水杨酸钠作用后大鼠耳蜗K—Cl协同转运体家族mRNA表达研究

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大鼠耳蜗组织中Nedd4及SGK1的表达

大鼠耳蜗组织中Nedd4及SGK1的表达钟时勋;刘兆华【摘要】目的研究大鼠耳蜗组织中神经前体细胞表达-发育性下调基因亚型(neural precursor celI-ex-pressed,developmentally downregulated isoforms,Nedd4)及血清糖皮质激素诱导激酶1(serum glucocorticoid-in-ducible kinase1,SGK1)蛋白分子的表达.方法选取健康Wistar大鼠8只.用特异性多克隆兔抗鼠Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1抗体,采用免疫组化法研究大鼠耳蜗组织中Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1蛋白的表达模式.结果 Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1蛋白广泛表达于大鼠耳蜗组织的各个区域中,包括血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋缘、螺旋神经节、前庭膜等处.结论在耳蜗组织中,存在一个由SGK1、Nedd4和上皮钠通道(ENaC)组成的Na+转运系统,它们协同作用转运Na+,从而保持内耳内环境的稳定.%Objective To investigate the cellular localization of the neural precursor cell-expressed, developmentally downregulated isoforms(Nedd4), Nedd4- 1/2 and Nedd4- 2, and the serum glucocorticoid- inducible kinasel(SGK1) in various subregions of the rat cochlea. Methods The expression patterns of Nedd4-1/2, Nedd42 and SGK1 in the cochlea of rat were studied by immunohistochemistry with the specific polyclonal rabbit antibodies against the rat Nedd4-1/2, Nedd4-2 and SGK1. Results All three proteins were extensively expressed in various regions of the rat cochlea. They were found in the stria vascularis, spiral ligament, organ of Corti, spiral limbus, spiral ganglion and Reissner's membrane. Conclusion Our findings suggest that there exists a Na+ transport system in the cochlea consisting of SGK1, Nedd4 isoforms andENaC, which may work in concert to transport Na+ and to maintain homeostasis in the inner ear as they do in other tight epithelia.【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2009(017)004【总页数】4页(P369-372)【关键词】内淋巴;耳蜗;血清糖皮质激素诱导激酶1;神经前体细胞表达-发育性下调基因亚型【作者】钟时勋;刘兆华【作者单位】重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,重庆,400016;第三军医大学附属大坪医院耳鼻咽喉科【正文语种】中文【中图分类】R339.16内淋巴为高钾低钠的溶液，由血管纹和前庭暗细胞分泌，在内淋巴囊、耳蜗外沟细胞、前庭移行细胞等处被重吸收。

水杨酸钠致耳鸣大鼠脑海马区促肾上腺皮质激素释放因子的表达＊

两组大鼠Ｒ值大于ｃ组（Ｐ＜０．０５），证明耳鸣大鼠模型建立成功；首次给药后２ｈ及给药结束后Ａ、Ｂ两组ＡＢＲ反应阈均较给药前提高了约３０ｄＢ（Ｐ＜０．０５），但Ａ、Ｂ两组间ＡＢＲ反应阈差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）；大鼠脑海马
１Ｏ水杨酸钠溶液３５０ｍｇ・ｋｇ１１・ｄ－。，共注射１４天，Ｃ组（对照组）腹腔注射等量生理盐水１４天。给药前采组大鼠进行条件反射训练，条件反射消退期开始注射水杨酸钠并检测各组大鼠饮水抑制率（Ｒ
ＸｉｅＷｅｉｑｕａｎ，ＬｉａｏＨｕａ，ＹａｎｇＸｉｌｉｎ，ＣｈｅｎＫａｎｇｓｏｎｇ，ＺｏｕＺｈｅｆｅｉ，ＬｉＷｅｔ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｔＯｒｈｉｎＯｌａｒｙｎｇＯｌＯｇｙＨｅａｄａｎｄＮｅｃｋＳｕｒｇｅｒｙ，ＲｅｎｍｉｎＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ，４３００６０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇｆａｃｔｏｒｉｎｒａｔ＇ｓｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｔＯｉｌｌｕｓ —

水杨酸钠对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞外向延迟整流钾电流及其尾电流的影响

中图法分类号Ｒ３８８３．Ｄ０Ｊ１．８（．ｉｓ．６２０４．０００．２：０３７）．ｓｎ１７７１２１．１０５／
ＴｈｆｃｆＳｄｕａｉｙａｅｏｈＫＲａｄＩ－ｉｏｅＥｆｅｔｏｏｉｍＳｌｃｌｔｎｔｅＩＤｎＫｔｌｆａＳｉａａｇｉｎＮｅｒｎｒｍｏａａｔｐｒｌＧｎｌｏｕｏｓｆｏＮｅｎｔｌＲａｓ
ａｈｉａｌｃｕｒｎｔ（Ｉｌ．ｉｓｌｔｄｓｒｌｇａｌｏｅｏ（ｎｄｔｅｒｔｉｒｅｓｌ１ｎｉｏａｅｐｉａｎｇｉｎｎｕｒｎｓＳＧＮｓｓｎａｔｈ— ｌｍｐｔｃＫ））ｕｉｇｐｃｃａｅｈｎｉｕｅａＯｉｑｕｒｎｔｈｏｃｑｎｄｔｎｉｅｉｏｔｅｔｘｉ
ＪａｇＹｕｎｎ Ⅲ ，ａｎｊｎ，ａｙａｅｌｉｎａｍｉｇＸｉｏＨｏｇｕＨｅＹｕｎｕｎｔａ
ＤｅａｔｎｆＯｆｒｏｎｇＺｇＵｎｏｓｔｌＴｏｇｉｄｉａｏｌｇｐｒｍｅｔｏｏ ” ｆｒ００，ｉｎＨｏｐｉ，ｎｊａＭｅｃｌＣｌｅ，ｅＨｕｚｏｇＵｎｖｒｉｆＳｉｎｅａｄＴｅｈｏｏｙ，ｕａ３０２，ｈｎａｈｎｉｅｓｔｏｃｅｃｎｃｎｌｇＷｈｎ４０２ＣｉａｙＤｅａｔｎｆ（ｆｒｏｎｇＺｇ，ＮｉｇｏＦｉｓｓｉａ，ｎｂ１００，ｉａｐｒｍｅｔｏ）０＾ｚｒ００３，ｎｂｒｔＨｏｐｔｌＮｉｇｏ３５１ＣｈｎＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｏｉｖｓｉａｅｔｅｅｆｃｓｏｏｉｍａｉｙａｅｏｕｗａｄｄｌｙｄｒｃｉｅｏａｓｕｃｒｅｔ（））ｓｒｃｊｃｉｖｎｅｔｔｈｆｅｔｆｓｄｕｓｌｌｔｎｏｔｒｅａｅｅｔｉｒｐｔｓｉｍｕｒｎｓ１ＩｇｃｆＫＲ

水杨酸钠诱导耳鸣大鼠海马中TNF-α、IL-1β的表达

•实验研究•水杨酸钠诱导耳鸣大鼠海马中TNF—!、IL—邛的表达&肖倩文12左健12葛佳丽12王采集134李雅兰12李婷2乔月华134【摘要】目的探讨水杨酸钠诱导耳鸣大鼠海马中肿瘤坏死因子a(TNF—a)、白介素lp(IL—lp)和N—甲基—D—天冬氨酸受体2B亚基(N—methyl—D—aspartate receptor2B,NMDAR2B)的表达变化与大鼠耳鸣之间的联系。

方法将18只健康成年SD大鼠随机分为三组:对照组(腹腔注射生理盐水)、腹腔注射水杨酸钠14天组(S14组)和腹腔注射水杨酸钠14天后停药恢复7天组(R7组)，每组6只。

检测各组大鼠造模前和造模结束后的惊跳反射前脉冲抑制(prepulse inhibition,PP I)和听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)；检测后处死大鼠并迅速分离出海马组织，采用荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)和Western Blot检测各组大鼠海马中TNF—a、IL—lp和NMDAR2B的表达(结果①S14组大鼠前脉冲抑制率较对照组显著增加(P V0.001)提示耳鸣模型建立成功;②S14组大鼠的ABR反应阈为51±1.87dB SPL,较对照组(36.67±1.05dB SPL)显著升高 (P<0.01)；R7组大鼠的ABR反应阈为35±1.29dB SPL,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)；③S14组大鼠海马TNF—a、IL—lp和NMDAR2B的表达水平较对照组显著升高(P<0.01)；与对照组相比,R7组大鼠海马IL 一邛的表达水平显著升高(P<0.05),TNF—a和NMDAR2B的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)(结论腹腔注射水杨酸钠可诱导大鼠产生耳鸣，并可能通过上调大鼠海马区TNF—a、IL—1p和NMDAR2B的表达水平参与耳鸣的发生发展。

水杨酸钠诱导大鼠耳蜗热休克蛋白表达的实验研究

中国医科大学硕士学位论文水杨酸钠诱导大鼠耳蜗热休克蛋白表达的实验研究姓名：***申请学位级别：硕士专业：耳鼻咽喉科学指导教师：***2001.6.1中文摘要、铲——旨～—／７热休克蛋白是一类高度保守的蛋白质，可由多种物理、化学、生物等应激原诱导合成，在保护组织、细胞耐受缺血、缺氧或毒物等损伤时起重要作用。

特别是氧化损伤时，热休克蛋白的高度表达可以保护细胞抵御氧化损伤，增强缺血耐受性。

而且作为一种内源性保护机制，热休克蛋白能比药物达到更自然的保护作用。

在耳科的研究表明耳蜗中热休克蛋白表达的增高明显地降低了强噪声刺激所致的永久性阈移。

因而如何有效地诱导热休克蛋白的表达成为近来研究的热点。

特别是在不造成细胞损伤的条件下诱导或者潜在性诱导合成ＨＳＰ更具应用前景。

水杨酸类药物以其良好的疗效在世界各国被广泛使用。

但因大剂量水杨酸类药物会产生一过性听力下降和耳鸣，被认为是一种耳毒性药物。

近来却发现水杨酸钠可以减轻噪声及庆大霉素造成的听力损伤。

另有实验发现水杨酸钠可以促进热休克蛋白表达。

考虑到热休克蛋白的保护作用，我们推测水杨酸钠亦可能在耳蜗中诱导热休克蛋白。

因此，本实验以此为出发点，研究水杨酸钠在耳蜗中诱导热休克蛋白的情况，探讨水杨酸钠对耳蜗的作用机制，为其在耳科的应用提供实验依据和理论基础。

料与方法材料：取耳廓反射正常的健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠５７只，体重２２０—２６０克，随机分组。

１００ｍｇ／ｋｇＳＳ组：１００ｍｇ／ｋｇＳＳ，ｉｐ；２５０ｍｇ／ｋｇＳＳ组：２５０，ｎｇ／ｋｇｓｓ，ｉｐ；５００ｍｇ／ｋｇＳＳ组：５００ｍｇ／ｋｇｓＳ，ｉｐ；对·ｌ·／婶一照组：等量生理盐水，ｉｐ；３７。

