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关于松花粉的药理作用和临床应用研究现状分析
2012-12-03
 【编者按】：护理论文是科技论文的一种是用来进行护理科学研究和描述研究成果的论说性文章。

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 【论文关键词】松花粉;药理作用;临床
 【论文摘要】目前虽然对于松花粉药理作用的研究较多,但是对于其作用机制缺乏深刻的研究,因此有必要对松花粉的作用机制做更深入的研究,阐明其作用机制并开发新型药物。

 1鉴别、分析方法
 盛明智等[1]在显微镜下观察并拍摄显微图像对松花粉进行鉴定,并用理化方法进行鉴
别,显示具有甾醇和黄酮类的显色反应。

王亚敏等[2]建立了利用傅里叶变换红外光谱法(FTlR)、扫描电镜(SEM)和X射线能谱对4种松花粉和破壁马尾松花粉中的主要营养成分和常见微量元素进行定性定量分析的方法,并发现4种松花粉中无机元素含量差别较明显等结果。

徐科等[3]利用扫描电镜和X射线能谱仪来研究松花粉粒中矿物质元素的分布规律,不需对松花粉样品进行化学提取分离,操作简便、分析迅速、选择性强。

 2药理作用
 2.1对生殖系统的影响牛嗣云等[4]研究发现,松花粉具有改善衰老雄性大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴功能紊乱的作用。

经松花粉给药后血清中黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、促性腺激素释放激素(GnRH)三者均有显著下降,胰岛素样生长因子(IGF-1)、睾酮含量明显提高。

陈丽等[5]实验表明,高、低剂量松花粉均可提高D-半乳糖衰老大鼠精子数量、活动度和存活率,表明松花粉具有抗生殖腺衰老的作用。

丛涛等[6-7]认为松花粉不仅能够降低机体雌、雄激素水平,调节微量元素代谢和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,抑制前列腺增生,同时其有效成分还可以通过非激素途径在细胞水平上发挥选择性抑制作用。

实验表明,松花粉组大鼠前列腺增殖状态明显低于安慰剂组,血清睾酮(T)和雌二醇水平与安慰剂组相比均显著降低。

 2.2抗氧化作用鲍善芬等[8-9]实验表明,松花粉对生化反应系统所产生的过氧化氢、超氧自由基、羟自由基和次氯酸等活性氧系具有较好的清除作用,以浓度依赖关系抑制反应的发生并发挥抗氧化作用,对涉及炎症反应的髓过氧化酶(MPO)活性有一定的抑制作用。

另外,松花粉在用铜诱导的LDL氧化反应模型和Rose Bengal反应模型中均发挥很
好的抗氧化能力。

松花粉乙醇提取液具有较好的自由基链式反应阻断剂的作用,有效地推迟人血浆中低密度脂蛋白(LDL)氧化生成共轭二烯,以清除自由基和螯合铜抑制脂质过氧化反应的发生。

牛嗣云等[10]实验表明松花粉可显著提高亚急性衰老大鼠肝脏抗氧自由基的能力,具有一定延缓衰老的作用。

松花粉灌胃给药后大鼠超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和总抗氧化能力(T-AOC)均显著提高。

宋成军等认为松花粉可显著提高亚急性衰老大鼠抗氧自由基的能力,提高精子的数量、活动度和存活率,具有延缓衰老的作用。

罗艳红等发现,松花粉能降低血砷含量,提高GSH-PX活性,有排血砷、提高抗氧化能力作用。

用松花粉治疗组与正常对照组、砷中毒对照组相比,两项指标差异显著。

刘协等实验发现松花粉能对抗酒精中毒引起的肝脏脂质过氧化损伤,具有有效的保肝作用。

各剂量松花粉使急性肝损伤模型小鼠肝组织MDA含量与乙醇模型组相比均降低,高剂量组有显著差异;低、高剂量组肝组织还原性谷胱甘肽(GSH)含量均高于乙醇模型对照组,各剂量组肝细胞内脂滴比乙醇模型对照组明显减少。

