紫外-可见分光光度法动态分析承德地区山楂叶总黄酮的含量
山楂叶总黄酮分光光度法测定—科标检测
山楂叶总黄酮的测定—分光光度法—科标检测方法名称： 山楂叶—总黄酮的测定—分光光度法应用范围：本方法采用分光光度法测定山楂叶中总黄酮（以无水芦丁计算)的含量。
本方法适用于蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifidaBge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶。
方法原理： 本品细粉置于索氏提取器中，依次加入三氯甲烷和甲醇提取，蒸干，加稀乙醇溶解，滤过，续滤液中依次加入水、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液一定量，摇匀，放置，立即置紫外可见分光光度计, 于波长500nm 处测定吸光度，以无水芦丁（C27H30O16)计算总黄酮含量。
试剂：1. 三氯甲烷2 .5%亚硝酸钠溶液3 .10%硝酸铝溶液4.氢氧化钠试液仪器设备：1. 紫外-可见分光光度计2. 索氏提取器试样制备： 对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品25mg ，置50mL 量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。
精密量取20mL ，置50mL 量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每1 mL 中含无水芦丁0.2mg 的溶液。
操作步骤： 1. 标准曲线的绘制精密量取对照品溶液1 mL 、2 mL 、3 mL 、4 mL 、5 mL 、6 mL ，分别置25 mL 量瓶中，各加水至6 mL ，加5%亚硝酸钠溶液1 mL ，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1 mL ，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10 mL ，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，立即照分光光度法，在500nm 波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 供试品的测定取本品细粉1g ，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇继续提取至无色（约4小时)，提取液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，转移至50 mL 量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，作为供试品储备液。
山楂中总黄酮的提取及含量测定
山楂中总黄酮的提取及含量测定（吕培银）一、实验目的1.掌握黄酮类物质的提取方法。
2.掌握分光光度法测定黄酮含量的原理。
二、实验原理山楂富含黄酮类化合物，具有重要的生理活性和药效。
黄酮化合物的母核由C6-C3-C6即A-C-B三个环组成，A环和B环具有芳香化合物的性质，C环具有黄酮化合物的独特性质。
母核中某些位置如C3和C5上含有羟基或具有邻二酚羟基时能与铝、铅等金属离子形成稳定的络合物，这些络合物在光谱上产生明显变化。
黄酮与金属离子的这种作用不仅可以用于鉴别这类成分中羟基的位置，还可以作为进行定量分析的基础。
本实验利用碱性条件下，在亚硝酸盐存在时，硝酸铝与黄酮进行络合反应，生成红色络合物，且在500 nm左右有最大吸收，可利用分光光度法进行测定。
因此，本实验采用索氏提取法提取山楂中的总黄酮，并采用分光光度法对其含量进行测定。
三、实验用品1、仪器：索氏提取器、平底烧瓶、电热套、量筒、试管、容量瓶、移液管、玻璃比色皿、可见分光光度计等。
2、药品：山楂粉末、无水乙醇、芦丁标准品、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等。
四、实验内容1、山楂总黄酮的提取精密称取山楂粉末6 g,滤纸包好后置于250 mL索氏提取器中，加60%乙醇150 mL，连续回流提取1-1.5h, 冷却，将提取液转移至250 mL的容量瓶中，将圆底烧瓶润洗3次，60%乙醇定容至刻度线，摇匀，过滤。
取1 mL滤液稀释至10mL,摇匀，即为样品待测溶液。
2、芦丁标准溶液的配制精密称取芦丁20 mg，加入60 mL无水乙醇超声使其溶解后，以蒸馏水定容至100mL，摇匀，即得0.2 mg/mL的芦丁标准液。
3、芦丁标准曲线的制定分别精密吸取芦丁标准液5mL、6mL、7mL、8mL、9mL至10mL容量瓶中，60%乙醇定容后得到浓度为0.10 mg/mL、0.12 mg/mL、0.14 mg/mL、0.16mg/mL 和0.18mg/mL的芦丁系列浓度梯度溶液。
山楂叶中黄酮类提取工艺与质量标准的研究
山楂叶中黄酮类提取工艺与质量标准的研究一、实验目的1 掌握从山楂叶中提取总黄酮的原理、方法及操作要点。
2掌握正交试验的原理及方法。
3 掌握UV含量测定、TLC的原理和方法。
二、实验原理利用正交试验法筛选最佳提取工艺，以总黄酮量为指标，芦丁为对照品进行含量测定，以得出的最佳工艺做验证实验，TLC的结果做质量标准的研究。
三、材料与仪器材料：山楂叶、芦丁标准品、聚酰胺板试剂：95%乙醇、甲酸、NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、AlCl3仪器：UV2550紫外可见分光光度计(日本岛津)、循环水式真空泵、旋转蒸发仪、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、层析缸、电子天平四、实验步骤1 山楂叶总黄酮的提取用剪刀将干燥的山楂叶剪碎，准确称取5.0g置于烧杯中，称取9份用来做正交试验，根据正交试验要求加入一定浓度、体积的乙醇回流提取一定时间。
趁热抽滤，用50ml 50%乙醇洗涤，合并滤液，减压浓缩至体积小于100ml，用60%乙醇定容至100ml，作为待测液。
