;王冬冬;田维敏【作者单位】中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州 571737【正文语种】中文【中图分类】S794.1Abstract The sclerenchyma in plants has supporting and protecting functions, it is, however, still not well known in the bark of rubber tree. In the present study, the structure and development of sclerenchyma in trunk bark of 7-year-old rubber tree clone PB86, PR107 and RY8-79 as well as in the bark of epicormic shoots of rubber tree clone RY7-33-97 at the different developmental stages was observe by using optical microscopy. In the bark of epicormic shoots, only the fiber, a kind of sclerenchyma, was observed. It could be recognized as cortical fiber and primary phloem fiber according to its distribution. The cortical fiber sparsely dispersed in cortex,while primary phloem fiber located outside the primary phloem, in a ring form of 2-3 fiber layers. By contrast, only the brachysclereid was present in the trunk bark of 7-year-old rubber tree clones. The stone cells existed generally in a cluster form and developed from parenchyma cells after the cell wall of the parenchyma cells lignified and thickened in a manner of concentric ring. The stone cells usually contained bronzing materials or crystals in the cavity. Some of stone cells were enclosed with a crystal sheath. The distribution and cell wall thickness of stone cells were clone-specific. Within the area from the innermost stone cell line to the outer layer of the sandy skin, the ratio of stone cells to the area was 28.9% in PR107, 27.4% in PB86, 12% in RY8-79. The thickness of stone cell wall was about 14 μm in PR107, 9 μm in PB86 and 7.8 μm in RY8-79. The difference in the density and cell wall thickness of stone cells may be related to the difference in the capacity of anti-pressure and anti-wind and bark hardness among the three clones. Knowledge about the sclerenchyma, especially the stone cells in the trunk bark of rubber tree will contribute to the selection of related accessory characters in Hevea breeding.Key words Rubber tree; Sclerenchyma; Fiber; Stone cell; Developmentdoi 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.02.016巴西橡胶树是天然橡胶的最主要来源，而橡胶树中的乳管细胞作为合成和贮存橡胶的重要组织，一直是橡胶树树皮组织研究的重点。

生物技术在巴西橡胶树遗传改良中的应用综述

ＴＩＮｎＡＬａｇ
（ｂｅｅａｃｎｔｕｅＣｉｅａｅｙｏｒｐｃｌＡｇｉｌｒＳｉｃｓＤｎｈｕＨａｎｎ５１０）ＲｕｂｒｓｒＩｓｔｔ，ｈｎｓＡｃｄｍｆＴｏｉｒｕｕｅｃｎｅ，ａｚｏｉａ７７０Ｒｅｈｉｅａｃｔｅ
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Ｋｅｒｓ：Ｈｅｅｒｉｉｎｓｓ；ｏｅｈｎｌｇｉｉｒｕｔｅ；ｅｔｃｅｉｅｉｙｗｏｄｖａｂａｓｌｅｉｂｉｎｇｎｅｒｎｇ：ｅｔｃｍｐｒｖ — ｇｎｅｉｉｏｅ
ｎｔｄｃｏｅｏｇｎｏｔｅＦａｌｐｏｂａｅｅＨｏｖｒｈｅｅｏｙｏｓｎｔｒｌｎｇｂｅｄｎａｅｒｐｂｌｎｉｇｔｈｍｉＥｕｈｒｉｃａ．ｙｗｅｅ，ｔｅｈｔｒｚｇｕａｕｅｏｒｅｉｇ，ｔｍｅｏｒｅｎｈｒｌｎｅｅｉｄｒｑｉｅｏｖｌａｉｎｏａｕｅｔａｔｒｔｏｇｌｉｔｏｓｉｆｔｅｓａｄｔｅｐｏｏｇｄｐｒｏｅｕｒｄｆｒｅａｕｔｏｆｍｔｒｒｉａｅｓｒｎｉｔｉｎｓｍａ
中图分类号：７４１￥９．
文献标识码：文章编号：ｌ０．１（ｏｏ０一Ｉ１Ａ０１２ｌ２ｌ）６ｏ一｝７Ｏ
ＡｖｅＯｌＡｐｌｃｔｏｆＢｉｔｃｏｏｙｉｎｅｉＲｅｉｗｉｐｉａｉｎｏｏｅｈｎｌｇｎＧｅｔｃＩｐｒｖｍｅｔｏｅｅｒｓｌｅｓｓｍｏｅｎｆＨｖａｂａｉｉｎｉ