Ｃ组：３７℃环境下，３０分钟后室温下恢复；１００ｍｅ／ｋｇＳＳ＋３７。

Ｃ组：１００ｍ∥ｋｇＳＳ，ｉｐ，６０分钟后人３７。

Ｃ环境３０分钟，再室温下恢复。

以上各组每组９只。

阳性对照组３只，热休克处置。

方法：（１）ＡＢＲ检测：除阳性对照组外，每组取３只于用药前及用药后４小时和２４小时将大鼠用３％戊巴比妥钠４０ｒａｇ／ｋｇ腹腔麻醉，测试ＡＢＲ阈值。

水杨酸钠增强氧化应激介导耳蜗螺旋神经节神经元损伤作用的实验观察

㊀㊀苏纪平，医学博士，二级教授，博士研究生导师㊂任职于广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科㊂曾留学德国㊁英国多年，并在美国和韩国专科进修㊂现任中国中西医结合学会耳鼻咽喉科分会全国委员，广西中西医结合耳鼻咽喉头颈外科分会主委，广西医师协会㊁抗癌协会理事㊂娴熟耳鼻咽喉头颈外科疾病的诊疗和各种手术，尤其精于内耳疾病㊁咽喉疾病及头颈肿瘤的诊疗，对于复杂气管狭窄的诊疗㊁食管气管瘘修复及腮腺系统改良手术有独到之处㊂主持科研课题２０余项，其中国家自然科学基金项目６项㊂侧重于内耳病理生理及头颈肿瘤的研究，发表论文１２０余篇，ＳＣＩ收录２０多篇㊂获广西科技进步三等奖，广西卫生技术进步二等奖㊂㊀㊀［摘要］㊀目的㊀观察水杨酸钠（ＳＳ）作用大鼠耳蜗螺旋神经节神经元（ＳＧＮ）后，ＳＧＮ中氧化应激水平的变化㊂方法㊀将６只ＳＤ大鼠随机分为对照组和ＳＳ组，每组３只㊂通过耳蜗器官培养４８ｈ后，用５ｍＭＳＳ处理４８ｈ，对照组不予处理，采用免疫荧光染色技术定位耳蜗器官中活性氧自由基（ＲＯＳ）的主要生成位置㊂将１５只ＳＤ大鼠随机分成５组，即对照组㊁ＳＳ组㊁ＳＳ＋Ｎ⁃乙酰⁃Ｌ⁃半胱氨酸（ＮＡＣ）组㊁阳性对照过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）组㊁Ｈ２Ｏ２＋ＮＡＣ组，每组３只㊂通过急性分离ＳＧＮ，原代培养４８ｈ后分别用５ｍＭＳＳ㊁５ｍＭＳＳ联合１００μＭＮＡＣ㊁３００μＭＨ２Ｏ２㊁３００μＭＨ２Ｏ２联合１００μＭＮＡＣ处理４８ｈ，对照组不予处理㊂采用荧光染色法检测并量化各组大鼠ＳＧＮ中ＲＯＳ荧光探针ＤＣＦＨ⁃ＤＡ的平均荧光强度；采用ＣＣＫ８法检测ＳＧＮ细胞存活率㊂结果㊀在耳蜗器官培养中，ＳＳ作用后，免疫荧光染色显示ＲＯＳ荧光增强，并且主要在ＳＧＮ中表达，而在其他细胞中荧光强度无明显变化㊂为进一步量化荧光强度，在原代培养ＳＧＮ中加入５ｍＭＳＳ处理后，荧光染色法显示ＲＯＳ平均荧光强度较对照组升高（Ｐ＜０００１），与Ｈ２Ｏ２组结果一致（Ｐ＜００００１）㊂在加入ＲＯＳ抑制剂ＮＡＣ之后，ＲＯＳ平均荧光强度较ＳＳ组下降（Ｐ＜００１）㊂ＣＣＫ８法结果显示，ＳＳ作用之后细胞存活率较对照组下降４１３４％（Ｐ＜００１）；在加入ＮＡＣ之后，细胞存活率较ＳＳ组上升３６０５％（Ｐ＜００１），与对照组比较差异无统计学意义（Ｐ＞００５）㊂Ｈ２Ｏ２组细胞存活率较对照组下降５２３１％（Ｐ＜０００１），在加入ＮＡＣ之后，细胞存活率较Ｈ２Ｏ２组上升３４７３％（Ｐ＜００１）㊂结论㊀ＳＳ增强ＳＧＮ的氧化应激，并且导致了ＳＧＮ损伤㊂氧化应激抑制剂ＮＡＣ可以降低ＳＧＮ的氧化应激，并且对ＳＳ致ＳＧＮ损伤具有保护作用㊂㊀㊀［关键词］㊀水杨酸钠；㊀耳蜗螺旋神经节神经元；㊀氧化应激；㊀免疫荧光；㊀耳蜗培养㊀㊀［中图分类号］㊀Ｒ７６４４㊀［文献标识码］㊀Ａ㊀［文章编号］㊀１６７４－３８０６（２０２３）０５－０４４７－０５㊀㊀ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－３８０６．２０２３．０５．０６Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅｅｎｈａｎｃｉｎｇｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｊｕｒｙｏｆｃｏｃｈｌｅａｒｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ㊀ＺＨＵＸｉａｏ⁃ｔｉｎｇ，ＨＵＡＮＧＪｉａ⁃ｌｉｎ，ＬＩＮＸｉａｏ⁃ｙｕ，ｅｔａｌ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙＨｅａｄａｎｄＮｅｃｋＳｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕａｎｇｘｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＥａｒｌｙＰｒｅｖｅｎ⁃ｔｉｏｎａｎｄＴｒｅａｔｍｅｎｔｆｏｒＲｅｇｉｏｎａｌＨｉｇｈＦｒｅｑｕｅｎｃｙＴｕｍｏｒ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３００２１，Ｃｈｉｎａ㊀㊀［Ａｂｓｔｒａｃｔ］㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｌｅｖｅｌｉｎｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ（ＳＧＮ）ａｆｔｅｒｔｈｅａｃｔｉｏｎｏｆｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅ（ＳＳ）ｏｎＳＧＮｏｆｒａｔｃｏｃｈｌｅａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＳｉｘＳｐｒａｇｕｅ⁃Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ｒａｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄＳＳｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ３ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｃｏｃｈｌｅａｒｏｒｇａｎｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ５ｍＭＳＳｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓａｆｔｅｒｔｈｅｙｗｅｒｅｉｎｃｕｂａｔｅｄｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓｌｅｆｔｕｎｔｒｅａｔｅｄ，ａｎｄｔｈｅｍａｉｎｌｏｃａｔｉｏｎｓｏｆｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅ⁃ｃｉｅｓ（ＲＯＳ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｏｃｈｌｅａｒｏｒｇａｎｓｗｅｒｅｌｏｃａｌｉｚｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．ＦｉｆｔｅｅｎＳＤｒａｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ，ｎａｍｅｌｙ，ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＳＳｇｒｏｕｐ，ＳＳ＋Ｎ⁃ａｃｅｔｙｌ⁃Ｌ⁃ｃｙｓｔｅｉｎｅ（ＮＡＣ）ｇｒｏｕｐ，ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ（Ｈ２Ｏ２）ｇｒｏｕｐ，ａｎｄＨ２Ｏ２＋ＮＡＣｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ３ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．ＴｈｅＳＧＮｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙａｃｕｔｅｉｓｏ⁃ｌａｔｉｏｎａｎｄｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ５ｍＭＳＳ，５ｍＭＳＳｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ１００μＭＮＡＣ，３００μＭＨ２Ｏ２，３００μＭＨ２Ｏ２ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ１００μＭＮＡＣｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓｌｅｆｔｕｎｔｒｅａｔｅｄ．ＴｈｅｍｅａｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｆＲＯＳｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｂｅＤＣＦＨ⁃ＤＡｉｎＳＧＮｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄａｎｄｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ；ｔｈｅＣＣＫ８ｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆＳＧＮｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｉｎｔｈｅｃｏｃｈｌｅａｒｏｒｇａｎｃｕｌｔｕｒｅ，ａｆｔｅｒＳＳｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＲＯＳｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｗａｓｅｎｈａｎｃｅｄａｎｄｍａｉｎｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＳＧＮ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｉｅｓｉｎｔｈｅｏｔｈｅｒｃｅｌｌｓｗｅｒｅｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｈａｎｇｅｄ．Ｔｏｆｕｒｔｈｅｒｑｕａｎｔｉｆｙｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，ｉｎｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅＳＧＮ，ａｆｔｅｒａｄｄｉｎｇ５ｍＭＳＳｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｅａｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｆＲＯＳｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０００１），ｗｈｉｃｈｗａｓｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｔｈｅＨ２Ｏ２ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００００１）．ＡｆｔｅｒｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅＲＯＳｉｎｈｉｂｉｔｏｒＮＡＣ，ｔｈｅｍｅａｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｆＲＯＳｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｔｈｅＳＳｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１）．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅＣＣＫ８ｍｅｔｈｏｄｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ４１３４％ａｆｔｅｒｔｈｅａｃｔｉｏｎｏｆＳＳｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１），ａｎｄａｆｔｅｒｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆＮＡＣ，ｔｈｅｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ３６０５％ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅＳＳｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１），ａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｎｏｔｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＞００５）；ｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｉｎｔｈｅＨ２Ｏ２ｇｒｏｕｐｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ５２３１％ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０００１），ａｎｄａｆｔｅｒｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆＮＡＣ，ｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ３４７３％ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｉｎｔｈｅＨ２Ｏ２ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＳＳｅｎｈａｎｃｅｓｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｏｆＳＧＮａｎｄｃａｕｓｅｓＳＧＮｄａｍａｇｅ．ＯｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒＮＡＣｃａｎｒｅｄｕｃｅｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｏｆＳＧＮａｎｄｈａｓａｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔａｇａｉｎｓｔＳＳ⁃ｉｎｄｕｃｅｄＳＧＮｄａｍａｇｅ．