2 标准曲线的制备将芦丁于120℃干燥至恒重，精密称取芦丁标准品9.28mg，用60%乙醇溶解，定容于50ml，得浓度为0.186mg/ml芦丁标准液。
准确吸取芦丁标准液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml于25ml容量瓶中，每瓶加去离子水至6ml，加5% NaNO2溶液1ml，摇匀，放置6min 后加入10% Al(NO3)3溶液1ml，摇匀，放置6min后加入4%NaOH溶液10ml，去离子水定容，摇匀，15min后于500nm处测定吸光度A，得芦丁含量与A之间的回归方程。
3 山楂叶总黄酮的测定准确吸取待测液0.4ml于25ml容量瓶中，步骤同上，测定其在500nm 处吸光度，计算每组山楂叶中总黄酮含量。
算出正交试验中的K和R 值，从而得出最佳工艺。
4 验证实验根据最佳工艺，做验证实验，提取、含量测定方法如上。
5 TLC鉴定吸附剂：聚酰胺板展开剂：乙醇-甲酸-水（4:0.01:1 v/v/v）以最佳工艺提取出的溶液为供试品溶液，另取配好的芦丁对照品溶液各2-3μl，分别点于同一聚酰胺板上，以乙醇-甲酸-水（4:0.01:1 v/v/v）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。
可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量实验讨论
可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量实验讨论
大山楂丸中总黄酮的含量可以采用可见分光光度法来测定。
1. 实验目的：测定大山楂丸中总黄酮的含量。
2. 实验原理：可见分光光度法利用物质对可见光的吸收特性来测定物质的浓度。
总黄酮具有一定的吸收特性，可以通过测量吸光度来计算其浓度。
3. 实验步骤：
a. 准备样品：将大山楂丸样品粉碎并称取适量。
b. 提取黄酮：使用适合的溶剂（如乙醇）将黄酮提取出来。
c. 制备标准曲线：准备一系列不同浓度的黄酮标准溶液，然后使用分光光度计分别测量吸光度。
d. 测量样品吸光度：将提取的样品溶液使用分光光度计测量吸光度。
e. 计算黄酮含量：根据标准曲线的吸光度-浓度关系，计算出大山楂丸中总黄酮的含量。
4. 实验结果：根据测量得到的吸光度值和标准曲线，计算出大山楂丸中总黄酮的含量。
5. 实验讨论：
a. 实验方法的准确性和重复性：可以进行重复实验，计算相对标准偏差或百分相对标准偏差来评估方法的准确性和重复性。
b. 实验条件的选择：实验中需要选择合适的波长和溶剂，并对提取方法进行优化，以获得最佳的测量结果。
c. 样品处理的改进：可以尝试不同的提取方法，如其他溶剂或萃取工艺，以提高黄酮的提取效率。
d. 可行性和适用性分析：可以对其他样品进行类似实验，评估方法的适用性和可行性。
紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量
紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量【摘要】目的建立测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量的方法。
方法采用紫外可见分光光度法，检测波长为500nm，无水芦丁为对照品。
结果芦丁在8.12～48.72μg/ml范围内呈良好的线性关系，r=0.9998（n=6），平均回收率为100.0%，RSD=0.13%（n=6）。
结论所用方法灵敏、准确、重现性好、结果可靠，可用于注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量测定。
【关键词】注射用山楂总黄酮；总黄酮；紫外可见分光光度法；含量测定山楂总黄酮即山楂叶总黄酮，是从山楂叶中提取的黄酮类化合物的总称，目前从山楂总黄酮中分离出的单体有三十多种，有牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、槲皮素等。
山楂叶中的黄酮类化合物的药理作用有很多方面，例如对心、脑血管疾病有确切明显的疗效，山楂总黄酮对心绞痛、冠心病、心律失常、脑供血不足、脑动脉硬化症、脑血栓、老年性痴呆及各种脑损伤后遗症可产生积极的预防和治疗作用。
1.仪器与试药TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；AE240电子天平（瑞士梅特勒公司）；所用试剂均为色谱纯。
2.方法与结果2.1线性关系考察对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品约10.08mg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（每1ml含无水芦丁0.2030mg）[1]。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，使摇匀放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置20分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版一部附录V A），在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、测试溶液中对照品浓度为横坐标绘制标准曲线。
总黄酮含量测定
1 总黄酮含量测定1．1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法．重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。
1．1．1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。
具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。
1．1．2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。
