生物技术制药题库

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生物技术制药题库
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名词解释
1、生物技术制药：即采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。

2、基因工程制药：指利用重组DNA技术生产蛋白质或多肽类药物。

3、细胞工程制药：是利用动、植物细胞培养生产药物的技术。

4、酶工程制药：是将酶或活细胞固定化后用于药品生产的技术。

5、发酵工程制药：指利用微生物代谢过程生产药物的技术。

6、抗体工程制药：利用抗原和抗体的特异性结合性质生产药物的技术。

7、先导化合物：通过优化药用、减少毒性和副作用可以使其转变为一种新药的化合物。

8、生物药物的定义：是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。

9贴壁细胞：生长须有贴附的支持物表面，依靠贴附因子生长。

10、悬浮细胞：生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长。

如血液淋巴细胞、
生产干扰素的Namalwa(那马瓦)细胞。

11、兼性贴壁细胞：生长不严格依赖支持物。

如中国地仓鼠卵巢细胞，小鼠L929细胞。

12牛痘病毒：构建多价疫苗腺病毒、
逆转录病毒：用于基因治疗
杆状病毒：用于外源基因表达
13、生物碱：含氮有机化合物
14、生理活性物质：对细胞内生化代谢和生理活动起着调节作用。

15、植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物，有些时候连续合成，有些时候在被刺激下才会产生抗毒素，或仅在被诱导下其产量才能增加。

16、生物转化定义（biotransformation,bioconversion）：也称生物催化（biocatalysis）,是指利用生物离体培养细胞，固定化的植物（或微生物）细胞或从这些有机体中分离得到的酶等，对外源底物进行结构修饰而获得更有价值产物的一种技术。

17、抗体（antibody，Ab）：是B细胞在抗原的刺激下分化为浆细胞，产生具有与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。

18、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。

19、多克隆抗体：由多个克隆细胞产生的针对多种抗原决定簇的混合抗体制剂。

也称第一代人工抗体
20、基因工程抗体：是利用DNA重组技术，通过对抗体分子基因结构与功能了解，有目的地在基因水平上对抗体分子进行切割、拼接或修饰，或者直接合成基因序列，再将基因导入细胞表达产生的一类抗体，也称第三代抗体
21、药用酶：指可用于预防和治疗疾病的酶。

22、酶法制药：指利用酶的催化作用而将前体物质转化为具有药用功效的物质的过程。

23、自然选育：在生产过程中，不经过人工诱变处理，根据菌种的
自发突变而进行菌种筛选的过程，叫做自然选育或
自然分离。

填空
1、生物药物原料以天然的生物材料为主，包括人体、动物、植物、微生物和各种海洋生物等。

2 、注射用药要求，对药品制剂的均一性、安全性、稳定性、有效性等
3、检验上的特殊性由于生物药物具有特殊的生理功能，（生物药物的活性检验）
4、蛋白质类药物的分离纯化方法：（1）沉淀法蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。

其原理是使蛋白质胶体颗粒破碎，从而沉淀蛋白质。

常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如抗原—抗体）等。

（2）按分子大小分离的方法有超滤法和透析法（即膜分离法）、凝胶层析法、超速离心法等。

其中膜分离法可用于生物大分子的浓缩、分级和脱盐。

（3）按分子所带电荷进行分离的方法氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质。

根据它们的等电点不同，调节pH值进行交换、电泳、等电聚焦法等。

（4）亲和层析法大部分生物活性物质都有其作用的靶物质，如酶与底物（或抑制剂）、抗原与抗体、激素与受体等。

5、核酸类药物的分离纯化方法：提取法和发酵法
6、糖类药物的分离纯化方法：非降解法、降解法。

分离方法：沉淀法和离子交换层析法
7、脂类药物的分离纯化方法：沉淀法和离子交换层析法
8、氨基酸的生产方法：蛋白质水解法、发酵法、化学合成与酶促合成法
9、氨基酸的分离方法：沉淀法、吸附法和离子交换法。

10、基因工程菌的培养方式：分批培养、补料分批培养、连续培养、透析培养（利用膜的半透性）、固定化培养（对分泌型菌有利）
基因工程菌培养原则
11、⑴细胞收集：离心法、膜分离法。

⑵细胞破碎：机械破碎法、非机械破碎法物理、化学和生物学法
12、贴壁细胞两种形态：成纤维细胞型、上皮细胞型
13、真核细胞基因表达载体种类：病毒载体、质粒载体
14、培养基的种类：天然培养基、合成培养基、无血清培养基
15、诱导子分类：内源性诱导子、外源性诱导子
16、免疫法包括：体内免疫法、体外免疫法、脾内免疫法
17突变分为：点突变和染色体畸变。

