同蜜源不同生产批次蜂蜜中淀粉酶活性分析

同蜜源不同生产批次蜂蜜中淀粉酶活性分析
宗德琴;宋文菲;赵洪木;杨娟;梁铖
【摘要】探讨同一蜜源生产的蜂蜜中淀粉酶活性与养蜂生产的关系.试验测定了2011年、2012年和2014年石榴花期不同批次生产的36个蜂蜜样品淀粉酶值,并进行比较分析.结果表明,石榴花期不同生产批次蜂蜜其淀粉酶值存在差异,第四批次蜜组酶值最高.第一批次蜜与第二批次蜜间差异显著(P =0.039)、与三、四批次蜜间差异极显著(P＜0.01);二、三、四批次蜜组间酶值差异都达到极显著水平(P＜0.01).结论,同蜜源生产的蜂蜜中淀粉酶活性受生产批次的影响,不同生产批次蜜样其淀粉酶活性有差异,随着生产批次的持续递增淀粉酶活性增强.
【期刊名称】《蜜蜂杂志》
【年(卷),期】2015(035)009
【总页数】3页(P1-3)
【关键词】蜂蜜;生产批次;淀粉酶
【作者】宗德琴;宋文菲;赵洪木;杨娟;梁铖
【作者单位】云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自661101
【正文语种】中文
【中图分类】S896.1
淀粉酶是蜂蜜中一种重要的天然生物酶。

Hrassnigg等(2003)的研究表明，蜂蜜
中的淀粉酶是工蜂咽下腺分泌，添加进去的。

淀粉酶能提高二糖的利用率，增加能量的供应，使工蜂能飞行更长的时间[1]。

蜂蜜中的淀粉酶活性，受到加工温度、
储存时间、蜜源品种等因素的影响，因而不同品种的蜂蜜淀粉酶活性不同[2]。

同
品种蜂蜜中的淀粉酶活性，随加工过程中温度升高过热或储存时间过长会降低，因此可以通过检测蜂蜜中的淀粉酶值来监控蜂蜜质量[3]。

随着工业耐高温淀粉酶的
发明并添加到蜂蜜中，蜂蜜质量控制中淀粉酶活性检测指标似乎失去了它的重要性。

但是，研究表明可以利用加热蜂蜜，根据淀粉酶活性的变化，进行检测是否添加耐高温淀粉酶[4,5]。

还有近年来发展起来的同工酶凝胶电泳技术,可根据同工酶的特
征酶谱来鉴别是天然蜂蜜中的淀粉酶还是工业淀粉酶[6]。

这些方法，也为蜂蜜真
假的判别提供参考。

研究蜂蜜中的淀粉酶在蜜蜂生物学、蜂蜜加工和质量控制等方面有着重要的意义。

养蜂生产过程中蜂群内部结构、饲养管理、生产方式等因素会影响蜂蜜的成分。

大面积的蜜源植物开花期间，适宜的气候条件，流蜜较好，加之蜂群内有适龄的采集蜂，养蜂场一般会随着花期的变化进行多次取蜜。

不同批次间蜂蜜的成分和品质差异的研究目前报道较少。

对蒙自石榴花期蜂蜜中的单宁含量研究中发现，不同花期生产的蜂蜜中单宁含量不同，随花期变化而改变，盛花期高于初花期和末花期，初花期到盛花期含量升高，盛花期到末花期含量降低[7]。

Subashini Devarajan研
究了印度蜂蜜中的酚类化合物的抗氧化活性及对淀粉酶的活性的抑制，结果表明酚类化合物能抑制淀粉酶活性，高浓度有高抑制率，低浓度时抑制率降低[8]。

鉴于
以上研究的结果及酚类化合物与淀粉酶的关系，该研究测定了蒙自石榴花期生产的蜂蜜中的淀粉酶值，进行比较分析同一蜜源生产的不同批次蜂蜜中淀粉酶活性与养蜂生产的关系，为蜂蜜中淀粉酶的生物学作用研究、生产加工应用提供参考。

1 材料与方法
1.1 试验材料
2011年、2012年、2014年，石榴花期在云南蒙自3家养蜂场，根据花期变化，从初花期开始到盛花期结束，每隔7天生产1批次蜂蜜，共生产4批次，每批次
均采集1次样品，共采集36个样品，–18℃保存。

采集地点:蒙自市草坝镇、蒙自市文澜镇碧云村、蒙自市文澜镇攀枝花村。

1.2 实验试剂及仪器设备
主要试剂:可溶性淀粉、碘、碘化钾、乙酸钠（CH3COONa·3H2O）、冰乙酸、氯化钠，均为分析纯，双蒸水自制。

仪器设备:AL204电子分析天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；722S可
见光分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；恒温水浴锅。

