1专题2微生物的培养与应用测试题

1专题2微⽣物的培养与应⽤测试题
《专题2微⽣物的培养与应⽤》练习题
1、下列有关微⽣物培养的叙述,正确的是( )
A.培养基⼀般都含⽔、碳源、氮源和⽆机盐
B.涂布接种时,涂布器应在⼲热灭菌箱中灭菌冷却后再使⽤
C.纯化培养时,培养⽫应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养
D.观察菌落时,应将培养⽫盖拿掉后在显微镜下进⾏观察计数
2、下列有关倒平板的叙述,错误的是( )
A.在酒精灯的⽕焰旁进⾏操作
B.将打开的锥形瓶瓶⼝迅速通过酒精灯的⽕焰
C.将培养⽫打开,培养⽫盖倒放在桌⾯上
D.待平板冷却凝固后需要倒过来放置
3、下列有关培养基配制原则的叙述,错误的是( )
A.异养微⽣物的培养基⾄少要有⼀种有机物
B.任何培养基都必须含有⽔、碳源、氮源、⽆机盐及特殊营养物质
C.配制培养基时,要注意各种营养物质的浓度和⽐例
D.微⽣物的⽣长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响
4、下列属于菌落特征的是( )
①菌落的形状②菌落的⼤⼩③菌落的多少④菌落的隆起程度⑤菌落的颜⾊⑥有⽆荚膜
A.①②③④
B.①②④⑤
C.②③④⑥
D.①②③④⑤⑥
5、下列有关细菌培养的叙述,正确的是( )
A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B.在培养基中加⼊青霉素可抑制真菌⽽促进细菌⽣长
C.向液体培养基中通⼊氧⽓能促进破伤风杆菌的⽣长
D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
6、防⽌杂菌⼊侵,获得纯净的培养物,是研究和应⽤微⽣物的前提。

下列叙述错误的是( )
A.实验室⾥可以⽤紫外线或化学药物进⾏消毒
B.接种环、接种针等⾦属⽤具,直接在酒精灯⽕焰的内焰部位灼烧灭菌
C.在实验室中,切不可吃东西、喝⽔,离开实验室时⼀定要洗⼿,以防⽌被微⽣物感染
D.使⽤后的培养基丢弃前⼀定要进⾏灭菌处理,以免污染环境
7、下列有关⽤平板划线法和稀释涂布平板法纯化⼤肠杆菌的叙述,正确的是( )
①都需要⽤固体培养基②都需要使⽤接种针进⾏接种③都需要在酒精灯⽕焰旁进⾏接种④都可以⽤菌落数来计数活菌
A.①②
B.①③
C.②④
D.③④
8、⾦黄⾊葡萄球菌有很强的致病⼒,常引起⾻髓炎等,还可能引起⾷物中毒。

下列筛选⾦黄⾊葡萄球菌实验结束后的做法,错误的是( )
A.对接种环进⾏灼烧处理
B.带菌培养基必须经⾼压蒸汽灭菌后才能倒掉
C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉
D.接种后双⼿必须经肥皂洗净,再⽤体积分数为75%的酒精棉球擦拭
9、下图是微⽣物平板划线⽰意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。

下列叙述正确的是( )
A.操作前要将接种环放在酒精灯的⽕焰边灼烧灭菌
B.划线操作应在酒精灯的⽕焰上进⾏
C.在5区域中才可以得到菌落
D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
10、下列关于微⽣物的实验室培养技术的表述,正确的是 ( )
A.溶化时将称好的⽜⾁膏从称量纸上直接倒⼊烧杯
B.常见的消毒⽅法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等
C.配制固体培养基时加⼊琼脂,其⽬的是为微⽣物⽣长提供碳源
D.⽤移液管稀释菌液时,吹吸三次的⽬的是使菌液与⽔充分混匀
11、测定⼟壤中某细菌和真菌数量的过程中,和真菌相⽐,细菌需要选⽤稀释倍数更⾼的稀释液进⾏平板培养的原因是( )
A.细菌个体⼩,真菌个体⼤
B.细菌易稀释,真菌不易稀释
C.在⼟壤中细菌⽐真菌多
D.随机的,没有原因
12、下列关于微⽣物分离和培养的叙述,错误的是( )
A.微⽣物培养前,需对培养基进⾏消毒
B.测定⼟壤样品中的细菌数⽬,常⽤菌落计数法
C.分离⼟壤中不同的微⽣物,要采⽤不同的稀释度
D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯⼀的氮源
13、下列是关于“检测⼟壤中细菌总数”实验操作的叙述,错误的是( )
A.⽤蒸馏⽔配制⽜⾁膏蛋⽩胨培养基,经⾼温、⾼压灭菌后倒平板
B.取104,105,106倍的⼟壤稀释液和⽆菌⽔各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养 24-48 h
D.确定对照组⽆菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进⾏计数
14、下列操作需要在酒精灯⽕焰旁进⾏的有( )
①⼟壤取样②称取⼟壤③稀释⼟壤溶液④涂布平板⑤微⽣物的培养
A.①②③④⑤
B.②③④⑤
C.③④⑤
D.②③④
15、从⼟壤中分离分解尿素的细菌的实验过程如下图所⽰。