常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。
1．1．3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。
而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。
1．1．4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。
在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。
如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1 ～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。
2 药理作用2．1 镇痛作用赵铁华等［4］研究结果显示灌胃、腹腔注射、皮下注射适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮，对实验动物经化学和热刺激导致的疼痛反应皆有一定的抑制作用，其镇痛作用机制与中枢作用相关。
银杏总黄酮( TFG) 腹腔内注射可显著抑制甲醛致小鼠疼痛反应，延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。
山楂叶的研究进展_陈四平
山楂叶的研究进展陈四平1,臧亚茹2(1.承德医学院中药研究所,河北承德 067000;2.承德医学院附属医院) 【关键词】山楂叶;研究进展 【中图分类号】R282.7 【文献标识码】A 【文章编号】1004-6879(2003)02-0164-02 山楂为蔷薇科植物,在我国具有悠久的保健与药用历史。
过去我们注重其果实方面的效果,但近几年随着提取工艺,检验手段的提高,对于山楂叶的研究有了很大进展,尤其是其在心血管系统方面有效的治疗保健作用以及抗衰老等作用,使之更加受到人们的青睐。
本文介绍国内外对山楂叶提取物及其制剂的有关化学,质量控制及生物活性,供开发山楂叶制剂参考。
1 化学1.1 化学成分 近年来对山楂叶化学成分的研究有了很大的进展,其主要成分为黄酮类。
黄酮也是山楂叶生理活性的主要成分,现已分离得到的主要有槲皮素(quercetin)、金丝桃甙、牡荆素(V it exin)、牡荆素2″-O-鼠李糖苷(V it exin-2″-0-rham no syl)[1]、pinnatifidaA、pinnat ifidaB、6″-0-乙酰基牡荆素(V itex in-6″-0-acety l)、2″-0-乙酰基牡荆素(V it exin-2″-0-acetyl)[4],pinna tifidaC、pinnatifidaD[5]。
除此之外,云南山楂叶中还含有芦丁[2],大果山楂中含有5,7,4ø-三羟基黄酮-8-C-B-D-葡萄糖(1→4)-B-D-葡萄甙[3]。
此外,还含有熊果酸[2],对羟基苯甲苹果酸[2-(4-hydr ox ybenzy l),ma lic-acid][1]等有机酸类;山梨醇(sor bitol)[1],二十乙烷醇[2]等有机醇类;还含有胡萝卜甙[2],盐酸二乙胺(diethy amine hydro chlor ide[1]等其它成分。
1.2 提取与精制1.2.1 水提法:干燥山楂叶粉碎,加热水提取,水提液过聚酰胺柱,乙醇洗脱得总黄酮[2]。
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量_滕晓弘
表 3 精密度结果
次数
1
2
3
4
5
R SD (% )
A
0. 631 0638 0. 644 0. 637 0. 652
1. 2
2. 7 重复性实验 取同一批号的样品 5份, 按供试 品溶液制备方法制备, 精密吸取 2m L, 照 / 标准曲线的 测定0中的方法测定吸收度, R SD 为 1. 8% , 表明该方 法测定总黄酮重复性良好。
不同方法提取的山楂叶总黄酮含量的测定
山楂叶系蔷薇科植物山楂 （ 012324567 89::239;9<2 的叶子， 其中含有黄酮类化合物。大量研究表 =54） 明， 黄酮类化合物具降血脂的药理作用。本文用分 光光度法对山楂叶提取物中的总黄酮含量进行测 定。结果报告于下。 " 材料、 方法与结果
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（上海第二分 ")" 仪器和试药 %!! 光栅分光光度计 析仪器厂） ； 芦丁标准品 （中国生物制品鉴定所） ； 氢氧 ； 化钠试液 （称取 ’5 氢氧化钠溶于 "$$>? 蒸馏水中） （!#5 亚硝酸钠溶于 #$$>? 蒸馏水中） ； #*亚硝酸钠 硝酸铝 （ 硝酸铝溶于 蒸馏水中） 。 "$* #$5 #$$>? " ) ! 标准曲线的绘制 用 " ) ! ) " 芦 丁 标 准 液 精 密 称 取 芦 丁 !$ ) !>5， 作为对照品溶液。 ,$* 的乙醇溶解并稀释至 "$$>?， 分别置 ")!)! 标准曲线 精密量取 "、 !、 (、 ’、 #、 ,>?， 各加水至 ,>?， 加 #* 亚硝酸钠溶液 !#>? 容量瓶中， 使混匀， 放置 ,>9:， 加 "$* 硝酸铝溶液 ">?， 使混 ">?， 匀， 放置 ,>9:， 加氢氧化钠试液 "$>? 再加水至刻度、 随行试剂空白对照。按分光光度法 摇匀， 放置 "#>9:， 在 #$$:> 波长处测定吸收度， 所取标准液的浓度和吸 收度数据经回归处理， 回归方程为 ! @ $ " ’"+% # A $ " 芦丁浓度在 $) !$! B ") $$#%+-， $ @ $)----。结果表明， !"!>5 C >? 范围内具良好的线性关系。 取山楂叶适量， 用乙醇液加热 ")( 样品的测定 （"） 回流提取， 过滤， 得粗提取液。乙醇浓度的选择： 取山 楂叶适量精密称定， 分别加 +$* 、 %$* 、 ,$* 、 #$* 乙 醇液 +$>?， 回流提取 (D， 过滤， 残渣分别用提取溶剂 洗 ( 遍， 同滤液合并入 "$$>? 量瓶中， 并加乙醇至刻 度， 按标准曲线项下的方法测定总黄酮的含量， 结果 本实 表明， 乙醇浓度在 ,$* 时提取效率最高。因此， 验采用 ,$* 醇作为提取总黄酮溶剂的第一步。