点突变分为：碱基对置换和编码组错位突变（发生一个基因范围内）
染色体畸变（染色体结构的变化）包括缺失、倒位、重复、易位和染色体数目变化等结构变化，通过分离筛选，可获得具有优良性状的变异菌株。

嘧啶与嘌呤嘧啶与嘧啶
简答
1、基因工程制药研究内容：
答：（1）药物品种的开发
（2）基因工程疫苗
（3）基因工程抗体
（4）基因诊断与基因治疗
（5）建立新药的筛选模型
（6）改良菌种以产生新的微生物药物
（7）改进药物生产工艺
（8）转基因动、植物生产蛋白质类药物
2、生物技术制药的特征
答：1、高技术2、高投入3、长周期4、高风险5、高收益
3、药理学特性
（1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。

如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。

（2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质，因此具有高效的药理活性
（3）毒副作用小，营养价值高（4）生物副作用常有发生 (5)用量少，价值高
4、生物药物按药物的化学本质和化学特性来分；
答：（1）氨基酸及其衍生物类药物（2）多肽和蛋白质类药物（3）酶和辅酶类药物（4）核酸及其降解物和衍生物类药物（5）糖类药物（6）脂类药物（7）细胞生长因子类（8）生物制品类
5、生物药物按原料的来源分类
答：（1）人体组织来源的生物药物：（2）动物组织来源的生物药物：（3）植物组织来源的生物药物（4）微生物来源的药物（5）海洋生物来源的药物；
6、生物药物按生理功能和用途分类
答：（1）治疗药物（2）预防药物（3）诊断药物（4）其它生物医药用品
7、生物药物原料选择选择原则主要为
答：有效成分含量高、原料来源丰富，易得；原料中杂质含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季节性、微生物原料要注意微生物生长的对数期、动物原料有的要注意动物的年龄与性别。

8、原料的保存方法主要有
答：（1）冷冻法（2）有机溶剂脱水法（3）防腐剂保鲜法
9、生物药物的提取方法
答：（1）是磨切法，（2）是压力法，（3）是反复冻融，（4）是超声波振荡破碎法，（5）是自溶法或酶解法
10、人类来源的其它原料的利用
答：人胎盘的应用：人胎盘丙种球蛋白、人胎盘白蛋白、人胎盘RNA酶抑制剂
；人尿的综合利用：
11、人血浆白蛋白制备工艺要点：
答：（1）络合（利凡诺（ HYPERLINK
"/view/2106401.htm" \t "_parent" 雷佛奴尔 ;利凡诺;乳酸依沙吖啶沉淀））：血浆在搅拌下用NaHCO3调节pH至8.6，加入等体积的2%利凡诺溶液，充分搅拌后静置2~4h，分离上清与络合物沉淀。

（2）解离：在沉淀中加灭菌蒸馏水。

用0.5mol/LHCl调节pH至弱酸性，加NaCl至0.15%~0.2%，搅拌下解离。

加热去杂蛋白：充分解离后，65℃恒温1h，离心分离出上清液。

（3）热处理（60 ℃，10h）：灭活病毒
（4）检验方法：冻干品为白色疏松物体。

白蛋白含量占95 %以上，水分<1%，水溶后pH为6.6~7.2，硫酸铵残留量<0.01%，细菌学和热源质检测合格。

12、动物来源药物的特点
答：1、具有生物药物的共同特点，2、来源丰富3、种属间差异的考虑
13、植物来源药物的特点
答：1种类多2结构复杂3小分子4大分子
14、生物技术在海洋药物研究与发展中的重要作用。

答：1、细胞工程、基因工程、酶工程
2、开发海洋生物基因工程药物
3、开发海洋生物细胞工程药物
4、加强海洋微生物药物的开发
5、住研究内容：用基因工程技术研究抗肿瘤药物。

15、基因工程药物的发展趋势
答： 1、研发新型生物药物的新模式
2、人类基因组计划与基因工程新药的研发
3、药物靶标天然配基的发现和新药的研发
4、构建生物分子库以发现新药
5、蛋白质工程与新药研究
6、糖基化工程与新药研究
7、代谢工程—组合生物学与新药研发
8、新型生物药物制剂的研究
16：利用基因工程技术生产药物的优点：
答：1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用提供有效的保障；
2、可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；
3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；
4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除
5、可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。