下列有关叙述错误的是( )
A.选肥沃、湿润的⼟壤,在距表层3 cm的深处取样
B.图中A应为加⼊蒸馏⽔,B应为⾼压蒸汽灭菌
C.统计⼟样中尿素分解菌的活菌数⽬宜采⽤稀释涂布平板法接种
D.在加⼊酚红的鉴别培养基上,有红⾊环带出现的是尿素分解菌
16、“筛选”是⽣物学中培育⽣物新类型常⽤的⼿段。

下列做法不可能筛选成功的有( )
A.在⽆氮培养基上筛选圆褐固氮菌
B.在不含精氨酸的培养液中筛选能合成精氨酸的微⽣物
C.⽤含青霉素的培养基筛选酵母菌和霉菌
D.⽤不含碳源的培养基筛选根瘤菌
17、微⽣物体内能够使纤维素分解成纤维⼆糖的酶是( )
A.C1酶和CX酶
B.C1酶和葡萄糖苷酶
C.C X酶和葡萄糖苷酶
D.C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶
18、欲从⼟壤中筛选纤维素分解菌,下列流程正确的是( )
A.⼟壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落
B.⼟壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落
C.⼟壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落
D.⼟壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落
19、下列关于纤维素酶的叙述,错误的是( )
A.纤维素酶只有⼀种,只能将纤维素分解为葡萄糖
B.纤维素酶是⼀种复合酶,⾄少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分
C.纤维素可被纤维素酶⽔解成葡萄糖,为微⽣物提供营养物质
D.分解纤维素的细菌、真菌和放线菌,都是通过产⽣纤维素酶来分解纤维素的
20、要从⽜的瘤胃中分离出能够分解纤维素的微⽣物,下列有关叙述不科学的是( )
A.在富含纤维素的培养基上长出的菌落即为纤维素分解菌
B.将培养基和实验器材进⾏严格的消毒灭菌
C.将提取的胃液进⾏系列稀释后接种培养
D.接种后在适宜温度和⽆氧条件下培养
21、下列有关培养基和菌种鉴定的叙述,正确的是( )
A.微⽣物培养所⽤的都是液体培养基
B.利⽤半固体培养基上的菌落特征来判断和鉴别细菌的类型
C.根据刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D.在⽆氮培养基中加⼊酚红指⽰剂鉴定尿素分解菌
22、稀释涂布平板法是微⽣物培养中的⼀种常⽤的接种⽅法。

下列相关叙述错误的是( )
A.操作中需要将菌液进⾏⼀系列的梯度稀释
B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表⾯
C.不同浓度的菌液均可在培养基表⾯形成单个的菌落
D.操作过程中培养基和涂布器等均需进⾏严格灭菌处理
23、下图是研究⼈员从红棕壤中筛选⾼效分解尿素的细菌的过程⽰意图。

下列有关叙述错误的是( )
A.在配制步骤②③的培养基时,应先调pH后⾼压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单细
胞菌落
C.步骤③采⽤涂布平板法接种,并需向⽜⾁膏蛋⽩胨培养基中加⼊尿素
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,⽐较细菌分解尿素的能⼒
24、不同的微⽣物对营养物质的需要各不相同。