山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测
山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测1项目设计的意义山楂为蔷薇科植物，资源丰富,叶片中含有的黄酮类化合物具有降压、降血脂、软化血管、增加冠状动脉流量、助消化等药理作用。
随着人们健康观念的更新以及黄酮类化合物越来越广泛的生物活性被发现,其开发利用已成为目前的一个研究热点。
研究证实,山楂叶和果含有相近的营养及药用成分,特别是总黄酮含量远高于果实,有很高的利用价值。
但长期以来,人们只注重果实的利用,而山楂叶则自生自落,白白浪费。
超声波法提取总黄酮具有简单、低成本、快速、有效的优点,且不破坏其有效成分。
为了充分开发利用山楂叶这一丰富的资源,本试验对山楂叶总黄酮的超声波提取工艺条件进行了研究,为进一步合理开发利用山楂资源提供理论依据。
2项目设计的原理2.1超声波提取法原理用超声波法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。
它的原理是超声波的空化作用对细胞膜的破坏有助于黄酮类化合物的释放与溶出,超声波使提取液不断震荡,有助于溶质扩散,同时超声波的热效应使水温基本在57℃,对原料有水溶作用。
因此,超声波法大大缩短了提取时间,提高了有效成分的提取率和原料的利用率，且实验可在室温下进行,设备简单,操作方便,是提取山楂中黄酮类物质的一种有效方法。
2.2测定原理黄酮类化合物主要包括黄酮苷和黄酮醇苷两大部分，三氯化铝与黄酮类化合物作用后，生成黄酮的铅盐络离子，呈黄色，颜色的深浅与黄酮的含量成一定的比例关系，可以定量测定。
3主要仪器及试剂KQ-5000DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司,额定功率为500W),754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司),JA-5003A型千分之一电子天平,DHG-9146A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司),RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)及其他玻璃仪器。
芦丁为生化试剂，乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等均为分析纯。
4实验内容和步骤4.1山楂叶总黄酮超声波法提取工艺条件的筛选(1)准确称取干燥山楂叶1.000g,加入20mL(料液比1:20)体积分数分别为60%、70%、80%、90%的乙醇,在40℃下以80%超声功率(400W)提取30min,测定其黄酮的提取率。
紫外分光光度法检测山楂总黄酮方法的建立_张雪
称取以上样品各数份， 分别添加适量标准， 按前 述操作进行处理， 测定， 以加样测得量减去原样含 量， 除以加样量， 计算回收率， 结果见析
２．１ 最佳检测波长的选择及标准曲线线性关系考察
紫外扫描结果表明， 芦丁在 ５１０ｎｍ 处的吸收值 最大， 即 ５１０ｎｍ 为芦丁的特征吸收峰值， 故检测波长 确定为 ５１０ｎｍ。经线性回归表明， 芦丁在 ０～０．６１８ｍｇ 范围内呈良好的线性关系， 达到显著水平。典型的标 准曲线如图 １ 所示。回归方程为 Ｙ＝１．２３８９Ｘ＋０．００３９
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ：ｒｕｔｉｎ； ｆｌａ ｖｏｎｅ ｏｆ ｈａ ｗｔｈｏｒｎ； ｓ ｐ ｅ ｃ ｔｒｏｐ ｈｏｔｏｍｅ ｔｒｙ
中图分类号： ＴＳ２０７．３ 文献标识码： Ａ 文 章 编 号 ： １００２－ ０３０６（ ２００７） ０７－ ０２００－ ０３
山 楂 中 含 有 多 种 黄 酮 类 化 合 物［１］。近 年 来 的 许 多 研究证明， 山楂对心血管系统有降压、增加冠脉血流 量、改善心肌供血供氧等功效 ， 对高血压、高血脂、冠 心病、心绞痛等症均有较好的疗效 ， 是防治心血管疾 病较好的天然植物资源 ， 其重要有 效 成 分— ——山 楂 总 黄 酮 ， 据 分 析 主 要 为 牡 荆 碱 鼠 李 糖 苷 （ ｖｉｔｅｘｉｎ ｒｈａｍｎｏｓｉｄｅ） 、 单 乙 酰 牡 荆 碱 鼠 李 糖 苷 （ｍｏｎｏａｃｅｔｙｌ ｖｉｔｅｘｉｎ ｒｈａｍｎｏｓｉｄｅ）、金 丝 桃 苷 （ ｈｙｐｅｒｓｉｄｅ） 及 山 楂 酸 （ ｃｒａｔａｅｇｉｃ ａｃｉｄ） 等［２］。山楂中黄酮类化合物是防 治 心 血管疾病及降血脂的有效成分， 由于各类黄酮物质 的理化性质差别很大， 因而检测手段也不可能统一。 有关总黄酮的测定方法有 ： 戴维斯法［３］、薄层层析－ 比 色法［４］、微分脉冲极谱 法［５］、硝 酸 铝 显 色 法［６］、紫 外 分 光 光度法［７］等。鲜山楂果胶含量达 ３．０％以上， 但上述方 法均忽略了山楂果胶对总黄酮含量的影响。本实验 针对上述检测方法存在的问题， 根据现有条件对硝 酸铝显色－ 分光光度法进行改进， 以芦丁为标准品， 利用果胶酶将山楂果肉中的果胶分解后， 再进行黄 酮的含量分析， 减少果胶对检测黄酮的影响， 建立起
山楂片中黄酮类物质的提取与检测
山楂片中黄酮类物质的提取与检测一、前言：山楂是我们冬天最喜欢吃的食物之一，黄酮成是山植中主要成分之一。
有资料表明:山植黄酮类物质对252例冠心病心绞痛病人总有效率为为 94.4 %。
对降低血脂总有效率达 85 %,对治疗冠心病、心肌炎及心肌病引起的早博总有效率为 62·5 %。
此外,对降低舒张压, 防治心律失常、心血管病和化痰也起重要作用二、材料、试剂、主要仪器设备材料：廊坊师院10教后采集的山楂叶试剂5 % 乙醇AR;无水乙醇;5％NaNO溶液 20％AL（NO3）3 溶液; ４％Na（OH）溶液;主要仪器设备:紫外光 /可见光自动记录分光光度计 ;高速离心机; 三．提取、纯化取干山植叶50g ,经破碎成1cm2左右。
置于烧杯中,加入蒸馏水加热煮沸3 h。