17：集落刺激因子临床应用
答：1肿瘤化疗辅助治疗2骨髓移植3骨髓异常增生综合症及再生障碍性贫血4艾滋病
18：表皮生长因子临床应用：
答：1消化管溃疡和烧伤的治疗；
2增加皮肤和牙齿生长
3角膜移植、角膜损伤修复、白内障外科手术
4伤口愈合及皮肤溃疡
19：心钠素及利钠多肽家族作用；
答：1使血液向血管外移动，降低心脏的负荷2增加肾血流量3协调中枢神经系统和外周的活动
20：基因工程药物制药的主要程序
答：⒈目的基因的克隆
⒉构建DAN重组体
⒊DAN重组体转入宿主菌
⒋构建工程菌
⒌工程菌发酵
⒍表达产物的分离纯化
⒎产品的检验等
21、最佳的基因表达体系：
答：1，目的基因的表达产量高2，表达产物稳定3，生物活性高4，表达产物容易分离纯化
22、表达特点
答：1不存在信号肽，多为胞内产物，提取困难2分泌能力不足，常形成不溶性的包含体3蛋白质不能糖基化4产物蛋白质氮端多一个甲硫氨酸残基5 内毒素及蛋白酶的破坏6表达水平高7 培养周期短 8抗污染能力强
23、影响目的基因在酵母菌中表达的因素
答：（1）外源基因的拷贝数（2）外源基因的表达效率—启动子（3）外源蛋白的糖基化（4）宿主菌株的影响
24、质粒不稳定产生的原因
答：⑴含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率和质粒丢失率⑵这两种菌比生长速率差异的大小。

25、提高质粒稳定性的方法
答：1、选择合适的宿主菌2、选择合适的载体3、选择压力抗菌素抑制质粒丢失菌的生长，提高质粒稳定性。

4、分阶段控制培养5、控制培养条件温度、pH、培养基组分和溶解氧浓度6、固定化
26、重组工程菌培养过程包括:
答：⑴摇瓶操作基因工程菌生长的基础条件。

⑵培养罐操作确定培养参数和控制方案以及顺序。

27、影响发酵的主要因素：
答：⒈培养基的影响⒉接种量的影响⒊ 温度的影响⒋ 溶解氧的影响⒌ 诱导时机的影响⒍ pH的影响
28、基因工程药物的分离纯化特点：
答：①表达产物在初始料中含量较低；②含有大量细胞及代谢产物；③表达产物稳定性差，易失活变性；④表达产物的种类繁多、结构不一、活性各异；⑤对其质量要求纯度高、无菌、无热原。

29、建立分离纯化工艺需了解的各种因素
答：1、含目的产物的起始料的特点
包括：①菌种的类型及其代谢特性。

②原材料培养基的来源及其质量。

③生产工艺及条件。

④初始物料的物理、化学和生物学特性。

⒉物料中杂质的种类和性质⒊目的产物特性⒋产品质量的要求
30、基因工程药物的质量控制理化性质鉴定
答：（1）非特异性鉴别（2）特异性鉴别（3）相对分子质量测定（4）等电点测定（5）肽图分析（6）氨基酸组成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白质二硫键分析
31、杂质检测
答：（1）蛋白质杂质（2）非蛋白类杂质
32、动物细胞的生理特点
答：⒈细胞的分裂周期长⒉细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制现象。

⒊正常二倍体细胞的生长寿命是有限的⒋动物细胞对周围环境十分敏感⒌动物细胞对培养基要求高⒍动物细胞蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同。

33、病毒作为载体的优点：
答：①双链DNA，易重组②插入7～8kb DNA不影响正常病毒粒子的形成。

③多角体蛋白和病毒粒子的形成无直接关系④多角体蛋白基因有非常强的启动子⑤用光学显微镜可看到多角体，可以此作为标记物，选阳性克隆。

⑥如用家蚕杆状病毒，还可在蚕体表达外源基因
34、小牛血清的作用
答：⑴提供生长因子和激素
⑵提供贴附因子和伸展因子
⑶提供结合蛋白
⑷提供必需脂肪酸和微量元素
35、无血清培养基优点
答:①提高重复性②减少微生物污染③供应充足稳定④产品易纯化⑤避免血清因素对细胞的毒性⑥减少血清中蛋白对生物测定的干扰
36、细胞体外培养基本条件:
答：①无菌②营养充足,防止有害物质③氧气④随时清除代谢有害物质⑤良好的生存外环境
pH :7.2-7.4 渗透压:290-300mOsm/Kg（毫渗透摩尔）温度:37+0.5℃⑥及时分种
37、植物组织培养过程再分化
答：离体的植物器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽
植物体
38、影响植物次级代谢产物累积的因素
答; 1、生物条件：外植体、季节、休眠、分化等；2、物理条件：温度、光（光照时间、光强、光质）、通气（氧气）、酸度和渗透压；3、化学条件：无机盐、碳源、物质生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质和前体等4、工业培养条件：培养罐类型、通气、搅拌和培养方式。

