瞬时转染和稳定转染是什么?

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瞬时转染和稳定转染是什么?
瞬时转染:外源⽚段的表达时间短暂。

这主要是因为外源导⼊的裸露的载体整合⼊基因组的⼏率⾮常低,所以以染⾊体外(episomal)形式存在,不能随细胞分裂⽽⼀同复制导致最后拷贝数被稀释导致的。

⽽且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量,所以起初转染的质粒拷贝数极⾼。

这就导致瞬时转染呈现⼀个⾼拷贝到低拷贝迅速降低的过程,且⽆法在这个系统上实现可诱导表达。

稳定转染:是相对瞬时转染⽽⾔,进⼊细胞的质粒整合⼊细胞基因组中,并能随细胞分裂稳定传递下去。

在这个系统中,质粒表达稳定,拷贝数低,且能实现诱导表达。

稳定转染并不是⼀种与瞬时转染不同的⽅法,只是对瞬时转染的细胞进⾏筛选,得到稳定整合的细胞株。

稳定整合的⼏率因基因传递的⽅法⽽异,跨度可以从10-8到10-1。

因此,对于有的转染⽅法,⽐如化学试剂介导的转染,其整合⼏乎可以忽略不计。

质粒载体整合的位点并不是完全随机分布,依据不同的基因传递⽅法,呈现不同的靶向倾向性,所以是⼀种半随机整合。

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