冷却后进行粗滤,滤液用高速离心机分离。
4000r/min;20min。
弃去滤渣。
滤液蒸发器上进行浓缩。
加热温度,加热温度 7 0 ℃浓缩液冷却后加入等体积95％乙醇。
放于冰箱内2h。
进行分离,高速离心机5000r/min3分钟,弃去粘稠滤渣。
滤液于蒸发器蒸馏( 7 0 ℃ );。
待乙醇蒸发后,将浓液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体、然后粉碎得终产物。
再将浸提过的山植叶再以同样方法处理2次。
合并3次产物,称重计收率。
四、黄酮类物质的测定芦丁标准曲线的建立（1）配置标准溶液精密称量干燥至芦丁样品10mg，置与50ml容量瓶中，加无水乙醇30ml轻摇使之充分溶解，定容摇匀得0.2mg/ml的芦丁标准溶液（2）测绘标准曲线，根据中国药典委员会规定的紫外分光光度计法，以芦丁标准品进行测量。
精密吸取标准溶液0、1、2、3、4、5和6ml 分别置于250ml容量瓶中，加水至6ml，加5％NaNO2溶液1ml后摇匀，静置6min加10％AL（NO３）３溶液１ｍｌ，摇匀静放６ｍｉｎ加入４％的Nａ（ＯＨ）溶液１０ｍl，摇匀后加水至刻度，摇匀放置15分钟，立即在510nm波长处测量吸光度（A）值，以吸光度为横坐标，浓度（C,m/v）为纵坐标测绘曲线，计算曲线的回归方程。
山楂叶中总黄酮含量的测定
山楂叶中总黄酮含量的测定(2) 山楂叶是一种常见的中药材，具有多种药用价值。
其中，总黄酮是山楂叶中的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有重要作用。
因此，准确测定山楂叶中总黄酮的含量对于其质量控制具有重要意义。
下面将介绍一种常用的测定山楂叶中总黄酮含量的方法。
实验仪器与试剂准备：1. 超声波萃取仪2. 高效液相色谱仪（HPLC）3. 山楂叶样品4. 乙醇（优级纯）5. 甲醇（色谱纯）6. 乙酸乙酯（色谱纯）7. 乙酸乙酯-甲醇（10:90，体积比）8. 乙酸乙酯-甲醇（30:70，体积比）9. 乙酸乙酯-甲醇（50:50，体积比）10. 水实验步骤：1. 将山楂叶样品晒干，研磨成粉末备用。
2. 取一定量的山楂叶粉末，放入超声波萃取仪中，加入适量的乙醇，超声提取30分钟。
3. 将提取液过滤，取上清液，用甲醇稀释至一定体积。
4. 准备好浓度梯度的乙酸乙酯-甲醇溶液（10:90、30:70、50:50）。
5. 在HPLC中设置好流速、柱温等参数，使用梯度洗脱法进行测定。
6. 取一定量的提取液，经过色谱柱进行分离，使用紫外检测器检测吸光度。
7. 根据峰面积与标准曲线的对照，计算出山楂叶中总黄酮的含量。
实验注意事项：1. 实验室操作时要注意安全，佩戴实验手套、眼镜等防护设备。
2. 实验过程中要保持操作环境干净，避免样品受到外界污染。
3. 在实验过程中，要严格按照测定步骤进行操作，确保实验结果的准确性。
4. 实验过程中应注意仪器的正确操作，避免对仪器造成损坏。
总结：通过以上的实验步骤，我们可以准确测定山楂叶中总黄酮的含量。
这种方法简便易行，结果准确可靠，适用于山楂叶中总黄酮含量的测定。
但是，需要注意的是，实验结果可能会受到多种因素的影响，如山楂叶样品的质量、提取液的浓度等，因此在实际操作中需要进行多次实验，取平均值以提高结果的可靠性。
[最新]可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量
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实验五可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量一、目的要求1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。
2、掌握可见分光光度计的使用方法。
二、基本原理大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。
黄酮类化合物具有邻二酚羟基，或3，5位羟基结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。
本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
三、仪器与试药1、可见分光光度计、分析天平、索氏提取器。
2、乙醇（A.R）、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
3、槲皮素（中国药品生物制品检定所）。
4、大山楂丸（市售品）。
四、操作步骤1、标准液的配制：精密称取槲皮素对照品20mg，置100ml容量瓶中，加95%乙醇50ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。
2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加50%乙醇溶液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
以第一瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。
3、样品液的制备：精密称取120℃干燥2小时的大山楂丸6.5g，置索氏提取器中，用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，将提取液移至250ml容量瓶中，补加蒸馏水至刻度，摇匀即得。
4、含量测定：精密量取提取液1ml，按上述标准曲线制备方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量。
山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测(学术论文)