㊀㊀［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］㊀Ｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅ；㊀Ｃｏｃｈｌｅａｒｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ；㊀Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ；㊀Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ；Ｃｏｃｈｌｅａｒｃｕｌｔｕｒｅ㊀㊀水杨酸是阿司匹林的活性成分，具有解热镇痛㊁抗炎等多种功效，是目前全球应用最广泛的非甾体类药物之一㊂然而，在水杨酸类药物使用过程中常伴随着不少的副作用，尤以耳毒性最为常见，主要表现为耳鸣和听力下降［１］㊂耳蜗螺旋神经节神经元（ｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ，ＳＧＮ）是连接毛细胞与听觉中枢的重要枢纽，已被证实是水杨酸钠（ｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅ，ＳＳ）耳毒性的重要作用位点［２］，但其具体作用机制仍未完全明了㊂氧化应激是耳聋的常见损伤机制，在噪声性聋［３］㊁老年性聋［４］以及顺铂诱导的耳毒性聋［５］中均可观察到氧化应激增强㊂有研究显示ＳＳ对神经元的氧化应激损伤具有保护作用［６⁃７］㊂但亦有研究发现ＳＳ会增强氧化应激，诱导细胞凋亡［８］㊂本课题组既往研究发现，ＳＳ使ＳＧＮ中过氧化物阴离子［活性氧自由基（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）来源之一］水平升高［９］，提示ＳＳ可能通过增强氧化应激导致ＳＧＮ损伤㊂本研究旨在通过免疫荧光技术观察ＳＳ对新生ＳＤ大鼠耳蜗ＳＧＮ的影响，定位ＲＯＳ产生的位置并量化其表达水平，为进一步研究ＳＳ致ＳＧＮ损伤的机制提供参考㊂１㊀材料与方法１１㊀实验动物及分组㊀选取新生２３ｄ龄无特定病原体（ｓｐｅｃｉｆｉｃｐａｔｈｏｇｅｎｆｒｅｅ，ＳＰＦ）级ＳＤ大鼠２１只，雌雄不限，由广西医科大学实验动物中心提供㊂耳蜗器官培养组６只，ＳＧＮ原代培养组１５只㊂其中耳蜗器官培养组随机分为对照组和５ｍＭＳＳ组，每组３只㊂ＳＧＮ原代培养组随机分为对照组㊁５ｍＭＳＳ组㊁５ｍＭＳＳ＋Ｎ⁃乙酰⁃Ｌ⁃半胱氨酸（Ｎ⁃ａｃｅｔｙｌ⁃Ｌ⁃ｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＮＡＣ）组㊁阳性对照过氧化氢（ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ，Ｈ２Ｏ２）组㊁Ｈ２Ｏ２＋ＮＡＣ组，每组３只㊂１２㊀主要仪器及试剂㊀主要仪器：细胞恒温培养箱（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公司），倒置显微镜及荧光显微镜（奥林巴斯公司）㊂主要试剂：１０ˑ多聚赖氨酸和１００ˑ青链霉素混合液购自索莱宝公司；ＤＭＥＭ⁃Ｆ１２（１ʒ１）培养基㊁胎牛血清㊁胰蛋白酶㊁磷酸缓冲盐溶液（ｐｈｏｓ⁃ｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＰＢＳ）购自Ｇｉｂｃｏ公司；ＳＳ㊁４％多聚甲醛㊁Ｔｒｉｔｏｎｘ⁃１００㊁山羊血清㊁Ｈ２Ｏ２购自Ｓｉｇｍａ公司；ＮＡＣ购自阿拉丁公司；鼠抗βⅢ⁃Ｔｕｂｕｌｉｎ购自Ａｂｃａｍ公司；Ａｌｅｘａ⁃８８９０Ｓ标记山羊抗鼠ＩｇＧ荧光二抗购自美国ＣＳＴ公司；ＣＣＫ８检测试剂购自东仁化学科技有限公司；活性氧检测试剂盒购自碧云天公司；贴壁得购自北京普利莱基因技术有限公司㊂１３㊀实验方法１３１㊀ＳＧＮ原代培养及ＳＳ干预方法㊀ＳＤ大鼠经７５％酒精消毒后断头处死，对半剪开头颅并剔除脑组织后放于４ħＰＢＳ中，在解剖显微镜下分离出完整的耳蜗，剔除螺旋韧带和基底膜，留取完整的蜗轴（即ＳＧＮ所在部位），将其用胰蛋白酶消化１０ｍｉｎ，离心㊁重悬后种植在用多聚赖氨酸包被过的培养皿上，将种植好的细胞放在细胞恒温培养箱中进行培养㊂用含胎牛血清及青链霉素混合液的培养基培养２４ｈ后进行半换液，继续培养２４ｈ后进行药物干预㊂ＳＳ处理组用含５ｍＭＳＳ的培养基进行培养，ＳＳ＋ＮＡＣ组用含１００μＭＮＡＣ培养基预处理１ｈ后再用含５ｍＭＳＳ和１００μＭＮＡＣ的混合培养基进行培养，Ｈ２Ｏ２组用含３００μＭＨ２Ｏ２培养基进行培养，Ｈ２Ｏ２＋ＮＡＣ组用含１００μＭＮＡＣ培养基预处理１ｈ后再加用含３００μＭＨ２Ｏ２和１００μＭＮＡＣ的混合培养基进行培养㊂１３２㊀耳蜗器官处理及培养㊀ＳＤ大鼠经７５％酒精消毒后断头处死，对半剪开头颅并剔除脑组织后放于４ħＰＢＳ中，在解剖显微镜下沿耳蜗纵轴剥开蜗壳，仔细分离螺旋韧带，将含有Ｃｏｒｔｉ器及ＳＧＮ的中回组织取出，平铺在事先用贴壁得孵育过的培养皿上，用含胎牛血清及青链霉素混合液的培养基培养㊂１３３㊀ＳＧＮ中氧化应激水平检测㊀ＳＧＮ加药处理后，移除培养基，用ＤＭＥＭ⁃Ｆ１２无血清培养基洗涤１次㊂加入ＲＯＳ荧光探针ＤＣＦＨ⁃ＤＡ，在３７ħ培养箱中避光孵育２０ｍｉｎ，移除荧光探针，用ＤＭＥＭ⁃Ｆ１２洗涤３次（５ｍｉｎ／次），加入４％多聚甲醛固定３０ｍｉｎ，移除固定液，用ＰＢＳ洗涤３次（１５ｍｉｎ／次）㊂将培养物放入神经元标志βⅢ⁃Ｔｕｂｕｌｉｎ一抗溶液（含１％Ｔｒｉｔｏｎｘ⁃１００＋５％山羊血清）中，４ħ孵育过夜㊂移除一抗溶液，用ＰＢＳ洗涤３次（１５ｍｉｎ／次），滴加Ａｌｅｘａ⁃８８９０Ｓ标记山羊抗鼠ＩｇＧ荧光二抗溶液（含１％Ｔｒｉｔｏｎｘ⁃１００＋５％山羊血清），室温避光孵育２ｈ㊂移除二抗溶液，用ＰＢＳ洗涤３次（１５ｍｉｎ／次）㊂滴加抗荧光淬灭剂，封片后在荧光显微镜下观察并拍照，使用ＩｍａｇｅＪ软件对荧光强度进行量化分析㊂１３４㊀ＣＣＫ８法检测ＳＧＮ细胞存活率㊀取原代培养ＳＧＮ细胞接种于９６孔板中，加药处理４８ｈ后移除药物溶液㊂各孔加入１００μｌＤＭＥＭ⁃Ｆ１２培养基后再加入１０μｌＣＣＫ８反应溶液，继续孵育３ｈ㊂在酶标仪下检测各孔４５０ｎｍ波长处的吸光度（ｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙ，ＯＤ）值㊂实验同时设置空白组（加入等体积的ＤＭＥＭ⁃Ｆ１２培养基及ＣＣＫ８反应溶液，不含细胞）㊂每组设置４个复孔，重复４次实验㊂细胞存活率（％）＝［（处理组ＯＤ值－空白组ＯＤ值）／（对照组ＯＤ值－空白组ＯＤ值）］ˑ１００％㊂１４㊀统计学方法㊀应用ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ９软件对数据进行统计学分析㊂计量资料以均数ʃ标准差（ｘʃｓ）表示，多组均数比较采用单因素方差分析（Ｏｎｅ⁃ｗａｙＡＮＯＶＡ）㊂事后比较采用Ｔｕｋｅｙ检验㊂Ｐ＜００５为差异有统计学意义㊂２㊀结果２１㊀ＳＳ与ＳＧＮ氧化应激水平㊀对于耳蜗器官培养ＳＧＮ对照组和５ｍＭＳＳ组，采用神经元标志物βⅢ⁃Ｔｕｂｕｌｉｎ标记ＳＧＮ，ＳＧＮ胞体和轴突均可见明显的红色荧光；ＲＯＳ荧光探针ＤＣＦＨ⁃ＤＡ呈现绿色荧光，与对照组相比，经５ｍＭＳＳ干预４８ｈ后ＲＯＳ荧光在ＳＧＮ处升高，而在其他位置荧光强度无明显变化㊂见图１㊂为进一步量化ＲＯＳ荧光强度，在原代培养大鼠ＳＧＮ中，与对照组相比，５ｍＭＳＳ干预４８ｈ后，ＲＯＳ平均荧光强度升高（Ｐ＜０００１），与Ｈ２Ｏ２组结果一致（Ｐ＜００００１）㊂见图２㊂注：ⓐⓑ为对照组；ⓒ为ⓐⓑ的融合图；ⓓⓔ为５ｍＭＳＳ处理组；ⓕ为ⓓⓔ融合图图１㊀ＲＯＳ在耳蜗器官的表达（１００ˑ）图图２㊀ＲＯＳ在原代细胞中的表达及量化（２００ˑ）比较图２２㊀氧化应激水平与细胞存活率㊀用氧化应激抑制剂ＮＡＣ处理后，与ＳＳ处理组对比，ＳＧＮ氧化应激水平下降（Ｐ＜００１）㊂ＣＣＫ８实验显示，ＳＳ处理ＳＧＮ４８ｈ后细胞存活率较对照组降低了４１３４％（Ｐ＜００１）㊂在加入ＮＡＣ之后，细胞存活率较ＳＳ组上升３６０５％（Ｐ＜００１），与对照组比较差异无统计学意义（Ｐ＞００５）㊂Ｈ２Ｏ２组处理ＳＧＮ４８ｈ后细胞存活率较对照组下降５２３１％（Ｐ＜０００１），在加入ＮＡＣ之后，ＳＧＮ氧化应激水平下降（Ｐ＜００００１），细胞存活率较Ｈ２Ｏ２组上升３４７３％（Ｐ＜００１）㊂见图３㊂图３㊀ＳＧＮ在不同处理组中的细胞存活率比较图３㊀讨论３１㊀药物性耳聋（ｄｒｕｇ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｈｅａｒｉｎｇｌｏｓｓ，ＤＩＨＬ）是最常见的后天性感音神经性聋㊂ＳＳ作为全球用量最大的非处方药物阿司匹林的有效成分，可以高效㊁快速㊁稳定㊁可逆地诱导实验动物耳鸣甚至双侧对称的以高频为主的轻度至中度聋，因此是研究ＤＩＨＬ的良好工具药物㊂ＳＧＮ是听觉神经通路的初级神经元，噪声㊁衰老㊁药物等各种原因造成的感音神经性聋，最终都造成ＳＧＮ的不可逆损伤㊂本研究表明５ｍＭＳＳ处理原代培养ＳＧＮ４８ｈ后，细胞存活率下降㊂由于ＳＧＮ缺乏再生能力，ＳＧＮ的变性和丧失将导致不可逆感音神经性聋㊂因此，探索ＳＧＮ损伤的深层机制，对治疗ＤＩＨＬ以及其他神经性耳聋具有重要意义㊂３２㊀ＳＳ致神经元的损伤与兴奋毒性有关㊂研究发现，ＳＳ显著增加小脑旁绒球的谷氨酸水平，使其兴奋性中间神经元自发放电率显著增加［１０］㊂在听觉系统中，ＳＳ能上调耳蜗背侧核［１１］㊁下丘以及听皮层［１２］ＮＭＤＡ受体表达㊂本课题组的前期研究也证实，ＳＳ易化ＳＧＮ的ＮＭＤＡ受体的电流［１３］，上调ＳＧＮ的ＮＭＤＡ受体表达［１４］，促进ＧＡＢＡＡ受体内化［１５］，可逆地抑制ＧＡＢＡＡ受体电流［１６］，使兴奋与抑制的平衡失调㊂这一系列的研究结果证实了ＳＳ可通过兴奋毒性介导ＳＧＮ损伤㊂３３㊀ＳＳ致神经元损伤的发生发展与氧化应激㊁凋亡密切相关㊂ＲＯＳ通过引起细胞内酶活性改变㊁蛋白质变性㊁细胞膜结构㊁功能破坏等最终导致神经元变性或坏死［１７］㊂本研究发现ＳＳ处理耳蜗器官４８ｈ后，ＲＯＳ在ＳＧＮ上显著升高，而在支持细胞㊁成纤维细胞等其他细胞中无明显变化，提示ＳＳ选择性增强ＳＧＮ的氧化应激水平㊂应用氧化应激抑制剂ＮＡＣ可显著降低ＳＧＮ的氧化应激水平，使细胞存活率上升，与阳性对照结果一致，提示ＳＳ通过增强氧化应激造成ＳＧＮ死亡㊂本课题组此前的研究也发现在体外培养的大鼠耳蜗器官中，ＳＳ作用４８ｈ后导致ＳＧＮ发生神经纤维水泡化和断裂，核固缩和核碎裂等凋亡形态学改变，并且具有ＳＳ浓度及处理时间依赖性㊂然而，毛细胞及支持细胞即使在ＳＳ高浓度（１０ｍＭ）和长时间（９６ｈ）的处理下，仍然没有明显的形态学损伤表现㊂ＳＳ处理后，只有ＳＧＮ中的过氧化物阴离子增加，这提示ＳＳ可能选择性地导致ＳＧＮ产生氧化应激损伤［９］㊂Ａｂｄ⁃Ｅｌｈａｋｉｍ等［１８］研究发现在大鼠大脑皮层和海马组织中，ＳＳ提高了丙二醛和ｃａｓｐａｓｅ⁃３水平，但总抗氧化能力和Ｂ细胞淋巴瘤⁃２（Ｂｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ⁃２，Ｂｃｌ⁃２）水平降低，神经元变性坏死㊂另外，ＳＳ使人神经母细胞瘤细胞ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ内的ＲＯＳ水平增加，ｃａｓｐａｓｅ⁃３表达增加，导致ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞凋亡［８］㊂其他的非甾体抗炎药（ｎｏｎ⁃ｓｔｅｒｏｉｄａｌａｎｔｉ⁃ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｒｕｇ，ＮＳＡＩＤ）如双氯芬酸作用ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ后，使ＲＯＳ水平升高，ｃａｓｐａｓｅ⁃３㊁ｃａｓｐａｓｅ⁃８㊁ｂａｘ㊁细胞色素ｃ和ｐ５３表达水平升高，抗凋亡Ｂｃｌ⁃２水平降低，引起氧化应激和细胞凋亡［１９］㊂不仅在神经元中，ＳＳ亦造成其他细胞的氧化应激和凋亡㊂研究发现ＳＳ可以通过激活Ｒａｃ１⁃ＮＡＰＤＨ氧化酶依赖途径使ＲＯＳ增加，进而造成线粒体膜电位下降，ｃａｓｐａｓｅ激活，导致胃癌细胞凋亡［２０］㊂在ＰＥＬ原发性渗出性淋巴瘤细胞和Ｃ６胶质细胞中，ＳＳ均导致ＲＯＳ大量生成，最终造成细胞凋亡［２１⁃２２］㊂这一系列的研究结果表明，ＳＳ通过氧化应激介导ＳＧＮ损伤㊂３４㊀在神经元中，胞内Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）升高能够增强氧化应激㊂在分离的线粒体中发现，高浓度的Ｃａ２＋通过开放线粒体通透性转换孔增加ＲＯＳ的生成［２３］㊂而在氟化钠诱导的ＳＨ⁃ＳＹ５Ｙ细胞毒性损伤中发现，［Ｃａ２＋］ｉ升高伴随ＲＯＳ增加，Ｃａ２＋螯合剂可以抑制ＲＯＳ生成，但抗氧化剂不能抑制［Ｃａ２＋］ｉ上调，表明［Ｃａ２＋］ｉ上调是氧化应激的上游介导因素［２４］㊂ＳＳ能升高神经元的［Ｃａ２＋］ｉ㊂小鼠被注射ＳＳ后，大脑神经元中钙相关的活动增强［２５］㊂ＳＳ也增强耳蜗背侧核神经元的钙内流［２６］㊂本课题组的前期研究证实了ＳＳ易化ＮＭＤＡ受体电流（一种配体门控钙内流）［１３］，其他学者也证实了阿司匹林选择性增强ＳＧＮ中ＮＭＤＡ诱导的电流［２７］㊂当ＮＭＤＡ受体被过度激活时，［Ｃａ２＋］ｉ会急剧上升，并引起兴奋毒性［２８］㊂上述结果提示，ＳＳ通过易化ＳＧＮ的ＮＭＤＡ受体，升高［Ｃａ２＋］ｉ，并可能由此增强ＳＧＮ的氧化应激，进而介导ＳＧＮ损伤㊂综上所述，ＳＳ通过增强ＳＧＮ的氧化应激引起ＳＧＮ的损伤，使用氧化应激抑制剂能够降低ＳＧＮ的氧化应激，并且对ＳＳ致ＳＧＮ损伤具有保护作用㊂关于氧化应激引起ＳＧＮ损伤的具体机制仍需要进一步研究㊂参考文献［１］Ａｂｄ⁃ＥｌｈａｋｉｍＹＭ，Ａｂｄｅｌ⁃ＭｏｔａｌＳＭ，ＭａｌｈａｔＳＭ，ｅｔａｌ．Ｃｕｒｃｕｍｉｎａｔｔｅｎｕａｔｅｓｇｅｎｔａｍｉｃｉｎａｎｄｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅｏｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓｂｙｍｏｄｕ⁃ｌａｔｉｎｇｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ⁃ｋａｐｐａＢａｎｄａｐｏｐｔｏｔｉｃｐａｔｈｗａｙｓｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＳｃｉＰｏｌｌｕｔＲｅｓＩｎｔ，２０２２，２９（６０）：８９９５４－８９９６８．［２］ＷｅｉＬ，ＤｉｎｇＤ，ＳａｌｖｉＲ．Ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｃｏｃｈｌｅａｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ⁃ａｐｏｐｔｏｓｉｓｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０１０，１６８（１）：２８８－２９９．