L8900 AA analyzer 样品前处理简要步骤

日立L-8900全自动氨基酸分析仪样品前处理步骤（内部用）
一、饲料样本中水解蛋白中氨基酸含量测定步骤（参考GB/T 18246-2000）
1. 样品制备
取具代表性的饲料样品，用四分法缩减分取25g 左右，粉碎并过。

.25m m孔径(60目)筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用。

对于粗脂肪含量大于、等于5%的样品，需将脱脂后的样品风干、混匀，装入密闭容器中备用。

而对粗脂肪小于5%的样品，则可直接秤用未脱脂样品。

2. 氨基酸水解液制备（酸水解）
称取含蛋白7.5 -25 mg的试样(约50~100 mg,准确至1 mg) 于20 mL水解管，加10.00 mL 酸解剂（6 mol/L HCl)，置液氮或干冰(丙酮)中冷冻。

然后，抽真空至7 Pa(-<5X1 0-'mm汞柱)后封口或充氮气封口。

将水解管放在110℃恒温干燥箱中，水解22~24 h。

冷却，混匀，开管，用水定容至
50~100mL（保证上机液中总氨基酸浓度在50-250 nmol/mL），过滤，用移液管吸取1.0 mL 于真空干燥箱60℃蒸干，必要时，加少许水，重复蒸干1-2次（或50℃氮吹仪吹干，加少量水重复吹干2次）。

加入2 mL 0.02 mol/L HCl溶液，充分溶解，0.22 um滤膜过滤，上机。

二、血浆中游离氨基酸测定
1. 样品制备
采集约5 mL抗凝全血，4000 × rpm离心，获得血浆，检测前-20℃保存。

2. 分离游离氨基酸
取血浆1.0 mL，加入1.0 mL 8%磺基水杨酸（8g磺基水杨酸溶于92mL的超纯水），4℃冰箱过夜，14000 × rpm 离心10 min，上清液过0.22 um滤膜，取约1 mL上机测定。