山楂叶片中黄酮类物质的提取工艺与检测一 实验目的1 复习可见分光光度计的使用2 学习超声波提取成分的方法3 掌握利用分光光度计测定含量的方法 二 实验原理1 黄酮含量的测定采用亚硝酸钠－硝酸铝分光光度法，在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成鳌合物，加入氢氧化钠溶液后显橙红色，即先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2－羟基查耳酮而显色，然后使用可见分光光度计在510 nm 波长处定量测定。
2 超声波提取超声波技术是利用超声波产生的强烈振动、空化作用、粉碎作用，将植物中的活性成分提取到溶剂中去。
植物组织中存在的大量水分和微小气泡正好使得超声波的空化作用极易产生，从而使细胞膜的结构受到破坏，提高和改善了组织细胞的通透性，有利于有机物质的溶出。
超声波媒介中传播引起位于路径上的质点进入振动状态，由此触发出强大的加速度引起一种复杂有力的机械搅拌作用。
由于植物组织引起超声波的吸收而使超声波的动能转化为热能，使得植物组织内部温度升高，有利于有机成分的溶出。
该法提取率高、节省溶剂、缩短提取时间、副产物少、简化操作步骤，能达到比常规提取更理想的效果。
三 主要仪器与试剂 1 主要试剂芦丁对照品（购自中国药品生物制品检定所）,硝酸铝（Al(NO3)3.9H2O,分析纯）,亚硝酸钠(分析纯),氢氧化钠（分析纯）,无水乙醇（分析纯，天津大茂化学试剂厂）,山楂叶片（采摘于本校校园）。
2 主要仪器FA1064N 型电子天平（上海精密科学仪器有限公司）SK8200HP 超声清洗器（59 KHz ，220 V ，500 W ，功率可调范围为40%-100%，上海科导超生仪器有限公司）UV-2550紫外可见分光光度计（日本岛津公司）循环水式多用真空泵（SHB-III ，郑州长城科工贸有限公司） 四 实验内容1 对照品溶液的配置准确称取芦丁对照品0.0124 g 于100 mL 烧杯中，加入10mL 无水乙醇溶解，再加入10mL 蒸馏水，然后将溶液定量转移至50 mL 容量瓶中，再用50%乙醇定容至刻度，摇匀，避光保存。
山楂叶不同采收期多种有效成分含量的比较
山楂叶不同采收期多种有效成分含量的比较王兆华;张大军【摘要】目的：探索山楂叶最佳采收期。
方法 HPLC条件：金丝桃苷检测采用Shim‐pack C18（150 mm ×4．6 mm ，5μm）；乙腈‐甲醇‐四氢呋喃‐5 mL · L －1醋酸溶液（1∶1∶19．4∶78．6）为流动相，检测波长为363 nm。
牡荆素鼠李糖苷检测采用Diamonsil C18柱（250 mm ×4．6 mm ，5μm）；四氢呋喃‐甲醇‐乙腈‐乙酸‐水（38∶3∶3∶4∶152）为流动相；检测波长为330 nm。
总黄酮检测利用可见分光光度法，以芦丁对照品为对照，NaNO2‐Al（NO3）3‐NaOH体系作显色剂，在500 nm波长处测定总黄酮含量。
结果金丝桃苷进样量在0．0805～0.4024μg范围内，质量浓度与峰面积线性关系良好（ r＝0．9993）；牡荆素鼠李糖苷进样量在0．418～2．090μg范围内，质量浓度与峰面积线性关系良好（ r＝0．9991）。
结论5月采收的山楂叶中牡荆素鼠李糖苷含量最高；8～11月采收的山楂叶中金丝桃苷及总黄酮的含量较高。
%Objective To explore the suitable time to harvest hawthorn leaves .Methods HPLC was used and the conditions were as follows :Shim‐pack C18 (150 mm ×4 .6 mm ,5μm) column with the mobile phase consisted of acetonitrile‐methanol‐tetrahydrofuran‐5 mL · L -1 acetic acid(1∶1∶19 .4∶78 .6) in the separation of hyperin ,and the detection wavelength was set at 363nm .The separation of vitexin‐2‐O‐rhamnoside was performed on the Diamonsil C18 (250 mm × 4 .6 mm ,5μm) column with the mobile phase consisted of tetrahydrofuran ,acetonitrile ,methanol ,acetic acid and water (in a ratio of 38∶3∶3∶4∶152) .The detection wave‐length was set at 330 nm .The content of total flavone in hawthorn leaves was determined byspectrophotometry .To compare with the rutin referencesubstance ,NaNO2‐Al(NO3 )3‐NaO H was used as the color development reagent .The detection wavelength was set at 500 nm .Results The linear relationship between area and amount was noted for hyperin with the amount of 0 .080 5‐0 .402 4 μg(r=0 .999 3);The linear relationship between area and amount was noted for vitexin‐2‐O‐rhamnoside with the amount of 0.418‐2.090 μg(r=0 .999 1) .Conclusion The content of vitexin‐2‐O‐rhamnoside in hawthorn leaves which were harvested in May was the highest ;The contents of hyperin and total flavone in hawthorn leaves which were harvested from August to November were relatively high .