GJB2、SLC26A4基因相关耳聋儿童的听力损失特点分析

GJB2、SLC26A4基因相关耳聋儿童的听力损失特点分析
崔庆佳;孙喜斌;戴朴;黄丽辉;王国建;张媛;杨影;康东洋;杜延顺;赵丽萍;黄莎莎;张伟【摘要】Objective To determine the audiological characteristics in 832
deaf children with biallelic causative mutations in GJB2 ,SLC26A4
gene .Methods The 832 patients received deafness gene screening ,553 were GJB2 gene biallelic causative mutations ,279 were SLC26A4 gene biallelic causative mutations .Patients were divided into four groups according to ages of hearing loss onset :<1 ,1~3 ,3~6 ,6~12 years old ,and the audiological character-istics and prevalence of GJB2 ,SLC26A4 gene mutations at different ages of onset .Results The prevalence of GJB2 gene mutations at four groups was 37 .97% (210/553) ,38 .34% (212/553) ,16 .27% (90/553) ,7 .41% (41/553) ,re-spectively ;the prevalence of SLC26A4 gene mutations at four groups was 25 .45% (71/279) ,44 .80% (125/279) , 20 .07% (56/279) ,9 .67% (27/279) ,respectively .The difference between GJB2 and SLC26A4 gene was significant(P=0 .001) .The prevalence of profound hearing loss with GJB2 gene mutations at four groups were 66 .67%
(140/210) ,61 .32% (130/212) ,47 .78% (43/90) ,41 .46%
(17/41) ,respectively .The difference was significant (P=0 .004) ,while the difference in 279 patients with SLC26A4 gene mutations was not statistically significant (P= 0 . 083) .Conclusion The age of hearing loss onset in patients with biallelic causative mutations in GJB 2 or SLC26A4 gene refers to 0~3 years -old ,hearing loss in patients with GJB2 ,SLC26A4 gene mutations gives priority to pro-found .The age of hearing loss onset
is smaller ,the ratio of profound hearing loss is higher .Patients with severe and profound hearing impairment should be performed the genetic testing when the age of onset under 12 .%目的：探讨明确为GJB2、
SLC26A4基因相关耳聋儿童的听力损失特点。

方法研究对象为832例0～12岁发病、经基因芯片检测明确诊断为GJB2或SLC26A4基因突变相关耳聋的患儿，其中GJB2基因纯合突变和复合杂合突变553例、SLC26A4基因纯合突变和复合杂合突变279例。

按耳聋发病年龄分为婴儿期（＜1岁）、幼儿期（1～3岁）、学
龄前期（3～6岁）和学龄期（6～12岁），分析比较GJB2、SLC26A4基因突变
耳聋儿童的发病年龄分布及听力损失特点。

结果①婴儿期GJB2和SLC26A4基因突变的发病年龄构成比分别为37．97％（210／553）及25．45％（71／279），幼儿期分别为38．34％（212／553）及44．80％（125／279），学龄前期分
别为16．27％（90／553）及20．07％（56／279），学龄期分别为7．41％（41／553）及9．67％（27／279），两者发病年龄构成比差异有统计学意义（P＝0．001）。

②GJB2基因突变耳聋儿童中，婴儿期、幼儿期、学龄前期、学龄期极重度听力损失构成比分别为66．67％（140／210）、61．32％（130／212）、47．78％（43／90）、41．46％（17／41），随发病年龄增大，极重
度听力损失比例逐渐减少（P＝0．004）。

③SLC26A4基因突变耳聋儿童中，各
发病年龄组听力损失程度构成比的差异无统计学意义（P＝0．083）。

结论本组0～12岁发病的GJB2及SLC26A4基因突变相关耳聋儿童发病年龄主要集中在婴儿及幼儿期，均以极重度听力损失为主，且发病年龄越小，极重度听力损失比例越高。