下列有关⼀种以CO2为唯
⼀碳源的⾃养微⽣物的描述,错误的是 ( )
A.氮源物质为该微⽣物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微⽣物的能源物质
C.⽆机盐是该微⽣物不可缺少的营养物质
D.⽔是该微⽣物的营养要素之⼀
25、发酵⼯程的第⼀个重要⼯作是选择优良的单⼀纯种菌。

消灭杂菌,获得纯种菌的⽅法不包括( )
A.根据微⽣物对碳源需要的差别,使⽤含有不同碳源的培养基
B.根据微⽣物需要的特殊营养物质的种类,在培养基中增减不同的特殊营养物质
C.根据微⽣物遗传组成的差异,在培养基中加⼊不同⽐例的核酸
D.根据微⽣物对抗⽣素敏感性的差异,在培养基中加⼊不同的抗⽣素
25、下图为从污⽔处理池中筛选能够⾼效分解有机污染物A的菌种的实验流程,下列说法错误的是( )
A.初选过程①中不能利⽤有机污染物A的微⽣物不能形成菌落
B.过程③应选择有机污染物A含量最低的培养瓶中的微⽣物进⼀步接种
C.接种过程④的⽬的是分离和纯化能够分解有机污染物A的菌种
D.过程⑤重复多次的⽬的是提⾼菌种分解有机污染物A的能⼒
26、下列有关⼟壤中微⽣物的分离与计数的说法,错误的是 ( )
A.因为⼟壤中各类微⽣物的数量不同,所以,为获得不同类型的微⽣物,要按不同的稀释倍数进⾏分离
B.测定⼟壤中细菌的总量和测定⼟壤中能分解尿素的细菌的数量,选⽤的稀释范围不同
C.如果某⼀稀释度的菌液接种后,得到了3个或3个以上菌落数⽬在30~300的平板,则说明稀释操作⽐较成功,并能够进⾏菌落的计数
D.⽜⾁膏蛋⽩胨培养基上的菌落数⽬明显⼩于选择培养基上的数⽬,说明选择培养基已筛选出⼀些细
菌菌落
27、某研究⼩组从有机废⽔中分离微⽣物⽤于废⽔处理。

下列叙述正确的是( )
A.培养基分装到培养⽫后再进⾏灭菌
B.转换划线⾓度后需灼烧接种环再进⾏划线
C.接种后的培养⽫须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔⼀周观察⼀次
28、做“微⽣物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是 ( )
A.⾼压蒸汽灭菌加热结束时,打开放⽓阀使压⼒表指针回到零后,开启锅盖
B.倒平板时,应将打开的⽫盖放到⼀边,以免培养基溅到⽫盖上
C.为了防⽌污染,接种环经⽕焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.⽤记号笔标记培养⽫中菌落时,应标记在⽫底上
29、下列关于微⽣物培养和利⽤的叙述,错误的是( )
A.利⽤稀释涂布平板法既能分离微⽣物,也能对微⽣物进⾏计数
B.接种时连续划线的⽬的是将聚集的菌种逐步稀释以获得单个菌落
C.以尿素为唯⼀氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
D.⽤⼤⽩菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加
30、某同学在以下三种条件下培养⼤肠杆菌:①以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,及时去除代谢产物;②以葡萄糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物;③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物。

根据培养结果绘制的⼀段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势如下图。

假设三种培养基中初始总糖量和⼤肠杆菌数量分别相
等,则①②③三种条件依次对应的趋势图是( )
A.甲、⼄、丙
B.⼄、丙、甲
C.丙、甲、⼄
D.丙、⼄、甲
⼆、填空题（共5道⼩题。

共50分）
1、在缤彩纷呈的⽣物世界,很多⽣命现象都与微⽣物有
着千丝万缕的联系。

(1)幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌,可以通过微⽣物培养对其进⾏检测和诊断。

将患者体内采集的样本制成菌液,培养在以尿素为唯⼀氮源的(填“选择”或“鉴别”)培养基上进⾏“浓缩”。

若培养基中加⼊酚红指⽰剂,则该菌落周围会岀现环带,这与菌体内酶的作⽤密切相关。

(2)⼤肠杆菌数⽬是否超标可以作为⾷品卫⽣和⽔源污染度的检测指标,⼤肠杆菌的数⽬可以通过滤膜法来测定:将⼀定体积的样品过滤后,将滤膜放在添加试剂的培养基上培养,⼤肠杆菌的菌落呈现⾊,根据该菌落的个数判定饮⽤⽔是否污染。