1.3 实验方法
检测方法参照蜂蜜中淀粉酶值的测定-分光光度法。

淀粉酶活性以淀粉酶值计，即
1 g蜂蜜所含淀粉酶在40℃条件下1 h内转化1%淀粉液的毫升数[9]。

1.4 数据分析
数据采用统计学软件SPSS 17.0进行单因素方差分析，用LSD进行多重比较。

分
析和处理结果以平均值±标准差（SD）表示。

2 结果与分析
2.1 石榴花期及不同生产年间的蜂蜜淀粉酶活性比较
蜂蜜中淀粉酶的活性受到多种因素的影响，会有所差异。

通过检测得出了2011年，2012年，2014年石榴花蜂蜜的淀粉酶值，进行方差分析，三年间蜂蜜中淀粉酶
活性差异不显著（P=0.269），结果见图1和表1。

说明该蜜源花期蜂蜜的淀粉酶活性受不同生产年影响不明显，质量稳定。

图1 不同年间石榴花蜂蜜淀粉酶的差异
表1 不同年间石榴花蜂蜜中淀粉酶值差异性分析注:同行比较小写字母相同表示差异不显著（P＞0.05）时间2011年2012年2014年
mL/(g.h)19.27±6.14a18.32±6.30a21.41±7.53a淀粉酶值
2.2 石榴花期不同生产批次的蜂蜜淀粉酶活性比较
对石榴花期不同生产批次蜂蜜淀中粉酶活性进行方差分析，结果表明，各生产批次的蜂蜜淀粉酶值存在差异，第一批次蜜与第二批次蜜间差异较显著（P=0.039），与第三、四批次蜜间差异到达极显著水平（P＜0.01）；第二、三、四批次蜜其组间比较酶值的变化也都到达极显著水平（P＜0.01），在盛花期结束时生产的第四批次蜜的酶值最高（表2）。

通过淀粉酶值变化的箱线图看出，随着连续生产批次递增，蜂蜜中淀粉酶活性呈上升趋势（图2）。

石榴花期不同生产批次蜂蜜淀粉酶活性不同，随着每年生产批次的持续递增酶活性增强。

表2 石榴花期不同生产批次蜂蜜淀粉酶值差异性比较注:同行比较，小写字母不同表示差异显著（0.01＜P≤0.05），大写字母不同表示差异极显著（P≤0.01），字母相同表示差异不显著（P＞0.05）。

生产批次一二三四淀粉酶值
mL/(g.h)13.69±3.07dC16.54±2.88cC20.40±3.67bB28.02±5.92aA
图2 不同生产批次蜂蜜中淀粉酶活性变化
3 讨论
石榴花期养蜂场生产的蜂蜜淀粉酶值批次间的差异，可能与花期变化、蜂群内部结构、饲养管理、生产方式等因素有关。

蒙自地区石榴蜜源产地的转地饲养的西方蜜蜂蜂场，由苕子、荔枝蜜源产地转入，蜂巢内有上一蜜源留下的蜂蜜，会影响第一批次的成分。

定地饲养的西方蜜蜂蜂场，石榴是主要生产蜜源，在越冬、早春过程中蜂巢中积累的蜂蜜，也会影响第一批次的成分。

从检查结果可知第一批次蜂蜜淀粉酶值低，可能是部分蜂蜜在蜂箱内储存时间较长。

蜂蜜在蜂箱内长时间储存，超过7天，甚至更长时间，可能使淀粉酶活性降低。

Subashini Devarajan研究表明蜂蜜中的淀粉酶活性会受到多酚化合物浓度高低的影响。

结合在石榴花期蜂蜜单宁含量分析研究结果，第一批次生产于初花期蜂蜜中单宁含量低，酶值也低，可能受蜂箱内留存蜂蜜的影响。

第二、第三批次生产于盛花期，蜂蜜中单宁含量升到最高，酶值也在增加，第四批次生产于末花期，单宁含量下降，淀粉酶值最高。

从不同批次间酶值增加的比例来看，第二批次比第一批次增加了20.82%，第三批次比第二批次增加了23.33%,第四批次比第三批次增加37%。

石榴盛花期时蜂蜜中的淀粉酶活性在高单宁浓度情况下，酶值变化较小，
到末花期时，蜂蜜中单宁含量下降，酶值大幅度升高。

推测石榴花期蜂蜜中单宁含量的变化，也引起蜂蜜淀粉酶活性变化。

花蜜到蜂蜜是由蜜蜂来完成的物理和化学的变化过程，养蜂生产中这一过程根据植物的花期长短重复多次，对于蜂蜜中的淀粉酶变化也是持续的。

参考文献:
[1]H RASSNIGG N,BRODSCHNEIDER R,FLEISCHMANN P,et al.Worker
bees(Apis mellifer L.)are able to utilize starch fuel for flight while drones
are not[C].38th
Apimondia Int.Apic.Congr.Standing Commission of Bee Biology,2003.
[2]王贻节.蜜蜂产品学[M].北京:农业出版社，1996，56-62.
[3]章彬佳，程春生，胡福良.蜂蜜中几种常见酶的研究进展[J].蜜蜂杂志，
2007(7):11-12
[4]李军生，黄位明，张嘉婧.淀粉酶在真假蜂蜜中的区别[J].食品与发酵工业，2006，32（1）:75-78.
[5]徐颖，汪辉.α-淀粉酶在检验真假蜂蜜中的应用[J].食品科学，2008，
33(3):214-216.
[6]叶云，梁超香，李军生，等.利用同工酶技术检测蜂蜜品质的新方法[J].食品科学，
2006，27(6):177-178.
[7]梁铖，宋文菲，赵洪木，等.石榴花期蜂蜜单宁含量分析[J].安徽农业科学，2012，40(35):17281-17282，17313.
[8]SUBASHINI DEVARAJAN,SUBHASHREE VENUGOPAL.Antioxidant and ɑ-Amylase Inhibition Activities of Phenolic Compounds in the Extracts of Indian Honey[J].Chinese Journal of Natural Medicines，2012，10(4):255-259.
[9]庞国芳.蜂产品标准汇编（第二版）[M].北京:中国标准出版社，2004.。