【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》
【年(卷),期】2014(000)002
【总页数】4页(P120-123)
【关键词】基因;突变;儿童;听力损失
【作者】崔庆佳;孙喜斌;戴朴;黄丽辉;王国建;张媛;杨影;康东洋;杜延顺;赵丽萍;黄莎莎;张伟
【作者单位】首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京 100005;中国聋儿康复研究中心;中国人民解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科;首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京100005;中国人民解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科;首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京 100005;中国聋儿康复研究中心; 言语听觉科学教育部重点实验室;中国人民解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科;首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京 100005;首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京 100005;中国人民解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科;首都医科大学附属北京同仁医院北京市耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科学教育部重点实验室首都医科大学北京 100005
【正文语种】中文
【中图分类】R764.43
据估计，遗传因素导致的听力损失在儿童听力损失患者中高达50%～60%以上[1]。

在中国聋人中，GJB2、SLC26A4基因突变导致的耳聋比例非常高[2，3]，全球有
超过2亿7千8百万聋人，其中8千万是非综合征型聋患者。

2006年我国人口抽样调查显示，听力残疾人达53 233例，其中儿童组多重残疾占71.37%，绝大多
数为听力言语残疾[4]。

因此，研究GJB2、SLC26A4基因突变在婴儿至学龄期儿
童的发病特点对制定儿童期耳聋患者的临床基因诊断策略及指导康复干预具有重要的临床意义。

为此，本研究选取在0～12岁发病，且携带有GJB2或SLC26A4基因纯合或复合杂合致病性突变而确诊为遗传性聋的儿童患者为研究对象，探讨其听力损失特点。

1 资料与方法
1.1 研究对象 2011年5月至2011年9月，北京市18个区县19 883例听力残
疾者接受了耳聋基因芯片检测，本研究选取其中0～12岁发病，且因携带纯合或
复合杂合致病性突变而确诊为GJB2、SLC26A4基因相关耳聋的832例患儿为研
究对象，其中，男399例，女433例；极重度听力损失504例(60.57%)，重度151例(18.15%)，中重度111例(13.34%)，中度66例(7.93%)。

553例(66.47%，553/832)为GJB2基因相关耳聋儿童，男278例，女275例，平均发病年龄
1.80±
2.58岁；279例(3
3.53%，279/832)为SLC26A4基因相关耳聋儿童，男121例，女158例，平均发病年龄2.25±2.54岁。

所有研究对象均在医生指导下
由监护人填写了《耳聋病人信息登记表》，包括一般信息、出生史、耳聋发病年龄、家族史、个人史(耳聋前感染病史、耳毒性药物应用史、外伤史等)等，并签署知情同意书。

1.2 研究方法
1.2.1 耳聋基因芯片检测方法采用康为世纪全血核酸提取试剂盒从研究对象外周血中提取基因组DNA，用NANO-DROP、ND2000进行DNA定量和纯度检测。

采用晶芯遗传性耳聋基因芯片检测试剂盒检测GJB2 (235delC、299_300delAT、176_191dell6、35delG)、SLC26A4(IVS7- 2A>G、2168A>G)、GJB3(538C>T)、
线粒体12SrRNA(1555A>G、1494C>T)。

按试剂盒说明进行目的基因的PCR 反应、芯片杂交、漂洗等步骤。

应用晶芯LuxScanTM10K-B微阵列芯片扫描仪以
90的激光扫描强度和532nm激发波长进行芯片扫描，用扫描仪自带软件进行结
果判读。

每批96例样本包含一组阴性、阳性对照组，以验证芯片检测结果的可靠性，并随机抽取5%进行DNA测序进一步验证芯片检测结果的准确性。

1.2.2 发病年龄分组结合儿童发育年龄分期及《中华人民共和国义务教育法》规定，本组对象按发病年龄分组如下：小于1岁为婴儿期(<1岁组)；1岁至满3岁之前
为幼儿期(1～岁组)；3岁至6岁之前为学龄前期(3～岁组)；6岁至12岁为学龄期(6～12岁组)。

1.2.3 听力损失程度分级本研究听力检测方法视患者配合程度选取听觉行为反应测听、游戏测听及纯音测听，以较好耳500、1 000、2 000、4 000 Hz平均纯音听阈判定其听力残疾等级。

