invitrogen qubit荧光波长
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Invitrogen Qubit荧光波长
1. 什么是Invitrogen Qubit?
Invitrogen Qubit是一种用于测量DNA、RNA和蛋白质浓度的荧光探针技术。
它由Thermo Fisher Scientific公司(前身为Invitrogen)开发,旨在提供一种快速、准确和灵敏的方法来确定样品中目标分子的浓度。
2. 荧光波长与测量原理
Invitrogen Qubit使用特定的荧光染料来标记目标分子,并通过测量荧光信号强
度来确定其浓度。
不同的荧光染料具有不同的激发和发射波长,这些波长可以与相关设备进行配合以实现准确的测量。
常用的Invitrogen Qubit荧光染料包括Qubit dsDNA HS Assay Kit、Qubit RNA HS Assay Kit和Qubit Protein Assay Kit等。
这些染料分别用于测量DNA、RNA
和蛋白质样品中目标分子的浓度。
3. Invitrogen Qubit荧光波长
根据不同类型的目标分子(DNA、RNA或蛋白质),Invitrogen Qubit使用不同的
荧光染料,并具有相应的激发和发射波长。
•DNA测量:Invitrogen Qubit dsDNA HS Assay Kit使用PicoGreen荧光染料,其激发波长为480 nm,发射波长为520 nm。
该荧光染料与DNA结合后
会产生荧光信号,通过测量荧光信号的强度可以确定样品中DNA的浓度。
•RNA测量:Invitrogen Qubit RNA HS Assay Kit使用RNA-Glo荧光染料,其激发波长为485 nm,发射波长为530 nm。
RNA-Glo与RNA结合后会产生
荧光信号,通过测量荧光信号的强度可以确定样品中RNA的浓度。
•蛋白质测量:Invitrogen Qubit Protein Assay Kit使用Quant-iT Protein Assay荧光染料,其激发波长为470 nm,发射波长为570 nm。
Quant-iT Protein Assay与蛋白质结合后会产生荧光信号,通过测量荧光
信号的强度可以确定样品中蛋白质的浓度。
4. Invitrogen Qubit的优势
相比传统的分光光度法和凝胶电泳法等方法,Invitrogen Qubit具有以下优势:•高灵敏性:Invitrogen Qubit可以检测低至0.1 ng/μL的DNA和RNA样品浓度,以及0.2 μg/mL的蛋白质浓度。
•高精确性:Invitrogen Qubit使用荧光信号强度来确定样品中目标分子的浓度,相比于吸光度法,可以提供更准确的测量结果。
•快速便捷:Invitrogen Qubit只需要少量样品(1-20 μL)和短暂的操作时间即可完成测量,适用于高通量实验和快速筛选。
•广泛适用:Invitrogen Qubit适用于各种类型的生物样品,包括DNA、RNA、蛋白质等。
同时,它也可以用于检测稀释或高浓度样品,以及复杂混合物中
目标分子的浓度。
5. 使用Invitrogen Qubit进行实验
要使用Invitrogen Qubit进行实验,需要准备以下材料:
•Invitrogen Qubit荧光染料(根据需要选择相应的染料)
•Invitrogen Qubit Assay Buffer
•微量离心管
•Invitrogen Qubit读数器
操作步骤如下:
1.准备待测样品,并根据需要进行稀释。
确保样品在所选染料的有效检测范围
内。
2.准备工作区域,并将Invitrogen Qubit读数器预热至适当的温度。
3.准备测量体系,将Invitrogen Qubit Assay Buffer与相应的荧光染料按照
说明书中的比例混合均匀。
4.取出微量离心管,加入10 μL的样品和90 μL的测量体系。
混合均匀后,
放入Invitrogen Qubit读数器中进行测量。
5.根据仪器上的操作指南,选择相应的测量模式(DNA、RNA或蛋白质),并
进行测量。
记录荧光信号强度,并根据标准曲线计算样品中目标分子的浓度。
6.清洗使用过的微量离心管和仪器,确保下次实验时不会受到污染。
6. 结论
Invitrogen Qubit是一种快速、准确和灵敏的荧光探针技术,可用于测量DNA、RNA和蛋白质样品中目标分子的浓度。
不同类型的目标分子使用不同波长的荧光染
料进行标记,并通过测量荧光信号强度来确定其浓度。
Invitrogen Qubit具有高
灵敏性、高精确性、快速便捷和广泛适用的优势,成为生命科学研究中不可或缺的工具之一。
通过正确操作Invitrogen Qubit读数器和相应的荧光染料,可以获得
准确的测量结果,为科学研究提供有力的支持。
参考文献: 1. Thermo Fisher Scientific. (2021). Qubit assay kits for DNA, RNA and protein quantitation. Retrieved from 2. Thermo Fisher Scientific. (2021). Qubit fluorometric quantitation: a guide to fluorescence-based quantitation of DNA, RNA, and proteins using the Qubit assay system. Retrieved from。