［３］ＰａｃｉｅｌｌｏＦ，ＰｉｓａｎｉＡ，ＲｏｌｅｓｉＲ，ｅｔａｌ．Ｎｏｉｓｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｃｏｃｈｌｅａｒｄａｍａｇｅｉｎｖｏｌｖｅｓＰＰＡＲｄｏｗｎ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｉｎｔｅｒｐｌａｙｂｅｔｗｅｅｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ（Ｂａｓｅｌ），２０２１，１０（８）：１１８８．［４］ＱｉＦ，ＺｈａｎｇＲ，ＣｈｅｎＪ，ｅｔａｌ．Ｄｏｗｎ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＣａｖ１３ｉｎａｕｄｉｔｏｒｙｐａｔｈｗａｙｐｒｏｍｏｔｅｓａｇｅ⁃ｒｅｌａｔｅｄｈｅａｒｉｎｇｌｏｓｓｂｙｅｎｈａｎｃｉｎｇｃａｌｃｉｕｍ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｍａｌｅｍｉｃｅ［Ｊ］．Ａｇｉｎｇ（ＡｌｂａｎｙＮＹ），２０１９，１１（１６）：６４９０－６５０２．［５］ＲａｍｋｕｍａｒＶ，ＭｕｋｈｅｒｊｅａＤ，ＤｈｕｋｈｗａＡ，ｅｔａｌ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｃａｕｓｅｄｂｙｃｉｓｐｌａｔｉｎｏｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ［Ｊ］．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ（Ｂａｓｅｌ），２０２１，１０（１２）：１９１９．［６］Ｔｈｒａｓｈ⁃ＷｉｌｌｉａｍｓＢ，ＫａｒｕｐｐａｇｏｕｎｄｅｒＳＳ，ＢｈａｔｔａｃｈａｒｙａＤ，ｅｔａｌ．Ｍｅｔｈ⁃ａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃｔｏｘｉｃｉｔｙｐｒｅｖｅｎｔｅｄｏｗｉｎｇｔｏｔｈｅｎｅｕ⁃ｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＬｉｆｅＳｃｉ，２０１６，１５４：２４－２９．［７］ＭａｄａｔｈｉｌＳＫ，ＫａｒｕｐｐａｇｏｕｎｄｅｒＳＳ，ＭｏｈａｎａｋｕｍａｒＫＰ．Ｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃ⁃ｙｌａｔｅｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｒｏｔｅｎｏｎｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｓｙｎ⁃ａｐｓｅ，２０１３，６７（８）：５０２－５１４．［８］ＳｏｎｇＡ，ＣｈｏＧＷ，ＶｉｊａｙａｋｕｍａｒＫＡ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｖａｌｐｒｏｉｃａｃｉｄｏｎｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｔｉｎｎｉｔｕｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ，２０２１，２３（１）：２３．［９］ＤｅｎｇＬ，ＤｉｎｇＤ，ＳｕＪ，ｅｔａｌ．Ｓａｌｉｃｙｌａｔｅｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙｋｉｌｌｓｃｏｃｈｌｅａｒｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓｂｙｐａｒａｄｏｘｉｃａｌｌｙｕｐ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ［Ｊ］．Ｎｅｕ⁃ｒｏｔｏｘＲｅｓ，２０１３，２４（３）：３０７－３１９．［１０］ＤｕＹ，ＬｉｕＪ，ＪｉａｎｇＱ，ｅｔａｌ．Ｐａｒａｆｌｏｃｃｕｌｕｓｐｌａｙｓａｒｏｌｅｉｎｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｔｉｎｎｉｔｕｓ［Ｊ］．ＨｅａｒＲｅｓ，２０１７，３５３：１７６－１８４．［１１］ＨｕＳＳ，ＭｅｉＬ，ＣｈｅｎＪＹ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｍｍｅｄｉａｔｅ⁃ｅａｒｌｙｇｅｎｅｓｉｎｔｈｅｄｏｒｓａｌｃｏｃｈｌｅａｒｎｕｃｌｅｕｓｉｎｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｔｉｎｎｉｔｕｓ［Ｊ］．ＥｕｒＡｒｃｈＯｔｏｒｈｉｎｏｌａｒｙｎｇｏｌ，２０１６，２７３（２）：３２５－３３２．［１２］ＨｕＳＳ，ＭｅｉＬ，ＣｈｅｎＪＹ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｍｍｅｄｉａｔｅ⁃ｅａｒｌｙｇｅｎｅｓｉｎｔｈｅｉｎｆｅｒｉｏｒｃｏｌｌｉｃｕｌｕｓａｎｄａｕｄｉｔｏｒｙｃｏｒｔｅｘｉｎｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｔｉｎ⁃ｎｉｔｕｓｉｎｒａｔ［Ｊ］．ＥｕｒＪＨｉｓｔｏｃｈｅｍ，２０１４，５８（１）：２２９４．［１３］ＧａｏＭ，ＦａｎｇＸＹ，ＦｅｎｇＳ，ｅｔａｌ．ＳａｌｉｃｙｌａｔｅｅｎｈａｎｃｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｃｏｃｈｌｅａｒｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ］．ＪＯｔｏｌ，２０１２，７（１）：９－１４．［１４］邓莉俐．水杨酸钠诱导耳蜗螺旋神经节神经元损伤机制的研究［Ｄ］．南宁：广西医科大学，２０１３．［１５］ＱｉｎＤ，ＬｉｕＰ，ＣｈｅｎＨ，ｅｔａｌ．Ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｏｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｓｐｉ⁃ｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓ：Ｃａ２＋／ＣａＭＫＩＩ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｄＧＡＢＡＡｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏｔｏｘＲｅｓ，２０１９，３５（４）：８３８－８４７．［１６］蔡㊀正，姚㊀晨，陈慧英，等．水杨酸钠可逆性抑制耳蜗螺旋神经节神经元ＧＡＢＡａ受体电流［Ｊ］．中华耳科学杂志，２０１５，１３（１）：８７－９１．［１７］展巧稚，阎文军．Ｇｈｒｅｌｉｎ对围术期神经认知障碍小鼠术后海马氧化应激及炎性反应的影响［Ｊ］．中国临床新医学，２０２２，１５（１２）：１１５８－１１６３．［１８］Ａｂｄ⁃ＥｌｈａｋｉｍＹＭ，Ａｂｄｅｌ⁃ＭｏｔａｌＳＭ，ＭａｌｈａｔＳＭ，ｅｔａｌ．Ｃｕｒｃｕｍｉｎｍｉｔｉｇａｔｅｓｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃａｎｄｎｅｕｒｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｇｅｎｔａｍｉｃｉｎａｎｄｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅｉｎｒａｔｓｂｙａｄｊｕｓｔｉｎｇｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＬｉｆｅＳｃｉ，２０２１，２６５：１１８８２４．［１９］ＤａｒｅｎｄｅｌｉｏｇｌｕＥ．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｈｒｙｓｉｎｏｎｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ⁃ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎＳＨ⁃ＳＹ５Ｙｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏｃｈｅｍＲｅｓ，２０２０，４５（５）：１０６４－１０７１．［２０］ＶａｅｔｅｅｗｏｏｔｔａｃｈａｒｎＫ，ＭｉｔｃｈａｉＭ，ＳｒｉｋｏｏｎＰ，ｅｔａｌ．Ｐｏｔｅｎｔｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ⁃ＪＮＫ⁃ｐ３８ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｂｙｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓｄｅａｔｈｏｆｐｒｉｍａｒｙｅｆｆｕｓｉｏｎｌｙｍｐｈｏｍａｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＲｅｓ，２０１４，３４（４）：１８６５－１８７１．［２１］ＳｅｏＭＳ，ＯｈＳＹ，ＰａｒｋＭＪ，ｅｔａｌ．Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅ⁃ｃｉｅｓ，ＥＲＫ１／２，ａｎｄｐ３８ＭＡＰＫｉｎｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ７２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＣ６ｇｌｉｏｍａｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ，２００５，１６（５）：８４１－８４９．［２２］ＣｈｕｎｇＹＭ，ＢａｅＹＳ，ＬｅｅＳＹ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒｏｒｄｅｒｉｎｇｏｆＲＯＳｐｒｏｄｕｃ⁃ｔｉｏｎ，ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｃｈａｎｇｅｓ，ａｎｄｃａｓｐａｓｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｓｏｄｉｕｍｓａｌｉｃｙｌａｔｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＦｒｅｅＲａｄｉｃＢｉｏｌＭｅｄ，２００３，３４（４）：４３４－４４２．［２３］ＦｅｉｓｓｎｅｒＲＦ，ＳｋａｌｓｋａＪ，ＧａｕｍＷＥ，ｅｔａｌ．ＣｒｏｓｓｔａｌｋｓｉｇｎａｌｉｎｇｂｅｔｗｅｅｎｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＣａ２＋ａｎｄＲＯＳ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＢｉｏｓｃｉ（ＬａｎｄｍａｒｋＥｄ），２００９，１４（４）：１１９７－１２１８．［２４］ＸｕＺ，ＸｕＢ，ＸｉａＴ，ｅｔａｌ．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＣａ２＋ａｎｄＲＯＳｄｕｒｉｎｇｆｌｕｏｒｉｄｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｊｕｒｙｉｎＳＨ⁃ＳＹ５Ｙｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＴｏｘｉｃｏｌ，２０１３，２８（６）：３０７－３１２．［２５］ＧｒöｓｃｈｅｌＭ，ＧöｔｚｅＲ，ＭüｌｌｅｒＳ，ｅｔａｌ．Ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓａｃｔｉｖｉｔｙｕｐｏｎｓｙｓｔｅｍｉｃｓａｌｉｃｙｌａｔｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎａｎｉｍａｌｓｗｉｔｈｋａｎａｍｙｃｉｎ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｈｅａｒｉｎｇｌｏｓｓａｍａｎｇａｎｅｓｅ⁃ｅｎｈａｎｃｅｄＭＲＩ（ＭＥＭＲＩ）ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１６，１１（４）：ｅ０１５３３８６．［２６］ＺｕｇａｉｂＪ，ＬｅãｏＲＭ．Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｅｘｃｉｔａｔｉｏｎｉｎｇｌｙｃｉｎｅｒｇｉｃｎｅｕ⁃ｒｏｎｓｂｙｐｒｏｌｏｎｇｅｄｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｈｉｇｈｄｏｓｅｓｏｆｓａｌｉｃｙｌａｔｅ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏ⁃ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１８，３７６：７２－７９．［２７］ＰｅｎｇＢＧ，ＣｈｅｎＳ，ＬｉｎＸ．ＡｓｐｉｒｉｎｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙａｕｇｍｅｎｔｅｄＮ⁃ｍｅｔｈｙｌ⁃Ｄ⁃ａｓｐａｒｔａｔｅｔｙｐｅｓｏｆｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｓｐｉｒａｌｇａｎｇｌｉｏｎｎｅｕｒｏｎｓｏｆｍｉｃｅ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏｓｃｉＬｅｔｔ，２００３，３４３（１）：２１－２４．［２８］ＩａｃｏｂｕｃｃｉＧＪ，ＰｏｐｅｓｃｕＧＫ．ＳｐａｔｉａｌｃｏｕｐｌｉｎｇｔｕｎｅｓＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｓｐｏｎｓｅｓｖｉａＣａ２＋ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ［Ｊ］．ＪＮｅｕｒｏｓｃｉ，２０１９，３９（４５）：８８３１－８８４４．［收稿日期㊀２０２３－０１－０３］［本文编辑㊀余㊀军㊀吕文娟］本文引用格式祝小婷，黄佳琳，林晓宇，等．水杨酸钠增强氧化应激介导耳蜗螺旋神经节神经元损伤作用的实验观察［Ｊ］．中国临床新医学，２０２３，１６（５）：４４７－４５１．。