39、诱导子的作用机制
答：1、膜脂超氧化和膜结构功能的改变2、形成和积累抗微生物的低相对分子质量植保素
3、蛋白酶抑制物的积累保护机体
4、合成和分泌降解微生物细胞壁的酶，从而抑制微生物生长
40、植物生物转化的意义
答：（1）在植物细胞培养中，一些重要的次生代谢产物并不形成和累积。

但是，这样的培养物却保留了将外源底物转化为有用产物的能力。

（2）生物转化既可产生新的化合物、又可改造已有的化合物、增加目标产物的产量以及克服化学合成的缺点。

（3）植物细胞和器官培养由于催化多步反应常常会产生中间体代谢产物，有助于我们阐明化合物的生物合成途径。

（4）催化反应可以在比较温和环境下进行，副产物较少、耗能少，安全以及减少开支等。

（5）植物生物转化系统可以与有机合成结合使用而相得益彰。

41、抗体药物的特异性
答：1、与相关抗原的特异性结合
2、对肿瘤靶细胞的选择性杀伤作用
3、在动物体内的靶向性分布
4、对相关的肿瘤显示更强的疗效
5、在临床使用取得确定的疗效
42、抗体作为治疗剂的作用
答：(1)直接使抗原失去活性
(2)使免疫效应细胞将其吞噬并加以破坏
(3)使抗原表面弱化而易于受补体破坏
43、单克隆抗体特点
答：高特异性: 均一性:来源稳定：
44、药用酶生产细胞的选择
答：1、选择条件：
（1）酶的产量高，可通过筛选、诱变、或采用基因工程、细胞工程等技术获得。

（2）容易培养和管理（3）产酶稳定性好（4）有利于酶的分离纯化（5）安全可靠
2、生产菌的来源
（1）菌种保藏机构和有关部门获得（2）自然界筛选，土壤、深海、温泉、火山、森林等菌种采集地
3、产酶菌的筛选
（1）菌种采集（2）菌种的分离初筛（3）纯化（4）复筛（5）生产性能鉴定等
45、菌种选育目的
答：1防止菌种退化2 解决生产实际问题 3提高生产能力 4提高产品质量 5 开发新产品
46、自然选育的目的：
答：1淘汰衰弱菌；2 保存优良菌； 3 可纯化菌种；4防止菌种衰退； 5 稳定生产和提高产量；
47、种子扩培的目的
答：1接种量的需要；2菌种的驯化；3缩短发酵时间；4保证生产水平。

48、种子的选取条件
答：1菌种细胞的生长活力强，移种至发酵罐后能迅速生长，迟缓期短；2生理形状稳定；
3菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求；4无杂菌污染；5保持稳定的生产能力。

49、工业微生物的培养类型
答：① 酶制剂两步：
第一步：菌体培养基+葡萄糖→菌体生长↑→酶合成↓→通气↑微生物生长↑酶合成↓抑制 [菌体生长条件（营养期）]
第二步：大量繁殖的菌种→收集菌体浓缩物→洗涤→放入产酶培养基中（添加诱导物）→菌体产酶↑ [产酶条件（自我繁殖期）]
酶制剂两步法特点：将菌体生长条件（营养期）与产酶条件（自我繁殖期）区分开来。

50、菌种保藏基本原理
答：根据菌种的生理、生化特性，人为地创造条件使菌种的代谢活动处于不活泼状态。

51、配制工业发酵培养基的一般要求：
答：1、营养物组成较丰富，浓度适当，能满足菌丝体菌种发芽和生长繁殖成大量具有生理功能的需要（产物合成潜力提高）
2、在一定条件下，各种原材料彼此不产生化学反应，理化性相对稳定。

3、粘度适中，渗透压适当。

4、原材料品种及浓度对代谢产物生物合成过程要有利于主产物的生物合成，高产率维持时间长，副产物合成率要降至最低。

5、不影响发酵过程的通气和搅拌，便于产物的分离纯化。

6、原材料尽量选质优价廉、成本低。

52、发酵染菌的危害
答：发酵染菌能给生产带来严重危害，防止杂菌污染是任何发酵工厂的一项重要工作内容。

尤其是无菌程度要求高的液体深层发酵，污染防止工作的重要性更为突出。

53工业常用的灭菌方法
答：1化学物质灭菌 2 热灭菌 3辐射灭菌 4过滤介质除菌
54、菌种保藏所用的基质
答：1）斜面：C/N比例少些，营养成分贫乏些→防止产酸+代谢活动↑+保藏时间↓
2）砂土：洗净→防止含有机物→影响菌代谢→灭菌后产毒
3）冷冻干燥：保护剂不能过度加热→防止产生有毒物（变性+分解）
名词：
1.基因表达：是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有的加工。