巴西橡胶树树皮结构特征与胶乳产量的相关性

第一作者简介：卢世香，女，１８９４年生，硕士研究生。研究方向：植物发育生物学。通讯作者，田维敏。Ｅｍａ：ｗｉｎ６．ｌ。 — ｉｍｔ＠１３ｃｎｌａｏ
收稿日期：２１ — ４１０００—２修回日期：２１ — ７１０００—２
第３１卷
第８期
热带作物学报
ＣＨＩＳＪＮＥＥＯＵＲＮＡＬＯＦＴＲＯＰＣＡＬＩＣＲＯＰＳ
Ｖｏ．１ｏ８１Ｎ．３
Ａｕ２０ｇ．０１
２１００年８月
巴西橡胶树树皮结构特征与胶乳产量的相关性
１１材料 Biblioteka １１１１８ ’ ．．９１ＩＲＲＤＢ种质这批种质分别于１９９４年和１８９７年定植在中国热带农业科学院试验农场根据２００４年的测产数据．从１８９７年定植的种质中选９份低产种质．从１９９４年定植的种质中选１０份低产
与胶乳产量显著正相关最内层石细胞团以内的次生韧皮部中乳管列数目与次生韧皮部厚度的比值在高产品种
和低产种质间以及在高比区不同无性系间与胶乳产量显著正相关．但在同一无性系的植株间与胶乳产量没有相
产量贡献不大因此．这部分的乳管数量与天然橡胶的产量没有直接联系本研究基于橡胶树的树皮结构．分析几个容易观测的参数与胶乳产量的相关性。为发展橡胶树产量育种的辅助育种技术打下基础。

巴西橡胶树单染色体分离及其高通量测序分析的研究

平革菌酶活性的影响以及酶活性与降解率之间的关系。（2）微波诱变后的诱变菌的酶活性变化以及对低阶煤的降解状况。（3）紫外，微波处理的球红假单胞菌对DBT 的降解状况及最适诱变时间。（4）利用响应面处理的方法探索影响DBT降解效果的因素。（5）球红假单胞菌对其他含硫模型化合物的降解。
6.3 技术路线
紫外诱变白腐菌酶酶活性检测褐煤降解率检测红外分析扫描电镜分析酶活性大小对比，最适诱变时间微波诱变白腐菌酶活性检测褐煤降解率检测红外分析扫描电镜分析
降解率对比，最适诱变时间
紫外，微波诱变效果大小对比分析
技术路线
紫外诱变白腐菌降解 DBT 2-HBP检测脱硫效果对比分析球红假单胞菌降解DBT 的响应面实验紫外诱变球红菌降解 DBT 2-HBP检测
创新点

（1）目前，对于利用紫外、微波诱变方法，筛选诱变菌种已做了大量的研究工作，但是这两种处理方法对降解酶系的活性和产量有无影响，以及降解酶活性与降解转化率之间的关系还有待于进一步探索。（2）球红菌可以降解转化DBT已被我们所熟知，但是紫外或是微波处理后的菌种对其降解效果还未被探究。（3）球红菌对其他的含硫模型化合有无降解能力，降解效果如何，降解产物具体是那些等问题还未被探究。（4）首次利用响应面的方法探索了球红菌降解DBT的影响因素的最佳组合（5）结合生物酶提纯技术，首次探索了紫外，微波诱变处理后降解酶的浓度变化与酶活性变化。.
安徽理工大学13级硕士研究生学位论文答辩报告
煤炭及含硫模型化合物生物降解转化的研究
专业：矿物加工工程姓名：邵雪嫚导师：张明旭教授
报告主要内容

课题来源立题依据国内外研究进展本研究的目的和意义研究内容研究方法和技术路线预期目标新颖之处所需解决的主要问题研究基础和条件研究进度及经费预算

橡胶树树皮细胞木质素显示方法的比较分析

橡胶树树皮细胞木质素显示方法的比较分析作者：史敏晶张世鑫丁欢蒋毅田维敏来源：《热带作物学报》2023年第10期关键词：巴西橡胶树；木质素；番红染色；薄壁细胞；荧光巴西橡胶树（HeveabrasiliensisMuell.Arg.，以下简称橡胶树）是最重要的人工栽培多年生产胶植物，为世界所需天然橡胶的主要来源[1]。

橡胶树树皮中的乳管作为天然橡胶合成和储存的特异组织，与天然橡胶的生产息息相关。

割胶是当前从橡胶树乳管组织中获取天然橡胶的唯一途径，割胶后橡胶树乳管的排胶速度和排胶时间直接决定着胶乳的产量。

因此，割胶后的排胶机理一直受到研究者的極大重视[2-5]。

橡胶树成熟乳管的封闭性结构和特殊的内含物导致了完整的乳管内部存在极高的膨压，高达10～15个大气压[6-7]，割胶后开放的割口压力与外界大气压相同，因此由外到内逐步增加形成一个压力梯度，这一压力梯度驱动胶乳向外涌流，形成了胶乳外排初始阶段的主动力。