水杨酸钠致耳鸣大鼠的行为学及听性脑干反应改变

水杨酸钠致耳鸣大鼠的行为学及听性脑干反应改变陈抗松;廖华;杨希林;陈建新;解为全;吴莎【摘要】Objective To observe behavioral changes and auditory brainstcm response ( ABR) changes of tinnitus rat model induced by salicylate. Methods Eighteen rats were randomly divided into three groups: control group,saline group and salicylate group with 6 rats for each. The salicylate group was injected intrapcritoncaiiy by salicylate on dose of 350 mg/kg at 8:00 am every day and the saline group was managed with saline on same dose at the same time. Animal behaviours were observed respectively by automatic tracking system on day one before injection, 14 days and 28 days after onset. In the present study, ABR was also tested by TDT at 1 day before injection,7 days, 14 days,28 days after onset for rats in the salicylate group. Results Compared with the control group and the saline group, the basic index of animal behaviour in Psychopharmacoiogy were markedly difference in the salicylate group(P<0. 01) at 14 days and 28 days after onset, while there was no significant difference between the control group and the saline group (P>0. 05). Within the salicylate group, the ABR threshold after injection were significantly higher than that before experiment ,and the longer the injection,the higher the ABR thresholds. At 7 days after onset, there were no statistical difference on latencies of each wave and intcrpcak latency intervals we could recorded (P>0. 05) . Compared with the ABR results before experiment and at 7 days, there were significant differences on the above latencies and intervals at 14 daysand 28 days(P<0. 05). Conclusion The changes of behavioral features of rat model of tinnitus induced by salicylatc indicate that tinnitus affects the psychological condition of animals in a degree. The ABR test provide objective evidence for the toxic effect and abnormal electric activities on peripheral brainstcm auditory pathway of rat after long-term and high - dose salicylatc injection.%目的观察水杨酸钠致耳鸣大鼠模型的行为学和听性脑干反应的改变,探讨耳鸣与精神行为异常的关系.方法 18只成年Wistar大鼠随机分为对照组、盐水组和水杨酸组,每组6只.水杨酸组每天按时腹腔注射350 mg/kg的水杨酸钠1次,连续28天,盐水组每天同一时间腹腔注射等量生理盐水,对照组不注射任何药物,观察各组大鼠注射前1天、注射第14、28天的旷场行为,并在实验前1天、注射第7、14、28天对水杨酸组大鼠进行ABR检测.结果注射水杨酸钠第14、28天,与盐水组和对照组比较,水杨酸组大鼠除粪便数量增加外,总行程、平均速度、直立次数、中央格停留时间、体重增长量、摄食量、24 h液体消耗量和糖水偏爱均显著降低(P<0.01);盐水组与对照组比较,各旷场行为差异无统计学意义(P>0.05).水杨酸组大鼠注射前和注射第7、14、28天ABR反应阈分别为36.67±4.08、50.00±5.48、64.17±8.61、75.00±4.47 dB SPL,差异均有统计学意义(均P<0.05),注射第14天与注射前、注射第7天比较,水杨酸组大鼠ABR波Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ潜伏期均延长(P<0.05),而各波间期差异无统计学意义(P>0.05);注射第28天与注射前、注射第7天比较,各波潜伏期及Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波间期延长,差异有统计学意义(P<0.05),与注射第14天比较,各波潜伏期及Ⅰ-Ⅲ波间期差异无统计学意义(P<0.05),而Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波间期延长(P<0.05).结论水杨酸钠致耳鸣大鼠的旷场行为表现异常,在一定程度上可反映耳鸣对其精神心理的影响;长期注射水杨酸钠可导致大鼠ABR反应阈升高,波潜伏期延长.【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2013(021)002【总页数】4页(P163-166)【关键词】水杨酸;耳鸣;动物行为学;听性脑干反应【作者】陈抗松;廖华;杨希林;陈建新;解为全;吴莎【作者单位】武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060;武汉大学人民医院精神卫生中心;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060【正文语种】中文【中图分类】R764.45耳鸣是耳科临床最常见的症状之一，耳鸣与心理因素密切相关，严重耳鸣可能使患者产生烦恼、焦虑、抑郁等不良情绪且在无意识中不断增强，继而耳鸣被感知为令人厌烦的信号，使精神紧张或抑郁加剧并形成恶性循环的条件反射[1]。

水杨酸盐对大鼠听觉中枢代谢功能影响的研究

水杨酸盐对大鼠听觉中枢代谢功能影响的研究易彬;鲍伟奇;石润杰;左传涛;吴聪;黄治物;吴皓【摘要】Objective To investigate the neural activity in the central auditory pathway by using a tinnitus an-imal model .Methods Twenty -four rats were randomly divided into the control ,acute salicylate treatment ,chronic salicylate treatment ,and recovery groups .The gap prepulse inhibition of acoustic startle test was used to confirm tinnitus -like behavior .After delivery of an intravenous bolus of fluorine -18 fluorodeoxyglucose (18F -FDG ) , small animal positron emission tomography scans were performed on rats .Results Only rats in chronic salicylate -treatment group showed evidence of experiencing tinnitus .The SUV ratios of the AC were significantly greater in the acute salicylate treatment group than in the control group (P<0 .01) ,suggesting relatively increased metabolism in the two brain regions of the rats in this group .The SUV ratios of the IC and AC (P<0 .01) ,but not of the CRB (P>0 .05) were greater in the chronic salicylate treatment group than in the control groups .There was a significant difference in whole brain SUVs between the control and acute salicylate treatment groups (P<0 .01) ,the whole brain SUVs in chronic salicylate treatment group were a little higher but showed no significant difference (P>0 .05) .There was no significant difference in the SUVs between the control and recovery groups (P>0 .05) .Conclu-sion These findings indicate that long -term salicylate administration induced tinnitus in rats and may have en-hanced neural activity corresponded to the up -regulated metabolic rate in our study .Alterations to neuroplasticity of the CNS may lead to tinnitus .%目的通过检测耳鸣模型大鼠听觉中枢听皮层和下丘的大脑活动功能,探讨中枢可塑性在耳鸣形成中的作用.方法 24只大鼠按照给药方式分为正常对照组(生理盐水连续注射14天)、急性注射组(水杨酸钠400mg/kg 单次注射)、慢性注射组(水杨酸钠200mg/kg连续注射14天,每天2次)和慢性恢复组(水杨酸钠200mg/kg连续注射14天,每天2次,然后恢复14天)四组,每组6只.各组大鼠在相应处理完毕后以听觉惊跳反射前抑制试验(gas-prepulse inhibition of austic startle reflex,GPIAS)检测耳鸣样行为,微型正电子发射断层显像/X线计算机体层成像(microPET/CT)检测听皮层和下丘的18F-FDG标准摄取值(standardized uptake values,SUV),同时以小脑脑区作为对照,比较各组间的差异.结果 GPIAS显示仅慢性注射组大鼠出现耳鸣样行为,GPIAS值在12和16kHz明显下降;microPET/CT结果显示,与正常对照组相比慢性注射组下丘和听皮层的SUV值相对性升高(P<0.01),急性注射组仅听皮层出现相对性升高(P<0.01),小脑脑区均未出现显著的相对性升高(P>0.05),说明慢性注射组下丘和听皮层神经活跃度升高,急性注射组听皮层神经活跃度升高;与正常对照组比较,急性注射组全脑区SUV 值显著升高(P<0.01),说明其呈现全脑活跃状态,而慢性注射组全脑区SUV值仅轻微上升,差异无统计学意义(P>0.05);对照组和慢性恢复组间各项数据差异无统计学意义(P>0.05).结论慢性注射水杨酸钠所诱导的耳鸣大鼠模型下丘和听皮层脑区活跃度上升,这可能是听觉中枢在中枢可塑性的引导下发生的功能性变化,最终导致持续性耳鸣.【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2018(026)001【总页数】5页(P73-77)【关键词】耳鸣;水杨酸盐;听觉中枢;微型正电子发射断层显像/X线计算机体层成像;中枢可塑性【作者】易彬;鲍伟奇;石润杰;左传涛;吴聪;黄治物;吴皓【作者单位】上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉-头颈外科上海200011;上海交通大学医学院耳科学研究所;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;复旦大学附属华山医院-PET中心;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉-头颈外科上海 200011;上海交通大学医学院耳科学研究所;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;复旦大学附属华山医院-PET中心;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉-头颈外科上海 200011;上海交通大学医学院耳科学研究所;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉-头颈外科上海 200011;上海交通大学医学院耳科学研究所;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉-头颈外科上海200011;上海交通大学医学院耳科学研究所;上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R764.43+3水杨酸盐是一种临床上常用的非甾体类解热镇痛药物，最常见的副作用为耳毒性和胃肠道反应等。