听力残疾一级为听觉系统的结构和功能方面极重度损伤，较好耳听力损失程度≥91 dB HL；听力残疾二级为重度损伤，听力损失程度81～90 dB HL；听力残疾三级为中重度损伤，听力损失程度61～80 dB HL；听力残
疾四级为中度损伤，听力损失程度41～60 dB HL[5]。

1.3 统计学方法使用统计软件SPSS 18.0，对GJB2、SLC26A4基因耳聋人群间的发病年龄构成比及听力损失程度构成比进行χ2检验；并分别对两基因突变人群中不同发病年龄组的听力损失程度构成比进行χ2检验，显著性检验水准均定为
a=0.05。

2 结果
2.1 GJB2、SLC26A4基因纯合和复合杂合突变基因型及构成比832例携带GJB2、SLC26A4基因纯合或复合杂合突变耳聋个体中，各基因突变的基因型及构成比见
表1。

表1 832例GJB2、SLC26A基因突变耳聋患儿的基因型及构成比突变基因基因
型例数(例)构成比(%)GJB2235delC/235delC32539.10235delC/
299_300delAT13516.20235delC/176_191dell6485.77299_300delAT/299_300 delAT283.37299_300delAT /176_191dell691.08235delC
/35delG50.60299_300delAT /35delG30.36SLC26A4IVS7- 2A>G/IVS7-
2A>G18722.50IVS7- 2A>G /2168A>G789.382168A>G/2168A>G141.68合
计 832100
2.2 GJB2、SLC26A4基因突变患儿发病年龄构成比(表2) GJB2和SLC26A4基因突变患儿在发病年龄构成比上的差异有统计学意义(χ2=45.78，P=0.001)；GJB2
及 SLC26A4基因突变耳聋患儿的发病年龄主要集中在婴儿及幼儿期(0～3岁)，两者在该年龄段所占比例分别为76.31%(422/553)和70.25%(196/279)。

2.3 GJB2、SLC26A4基因突变耳聋患儿听力损失程度的比较 GJB2 、SLC26A4基因纯合突变或复合杂合突变引起的听力损失程度差异无统计学意义(χ2=4.40，
P=0.221)，均以极重度听力损失为主(表3)。

2.4 GJB2基因突变耳聋患儿中不同发病年龄组的听力损失程度比较 GJB2基因突
变者发病年龄主要分布在婴儿期和幼儿期，各发病年龄组均以极重度听力损失为主(表4)。

各发病年龄组听力损失程度构成比的差异有统计学意义(χ2=24.179，
P=0.004)，随发病年龄增大，极重度听力损失比例逐渐减少。

2.5 SLC26A4基因突变耳聋患儿中不同发病年龄组的听力损失程度比较 SLC26A4基因突变耳聋患儿发病年龄主要分布在幼儿期，各发病年龄组均以极重度听力损失为主(表5)，各发病年龄组听力损失程度构成比差异无统计学意义(χ2=15.31，
P=0.083)，但可见6岁以内，随发病年龄增大，极重度听力损失者比例逐渐减少。

表2 GJB2、SLC26A4基因突变患儿发病年龄构成比(例，%)突变基因例数年龄(岁)<11～3～6～
12χ2PGJB2553210(37.97)212(38.34)90(16.27)41(7.41)45.780.001SLC26A427
971(25.45)125(44.80)56(20.07)27(9.67)合计
832281(33.77)337(40.50)146(17.55)68(8.17)
表3 GJB2、SLC26A4基因突变患儿听力损失程度比较(例，%)突变基因例数听力损失程度中度中重度重度极重度
χ2PGJB255344(7.96)83(15.01)96(17.36)330(59.67)4.400.221SLC26A427922( 7.89)28(10.03)55(19.71)174(62.37)合计
83266(7.93)111(13.34)151(18.15)504(60.58)
表4 不同发病年龄组GJB2突变者的听力损失程度比较(例，%)组别例数听力损失程度中度中重度重度极重度<1岁
210(37.97)14(6.67)21(10.00)35(16.67)140(66.67)1～岁
212(38.33)11(5.19)34(16.04)37(17.45)130(61.32)3～岁
90(6.27)12(13.33)20(22.22)15(16.67)43(47.78)6～12岁
41(7.41)7(17.07)8(19.51)9(21.95)17(41.46)合计
553(100.0)44(7.96)83(15.01)96(17.40)330(59.67)
表5 不同发病年龄组SLC26A4突变者的听力损失程度比较(例，%)组别例数听力损失程度中度中重度重度极重度<1岁
71(25.45)3(4.23)7(9.86)11(15.49)50(70.42)1～岁
125(44.80)10(8.00)8(6.40)28(22.40)79(63.20)3～岁
56(20.07)7(12.50)6(10.71)13(23.21)30(53.57)6～12岁
27(9.68)2(7.41)7(26.93)3(11.11)15(55.56)合计
279(100.0)22(7.89)28(9.90)55(19.71)174(62.37)
3 讨论
从本组GJB2、SLC26A4基因突变相关耳聋儿童的6个热点突变筛查其听力损失特点分析，发现该群体中一些基因型对表型影响的规律如下。