(3)酿造葡萄酒时,葡萄⽪上有少量醋酸菌,在酒精发酵的旺盛阶段,醋酸菌(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。

原因主要有两⽅⾯: 。

2、多氯联苯是⼀种对⼈体有很⼤危害的有机物质,污染⼟壤后,很难清除。

研究发
现,部分酵母菌具有分解多氯联苯的作⽤。

为消除这种污染,科研⼈员计划从污染的
⼟壤中筛选出⾼效分解多氯联苯的菌株。

请回答问题。

(1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将⼟壤样品,接种到以
为唯⼀碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。

(2)对初步提取到的菌株要进⾏培养,⼀般操作⽅法有两种,其中之⼀是右图所⽰的法。

(3)将酵母菌溶液分别稀释10倍、100倍、1000倍。

每个浓度都接种三个平板,每个平板均接⼊0.1 mL稀释菌液,该接种⽅法是。

培养时,需将培养⽫培养,以防冷凝⽔造成污染。

经适当培养后,平板上的菌落数如下表所⽰:据此可得出,每平板编号菌落数稀释倍数 1 2 3 10 420 495 393 100 45 57 51 1 000 2 7 3
升菌液中酵母菌活菌数为个。

3、⼟壤中的苯酚(C6H5OH)对环境有极⼤的污染,实验室希望能从⼟壤中分离出能专⼀性降解苯酚的微⽣物,下图是部分实验过程。

回答下列问题。

(1)为了分离纯化⽬的菌种,①~④步骤的培养基中都加⼊了⼀定浓度的苯酚,该物质能为微⽣物提
供,除此⽽外,培养基中⼀般都还需要⽔、等营养物质。

(2)制备步骤④所需要的固体培养基,操作顺序是:计算→称量→→→倒平板。

为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落,涂布平板前,需要对培养液进⾏多次稀释,原因
是
(3)研究⼈员想通过⽐较试管甲和⼄中微⽣物的⽣长情况,来证明分离出来的微⽣物只能以苯酚作为碳源,若甲试管中的液体培养基中的唯⼀碳源是苯酚,那么,⼄试管中培养基成分与甲相⽐,区别是。

研究⼈员对甲、⼄两⽀试管进⾏接种时,所选菌种都来⾃步骤⑤平板上的同⼀个单菌落,这样做的⽬的是。

4、酸奶和泡菜的制作都离不开乳酸菌,请回答下列有关制作酸奶和泡菜的问题。

(1)分离纯化乳酸菌的培养基中含⽜⾁膏,⽜⾁膏提供的主要营养有;培养⽫灭菌常采⽤法;检验培养基灭菌是否合格的⽅法是。

(2)培养乳酸菌⼀段时间后,培养基中的pH会下降,原因是。

(3)家庭制作泡菜时,⼀般需要配制泡菜盐⽔,但会因其含盐量过⾼⽽影响⼝感。

直接接种乳酸菌制作泡菜时,产⽣的⼤量乳酸能够抑制,因此可以采⽤低盐⼯艺制作泡菜,从⽽⼤幅降低泡菜的含盐量。

(4)乳酸菌活菌数是衡量酸奶营养价值的⼀个重要指标,为检测某酸奶中乳酸菌的含量取不同稀释度的样品各1 mL涂布到固体培养基上,在适宜条件下培养⼀段时间,统计得到106、107、108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为413个、86个、13个,据此估算,每毫升样品中的乳酸菌数约为___个,接种乳酸菌所⽤的接种⼯具是。