慢性注射水杨酸钠使大鼠耳蜗prestin表达上调

慢性注射水杨酸钠使大鼠耳蜗prestin表达上调黄治物;杨琨;肖伯奎【期刊名称】《中华耳科学杂志》【年(卷),期】2010(008)004【摘要】目的前期研究表明急性及慢性注射水杨酸钠可致豚鼠畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emissions,DPOAE)幅值可逆性改变.本研究通过对急性及慢性水杨酸钠肌注后,大鼠耳蜗prestin基因mRNA及其蛋白表达的检测,探讨其引起DPOAE幅值改变的可能机制.方法实验动物随机分为慢性组、急性组、慢性恢复组、正常对照组.各组大鼠断头处死后迅速剥离耳蜗;采用基于Taqman探针的荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction,real-time RT-PER)及Westernblot(蛋白质印迹)方法,检测各组大鼠耳蜗prestin基因mRNA及其蛋白的表达变化.结果 (1)慢性组prestin基因mRNA及其蛋白表达水平较正常组高,差异有显著性(P<0.05),其中mRNA上调2.25倍;(2)急性水杨酸钠注射组prestin基因mRNA及其蛋白表达量水平与正常对照组无显著性差异(P>0.05);(3)慢性注射水杨酸钠后恢复28天,大鼠耳蜗中prestin基因mRNA及其蛋白表达水平与正常对照组无显著性差异(P>0.05).结论 (1)急性注射水杨酸钠对耳蜗prestin基因的表达无影响;(2)长期注射水杨酸钠使耳蜗prestin基因表达可逆性上调可能是其引起DPOAE幅值增加的主要因为,推测水杨酸钠致耳鸣极可能起源于OHC水平,为水杨酸钠致耳鸣的机制提供了重要的实验依据.【总页数】5页(P451-455)【作者】黄治物;杨琨;肖伯奎【作者单位】上海交通大学附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科,上海交通大学耳科学研究所,上海,200092;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430060【正文语种】中文【中图分类】R339.16;R764.45;R971.1【相关文献】1.水杨酸钠对大鼠耳蜗NKCC1 mRNA表达的影响 [J], 姚可青;黄治物;杨琨;黄娟2.水杨酸钠作用后大鼠耳蜗K-Cl协同转运体家族mRNA表达研究 [J], 黄娟;黄治物;杨琨;肖伯奎3.正常及慢性水杨酸钠作用后大鼠耳蜗总RNA的提取和产量 [J], 陈平;肖伯奎;黄治物4.水杨酸钠诱导大鼠耳蜗中DAPK1表达改变 [J], 翟思佳; 黄巧; 廖行伟; 刘宇超; 尹时华5.水杨酸钠急慢性注射致豚鼠耳蜗形态学的改变 [J], 黄治物;罗燕云;肖伯奎;吴展元因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

长期注射水杨酸钠大鼠下丘EphA4的表达

长期注射水杨酸钠大鼠下丘EphA4的表达王文静;杨琨;廖华;杨希林;刘行【摘要】Objective To investigate the influences of sodium salicylate on the auditory brainstem response (ABR)and expression of EphA4mRNA in rat inferior colliculus and its effects on salicylate ototoxicity.Methods A total of 30 healthy SPF rats were randomly divided into five groups:the control group (without any treatment),S7 (i.m.injection of sodiumsalicylate,175mg/kg,twice daily for 7 days),S14(the same method asS7,twice daily for 14 days),S14+R14(the same method as S14,twice daily for 14 days and recovered for 14 days),and S14+R28(the same method as S14,twice daily for 14 days and recovered for 28 days).After the ABR assessment,rats were sacri-ficed after deep anesthesia and the inferior colliculus tissues were dissected.Real-time PCR was used to detect the expression of EphA4mRNA.Results Compared with the control group,ABR thresholds in the S7 group and S14 group were increased significantly(P<0.05),while there was no significant difference between the control group and the S14+R28 group (P>0.05).The inferior colliculus EphA4mRNA expression level of S7 group was signifi-cantly decreased than the control group (P<0.05).The EphA4mRNA expression level of S7 group was significant-ly decreased than the control group (P<0.05),while there was no significantly difference between the control group and the S14+R28 group (P>0.05).Conclusion Long term injection of sodium salicylate can cause changes in the inferior colliculus of EphA4mRNA which are relatedclosely with synaptic plasticity.It may lead the alteration of the inferior colliculus synaptic plasticity,which is associated with the changes of the hearing failure and the tinni-tus behavior.This indicates that EphA4 which is considered as a related protein in the inferior colliculus may play an important role in the pathology of tinnitus.%目的：通过观察长期水杨酸钠作用后大鼠ABR及下丘EphA4mRNA表达变化，探讨下丘EphA4表达在水杨酸钠耳毒性中的作用。

水杨酸钠对大鼠耳蜗NKCC1 mRNA表达的影响

水杨酸钠对大鼠耳蜗NKCC1 mRNA表达的影响姚可青;黄治物;杨琨;黄娟【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2009(17)3【摘要】目的研究水杨酸钠作用后大鼠耳蜗Na+-K+-2Cl-联合转运体(Na+-K+-2 Cl-co-trans-porter,NKCC1)mRNA的表达变化情况.探讨NKCC1在水杨酸钠肌注后引起大鼠耳蜗主动性改变中的作用和意义.方法选用24只正常成年SD大鼠,随机分成四组,每组6只:正常对照组(无特殊处理)、急组(一次肌注水杨酸钠400 mg/kg后处死)、慢性组(肌注水杨酸钠175 mg/kg,2次/天,连续用药14天后处死),恢复组(给药方法及时间同慢性组,停药14天后处死),运用荧光定量PCR技术比较四组大鼠耳蜗NKCC1mRNA的表达变化.结果 NKCC1mRNA在正常对照组,急性组、慢性组、恢复组均有表达.慢性组、恢复组的表达量均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);急性组NKCC1mRNA的表达低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);恢复组NKCC1mRNA的表达低于慢性组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NKCC1mRNA在正常大鼠中有表达,提示其对维持内淋巴液中Cl-的平衡有一定作用;水杨酸钠肌注可以引起大鼠耳蜗NKCC1>mRNA表达变化,可能通过改变耳蜗内淋巴液Cl浓度平衡,而影响外毛细胞的电能动性.%Objective To investigate the different expression levels of Na+ - K+ - 2Cl- co- transporter NKCC1 mRNA in the cochlea of rats after sodium salicylate injection and to explore the mechanism underlying the change of outer hair cells, induced by different salicylate administration. Methods Twenty-four normal adult rats were randomly divided into four groups with six rats in each group.Rats in control group,did not recieve sodium sa-licylate injection. The other three groups were acute group,chronic group,and recovered group according to the dif-ferent doses of sodium salicylate. The fluorescence quantitative PCR method was used to detect the expression levels of NKCC1 mRNA in the rat cochleas of the four groups. Results NKCC1 mRNA was expressed in all of the four groups. After sodium salicylate injection, the expressions of NKCC1 mRNA in chronic and recovered group were higher than that in control group(P<0.05). While the expression of NKCC1 mRNA in acute group was lower than that in control group(P(0. 05). Conclusion The expression of NKCC1 mRNA in the normal cochlea indicates that NKCC1 may play an important role in the maintenance of Cl- in the endolymph of the cochlea. The alteration of NKCC1 mRNA expression caused by sodium salicylate injection may lead to the change of the outer hair cell electro-motility.【总页数】3页(P258-260)【作者】姚可青;黄治物;杨琨;黄娟【作者单位】武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉430060;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R339.16【相关文献】1.水杨酸钠作用后大鼠耳蜗K-Cl协同转运体家族mRNA表达研究 [J], 黄娟;黄治物;杨琨;肖伯奎2.固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA表达的影响 [J], 李莉;李卫华;王俊锋;宋红梅;熊大经3.水杨酸钠对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞外向延迟整流钾电流及其尾电流的影响 [J], 江远明;肖红俊;何圆圆;杨琛;韦永豪;郑娜;马志跃4.水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1mRNA表达的影响 [J], 曾英;吴立连5.固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响 [J], 李莉;王俊锋;熊大经因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水杨酸钠注射后大鼠听觉通路突触素表达的变化

水杨酸钠注射后大鼠听觉通路突触素表达的变化朱艳双;赵德安【期刊名称】《浙江医学》【年(卷),期】2013(000)022【摘要】目的：检测水杨酸钠注射后大鼠耳蜗核、上橄榄核、下丘脑及听皮层突触素表达的变化，探讨听觉通路的可塑性变化与耳鸣发病机制的关系。

方法将36只大鼠随机分为6组（每组6只）：按照注射药物时间长短的不同分为Ⅰ、Ⅱ组，其中Ⅰ组注射药物时间为14d，Ⅱ组注射药物时间为21d（空白对照组不注射药物）；两组又各自分为A、B、C 3个亚组，其中A组为水杨酸钠组，B为0.9%氯化钠溶液组，C为空白对照组。

ⅠA组：每次条件反射训练前3h腹腔注射10%水杨酸钠溶液（350mg/kg），至实验结束；ⅠB组：每次条件反射训练前3h腹腔注射同体积0.9%氯化钠溶液，至实验结束；ⅠC组：饲养在安静环境中，不限饮食，不注射药物，不进行条件反射训练；ⅡA、ⅡB、ⅡC组的分组方法同前。

应用免疫组化技术检测各组大鼠听觉通路中4个核团突触素表达的情况。

结果早期耳鸣组（ⅠA）与持续耳鸣组（ⅡA）同其余组大鼠相比，耳蜗核、上橄榄核、下丘脑、听皮层突触素的表达都明显增多（均P＜0.01）；且ⅡA组各核团中突触素的表达均较ⅠA组增多（均P＜0.01）。