3.1 GJB2、SLC26A4基因相关耳聋患儿的发病年龄文献报道[6～8]，GJB2基因
突变人群耳聋发病年龄从6～8个月至20岁不等。

本研究结果中，GJB2基因突变的发病年龄主要集中在婴儿期(0～1岁，37.97%)和幼儿期(1～3岁，38.34%)，
提示GJB2基因突变患者常见发病年龄为0～3岁。

SLC26A4是大前庭水管综合征(enlarged vestibular aqueduct syndrome, EVAS)的致病基因，也是中国第二位致聋基因[9]。

国内外研究[9～12]表明，SLC26A4
基因突变相关耳聋的发病年龄多在婴儿期或幼年期，本研究结果与以上研究相吻合，尤其以1～3岁(44.80%)居多，0～1岁(25.45%)次之。

另外，值得注意的是，GJB2基因突变耳聋患儿以0～1岁发病居多，可以被早期
发现；SLC26A4基因突变耳聋患儿的发病年龄则更主要集中在1～3岁，常表现
为出生时有较好的残余听力或接近正常的听力，不易被父母察觉。

究其原因可能是SLC26A4基因突变导致前庭水管或内淋巴囊扩大，1岁以后患儿开始行走活动，
容易发生头部碰撞，碰撞后内淋巴液经扩大的前庭水管从内淋巴囊倒流入耳蜗或前庭，损伤毛细胞，从而导致波动性听力下降。

3.2 GJB2、SLC26A4基因突变耳聋患儿的听力损失程度 GJB2基因突变引起的听
力损失大多表现为重度或极重度聋[13，14]，本研究对象中同样以极重度听力损
失为主。

另外，本文结果显示，发病年龄越小，极重度听力损失患儿所占比例越大，提示年龄很小时GJB2突变即导致非常严重的听力损失，因而易于发现，同时也提示GJB2耳聋随年龄增长加重的趋势不明显，因而表现为高龄儿童极重度听力损失患儿所占比例有所下降。

研究表明，SLC26A4基因突变导致的听力损失以重度至极重度为主[14]。

从文中
结果看SLC26A4基因突变耳聋患儿各年龄组也均以极重度听力损失为主；6岁以内，随发病年龄增大，极重度听力损失的比例有所下降。

综上所述，在0～12岁发病且确诊为GJB2、SLC26A4基因相关耳聋儿童中，发
病年龄主要集中在婴儿期及幼儿期，并以极重度听力损失为主。

GJB2基因突变者发病年龄越小，极重度听力损失比例越大。

提示对12岁以下尤其是3岁以内发病的重度、极重度聋患儿，要重视遗传性聋的分子学诊断，以做到早发现、早治疗和早干预，实现聋而不哑，减轻社会和家庭负担，提高患儿生活质量。

值得注意的是，仍有相当数量的重度聋患儿仅发现GJB2或SLC26A4单等位基因突变或未发现突变而无法明确分子病因者，需要进一步行两个基因的全序列分析，以期发现双等位基因突变，提高确诊率；同时，结合基因检测结果和听力检查结果，获得更多耳聋突变位点的基因型与听力表型的相关性，为临床诊疗提供进一步的理论依据。

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