5、使⽤聚苯⼄烯制成塑料产品,其物理和化学结构稳定,在⾃然环境中难以降解,⼈们⾄今没有找到处理这种⽩⾊污染的好办法。

近年来,研究⼈员开始接连发现多种“吃”塑料的⾍⼦,并从⾍⼦的肠道中找到了能降解塑料的微⽣物。

下图表⽰获取微⽣物样品后的研究过程。

请回答下列有关问题。

(1)在获取肠道微⽣物后先进⾏①~③的培养,其⽬的是。

为了获得⽬的微⽣物,①~③号瓶所⽤的液体培养基的成分共有的特点是。

(2)通过④培养能获得单个菌落。

若⽤平板划线法在培养基上划线,第⼆次及以后的划线,总是从
开始,划线后再恒温培养箱中培养时,培养⽫倒置,⽬的是。

(3)为了统计能降解聚⼄烯的微⽣物数量,我们常采⽤稀释涂布平板法,但计数值往往偏,是因为。

同时为了计数的准确性,我
们往往只统计菌落数范围的平板。

6、（2020·全国⾼三⼀模）最新调查显⽰⼿机每平⽅厘⽶就驻扎了12万个细菌，这个数字⾜以令马桶坐垫上的细菌队伍汗颜。

某⽣物兴趣⼩组的同学，利⽤⼿机表⾯的细菌进⾏了相关的培养研究。

（1）培养微⽣物的培养基⼀般含有的成分有，另外还需满⾜PH、营养物质以及对氧⽓的需求。

（2）若想获取不同菌的菌落形态，需要固体培养基培养，培养基配置的基本步骤有：计算→→溶化→灭菌→倒平板_______。

上述操作完成待培养基冷却凝固后需将平板倒置，这样做的⽬的
是。

（3）为研究⼿机表⾯微⽣物的种
类，⽤稀释涂布平板法进⾏细菌的
纯化和分离。

下⾯的四种菌落分布
情况中，哪些选项是通过稀释涂布
平板法得到的。

（4）研究⼩组⽤琼脂扩散法测定
玫瑰精油对⼿机表⾯细菌的抑制情况。

该⽅法的操作步骤如下：⾸先制备⽜⾁膏蛋⽩胨平板，⽤涂布器将5种细菌分别接种到5个平板上，得到细菌平板。

然后制备直径为5mm 的滤纸圆⽚，采⽤灭菌法处理，将灭菌的滤纸⽚分别放⼊中浸泡10min，后将滤纸⽚放在5个细菌平板表⾯。

最后将平板放⼊中倒置培养48⼩时。

通过测量来检测玫瑰精油对5种细菌的抑制效果。

7、（2020·安徽省淮北⼀中⾼三其他）布鲁⽒菌病是由布鲁⽒菌属的细菌侵⼈机体，引起⼈畜共患的传染性疾病。

研究⼈员⽆菌选取病料样本，将其接种到10%马⾎清布⽒⾁汤培养基(该培养基能促进布鲁⽒菌的⽣长并抑制其他杂菌⽣长)中，置于培养箱中培养．观察液体培养基混浊程度，然后取变混浊的⾁汤接种到10%马⾎清布⽒培养基中培养并观察菌落⽣长情况。

请回答下列有关问题：
（1）适于布鲁⽒菌⽣长的培养基中的营养成分⼀般含有⽔和⽆机盐，此外培养基还需要满⾜有利于布鲁⽒菌⽣长的特殊营养物质、温度、pH等条件。

病料样本初次接种到10%马⾎清布⽒⾁汤培养基中，并置于⼀定环境中连续培养7 d的⽬的是；从功能上看，培养布鲁⽒菌的培养基属于，在前⾯培养基的基础上还应加⼈ ____________才能观察到菌落的⽣长情况。

向试管内分装该培养基时，若试管⼝黏附有培养基，则需要⽤酒精棉球擦净。

原因是。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下⽤直接计数，也可采⽤稀释涂布平板法统计活菌数⽬p对⽐这两种⽅法可知，稀释涂布平板法测得的微⽣物数⽬较低，其原因是。