结论水杨酸钠注射可成功建立大鼠耳鸣模型，耳鸣大鼠听觉通路突触素表达的改变为耳鸣的中枢源性学说提供了部分理论依据。

%Objective To investigate the expression of synaptophysin in cochlear nucleus, superior olivary nucleus, infe-rior col iculus and auditory cortex of rats after salicylate injection. Methods Thirty- six Wistar rats were randomly divided into 3 groups: rats in group A received intraperitoneal(i.p) infection of 350 mg/kg sodium salicylate 3h before conditioned response training, while rats in group B received i.p injection of normal saline 3h before conditioned response training, and no conditioned response training and drug injection was given to animals in group C (blank control);the animals were further divided into 6 sub-groups (n=6, in each subgroup):AI, BI and CI subgroups received treatment for 7d, subgroups AII, BII and CII for 14d. Sam-ples were col ected after animals were sacrificed, the expression of synaptophysin in rat cochlear nucleus, superior olivary nu-cleus, inferior col iculus and auditory cortex were detected by immunohistochemical technique. Results The expressions of synaptophysin in cochlear nucleus, superior olivary nucleus, hypothalamus and auditory cortex in group A were significantly higher than those in groups B and C (P<0.01) , and t he expression of synaptophysin inⅡA group was higher than that inⅠA group in auditory pathway tested(P<0.01). Conclusion The tinnius model can be established by injection of sodium salicylate in rats, and the alteration of synaptophysin expression in auditory nucleus provides a experimental basis for the central source of tinnius.【总页数】4页(P1975-1977,2006)【作者】朱艳双;赵德安【作者单位】361003 厦门大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科; 义乌市中心医院耳鼻咽喉科;361003 厦门大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科【正文语种】中文【相关文献】1.大鼠颅脑外伤后突触素P38在中枢神经系统的表达变化 [J], 栾永昕;左玲;张剑涛;罗毅男2.大鼠骨骼肌失神经支配后串珠素和突触素表达的变化 [J], 王彦亮;王大章;邵龙泉3.双侧耳蜗毁损后大鼠听皮层突触素表达的变化 [J], 李孟;华清泉;廖华;肖伯奎4.慢性捆绑应激致大鼠学习记忆受损及海马神经元突触素和突触后致密物95表达的变化 [J], 廖敏;刘能保;张敏海;李宏莲;刘少纯;刘向前;张伟5.戊四氮点燃癫痫大鼠空间学习记忆改变及海马突触素、突触后致密物PSD-95表达的变化 [J], 王佩;王维平;王海祥;范月辉;胡华伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水杨酸钠作用后大鼠伏隔核内多巴胺水平变化

水杨酸钠作用后大鼠伏隔核内多巴胺水平变化胡伟倪;刘俊秀;毛兰群;马芙蓉【期刊名称】《中国耳鼻咽喉头颈外科》【年(卷),期】2017(24)3【摘要】目的探讨边缘系统核团纹状体伏隔核中多巴胺浓度的变化在耳鸣发病机制中的作用。

方法通过大剂量水杨酸钠诱导建立的耳鸣动物模型,利用活体微透析技术结合单胺类物质高效液相色谱电化学检测方法,研究水杨酸钠作用后大鼠纹状体伏隔核内多巴胺水平的变化情况。

结果水杨酸钠引起大鼠纹状体伏隔核多巴胺水平显著性的升高,最高达到基础值的(321±97)%,之后保持在相对稳定的水平。

生理盐水对照组仅有轻微上升。

结论大鼠纹状体伏隔核内多巴胺水平的显著性升高可能与水杨酸钠诱导的耳鸣产生有关,该实验结果为边缘系统参与耳鸣的发生提供直接的实验证据。

【总页数】3页(P153-155)【关键词】动物实验;水杨酸钠;大鼠;耳鸣;多巴胺;伏隔核;微透析【作者】胡伟倪;刘俊秀;毛兰群;马芙蓉【作者单位】北京大学第三医院耳鼻咽喉头颈外科;中国科学院化学研究所【正文语种】中文【中图分类】R979.7【相关文献】1.多巴胺D2受体在创伤后应激障碍样大鼠伏隔核内的表达 [J], 张伟国;曹桂范;杜惠莲;陶凯;杜喆2.海洛因成瘾大鼠伏隔核毁损术前后觅药行为及多巴胺神经递质的变化 [J], 刘剑;张世忠;梁军潮;刘灵慧3.海洛因成瘾复吸大鼠中脑腹侧被盖区、伏隔核神经元超微结构和全脑多巴胺递质含量变化的研究 [J], 周燕;叶峻;韦献良;韦世秀4.条件性位置厌恶大鼠伏隔核壳区多巴胺及其代谢产物3,4二羟基苯乙酸水平变化[J], 苏少华;王传升;乔振;李文强;潘苗;王亚丽;张瑞岭;李毅;石玉中5.水杨酸钠作用后大鼠海马内葡萄糖和乳酸水平变化 [J], 刘俊秀;林雨青;毛兰群;李学佩;马芙蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1mRNA表达的影响

水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1mRNA表达的影响曾英;吴立连【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2004(018)006【摘要】目的观察水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1表达的影响,并分析其可能的机制.方法将造模4周后模型成功大鼠36只,另设正常对照组(假手术组)12只,分为4组,每组12只,A组:正常对照组(假手术组,Sham组);B组:模型对照组(2K1C 组);C组:2K1C+水杨酸钠组;D组:2K1C+水杨酸钠(450mg·kg-1·d-1)+ L-精氨酸(L-Arg ,200mg·kg-1·d-1)组.采用RT-PCR方法检测耳蜗组织Hsf1 mRNA表达情况,并做半定量法分析.结果①2K1C+水杨酸钠+ L-Arg尾SBP较模型对照组和2K1C+水杨酸钠组明显降低(P<0.05);②正常对照组Hsf1mRNA有微弱表达,模型对照组Hsf1mRNA表达较高,2K1C+水杨酸钠组表达最高,2K1C+水杨酸钠+ L-Arg治疗组表达较弱;OD值比较分析发现,模型对照组Hsf1mRNA表达较正常对照组Hsf1mRNA表达有显著增高(P<0.01),2K1C+水杨酸钠组与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05),2K1C+水杨酸钠+ L-Arg治疗组OD值明显低于模型对照组(P<0.05)以及2K1C+水杨酸钠组(P<0.01),2K1C+水杨酸钠+ L-Arg治疗组OD 值与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05).结论水杨酸钠可提高耳蜗组织Hsf1mRNA表达,L-Arg可使水杨酸钠所致的耳蜗组织Hsf1mRNA表达下调.【总页数】4页(P404-407)【作者】曾英;吴立连【作者单位】咸宁学院附属第一医院耳鼻咽喉科,湖北,咸宁,437100;咸宁学院附属第一医院耳鼻咽喉科,湖北,咸宁,437100【正文语种】中文【中图分类】R965.1【相关文献】1.钩藤碱对肾性高血压大鼠心肌中叶素及其受体表达的影响 [J], 汪江涛;丁伯平;柏松;陈莉;黄帧桧2.灯盏生脉胶囊口服结合运动训练对肾性高血压大鼠脑低密度脂蛋白相关受体蛋白-1、高度聚糖化作用终产物受体和β淀粉样蛋白1-42表达的影响 [J], 陈兴泳;张旭;汪银洲;汪效松;雷惠新3.水杨酸钠对大鼠耳蜗NKCC1 mRNA表达的影响 [J], 姚可青;黄治物;杨琨;黄娟4.水杨酸钠对肾性高血压大鼠畸变产物耳声发射的影响 [J], 曾英;尹时华;吴立连5.L-精氨酸对肾性高血压大鼠心肌细胞Livin蛋白表达的影响 [J], 吴瑞霞;张端莲;华先平;曹政;杨勇;陈平英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

长期注射水杨酸钠对大鼠听皮层酪氨酸受体激酶B及c－fos基因表达的影响

长期注射水杨酸钠对大鼠听皮层酪氨酸受体激酶B及c－fos基因表达的影响李锦秀;杨琨;吴莎;华清泉【摘要】目的：通过观察长期注射水杨酸钠后大鼠听皮层中酪氨酸受体激酶B （TrkB）及c－fos基因的表达，探讨其在水杨酸钠耳毒性机制中的作用。

方法健康成年Wistar大鼠36只，分为正常组（不做任何处理）、慢性组（肌肉注射水杨酸钠175 mg／kg ，2次／天，时间间隔8小时，连续注射14天）、慢性恢复组（前期处理同慢性组，停药后恢复28天），每组12只。

造模结束后各组大鼠均行听性脑干反应（ABR）检测，然后断头处死并迅速取出听皮层，运用实时荧光定量PCR技术及Western－blot技术分别检测三组大鼠听皮层中TrkB及c－fos 的表达。

结果正常组ABR反应阈为36±2．23 dB SPL ，慢性组反应阈升高为41．3±3．31 dB SPL ，与正常组比较，差异有显著统计学意义（P＜0．01）；慢性恢复组ABR反应阈为38．6±5．51 dB SPL ，与正常组比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。

慢性组听皮层c－fos mRNA表达为1．24±0．09，蛋白的表达为0．70±0．12，慢性恢复组听皮层c－fos mRNA的表达为1．23±0．04，蛋白的表达为0．68±0．08，两组均高于正常组（分别为1．12±0．05、0．50±0．04），差异有统计学意义（P＜0．01）。

慢性组听皮层TrkB mRNA表达为1．26±0．10，蛋白的表达为1．85±0．17，慢性恢复组听皮层TrkB mRNA表达为1．23±0．07，蛋白的表达为1．80±0．08，均高于正常组（分别为1．11±0．03，1．53±0．16），差异有统计学意义（P＜0．05）。

水杨酸钠对大鼠下丘内谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

水杨酸钠对大鼠下丘内谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响刘俊秀;马芙蓉;李学佩;刘砚星;王磊;刘国诠;毛兰群【期刊名称】《中华耳科学杂志》【年(卷),期】2009(0)3【摘要】目的探讨水杨酸钠诱导产生耳鸣动物模型时神经递质在其中枢发病机制中的作用.方法利用微透析技术,在活体清醒的状态下检测水杨酸钠诱导的耳鸣动物模型,研究水杨酸钠对听觉中枢核团下丘的神经递质俗氨酸和γ-氨基丁酸的影响.结果腹腔注射10%水杨酸钠(350 mg/kg)引起下丘谷氨酸水平的显著性升高,最高达到基础值的236%±19%;γ-氨基丁酸水平显著性降低,最低达到基线水平的50%±12%.对照组(注射生理盐水)并未引起任何显著改变.结论微透析技术活体检测数据表明,下丘内谷氨酸水平的升高和γ-氨基丁酸水平的降低可能和耳鸣的产生有关.【总页数】4页(P212-215)【作者】刘俊秀;马芙蓉;李学佩;刘砚星;王磊;刘国诠;毛兰群【作者单位】北京大学第三医院耳鼻咽喉科,北京,100083;北京大学第三医院耳鼻咽喉科,北京,100083;北京大学第三医院耳鼻咽喉科,北京,100083;北京大学第三医院耳鼻咽喉科,北京,100083;中国科学院化学研究所,北京,100190;中国科学院化学研究所,北京,100190;中国科学院化学研究所,北京,100190【正文语种】中文【中图分类】R764.45;R338.14【相关文献】1.长期注射水杨酸钠大鼠 ABR 及下丘谷氨酸脱羧酶-67表达的变化 [J], 吴莎;华清泉;杨琨;肖伯奎;张志敏2.大鼠单侧耳蜗损毁后下丘r氨基丁酸和谷氨酸变化 [J], 王勤瑛;华清泉;汪审清;肖伯奎;廖华3.水杨酸钠对小鼠下丘核神经元γ-氨基丁酸和谷氨酸表达及听反应特性的影响 [J], 尹时华;唐安洲;幸小玲;谭颂华;谢利红4.水杨酸钠对大鼠下丘和听皮层内5-羟色胺的影响 [J], 刘俊秀;李学佩;刘砚星;马芙蓉5.白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑γ-氨基丁酸和谷氨酸的影响 [J], 冯玉;张惠云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水杨酸盐毒性与大鼠耳蜗核炎症因子表达

