人教版高中生物选修三基因工程课件

目的基因的检测与鉴定
导入的鉴定：检测转基因生物的染色体DNA上是否插 入目的基因。DNA分子杂交
转录的鉴定：检测目的基因是否转录出mRNA。分子杂 交技术
翻译的鉴定：检测目的基因是否翻译出蛋白质。抗原 -抗体杂交
四 基因工程的应用
（1） 植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，改良植物品质
（2） 动物基因工程：提高生物生长速度，改良畜产品品质，转基因动物生产药物
（3）PCR技术：使目的基因以指数的形式在短时间内快速扩增。
构建基因表达载体
表达载体的组成： 启动子、目的基因、终止子、标记基因、复制原点
启动子：位于基因的首端，是与RNA聚合酶结合的部 位，驱动基因转录出mRNA。
插入基因：目的基因
终止子：一段特殊的DNA片段，位于基因的尾端， 作用是使转录停止。
基因工程
选修三
内容
一 基因工程的概念 二 DNA重组技术的基本工具 三 基因工程的基本操作步骤 四 基因工程的应用
教学目标 1.基因工程的概念。 2.基因操作的工具和基本步骤
一 基因工程的概念
基因工程：又叫做基因拼接技术或 DNA重组技术。通俗的说，就是按照 人们的意愿，把一种生物的某种基因 提取出来，加以修饰改造，然后放到 另一种生物的细胞里，定向地改造生 物的遗传性状。
黏性末端 平末端
二 DNA重组技术的基本工具
（2）基因的针线─DNA连接酶
DNA连接酶可以把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来（形 成磷酸二酯键），形成重组的DNA分子
种类
大肠杆菌连接酶（E.coliDNA连接酶）：黏性末端 T4DNA连接NA重组技术的基本工具
获取目的基因
1.目的基因主要指编码蛋白质的结构基因
2.目的基因获取方法（1）基因法：从构建好的基因中，依据基因的核苷酸序列、基 因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的 表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。
（2）人工合成 ①逆转录合成：以目的基因转录成的mRNA为模板。 ②化学合成法：已知目的基因序列的情况下，利用DNA合成仪人工合成。
（3） 基因工程药物：生产胰岛素、干扰素、乙肝疫苗、细胞因子
（4） 基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用
(5)
环境保护：基因工程做成的DNA探针能够灵敏检测环境中的病毒等微生物
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标记基因：鉴别受体细胞中是否有目的基因
将目的基因导入受体细胞
导入是目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定 和表达的过程。导入的受体细胞不同，导入的方法也不同。
植物细胞 （常用体细胞）
动物细胞 （受精卵）
微生物细胞 （大肠杆菌、酵母菌）
农杆菌转化法 基因枪法
花粉管通道法 显微注射法
钙离子处理法
（3）基因的运输工具—载体
载体有：质粒、噬菌体和动植物病毒等
载体具备的条件： ①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制； ②有一个或多个限制酶切点，供外源DNA插入 ③有一定的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择
三 基因工程的基本操作步骤
获取目的基因 构建基因表达载体（核心） 将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
生物体外、DNA分子水平
二 DNA重组技术的基本工具
（1）基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶（限制酶）
来源：主要从原核生物中分离纯化出来的
功能：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使 每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，具 有特异性
结果：切割后产生DNA的双链片段
片段末端的形式