可见，橡胶树的膨压与排胶密切相关。

已有研究表明，细胞壁的弹性在维持细胞膨压中具有重要作用[8-9]，弹性越好能维持的膨压也越高；细胞壁的硬度和刚性越大，则膨压越低[10-11]，而细胞壁的结构特征决定其弹性和刚性、硬度。

细胞壁作为植物细胞最重要的特征结构，也是最早被观察到的细胞结构，在很长的一段时间内被认为是一成不变的简单结构，随着科学的发展其作为一个高度动态变化的复杂网络结构才被认识到[12]。

植物化学分析表明，纤维素、半纤维素、果胶质和木质素等构成了细胞壁的主要成分，并在不同物种、组织、细胞类型中含量和结构都有差别[13]。

木质素作为植物体中仅次于纤维素的第二大有机物质，其在细胞壁中含量的高低被证明对植物木材细胞的弹性和硬度有显著影响[14]，进而影响膨压[15]。

晁金泉等[16]研究发现排胶通畅的橡胶树无性系RY8-79的树皮内层木质素的含量低于排胶凝滞的无性系PR107，而AN等[17]证明RY8-79的膨压明显高于PR107，可见在橡胶树树皮中木质素含量的高低与膨压之间存在关联。

观察木质部薄壁组织的切片混合染色液和切片的制备方法

观察木质部薄壁组织的切片混合染色液和切片的制备方法木质部是大多数植物体内的一种组织，它的主要功能是提供支撑和运输水分和营养物质。

在观察木质部的时候，我们通常需要制备切片并对其进行染色。

这篇文档将介绍一种常用的方法，即使用混合染色液制备木质部切片并进行观察。

制备切片的方法：1. 取一棵木质部丰富的植物（例如桉树），用锯子将其干枝段切成薄片。

2. 把薄片置于加热的盛有蒸馏水的玻璃器皿中，让其温度达到70℃以上，持续15分钟以上，以软化细胞。

3. 将软化的薄片取出，用刀片在细胞的衰脆部分将其切成薄片，约1mm左右的厚度。

4. 将切好的薄片放入一瓶中性缓冲液中，用手轻轻晃动瓶子，使缓冲液均匀分散。

5. 把处理好的切片放在切片微调台上，用调节杆先将其压平，再用中小剪刀将其修整为所需的大小。

制备混合染色液的方法：1. 取一小瓶苏木精，加入500ml蒸馏水，摇匀。

2. 取一小瓶伊红，加入500ml蒸馏水，摇匀。

3. 将苏木精溶液和伊红溶液混合，使其比例为3:2，即苏木精液：伊红液＝3:2。

摇匀混合液即可得到混合染色液。

使用方法：1. 取出制备好的切片，用滴管滴上少量的混合染色液，并在切片上涂匀。

2. 将切片在盖片中心位置摆放，用镊子把盖玻片放在切片上面，使其压平。

3. 用一块干净的滤纸轻轻地压在盖玻片上，以吸去多余的染色液。

4. 把制作好的切片放入显微镜中，用40倍或100倍物镜下观察即可。

需要注意的是，在制备切片和染色的过程中，一定要注意卫生干净，避免外来微生物的污染。

此外，在染色过程中，要保证染色时间的准确性和染色液的均匀性，以免影响结果的准确度。

总之，观察木质部薄壁组织的切片混合染色液和制备方法是一种常见的、简单易行的方法。

通过这种方法可以有助于对木质部细胞、薄壁组织及其各种特征的了解，为植物学研究提供了方便和支持。

巴西橡胶树胶乳中IAA和iPA含量的季节变化及其与产量的关系

巴西橡胶树胶乳中IAA和iPA含量的季节变化及其与产量的关系曹建华;林位夫;陈俊明【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2009(000)015【摘要】采用酶联免疫检测技术测定了3种由巴西橡胶树花药离体组织培养的无性系组成的芽接树PR107/热研88-13、PR107/海垦2和PR107/大丰99接穗(PR107)胶乳中生长素(IAA)、细胞分裂素(iPAs)的含量在一年中不同季节的变化情况.同时利用DH925A型微波胶乳测试仪测定了胶乳干舍(DRC),分析了它们之间的相互关系,结果表明:同一嫁接组合材料在不同月份采胶.