水杨酸盐毒性与大鼠耳蜗核炎症因子表达胡守森;梅玲;陈建勇;吕静荣;黄治物;吴皓【期刊名称】《中华耳科学杂志》【年(卷),期】2015(000)001【摘要】Objective Salicylate has the potential to cause reversible tinnitus. However, few reports have examined the as⁃sociation between tinnitus and inflammatory cytokines in the cochlear nucleus in a rat model of tinnitus. To investigate the central mechanisms in tinnitus induced by salicylate, we examined the expression levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleu⁃kin-1β(IL-1β), interleukin-6 (IL-6), N-methyl D-aspartate receptor subunit 2B (NR2B) genes in the cochlear nucleus of rats following salicylate administration. Methods Rats were divided into fourgroups:control group;acute treatment group with salicy⁃late injected once;chronic treatment groups with repetitive injections of salicylate for 14 days;recovery groups with 14 days, post-chronic salicylate administration, and then we investigated the expression levels of TNF-α, IL-6, and NR2B mRNA and protein in the cochlear nucleus. Results The mRNA and protein expression levels of TNF-αand NR2B were up-regulated in chronic treatment groups(p<0.05). These levels returned to baseline 14 days after cessation of treatment. Compared to control group, IL-1βmRNA expression was up-regulated in the acute group, chronic group and recovery group (p<0.05), and the protein expression levels of IL-1βincreased in the chronic group and recovery group (p<0.05). However, IL-6 gene expression was not significantly different in any of the groups. In addition, expression levels of the TNF-a mRNA were positively correlated with those of the NR2B mRNA in cochlear nucleus(p<0.01). Conclusion These data revealed that chronic salicylate administration markedly, but reversibly, induces tinnitus, augments the expression of TNF-α, IL-1βand NR2B in the cochlear nucleus;Altera⁃tions of TNF-αmight lead to tinnitus directly or via modulating the NMDA receptor.%目的：本研究采用对大鼠急性及慢性水杨酸盐腹腔注射建立耳鸣动物模型，通过检测大鼠耳蜗核中肿瘤坏死因子α(TNF-α)，白介素-1β（IL-1β），白介素6(IL-6)以及NMDA受体亚基（NR2B）mRNA及其蛋白的表达，了解慢性水杨酸盐诱导的耳鸣动物耳蜗核中是否出现炎症因子表达的改变，以探讨炎症因子在耳鸣中的作用。

水杨酸钠急慢性注射致豚鼠耳蜗形态学的改变

水杨酸钠急慢性注射致豚鼠耳蜗形态学的改变
黄治物;罗燕云;肖伯奎;吴展元
【期刊名称】《武汉大学学报：医学版》
【年(卷),期】2003(24)1
【摘要】目的 :研究水杨酸钠对豚鼠耳蜗形态学改变的急慢性作用。

方法 :采用单次和长期注射水杨酸钠建模分别在光镜、电镜 (扫描、透射 )下观察 1次及多次注射水杨酸钠组和生理盐水对照组豚鼠耳蜗基底膜Corti器 ,特别是外毛细胞形态的改变。

结果 :以相应的生理盐水组为对照 ,急性水杨酸钠注射 2h主要引起透射电镜下豚鼠外毛细胞侧壁表面下池发生扩张性空泡形成 ;慢性水杨酸钠注射 2周主要引起豚鼠外毛细胞在透射电镜下出现表面下池肿胀、扩张、空泡形成 ,以及透射和扫描电镜下均出现静纤毛柔软、弯曲。

结论 :急慢性水杨酸钠注射引起豚鼠耳蜗形态学改变可能为耳蜗功能改变的原因。

【总页数】4页(P6-8)
【关键词】水杨酸钠;急慢性注射;豚鼠;耳蜗;形态学
【作者】黄治物;罗燕云;肖伯奎;吴展元
【作者单位】武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科;广州军区武汉总医院耳鼻喉科【正文语种】中文
【中图分类】R764.35
【相关文献】
1.耳蜗局部应用NR2B受体阻滞剂对水杨酸钠致豚鼠螺旋神经节细胞损伤的拮抗作用 [J], 刘渊;尹时华;黄训健;周琦;舒竞铖;韦顺莲
2.急慢性水杨酸钠注射后大鼠耳蜗基因表达谱研究 [J], 黄治物;陈平;梅玲;凡启军;肖伯奎;吴展元
3.氟桂嗪对豚鼠耳蜗缺血的形态学改变的影响 [J], 杨彩荣;董明敏;董民声
4.利尿酸致聋的豚鼠耳蜗生物电改变 [J], 丁大连;金晓杰
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大鼠耳蜗神经和坐骨神经P0蛋白的DNA序列和mRNA水平比较

大鼠耳蜗神经和坐骨神经P0蛋白的DNA序列和mRNA水平比较王英歌;林熹;叶胜难;张榕【期刊名称】《中华耳科学杂志》【年(卷),期】2010(008)003【摘要】目的 P0蛋白与内耳和周围神经自身免疫性疾病的发生有关,本研究拟通过比较耳蜗神经和坐骨神经中该蛋白的一致性和mRNA水平,为自身免疫性内耳病的诊治提供线索.方法分别提取36只SD大鼠的耳蜗神经和坐骨神经总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及半定量RT-PCR测试P0蛋白的mRNA表达水平,将RT-PCR产物进行cDNA序列测定,比较大鼠耳蜗神经和周罔神经P0蛋白的cDNA序列和mRNA转录水平.结果大鼠耳蜗神经和坐骨神经P0蛋白的cDNA序列相同,但二者之间的mRNA转录水平有显著性差异.结论大鼠耳蜗神经和坐骨神经的Po蛋白具有一致性.其mRNA转录水平有显著性差异.【总页数】5页(P330-334)【作者】王英歌;林熹;叶胜难;张榕【作者单位】福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,福州,350005;福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,福州,350005;福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,福州,350005;福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,福州,350005【正文语种】中文【中图分类】R322.8%R341.5%R342【相关文献】1.大鼠坐骨神经夹伤与坐骨神经结扎后脊髓胞体分布区神经组织基因表达的比较[J], 吕艺;刘淑红;葛学铭;范明2.层粘连蛋白和纤连蛋白在大鼠视神经和坐骨神经的表达 [J], 朱捷;朱益华;唐宝丰;王玮;徐国兴;韩晓丽;郑伟3.荧光定量聚合酶链反应法比较标准管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA在老年大鼠不同组织中的表达 [J], 叶文静;侯配强;赵晓民;蔡洪信;夏作理4.微囊化异种坐骨神经移植对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白43和神经丝蛋白200表达的影响 [J], 刘德明;马学强5.Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂P0蛋白质 [J], 汤黎;郑明秀;雷雳;齐若梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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ＪｕｎｌｆＡｕｉｌｇｎｐｅｈＰａｈｌｇ０８Ｖｏ６Ｎｏ２ｏｒａｄｏｏｙａｄＳｅｃｔｏｏｙ２０．ｌ１．．ｏ
水杨酸钠作用后大鼠耳蜗Ｋ—Ｃｌ同协转运体家族ｍＲＮＡ表达研究
４参考文献
１Ｓｅｋｒ，ＢｕｃｒａＤ，ＬａａｓＳ，ｅ１ｔｒｅｓ０ｏａｒｂｓｉｔａ．Ａｉｌａｍ— ｍｄｄｅｅｒｉｐａｔｈｍｐｏｉｉｒｎｏｄｒｄｅｅｒｓｅｔｖｔｄｌｎ，ｔｅＳｙｈｎｘｖｂａｔｓｕｎｂｉｇ：ｒｔｏｐｃｉｅｓｕ —
ＥｒｓｉｆＫｘｐｅｓｏｎｏ
ＣＩｃｔａｓｒｅＲＮＡｉｔＣｏｈｅａＩｄｕｅｏｒｎｐｏｔｒｍｎＲａｃｌｎｃｄｂｙＳｏｄｉｍｙｌｔｕＳａｌａｅｉｃＨｕｇＪａＨｕｎａｎｕｎ，ａｇＺｈｉｗｕ，ｎｎ，．ＹａｇＫｕｅｔａ１
（ｐｒｍｅｔｆ０ｔＩｒｎＯＯｙＨａ＆Ｎｃｕｇｒ，ｎｎＨｏｐｔｌｆＤｅａｔｎＯａｙｇＩｇｅｄｏｅｋＳｒｅｙＲｅｍｉｓｉａｏ
ＷｕａｉｒｉＷｕａ４００，ｉａ）ｈｎＵｎｖｅｓｔｙ，ｈｎ，３０６Ｃｈｎ
急性组ＫＣｍＡ、ＣＲＮ急性组、性组和恢复组ＫＣ。ＮＡ以及急性组、性组ＫＣＣｍＲ慢ＣｍＲＮ表达水平低于对照Ａ
组，异有统计学意义（差Ｐ＜Ｏ０）结论．５。
ＫＣ。ＮＡ在正常大鼠耳蜗中均有表达，示其可能共同参与耳蜗Ｃ～ｍＲ提
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ｂｉｇｅｉｅＪ．ｕｃ０ｈｎ１ｒｎ０，０４２１４３ｒｅｄｖｃ［］ＥｒＡｒｈｏｔｒｉ０ａｙｇ１２０，６：９．ｄ－
Ｃｏｌｔｉ，ＳｏｉＤ，ＣａｎｒＭ，ｅ１ｌｅｔＶｌＳｒｅｔａ．Ｔｒａｍｅｔｏｘｄｅｔｎｆｍｉｅｈａｉｇｌｓｅｉｍｐａｔｔｎｏｉｒｔｒｒｎｄｃｒｏｈｅｒｎｏｓｓｖａｉｌｎａｉｆａｖｂａｏｙｔａｓｕｅｎｔｅｏ
黄娟黄治物杨琨肖伯奎
【要】目的研究水杨酸钠作用后大鼠耳蜗Ｋ— Ｃ协同转运体家族（一Ｃ一ｃｔｎｐｒｒ，Ｃ）员摘ｌＫ１ｏｒｓｏｔＫＣ成ａｅ
ＫＣ。Ｎ的表达情况，讨ＫＣ在水杨酸盐耳毒性中的作用及意义。方法Ｃ～ｍＲＡ探Ｃ
选用３Ｏ只正常大鼠，机分成随
五组，组６只：一组为预实验组，给予任何处理，用逆转录ＰＲ技术检测大鼠耳蜗中ＫＣ－ＮＡ表达每第未采ｃＣ～ｍＲ情况；二、、、第三四五组分别为对照组（用药）慢性组（肉注射水杨酸钠１５ｍｇｋ，／，用ｌ不、肌７／ｇ２次天连４天后处死观察）急性组（次肌肉注射水杨酸钠４０ｍｇｋ、一０／ｇ后处死观察）恢复组（杨酸钠用量及用法同慢性组，药ｌ、水停４天后处死观察）运用荧光定量ＰＲ技术比较各组大鼠耳蜗内ＫＣ～ｍＲＮ表达情况。果ＫＣ～ｍＲ，ＣＣＡ结Ｃ－ＮＡ在正常成年大鼠耳蜗中均有表达；对照组及水杨酸钠作用后大鼠耳蜗ＫＣ－ｍＲＮ表达均有变化，性组ＫＣ在Ｃ～Ａ急ＣｍＲＮＡ、性组和恢复组ＫＣｍＲＮ恢复组ＫＣｍＲＡ表达水平高于对照组，异有统计学意义（慢ＣＡ、ＣＮ差Ｐ（Ｏ０）．５，
内淋巴液Ｃ一度的维持；水杨酸钠作用后ＫＣｌ浓在Ｃ～ｍＲＮ表达的不同变化，坏了耳蜗内淋巴液Ｃ一度平Ａ破ｌ浓衡，响外毛细胞能动性。影【键词】Ｋ— Ｃ协同转运体；水杨酸钠；外毛细胞能动性；ＰＲ；大鼠关ｌＣ【图分类号】Ｒ６．５中７４３【献标识码】Ａ文【章编号】１０ —７９（０８０ — ０４ —０文０６２９２０）２１０５
１武汉大学人民医院耳鼻咽喉一头颈外科（武汉
４０６）３００
作者简介：娟，，黄女江西人，读硕士，要从事听力学研究。在主
通讯作者：治物（ｍａ：ｕｎ０６ｐｂｉｗｈｈ．ｎ黄Ｅｉｈａｇ８＠ｕｌ．．ｂｃ）ｌｃ