第四章 免疫球蛋白剖析

第四章免疫球蛋白

第一节基本概念

1、抗体：B淋巴细胞在有效的抗原刺激下分化为浆细胞，产生具有与相应抗原发生特异性结合功能的免疫球蛋白，这类免疫球蛋白称为抗体。

1937年，Tiselius用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分，其后又证明抗体的活性部分是在γ球蛋白部分。因此，相当长一段时间内，抗体又被称为γ球蛋白（丙种球蛋白）。实际上，抗体的活性除γ球蛋白外，还存在于α和β球蛋白处。

20世纪40年代初期，Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。肺炎球菌多糖免疫家兔后可获得高效价免疫血清。然后加入相应抗原吸收以除去抗体，将除去抗体的血清进行电泳图谱分析，发现丙种球蛋白（γ-G）组分明显减少，从而证明了抗体活性是存在于丙种球蛋白内。

2、免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。

区别：

抗体都是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并不都是抗体。如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清中存在的异常免疫球蛋白结构与抗体相似，但无抗体活性。

免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig,SIg）和膜型（membrane Ig, mIg）。

前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中，具有抗体的各种功能；后

者是B细胞表面的抗原识别受体。

第二节免疫球蛋白结构

一、免疫球蛋白的基本结构

（一）重链和轻链

免疫球蛋白分子是由两条相同的重链（heavy chain，H链）和两条相同的轻链（light chain，L链）通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。X 射线晶体结构分析发现，IgG分子由3个相同大小的节段组成。

1. 重链

分子量约为50～75kD，由450～550个氨基酸残基组成。免疫球蛋白重链恒定区由于氨基酸的组成和排列顺序不同，故其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白分为五类，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。不同的同种型具有不同的特征，包括链内二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、功能区的数目以及铰链区的长度等。同一类Ig根据其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目和位置的差别，又可分为不同的亚类。如IgG可分为IgG1～IgG4；IgA可分为IgA1和IgA2。IgM、IgD和IgE尚未发现有亚类。

2.轻链

免疫球蛋白轻链的分子量约25 kD，由214个氨基酸残基构成。轻链可分为两型，即κ(kappa)型和λ(lambda)型，一个天然Ig分子上两条轻链的型别总是相同的,两型轻链的功能无差异。不同种属中，两型轻链的比例不同，正常人血清免疫球蛋白κ:λ约为2:1，而在小鼠则为20:1。κ:λ比例的异常可能反映免疫系统的异常，例如人类免疫球蛋白λ链过多，提示可能有产生λ链的B细胞肿瘤。根据λ链恒定区个别氨基酸的差异，又可分为λ1、λ2、λ3和λ4 四个亚型。

（二）可变区和恒定区

通过分析不同免疫球蛋白重链和轻链的氨基酸序列，发现重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大，称为可变区（variable

region,V区），而靠近C端的其余氨基酸序列相对稳定，称为恒定区(constant region, C区)。

１.可变区重链和轻链的V区分别称为V

H 和V

L

。

①高变区（hypervariable region，HVR）：比较许多不同抗体V区

的氨基酸序列，发现VH和VL各有三个区域的氨基酸组成和排列顺序特别易变化，这些区域称为高变区，分别用HVR1、HVR2和HVR3表示，一般HVR3变化程度更高。

VL的三个高变区分别位于28～35、49～56和91～98位氨基酸；VH 的三个高变区分别位于29～31、49～58和95～102位氨基酸。

②骨架区（framework region,FR）：高变区之外区域的氨基酸组成

和排列顺序相对不易变化，称为骨架区。

V H 或V

L

各有四个骨架区，分别用FR1、FR2、FR3和FR4表示。

稳定CDR结构，以利IgCDR与抗原决定簇精细特异地结合。

③互补性决定区（complementarity-determining region，CDR）：

VH和VL的三个高变区共同组成Ig的抗原结合部位，该部位形成一个与抗原决定簇互补的表面，故高变区又被称为互补性决定区，分别用CDR1、CDR2和CDR3表示。不同的抗体其CDR序列不相同，并因此决定抗体的特异性。

２. 恒定区

重链和轻链的C区分别称为CH和CL。不同类Ig重链CH长度不一，有的

包括C

H 1、C

H

2和C

H

3；有的更长，包括CH1、CH2、CH3和CH4。同一种属

动物中，同一类别Ig分子其C区氨基酸的组成和排列顺序比较恒定。例如：针对不同抗原的人IgG抗体，它们的V区不相同，只能与相应的抗原发生特异性结合，但其C区的抗原性是相同的，应用抗人IgG抗体（第二抗体），均能与不同人的IgG结合。

（三）免疫球蛋白的功能区：

1．定义：Ig的H链、L链每隔110个氨基酸由链内二硫键连接构成一个能行使特定功能的球形结构，称为Ig的功能区。

这些功能区的功能虽不同，但其结构相似。每个功能区约由110个氨基酸

组成，其氨基酸的序列具有相似性或同源性。

轻链有VL和CL两个功能区；IgG、IgA和IgD重链有VH、CH1、CH2和CH3

四个功能区；IgM和IgE重链有五个功能区，比IgG多一个CH4。

2．功能区的作用为：

①VH和VL是结合抗原的部位，其中HVR（CDR）是V区中与抗原表位互补

结合的部位；

②CH和CL上具有部分同种异型（allotype）的遗传标志；

③IgG的CH2和IgM的CH3具有补体C1q结合位点，可启动补体活化经典

途径；

④IgG可通过胎盘；

⑤IgG的CH3可与单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、B细胞和NK细胞表

面的IgG Fc受体（FcγR）结合，IgE的CH2和CH3可与肥大细胞和嗜碱

性粒细胞的IgE Fc受体（FcεR）结合。

3．铰链区铰链区位于CH1与CH2之间，含有丰富的脯氨酸，因此易伸展

弯曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。铰链区连接抗体的Fab

段和Fc段，使两个Fab段易于移动和弯曲，从而可与不同距离的抗原部

位结合。五类Ig或亚类的铰链区不尽相同，例如IgG1、IgG2、IgG4和

IgA的铰链区较短，而IgG3和IgD的铰链区较长。IgM和IgE无铰链区。

1.利于抗体分子超变区与抗原决定簇吻合