 2.3对物质代谢的影响赵霖等发现食用添加3.5%松花粉饲料不仅显著地增加了家猪粪便中甘油三酯、胆固醇及脂肪酸的排泄量,同时也促进了胆酸的排泄。

破壁松花粉对高脂的形成具有一定的预防控制效应。

实验表明,松花粉中、高剂量组大鼠血清总胆固醇(TC)降低,高剂量组大鼠甘油三酯(TG)降低,高剂量组大鼠高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高。

破壁松花粉有降低血糖功能的作用。

松花粉高剂量组能明显降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的2h时相血糖含量及血糖曲线下面积。

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2012-12-03
 【编者按】：护理论文是科技论文的一种是用来进行护理科学研究和描述研究成果的论说性文章。

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 【关键词】克霉唑; 薄膜过滤法; 抑菌活性
 克霉唑(Clotrimazole)药膜作为阴道局部外用制剂，中国药典2005(CP2005)年版二部对受微生物污染的微生物限度有明确要求，对具有抗菌活性的药品进行微生物限度检查，首先应排除抗菌活性，经验证试验来确认其抑菌活性是否去除而不影响检验结果，保证检验结果的准确性。

2007年11月~2008年2月为建立克霉唑药膜微生物限度检查方法，参考中国药典，以试验菌的回收测定为主要方法，测定克霉唑膜制剂在微生物限度检查条件下对细菌、霉菌、酵母菌的代表菌的抑菌活性，并进行方法选择试验[1，2];对筛选出的敏感菌选择用离心沉淀与薄膜过滤法联用消除其抑菌活性，经选择试验确定供试液浓度及冲洗条件，按筛选出的方法作3个批号计数方法的验证，对方法进行评价[3];对控制菌检查方法进行了验证试验研究，建立克霉唑药膜的微生物限度检查方法。

 1 实验材料及仪器
 1.1 仪器与样品
 HTY-2000型智能集菌仪、多次使用集菌器、一次性薄膜过滤器(杭州泰林生物技术设备有限公司)、离心机(800型沉淀离心机，上海手术器械十厂)、高压蒸汽灭菌器、电子天平、生物安全柜、生化培养箱等。

克霉唑药膜( 规格：4mg，贵州德轩堂制药有限公司生产批号：051225、051226、051227)。

 1.2 培养基、稀释剂及试剂
 营养琼脂、营养肉汤、玫瑰红钠琼脂、改良马丁培养基、胆盐乳糖增菌培养基、溴化十六烷基三甲胺琼脂、亚碲酸盐肉汤、甘露醇氯化钠琼脂、0.9%氯化钠溶液、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(中国北京三科科技开发公司生产，按CP2005版规定配制及灭菌)[1]。

 1.3 试验用菌种
 大肠埃希菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylocoddus aureus、枯草芽孢杆菌
Bacillus subtilis、白色念珠菌Candida aibicans、黑曲霉Aspergillus niger、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa[CMCC(B)10104]，菌种均来源于中国医学细菌保存中心，均为不超过5代的菌株[1]。

 2 方法
 参照CP2005年版二部附录微生物限度检查法中计数方法的验证、控制菌检查方法的验证。

 2.1 菌液制备方法
 取经(36 1)℃培养16~18 h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌肉汤新鲜培养液，加入0.9%氯化钠溶液或营养肉汤，10倍递增稀释制成50~100 cfu/ml菌液，计数备用。

取经26 ℃培养24~48 h的白色念珠菌的改良马丁液体新鲜培养液，用0.9%氯化钠溶液10倍稀释制成50~100 cfu/ml菌液计数，备用。

取经26 ℃培养5~7 d 的黑曲霉改良马丁斜面培养物，加适量0.9%氯化钠溶液洗下孢子，取孢子悬液加入0.9%氯化钠溶液10倍稀释制成50~100 cfu/ml孢子悬液计数，备用。