2．融合蛋白：原核多肽和真核蛋白结合在一起称融合蛋白
3.比生长速率:菌体繁殖速率与培养基中菌体浓度之比
4.对数生长期:细菌以最大比生长速率生长,是一个常数。

5.“严紧反应”是当氨酰tRNA不足时,核糖体在密码子上停留,并合成被称为魔点的ppGpp的结果。

6.细胞因子：由一类主要由免疫细胞产生的、在体内含量极低的，但具有多种生物学活性的小分子蛋白多肽或糖蛋白。

10.白细胞介素（IL）：是能够介导白细胞间及其他细胞间相互作用的细胞因子。

13．肿瘤坏死因子：是一类能直接造成肿瘤细胞死亡的细胞因子。

14.促血小板生成素：用于癌症化疗或放疗引起的血小板减少症
15．集落刺激因子：选择性刺激造血干细胞分化发育成某一细胞谱系的细胞因子的统称
16.激素：是由机体的特殊腺体合成和释放，通过循环系统，作用于靶细胞受体的微量信息因子。

18.外植体：用于植物组织培养的器官或组织，植物的部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进行组织培养。

19.突变体：细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的新细胞
21. 诱导子：是在植物抗病生理过程中诱发植物产生植物抗毒素和引起植物过敏反应的因子
22.内源性诱导子：来自植物细胞的分子，多为植物细胞壁在微生物作用下的降解产物及沉积在细胞壁上的木质素。

23.外源性诱导子：又称真诱导子，指病原微生物在入侵植物时自身被降解的产物及其代谢产物
27.诱变剂：能够提高生物体突变频率的物质称为诱变剂。

28杂交育种：一般指两个不同基因型的菌株通过接合或原生质体的融合使遗传物质重新组合，再从中分离和筛选出具有新性状的菌株。

29.生长因子：从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。

30.前体：在产物的生物合成过程中，被菌体直接用于产物合成而自身结构无显著改变的物质称为前体。

31.产物促进剂：是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。

32.灭菌：指用化学的或物理学的方法杀灭或除掉物料或设备中所有的有生命的有机体的技术或工艺过程。

33.消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。

35. 单克隆抗体：仅识别抗原分子上同一抗原表位区的由同一克隆细胞产生的抗体
填空：
1. 菌种保藏方法：定期保藏法、液体石蜡法、液体石蜡法、砂土管保藏法、冷冻干燥保藏法、液氮保藏法
2、链霉菌优点：不致病、使用安全、分泌能力强、表达产物可糖基化。

3.酵母菌优点：其基因组小，世代时间短，有单倍体双倍体两种形式，繁殖迅速，无毒性。

能外分泌，产物可糖基化。

4. 单克隆抗体特点：高特异性、均一性、来源稳定
5.主要基因工程表达体系比较：
6.一些比较重要的生物转化类型:（1）羟基化（2）糖基化（3）醇和酮的氧化还原反应（4）、水解反应（5）环氧化反应6 、羰基还原反应7、C-C双键的还原反应8.硝基还原反应
简答：
1、生物药物按生理功能和用途分类
（1）治疗药物（2）预防药物（3）诊断药物（4）其它生物医药用品
2、生物药物原料的选择、预处理与保存方法
（1）原料选择选择原则主要为：有效成分含量高、原料来源丰富，易得；原料中杂质含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季节性、微生物原料要注意微生物生长的对数期、动物原料有的要注意动物的年龄与性别。

（2）原料的预处理与保存：动物原料采集后要立即处理，去除结缔组织、脂肪组织等，并迅速冷冻贮存。

植物原料确定后，要择时采集并就地去除不用的的部分，有用部分保鲜处理，收集微生物时要及时将菌细胞与培养液分开，进行保鲜处理。

3.生物药物原料的保存方法主要有：（1）冷冻法（2）有机溶剂脱水法（3）防腐剂保鲜
生物组织和细胞的破碎常用的破碎方法一是磨切法、二是压力法；三是反复冻融法，四是超声波振荡破碎法
4、蛋白质类药物的分离纯化方法
（1）沉淀法常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法
（2）按分子大小分离的方法有超滤法和透析法、凝胶层析法、超速离心法等。

（3）按分子所带电荷进行分离的方法.根据它们的等电点不同，调节pH值进行交换、电泳、等电聚焦法等。

(4）亲和层析法。