在涂布接种前，随机取若⼲灭菌后的空⽩平板先⾏培养--段时间，这样做的⽬的是。

8、（2019·湖北省⾼⼆期末）请回答下列与细菌培养有关的问题。

（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的营养成分常⽤的是。

（2）通常，制备培养基时，要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH。

其原因是
（3）将细菌接种到平板培养基上的常⽤⽅法是平板划线法和。

（4）单个细菌在平板上会形成菌落。

研究⼈员通常可根据菌落的形状、⼤⼩和颜⾊等特征来初步区分不同种的微⽣物。

其原因是。

（5）有些使⽤后的培养基在丢弃前，需要经过处理。

这样可以杀死丢弃物中所有的微⽣物。

9、（2020·河北省衡⽔中学⾼三其他）桑椹酿酒使⽤的多为葡萄酒酵母菌。

现科研⼈员从桑园中分离出发酵性能优良的专⽤桑樵酒酵母菌E44，并⽤葡萄酒酵母菌（CK）做对照，对其相关性能进⾏测定。

分析回答下列问题：
（1）分离E44菌株的培养基⼀般需⽤灭菌，常⽤的分离⽅法是平板划
线法和。

研究发现，酿酒酵母菌不能以赖氨酸作为氮源，因此可将分离获得的酵母菌接种在培养基上进⾏鉴定，结果发现菌株不能⽣长。

（2）普遍认为酵母菌的发酵能⼒与菌株对酒精的耐受性有关。

为此，科研⼈员对E44菌株和CK 菌株在不同酒精浓度下的死亡率进⾏了测定，由实验结果判断E44
菌株的酒精耐受性更⾼，该结果的检测过程中先⽤次甲基蓝染⾊，再借助显微镜运⽤法计数后，计算出各菌株的
死亡率。

次甲基蓝可将死细胞染成蓝⾊，⽽活细胞不着⾊，原因是
（3）为进⼀步确定E44菌株的发酵性能，科研⼈员分别测定并绘制了E44菌株和CK 菌株的发酵性能
曲线（如下图）。

由图可知，第1d 酵母菌降糖速率缓慢，酒精度增长较慢的原因是从第2d 开始，糖度迅速下降，酒精度也较快增
长的原因
是。

通过对
⽐发现，E44菌株⽐CK 菌株起酵快，发酵平稳，
是优良的桑棋酒酿酒酵母菌种。

10、（2020·河北省⾼三⼀模）⽜⾁膏蛋⽩胨培
养基是⼀种应⽤⼗分⼴泛的天然培养基，多数
微⽣物能够在该培养基上⽣长。

⽜⾁膏蛋⽩胨
培养基的营养构成如表所⽰。

请回答下列有关问题：
(1)按物理状态划分，该培养基属于 __________培养基。

上述培养基配⽅中提
供碳源的物质
是在提供上述⼏种主要营养物质的基础上，培养基还需要满
⾜微⽣物⽣长对pH 、以及氧⽓的要求。

（2）获得纯净培养物的关键是接种环使⽤前后要进⾏灭菌。

（3）该培养基（填能或不能）⽤于⼟壤中纤维素分解菌的筛选，原因
是。

11、（2020·湖南省⾼三⼀模）⼀个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库⼤学的科学家组成的研究⼩组⽇
前开发出⼀种通过⼤肠杆菌制造丙烷的新技术。

科研⼈员要对⼤肠杆菌进⾏研究和利⽤，需要对⼤肠
杆菌进⾏培养、分离、鉴定与计数等，请结合所学知识，回答下列问题：
（1）培养基配制时需要对培养基进⾏灭菌，采⽤的⽅法是，实验室常⽤的三
种消毒⽅法的名称是在接种前通常需要检测固
体培养基是否被污染，检测的⽅法是
（2）图1所⽰的⽅法是，对分离得到的⼤肠杆菌可通过观察菌落
的进⾏形态学鉴定。

在5个平板上分别接⼊0．1mL 稀释液，经适当培养后，
5个平板上菌落数分别是19、61、64，65和66，则1g ⼟壤中的活菌数约为 ___个。

（3）图2是某同学利⽤不同于图1⽅法分离菌株的⽰意图。

下列对其操作的叙述正确的有。

a ．操作前⽤⽆⽔⼄醇对双⼿进⾏消毒处理
b ．不能将第⑤区域的划线与第①区域的划线相连
c ．整个过程需要对接种环进⾏6次灼烧
d ．平板划线后培养微⽣物时要倒置培养
物质⽤量物质⽤量
⽜⾁膏 5g 琼脂 20g 蛋⽩胨 10g ⽔定容⾄1000mL NaCl 5g
7．（2020·吉林省⾼三⼀模）为调查某地⼟质状况，科研⼩组对该地⼟壤中分解尿素的细菌进⾏了分离和纯化培养。

请回答下列问题。

（1）⼟壤中的尿素不能直接被农作物吸收，只有当⼟壤中的细菌将尿素分解成____后，才能被植物利⽤。

（2）为筛选出分解尿素的细菌，应配制____的培养基以达到选择的作⽤。

分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源，但可⽤葡萄糖作为碳源，由此推测
分解尿素的细菌是 ___（填“⾃养”或“异养”）型⽣物。