 2.2 供试液制备方法
 取样品100 cm2，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 ml，振摇，使充分分散均匀，即为1∶10供试液; 取上述1∶10供试液10 ml加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液分别至50、100、200 ml，即为1∶50、1∶100、1∶200供试液。

 2.3 敏感菌的确定及细菌、霉菌、酵母菌计数方法选择试验及验证试验方法
 为确定克霉唑药膜的敏感菌，选择有效的去除抑菌活性的方法，用CP2005年版平皿稀释法、低速离心沉淀处理供试液与平皿稀释法联用、低速离心沉淀处理供试液与薄膜过滤法联用消除其抑菌活性[1，2];对试验菌金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉进行活菌计数回收试验，从各菌的回收结果确定敏感菌，选择出回收率在70%以上的方法作为有效方法，各试验菌作3个批号验证试验以对方法进行评价。

 2.3.1 平皿稀释法[1] 每皿中分别加入1∶10供试液1 ml、0.2 ml，每皿分别各加入试验菌50~100 cfu，立即倾注规定的琼脂培养基15~20 ml，每种试验菌平行制备2个皿，置规定温度，培养、计数菌落数作为试验组;不加入供试液，同法测定相应加入的试验菌数，作为菌液组;不加入试验菌，同法测定1∶10供试液1 ml、0.2 ml中的本底菌数作为空白组，计算回收率。

回收率(%)=[(试验组平均菌落数-空白组平均菌落数)
菌液组平均菌落数] 100%。

 2.3.2 离心加薄膜过滤法联用取供试液10 ml于500 r/min离心4~5 min，管底离心沉淀物0.25 ml，取出全部上层液混匀，即为供试液，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(冲洗液室温或加热至40~45 ℃)约90 ml中，混匀过滤冲洗，在最后一次冲洗夜中加入试验菌。

取膜贴于规定的琼脂培养基，作为试验组，培养、计数菌落数[1];在冲洗液中加入与试验组等量试验菌液，过滤，取膜贴于规定的琼脂培养基作为菌液组;不加入试验菌，同法测定供试液中的本底菌数，作为空白对照;计算回收率(同平皿稀释法)。

 2.3.3 冲洗方法条件选择采用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每个滤器60、80~90 ml/次，冲洗量300 ml、500 ml或800 ml，在最后一次冲洗液中加试验菌液，冲洗液温度为室温、40~45 ℃，按冲洗效果进行选择。

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 2.4其他破壁松花粉有调节免疫功能的作用。

张暾等实验发现,与阴性对照组比较,松花粉中、高两个剂量组小鼠血清溶血素抗体积数水平、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、小鼠NK细胞活性、小鼠抗体生成(溶血空斑数)和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化,高剂量组二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应中小鼠左右耳的差值,差异显著;而小鼠胸腺
指数、脾指数和阴性对照组比较,均无显著性差异。

白树民等采用慢性应激动物模型对大鼠进行观察,发现在慢性应激条件下,大鼠发生了以原籍茵双歧杆茵减少为特征的肠道微生态紊乱的现象,食用松花粉能够有效减轻慢性应激因素导致的大鼠肠道微生态紊乱。

 3临床应用
 3.1前列腺疾病王福昌采用八正散加减合松花粉治疗前列腺增生、前列腺炎患者50例,获得满意疗效。

巴图运用自拟蚂蟥白花蛇舌草汤加减化裁,近几年配合应用国珍松花粉片加快了疗效,疗程和效果明显优于单纯应用中药治疗组。

 3.2原发性高血压胡国灿等]选择107例受试者,随机分为试验组54例,对照组53例。

结果试验组症状缓解,血压下降,血脂降低,与对照组有显著性差异。

 参考文献
 [1]盛明智,陈开文,卢红.松花粉的显微和理化鉴定研究[J].中华医学丛刊,2004,4(7):9-10.
 [2]王亚敏,汪洪捷,张卓勇.松花粉的红外光谱、扫描电镜和X射线能谱仪分析[J].光谱
学与光谱分析,2005,25(11):1797
 医药卫生栏目
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