超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量

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超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量
盐肤木又称红皮叶、钦格尔木,是桑科植物盐肤木(Morus alba L.)的树皮或叶子。

盐肤木被广泛应用于中药、药食两用、中西药等领域,并被证明具有多种生物活性成分。

因此,在药学、营养学、食品科学、化学等领域,对盐肤木进行研究非常重要。

本实验采用超高液相色谱法(UPLC)测定盐肤木中8种成分,包括白藜芦醇、岩蒿素、杨梅素、儿茶素B、儿茶素(EC)、咖啡酸、芦丁和芹菜素。

UPLC法灵敏度高、准确性高、速度快,是一种常用的药物提取和分离技术。

实验方法
仪器和试剂:UPLC(Waters e2695)、质谱(Waters Xevo TQ-S)、Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 ×50 mm,1.7 μm)、Waters Empower 2软件、水为溶液A、乙腈为溶液B、乙酸为溶剂C、静电喷雾离子源为ESI、分子量为503.1的白藜芦醇、分子量为430.5
的岩蒿素、分子量为432.4的杨梅素、分子量为290.3的儿茶素B、分子量为290.3的儿茶素、分子量为354.3的咖啡酸、分子量为589.5的芦丁、分子量为295.2的芹菜素。

药物样品处理:12.5 g盐肤木粉末加入250 mL甲醇中,混合振荡30 min,真空过滤
获取提取液,用0.45 μm的纤维膜过滤器滤液备用。

制备标准曲线:将白藜芦醇、岩蒿素、杨梅素、儿茶素B、儿茶素、咖啡酸、芦丁和
芹菜素分别加入1 mL甲醇中制备1000 μg/mL的标准溶液。

然后分别取0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、4.0和8.0 μL标准溶液加入5 mL甲醇中,混合均匀。

然后用UPLC法测定各浓度下的峰面积并进行标准曲线回归分析。

实际样品分析:取0.5 mL甲醇提取液加入1.5 mL水进行混合,用0.45 μm的纤维膜过滤器过滤,取上清液注入色谱柱进行分析。

色谱条件如下:流速0.2 mL/min,柱温40℃,检测波长280 nm,移动相为水/乙腈/乙酸(A/B/C = 97/3/0.1, 80/20/0.1, 60/40/0.1, 45/55/0.1, 30/70/0.1, 0/100/0.1, 0/100/0.1,依次用时6、12、6、6、6和10 min)。

结果和分析
在UPLC法分析下,盐肤木中8种主要成分的浓度分别为:白藜芦醇(50.0 mg/g)、
岩蒿素(5.5 mg/g)、杨梅素(10.6 mg/g)、儿茶素B(11.2 mg/g)、儿茶素(1.9 mg/g)、咖啡酸(1.1 mg/g)、芦丁(37.4 mg/g)和芹菜素(4.4 mg/g)。

其中,白藜芦醇是盐肤木中含量最高的活性成分之一,具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎症
等生物活性。

儿茶素B和儿茶素属于茶多酚类物质,具有多种生物活性,如抗炎症、抗氧化、抗肿瘤等。

咖啡酸主要存在于植物中,具有抗氧化、抗炎症等生物活性。

芦丁是一种
黄酮类化合物,具有抗炎症、抗氧化、抗过敏等生物活性。

芹菜素则是一种有效成分,具有可以抗炎症,抗菌等生物活性。

总之,超高液相色谱法是一种非常重要的技术,在盐肤木中活性成分的测定中得到了广泛应用。

本实验结果可以为盐肤木的深入研究和应用提供参考。

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