配制好的培养
基需经过⾼压蒸汽灭菌，在装⼊待灭菌物品时，不要摆得太挤，以
免。

（3）对不同深度⼟壤取样统计菌落数⽬时，⼀般采⽤____⽅法接种，接种
后需每隔24h统计⼀次菌落数⽬，选取菌落数⽬稳定时的记录作为结果，
这样可以防⽌____。

对分离得到的分解尿素的菌种作进⼀步的鉴定，需加
⼊____，如果pH____，指⽰剂将变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。

12、（2019·贵州省⾼三⽉考）尿素是⼀种重要的氮肥，但是不能被农作物
直接吸收，只有被⼟壤中的细菌分解成氨后才能被利⽤。

某实验⼩组要完
成课题“从⼟壤中分离出能分解尿素的细菌”，请分析回答：
（1）尿素分解菌能分解尿素是因为它们能够产⽣______________，将尿素
分解成氨。

通常接种微⽣物可以采⽤平板划线法和
________________________。

（2）为了获得尿素分解菌，要配制以尿素为唯⼀氮源的选择培养基，选择培养基是指
________________________；在以尿素为唯⼀氮源的培养基中加⼊________________，可以初步鉴定筛选出尿素分解菌；本实验涉及的平板和试管⽐较多，为避免混淆，最好使⽤前做好____________。

（3）为检验培养基及培养⽫灭菌是否合格，可采取的措施是________________________。

（4）筛选出来的优良菌种，若频繁使⽤，可以采⽤____________法进⾏保存。

13、（2020·陕西省西安中学⾼三⼆模）⼤肠杆菌是寄⽣于⼈和动物肠道中的细菌，是⼀种常⽤的⽣物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈⿊⾊。

（1）下表是某公司研发的⼀种培养⼤肠杆菌菌群的培养基配⽅。

根据⽤途划分，该培养基属于___________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中
_________换成__________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成
___________。

（2）培养⼤肠杆菌时，常⽤的接种⽅法是_______________________。

（3）培养⼤肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染。

对于固体培养基应采⽤的检测⽅法是____________。

对已使⽤过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防⽌培养物的扩散。

（4）现有⼀升⽔样，⽤⽆菌吸管吸取1mL⽔样⾄盛有9 mL⽆菌⽔的试管中，依次稀释103稀释度。

各取0． 1mL已稀释103倍的⽔样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原⽔样中⼤肠杆菌数为____________。

（5）为检测严重污染⽔体中⼤肠杆菌数量，将⽔样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜⾊为____________的菌落进⾏计数。

该⽅法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是
____________________________________。

14、（2020·河南省⾼三⼀模）图甲是从⼟壤中筛选产脲酶细菌的过程，图⼄是脲酶基因转录的mRNA
成分含量
蛋⽩胨10．0g
乳糖5．0g
蔗糖5．0g
K2HPO42．0g
显⾊剂0．2g
琼脂12．0g
将上述物质溶解后，⽤蒸
馏⽔定容到1000mL
部分序列。

（l）图中选择培养基应以尿素为唯⼀_____________________；鉴别培养基还需添加
_________________作指⽰剂，产脲酶细菌在该培养基上⽣长⼀段时间后，其菌落周围的指⽰剂将变成_________________⾊。

（2）在4个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的⼟壤样品溶液0．lmL，培养⼀段时间后，平板上长出的细菌菌落数的数值分别为13、156、178和191。

该过程采取的接种⽅法是
_________________，每克⼟壤样品中的细菌数量为_________________个；与⾎细胞计数板计数法相⽐，此计数⽅法测得的细菌数较少，其原因是____。

（3）现有⼀菌株的脲酶由于基因突变⽽失活，突变后基因转录的mRNA在图⼄箭头所⽰位置增加了10个核苷酸，使图⼄序列中出现终⽌密码（终⽌密码有UAG、UGA和UAA）。

突变基因转录的mRNA中，终⽌密码为_________________，突变基因表达的蛋⽩质含_____个氨基酸。

参考答案
⼀、选择题
1—10 ACBBD BBCDD
11—20 CADDB DABAA
21—30 CCCBC ADDBB
31—35 DDADC
⼆、填空题
1、(1)选择红⾊脲
(2)伊红美蓝⿊。