【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2016(031)004【总页数】4页(P350-353)【关键词】金丝桃苷;牡荆素鼠李糖苷;总黄酮;山楂叶;采收期;H PLC;分光光度法;含量测定【作者】王兆华;张大军【作者单位】吉林省中医药科学院，长春 130012;吉林省中医药科学院，长春130012【正文语种】中文【中图分类】R927.2山楂叶[1]为rataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br. Crataegus pinnatifida Bge.或Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶，是卫生部公布的既是食品又是药品的中药[2]，是健脾开胃、消食化滞、活血化瘀的良药。
紫外可见分光光度法测定三叶青中总黄酮的含量_郑军献
加甲醇 50ml , 加热回流 提取 2 次 , 每 次 1 小时 , 取 出放冷 , 滤 过 , 滤液挥干 , 残渣 用适 量甲醇 溶解 转移至 10ml 量 瓶中 , 加 甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 即得 。 平行操作 3 份 。 2.3 对照品溶液的制备 精密 称取 芦丁对 照品 适量 , 加甲 醇制成每 1ml 含 0.2mg 的溶液 , 摇匀 , 即得 。 2.4 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶 液 0、1、2 、3、4、5、 6ml, 置 25ml 具塞比色管中 , 加 水至 6ml, 精密加入 5%亚硝酸 钠溶液 1ml , 摇匀 , 放置 6 分钟 , 再精密 加入 10 %硝酸 铝溶液 1ml, 摇匀 , 放置 6 分钟 , 精 密加入氢氧化钠试液 10ml, 加水至 刻度 , 摇匀 , 放置 15 分钟 , 照紫 外可 见分 光光度 法(《 中国药 典》2005 年版一部附录 ⅤA), 于 500nm 处 测定吸 收度 。 以吸 收度值 A 为纵坐标 , 芦丁对 照品的浓 度(mg L)为横坐 标 , 绘 制标准 曲 线 , 回 归 方 程 为 :A =0 .01362C -0 .01839 , r =0. 9996。 表明芦丁在 7 .52～ 45.12mg L 范围内呈良好 的线性关 系。 2.5 方法学考察 2.5 .1 精密度试验 精密吸取对照品溶 液 4ml、供试品溶液 6ml, 共 6 份 , 置 25ml 比色管中 , 加水至 6.0ml, 其余操作同“标 准曲线的 制 备” , 于 500nm 处 测 定 吸 收度 。 结 果 对 照品 的 RSD 为 1 .54%, 供试品的 RSD 为 1 .66%。 2.5 .2 稳定性试验 取精密度项下的 对照品和供 试品的第 6 号样品于 10 、20、40、60 、90、120 分钟测定吸收度 。 结果对照 品的 RSD 为 0 .57%, 供试 品的 RSD 为 1.54%。 对照 品溶液 与供试品溶液在显色后 120 分钟内基本稳定 。 2.5 .3 重复性 试验 平行称 取 6 份样 品 , 按 2.2 项 下制备 供试品溶液 , 进样测定 , 结果平均含量为 6 .44mg g , RSD 为 1. 46 %。 2.5.4 加样回收试 验 称取 已知含 量的 同一 批样品 9 份 , 精密称定 , 分别精密 加入不 同量的 对照品 溶液 , 按供 试品溶 液制备方法制备 , 测定 , 计算回收率 , 平均回收率为 99.10%, RSD 为 1 .30%, 结果见表 1 2.6 样品测 定 分别取 2 个 不同批 号样品 , 按 2.2 项下制 备供试品溶液 , 测 定 , 计算 样品 中总 黄 酮的 含量 , 结果 见表 2。
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量
滕晓弘;刘威
【期刊名称】《辽宁中医杂志》
【年(卷),期】2008(35)2
【摘要】目的：测定复方山楂片中总黄酮的含量,从而对本品质量进行控制。
方法：采用紫外分光光度法测定。
结果：芦丁的线性范围为0.008-0.040mg/mL,回归方程Y=18.8X-0.0364,相关系数r=0.9998,加样回收率为98.6%,RSD为1.8%。
结论：该法简便易行、快速、准确、可以用于本品的质量控制方法之一。
【总页数】2页(P261-262)
【关键词】总黄酮;紫外分光光度法;含量测定
【作者】滕晓弘;刘威
【作者单位】丹东市中心医院药剂科;辽宁中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284
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1.紫外分光光度法测定维吾尔药复方艾皮提蒙合剂中总黄酮含量 [J], 热孜亚·吾甫尔;艾尼瓦尔·塔力甫;买迪娜木·米吉提;热甫哈提·赛买提
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耀;王宾豪;张小梅
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紫外分光光度法测定山楂提取物中总黄酮的含量
紫外分光光度法测定山楂提取物中总黄酮的含量
王阳;吕晓丽;常福厚;刘超;白图雅;范蕾
【期刊名称】《内蒙古医科大学学报》
【年(卷),期】2011(000)0S1
【摘要】全球每年约有1200万人死于心血管病和脑中风,高脂血症引起的动脉粥样硬化是造成冠心病、高血压和脑血管疾病的主要原因。
2002年,降血脂药物阿托伐他汀(atorvastatin,Lipitor)以近80亿美元的年销售额列为当年世界最畅销药榜首。
因此,研究和发展新型降血脂药物具有重大的社会效益和经济效益[1]。
山楂是蔷薇科植物,含有多种
【总页数】3页(P572-574)
【作者】王阳;吕晓丽;常福厚;刘超;白图雅;范蕾
【作者单位】内蒙古医学院附属医院药房;内蒙古医学院药学院药理学教研室【正文语种】中文
