一片叶子的成长史1PPT课件

2021/3/9
授课：XXX
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5、植物生长调节物质——植物激素
（一）生长素类
生理作用：促进细胞伸长和细胞分裂，形成愈伤组织（2,4-D） ；促 进生根（IBA） ；促进植物性别分化；防止落花、落果、促进无 籽果实的形成；与细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽 的萌发与生长，诱导胚状体的产生。
种类:IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙 酸）、IBA（吲哚丁酸）。
2、培养条件：温 度 ２５℃、每天光照时间１６ｈ。
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3、样本的采集与处理
准备器材：剪刀、镊子、保鲜袋、手套 样本处理： A、将苗木上的侧芽（约３～４ｃｍ）切下； 2、用１％次氯酸钠溶液浸泡、消毒１５分 钟； B、无菌水５次洗净后，直立扦插于添加３ ％蔗糖的 ＭＳ基本培养基上培养； C、每隔１ 个 月以同样的方法继 代 １次。 取连续继代６个月以上的无菌苗叶片为材 料。
2、分类
（一）依不同培养材料分为：
1、愈伤组织培养
愈伤组织：植物组织培养过程中，在人 工培养基上由外植体的表面细胞恢复分裂 能力而形成的一团无序的薄壁细胞。
2、悬浮细胞培养 3、器官培养
4、原生质体培养 5、分生组织培养
（二）依培养介质不同分为液体培养和固
体培养
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3、原理-植物细胞全能性
药性: 2，4-D> NAA = IBA >IAA
溶解性：一般溶于95%酒精或0.1mol/LNaOH中。用量在0.01-5mg/L。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（二）细胞分裂素类
生理作用：促进细胞分裂与扩大，可使茎增粗，而抑制茎伸长； 诱导芽的分化，促进侧芽萌发与生长。
种类：6BA（6-苄腺嘌呤）、KT（糠基腺嘌呤）、ZT （玉米 素）、2ip（异戊烯基腺嘌呤）、激动素（呋喃氨基嘌呤） 等。常用的是6－BA和KT。其与生长素配合使用控制器官的 分化。
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二、植物组织培养的具体实验操作流 程
1、基础培养基的配制 2、培养条件 3、样本的采集与处理 4、愈伤组织和不定芽诱导 5、不定芽伸长 6、不定根诱导 7、再生植株的移栽和炼苗
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二、植物组织培养的技术基础
1、基础培养基的配制
A、准备器材：烧杯、量筒、药匙、三角瓶（平底试管）、天平、pH计、锡
溶解性:溶于0.5 或 1mol/L HCL或稀薄的NaOH中。用量为0.110mg/L。
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（三）赤霉素类—GA3 生理作用：诱导茎的细胞伸长生长；促进开花；打破
休眠；对生长素和分裂素的活性有增效作 用。 溶解性：溶于水中不稳定，不耐热，应采用过滤灭菌 法加入，或用95%酒精溶解再用水定容配成母 液。
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1、定义 植物组织培养：离体的植物细胞、组织、器官以及
原生质体在适宜的光照、温度、湿度等环境条件下被 培养在含多种养分的无菌培养基中使其增殖、生长、 发育而形成完整的植株的过程。
外植体：指活植物体上切取下来以进行培养的那部 分组织或器官。
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Medium 为No胚.性细胞，重新 获得分裂能力P。hfree
为外植体
试剂
在培养箱中培养３０ｄ后，观 Sucrose(g/L)
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察愈伤组织和不定芽的生长状
态
MS(g/L)
2.21
NAA（mg/L）
TDZ（mg/L）
BAP（mg/L）
pH
5.8
Agar（g/L）
◆◆
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绿 叶 的 “ 凤 凰 涅 坛
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植物组织培养
——以康乃馨“白雪公主”组培为例
一 、植物组织培养的基本概念 二、植物组织培养的具体实验操作流程
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一 、植物组织培养的基本概念 1.植物组织培养的定义 2.植物组织培养的分类 3.植物组织培养的原理 4.营养成分 5.植物生长调节物质
Medium No.
试剂 Sucrose(g/L) MS(g/L) pH Agar（g/L） Total(L)
Phfree
15 2.21 5.8
6 1
stock
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4、愈伤组织和不定芽诱导（脱分化） 分化的细胞在一定
取无菌苗顶部的前４对叶，切
条件下，可以转变
取叶基部５ｍｍ 长度的叶片作
纸、镊子
试剂：蔗糖、琼脂、MS培养基、0.1M KOH、0.1M HCl、蒸馏水
B、计算培养基各成分用量并称量；
C、溶解MS培养基和蔗糖并定容。；
D、pH的调整（5.8）；
E、 加入琼脂放入微波炉溶解；
F、培养基的分装和高压灭菌，条件：101.3kPa，121℃时保持15-20分钟即可；
G 、需要加入激素的培养基，在高压灭菌后冷却到合适温度再加入。
植物细胞全能性：指任何具有完 整细胞核的植物细胞（不论是性 细胞还是体细胞）都具有全套的 遗传信息，在离体培养情况下， 这些信息仍能进行表达而产生一 个独立完整的植物个体。
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4、营养成分
（一）大量元素（0.5mmol/L以上） 碳（C）、氮(N)、磷(P)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)和硫(S)等元素。
（二）微量元素（0.5mmol/L以下） 铁(Fe)、铜(Cu)、钼(Mo)、锌(Zn)、钠(Na)、锰(Mn)、钴(Co)、
硼(B)和碘(I)等。
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（三）有机营养 1．维生素类：硫氨素（VB1）、烟酸（VB3）、吡多醇（VB6）泛酸、叶酸等。 2．氨基酸：
甘氨酸(2-3mg/L), 丝氨酸、 水解酪蛋白（CH)、水解乳蛋白（LH)(3002000mg／L),促进胚状体或不定芽的分化。 3．添加物：大多含氨基酸、激素、酶等的复杂化合物。 (1)椰乳(CM):CM是椰子的液体胚乳，一般使用浓度在10％-20％； (2)香蕉:用量为100-200g/L，主要应用于兰花的组织培养中，缓冲pH,促进发育； (3)马铃薯:用量为150-200g/L，具壮苗的作用； (4)酵母提取液(YE):用量约0.5％；麦芽提取液（ME)，用量为0.0l％—0.5％； 苹果汁、蕃茄汁(TJ)、柑桔汁等。