胶体金(wH)试纸条检测粪便隐血方法的优缺点
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胶体金(wH)试纸条检测粪便隐血方法的优缺点形态学检查与潜血检查是粪便常规检查中最常见的两种检查方式,潜血检
查对诊断多种消化道出血性疾病有重要价值,也是普查筛选消化道肿瘤的有效手段。所谓的潜血检查是指消化道出血量很少,肉眼不见血色,而且少量红细胞又被消化分解以致显微镜下也无从发现的出血状况。通常用联苯胺作试剂,因血红蛋白中的铁有过氧化酶的作用,能分解过氧化氢而放出氧,将联苯胺氧化为联苯胺蓝而显蓝色,即为阳性。根据颜色出现的速度和深度,可将阳性结果分为弱阳性、阳性、强阳性。近年来对隐血检查开始建立了免疫学检查法,所用抗体有抗人血红蛋白抗体和抗人红细胞基质抗体,前者可检出消化道任何部位的出血,而后者只能检出下消化道的出血,因上消化道的出血经消化酶作用后,其红细胞基质尽被消化,不再有免疫反应。这对鉴别消化道出血部位,也有临床意义。
标签:粪隐血试验;胶体金免疫
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2013年3月-2014年3月期间在本院住院的采取胶体金免疫法检测的153例患者的粪便隐血阴性标本进行回顾性统计。根据粪便的颜色,将其分成两组,一组标本的粪便外观正常组,标本粪便的颜色显示黄色,共有100例;另一组标本粪便外观异常组,粪便颜色为酱黑色、鲜红带血便、褐色以及棕色,共有53例。
1.2 试剂
选用由上海凯创生物公司生产的大便隐血胶体金检测试剂条;匹拉米同试剂则选用珠海贝索公司制造的;贝索粪便隐血2号试剂盒(英简Fecal OB-II)。
1.3 操作方法
采取胶体金检测,在处理样品期间,将其置入0.6ml蒸馏水内。然后进行专用取样,就是从患者粪便的各个部位全面取样,再把取样棒前端沾满样品的小圆环作为标准,置入样品管内,将其搅拌均匀。把试剂条加样端放入进去,约15秒后取出并放平,然后3-5分钟时可评判结果,若是质控线、测试线均显示紫红色,结果为阳性。若是质控线显示紫红色,测试线无颜色,结果为阴性。若是质控线没有红线产生,则说明结果无效。应用匹拉米同检测法,则是利用纸卡作为粪便检体的一种输送容器,其阳性反应结果最终的颜色表现为紫红色。匹拉米同法检测结果显示阳性的患者,经过素食3天以后,实施化学法复检。通常情况化学试剂的稳定性较差,长时间放置将导致其反应变弱。在检测之前,应对检测试剂进行严格监控,把过氧化氢点滴在血片上,可能产生泡沫。或是滴入重铬酸钾硫酸液,当结果显示褐色时,说明结果有效。
2 结果
胶体金粪便隐血检测结果显示阴性颜色,正常组有100例标本,采取匹拉米同法加以复检后,其检测结果仍为阴性。但是粪便外观异常组的53例标本,采取匹拉米同法加以复检后,其检测结果有33例出现阳性,在患者素食3天后,仍然有21例检测呈阳性,结合临床情况予以综合分析确诊为消化道出血。
3 讨论
免疫法检测具有很好的特异性,可以有效的检测出人体中血红蛋白的成分,而且不会受到饮食方面的干扰,主要优点在于特异性高、灵敏度高、方便、快捷等。在胶体金试纸上,如果包被抗体对应抗原被破坏,将发生假阴性。所以免疫法一般被应用在消化道出血的检查中,但是40%-50%的患者无法检测出上消化道出血。此外,在大量出血期间,血红蛋白含量过高导致的与单克隆抗体不符,也可能发生假阴性,这时该两种情况粪便的外观均会产生显著性改变。化学法则是利用血红蛋白内的含铁血红素产生与过氧化氢酶类似的作用,其能够把供氢体内的氢转移给过氧化氢分解成水,供氢体脱氢以后出现发色基团,然后可呈色。而呈色深浅程度,能够说明血红蛋白水平的多少。当化学法检测结果显示阳性时,应该做好化学法报告及时通报给临床,让临床医生结合患者病情情况予以综合性分析,可以考虑饮食方面调控2至3天后再予以复检,同时给予维生素C等还原性药物。在实际临床工作期间,标本很可能被稀释,然后再去胶体金做复检,但是稀释程度还没有达成统一标准,还需要多次操作稀释,工作量很大,成本费用也很高。如果抗原遭到破坏,稀释以后结果显示阴性。与此同时,因为家族性息肉及直肠癌等方面的因素可能不出血,或是出血在粪便内比较分散不均匀,均会出现阴性结果。所以此法只能作为临床辅助或筛选诊断,而无法替代X线片、内窥镜、直肠镜以及胃镜等检查。
参考文献:
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[3]吴新宏.上消化道出血而免疫法粪便潜血阴性一例[J].实用医技杂志,2010,17(1):95.