【中图分类】R
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【 关键词】 山楂叶 ； 紫外一可见分光光度法； 采收期 ； 总黄酮
【 中图分类号】 Ｒ ２ ８ ５ 【 文献标ｉ Ｐ ， ｔ ｉ ￣ － ｌ Ａ 【 文章编号］ １ ０ ０ ４ － ． ６ ８ ７ ９ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ － ０ ０ ７ ８ － ０ ２
山楂 叶 为蔷薇 科植 物 山里红（ Ｃ ｒ ａ ｔ ａ ｅ ｇ ｕ ｓ ｐ ｉ ｎ ｎ ａ ｔ ｉ ｉ ｆ ｄ ａ Ｂ ｇ ｅ ． Ｖ ａ ｒ ． Ｍａ ｊ ｏ ｒ Ｎ ． Ｅ ． Ｂ ｒ ． ） 或 山楂（ ｃ ￣ ｔ ａ ｅ ｇ ｕ ｓ ｐ ｉ ｎ ｎ ａ ｉ ｆ ｉ ｆ ｄ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ） 的干 燥 叶， 夏、 秋二季采收 。 山楂 叶中所含的黄酮类 成分具 有降 压、 降糖 、 降脂 、 强心等多种药理 作用 ， 尤其对缺血性心肌损 伤有明显的保护作用 。 山楂叶早在东晋时代就有入药治病 的记载 ， 本草纲 目谓山楂叶煮汁治漆疮， 现在 已经被２ ０ １ ０ 版 中华人 民共和 国药典》 收载 。 山楂叶主产于河北承德、 兴 隆以及辽宁、 山东和山西等地 。 不 同产地、 不 同采收期的中 药材， 所含有的化学组 分以及含量可能会有所不同， 因此， 考察 山楂叶的最佳采集期对提高 山楂叶的利用具有重要的
１仪器与试剂
８ ４ ５ ３ 紫外一可见分光光度仪 ， 美 国惠普公司 ； Ａ Ｇ － ２ ４ ５ 电 子分析天平 ， 瑞士梅特勒公司 ； Ｋ Ｑ － ７ ０ ０ 型超声波清洗器 ， 昆
山市超声仪器有限公司。 芦丁对照品（ 批号： １ ｏ ｏ ｏ ８ ｏ － ２ ｏ ｏ ７ ｏ ７ ） ， 中国药品生物制 品检 定所 ； 供试 品山楂 叶采 自承德（ ５ － １ ｌ 月每月采集一次， 采摘后立即暴晒、 晾干） 由河北 民族师范
液为空白液 ， 采用紫外一可见分光光度法 ， 在波长５ １ ￣ａ ｍ处 测定吸光度， 以吸光度值为纵 坐标 ， 浓度为横坐标 ， 绘制 标
分析 ， 并确定 了最佳采收期 ， 为山楂叶的质量评价提供 了科
学依据。
准 曲线方程 ， Ｙ ＝９ ． ７ ０ ８ ３ Ｘ － ０ ． ０ ０ ８ ２ ， １ ＂ ＝ － ０ ． ９ ９ ９ ９ 。
２ ． ７ 不 同采收期 山楂 叶中总黄 酮的含量 分别取承德 产 不同采收期的山楂叶粉末ｌ ｇ ， 每期山楂叶取３ 个样本， 按２ ． ２ 的方法制 备供试 品溶液， 按２ ． ３ 的方法 ， 自 “ 加水至６ ｍｌ ” 起
科学意义 。 本研究应用楂叶的紫外一可见分光光度法测定 不同采收期承德产 山楂叶中总黄酮 的含量 ， 同时进行动 态
置于蒸发皿 中蒸干， 残渣加５ ０ ． ０ ％稀 乙醇溶解， 所得溶液转 移至５ ０ ｍ ｌ 量瓶 中， ） ￣ ｎ ５ ｏ ． ０ ％稀乙醇稀释 至刻度， 摇匀、 滤过 、 取续滤液。 精密量取续滤液５ ｍ ｌ ， 移置２ ５ ｍｌ 量瓶中， 加水稀释 至刻度， 摇匀。 所得溶液精密量取２ ｍｌ ， 置２ ５ ｍ ｌ 量瓶 中， 作为 供试品溶液。 ２ ． ３ 标 准曲线的制 精密量２ ． １ 中的对照品溶液０ ｍ ｌ 、 ｌ ｍｌ 、 ２ ｍｌ 、 ３ ｍｌ 、 ４ ｍｌ 、 ５ ｍｌ 、 ６ ｍ ｌ ， 分别置于２ ５ ｍｌ 量瓶 中， 分 别加 纯净水至６ ｍｌ ； 加５ ％亚硝酸钠溶液ｌ ｍ ｌ ， 摇匀， 放￣６ ｍｉ ｎ ； 加 ｌ ０ ％硝 酸铝溶液ｌ ｍｌ ， 摇匀， 放置６ ｍ ｉ ｎ ； 再加 氢氧化钠试 液 １ ０ ｍｌ ， 加水稀释至刻度， 摇匀后放置１ ５ ｍｉ ｎ 。 以不加对照品溶
（ 收稿日期： ２ ０ １ ３ － ０ ９ — ２ ４ ）
（ 短 篇 报 道 栏 目编 辑 ： 张 玉 亭 ）
紫外一可见分光光度法动态分析承德地区山楂叶总黄酮的含量
杨 少冉 ， 高 菁 ， 陈艳 昆 ， 潘海 ， 赵胜 男 （ １ ． 承德医学院 中药学系２ ０ １ １ 级， 河北承德 ０ ６ ７ ０ ０ ０ ； ２ ． 指导教师）
承
德
医
学
院
学
报
ＶＯ １ ． ３ １ Ｎｏ． １ ２ ０ １ ４
为 肝脓 肿【 Ｊ ］ ． 临床误诊误治 ， ２ ０ ０ ８ ， ２ １ （ １ ２ ） ： ４ ８ － ４ ９ ． ［ ２ ］ 王 天浩 ， 潘志刚 ， 任 正刚 ． 少见类型的肝脏 原发性恶性肿
瘤［ Ｊ ］ ． 复旦大学学报（ 医学版） ， ２ ０ ０ ９ ， ３ ６ （ ２ ） ： ２ 方法， 自 “ 加水至６ ｍｌ ” 起测定吸光度， Ｒ Ｓ Ｄ值为１ ． ２ ％， 表明本方法重复性较好。 ２ ． ６ 稳定性试验 取 同一批 山楂叶粉末 ， 按２ ． ２的方法制
备供试品溶液， 按２ ． ３的方法 ， 自 “ 加水至６ ｍｌ ” 起依法处理 。 分别于显色后ｌ ５ 、 ３ ０ 、 ４ ５ 、 ５ ０ ａｉ ｒ ｎ时测定吸光度值 ， Ｒ Ｓ Ｄ值为 ０ ． ９ ８ Ｄ ／ ０ ， 表明样品溶液在６ ０ ｍｉ ｎ内稳定性 良好。
学院董建新教授鉴定为蔷薇科 山楂属植物山楂（ Ｃ ｒ ａ ｔ ａ ｅ ｇ ｕ ｓ ｐ ｉ ｎ ｎ ａ ｔ ｉ ｉ ｆ ｄ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ） 的干燥叶 ； 其余试剂均为分析纯。 ２方法与结果
２ ． １ 对 照品溶液的制备 精密称量在１ ２ ０ ￣ Ｃ干燥至恒重的 芦 丁对 照品２ ５ ｍｇ ， 置５ ０ ｍｌ 量瓶 中， 加 无水 乙醇 适量 ， 超声 溶 解， 放冷 ， 加无 水乙醇至刻 度， 摇 匀。 精密量取 上述溶液
２ ． ４ 精 密度试验 精 密量２ ． １中对照 品溶液２ ｍｌ ， ６份， 按 ２ ． ３ 标准曲线制备项下的方法 ， 自 “ 加水至６ ｍ ｌ ” 起测定吸光 度值， Ｒ Ｓ Ｄ值为１ ． ９ ％， 表明本方法精密度良好。 ２ ． ５ 重复性试验 取山楂叶粉末６ 份， 按照２ ． ２的方法制备