胶乳中IAA或iPA含量差异极显著,胶乳中IAA和iPA含量受季节影响明显;割胶对胶乳中IAA和iPA舍量有显著的影响,割胶后二者含量成倍增加:不同砧木材料(热研88-13、海垦2和大丰99)对同一接穗(PR107)胶乳中的IAA和iPA含量的影响是不同的,二者的含量在不同嫁接组合中存在显著差异;IAA、IAA/iPA与胶乳干含呈显著正相关,iPA与胶乳干含的相关性不显著(但接近显著相关水平).表明IAA和iPA参与了产胶调节;干胶产量与胶乳中IAA和iPA含量及IM/iPA比值具有一定正相关关系,但相关性不显著.【总页数】5页(P182-186)【作者】曹建华;林位夫;陈俊明【作者单位】中国热带农业科学院橡胶所,海南,儋州,571737;农业部热带作物栽培生理重点开放试验室;中国热带农业科学院橡胶所,海南,儋州,571737;农业部热带作物栽培生理重点开放试验室;中国热带农业科学院橡胶所,海南,儋州,571737;农业部热带作物栽培生理重点开放试验室【正文语种】中文【中图分类】S794.1【相关文献】1.酒精阳性牛乳中无机盐含量与季节变化关系的研究 [J], 刘景华;宫向义2.巴西橡胶树胶乳核酸含量与产量及死皮关系的研究 [J], 曾日中;黎瑜3.一种测定巴西橡胶树胶乳中过氧化氢含量及其在胶乳各组分中分布的方法研究[J], 蔡甫格; 王立丰; 史敏晶; 田维敏4.一种测定巴西橡胶树胶乳中过氧化氢含量及其在胶乳各组分中分布的方法研究[J], 蔡甫格; 王立丰; 史敏晶; 田维敏5.硼与小麦不同器官中IAA、GA_3、iPA和ABA含量的关系 [J], 严红;刘娜;金剑;孙彦坤;于淑萍;李文雄因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

环氧树脂包埋HE染色试验步骤2016.4.20_张丽

环氧树脂包埋-半薄切片-HE染色1，环氧树脂包埋1.1取材1.1.1快：组织从活体取下后应在最短时间内(争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液。

1.1.2小：一般不超过1mm×1mm×1mm。

也可将组织修成1mm×1mm×2mm 大小长条形。

因为固定剂的渗透能力较弱，组织块如果太大会影响细胞超微结构的保存。

1.1.3 轻：机械损伤要小，解剖器械应锋利，操作宜轻，避免牵拉、挫伤与挤压。

1.1.3冷：所用的固定液、操作工具要预先冷藏，操作环境温度最好在低温(0℃～4℃)下进行，以降低酶的活性，防止细胞自溶。

1.1.4准：取材部位要准确，即各组实验动物必须取材在同一脏器的同一位置，这样才能有较可信的比较。

1.2 固定2.5%戊二醛固定2小时以上，pH7.2～7.4。

固定完毕，用缓冲液漂洗30分钟后进行脱水。

1.3 脱水70% 丙酮15分钟，80% 丙酮15分钟，90%丙酮15分钟，100%丙酮20分钟(分二次进行)1.4 浸透和包埋将组织块包埋在多孔橡胶包埋模板的环氧树脂中浸透，然后置烤箱烘干，在45℃(12小时)、60℃(36小时或更长)烤箱内加温，即可聚合硬化，形成包埋块。

1.5 注意事项：(1)所有试剂要防潮，最好存放在干燥器中；(2)所用器皿应烘干；(3)配包埋剂时，每加入一种试剂要搅拌均匀；(4)包埋时动作要轻巧，防止产生气泡；(5)皮肤尽量不要接触包埋剂，以免引起皮炎；(6)盛放过包埋剂的容器要及时用丙酮清洗干净；（7）操作过程最好在通风柜中进行。

2，半薄切片制备按常规环氧树脂包埋法将组织制成包埋块, 在半薄切片机上切成0.5-1μm的半薄切片，切片于组织切片于65℃烤箱中过夜。

3，试剂配制配制饱和氢氧化钠无水乙醇溶液, 静置一周, 使溶液呈黄褐色。

取上述溶液与二甲苯按3:1(V/V) 混合成工作液( 临用前配制) 。

4，脱环氧树脂将半薄切片置工作液中5 -10min，捞出经无水乙醇洗后镜下观察以确认树脂脱净；弃掉工作液，无水乙醇清洗 5 min x 3 次, 此时脱树脂完成。