高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程
实验十八 血清高密度脂蛋白胆固醇测定

二、实验操作 将血清与沉淀剂R3以1:1混合,室 温放置10分钟后,3000转/分离心15分 钟,取上清夜做胆固醇测定,必须在4 小时内完成。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
二、实验操作: 空白 蒸馏水 25μl 标准液 血清 试剂 1.0ml
标准 25μl
测定
1.0ml
25μl 1.0ml
37℃ 、水浴6min,试剂空白调零,半自动生化分 析仪测定,测试程序15.
实验十七
血清高密度脂蛋白 胆固醇测定
一、实验原理: 血清中低密度脂蛋白及极低密度脂蛋 白经磷钨酸镁沉淀后,上清夜为高密度脂 蛋白,其含量用酶法测定:
胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸 胆固醇+O2 CHOD △4-胆汁烯酮+H2O2 2 H2O2 +4-氨基安替吡啉+4-氨酚 POD 醌亚胺+4H2O
检验科生化高密度脂蛋白胆固醇HDL测定的标准操作规程

高密度脂蛋白胆固醇测定的标准操作规程【目的】体外检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯,应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理本试剂采用化学修饰酶法,其反应原理如下:CHER表面活性剂HDL-胆固醇^胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+O2™D(化学修饰)胆甾烯酮+H2O22H 2O2 + 4-AA+TOOS+H 3+O POD红色苯醍色素+5H2OTOOS: N-己烷基-N-硫羟基-丙烷基-M-二甲苯胺钠盐在上述反应中,红色苯醍色素的生成量与样本中高密度脂蛋白胆固醇浓度成正比,通过在6nm处测定吸光度的变化值,即可测得样本中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂1(R1)TOOS0.3g/L过氧化物酶0.65KU/LMES 缓冲液0.05mol/L试剂2(R2)胆固醇氧化酶2.1KU/L胆固醇酯酶3KU/LMES 缓冲液0.05mmol/L4-氨基安替比林0.6g/L2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征高低密度脂蛋白胆固醇校准品对测定进行校准。
高密度胆固醇(HDL) 直接测定法
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目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理1. 试剂1使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。
胆固醇酯酶胆固醇酯+ H2O -------------------- 胆固醇+ 脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇+ O2 ------------------------- 胆淄烯酮+ H2O2过氧化氢酶H2O2 ------------------ O2+H2O2. 试剂2中的变性剂释放出高密度脂蛋白后,对HDL进行测量。
胆固醇酯酶胆固醇酯+ H2O -------------------- 胆固醇+ 脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇+ O2 ------------------------- 胆淄烯酮+ H2O2过氧化物酶H2O2 + 4-氨基安替比林+ HDAOS -------------------- 醌染料+ 4H2O在600nm醌染料的吸光度的与胆固醇的含量相关。
2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物,如降血脂药、避孕药等。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为血脂水平有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验,应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)定量测定标准操作程序
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高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C )定量测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清或血浆中HDL-C 的含量。
众多流行病学研究证实,血清中的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C )水平与冠心病的发生几率呈负相关,即HDL-C 是冠心病的负危险因素。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C )的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C )浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理;本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C )试剂盒采用的是酶法。
5. 原理上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒(直接法)采用两步法测定:1. 用胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶去除低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C )和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C )。
具体反应如下:222222222O O H O H O H O +−−−→−+−−−−→−++−−−→−过氧化氢酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶胆甾烯酮胆固醇游离脂肪酸胆固醇胆固醇酯2.在溶液B 中含有特殊的表面活性剂,释放HDL-C ,然后测定,反应如下: O H HDAOS AA O H O H O O 2222222442+−−−→−+-++−−−−→−++−−−→−+醌类化合物胆甾烯酮胆固醇游离脂肪酸胆固醇胆固醇过氧化物酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶在600nm 处,醌类化合物颜色强度的增加与HDL-C 的含量成正比。
6. 仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:Good’s缓冲液、HDAOS,胆固醇酯酶,胆固醇氧化酶,过氧化氢酶,4-AA,过氧化物酶,叠氮钠7.3试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。
高密度脂蛋白胆固醇 检测条说明书

高密度脂蛋白胆固醇检测条说明书高密度脂蛋白胆固醇检测条说明书【产品名称】..............................1【包装规格】..............................1【预期用途】..............................1【检验原理】..............................2【主要组成成份】..........................2【储存条件及有效期】......................3【适用仪器】..............................3【样本要求】..............................3【检验方法】..............................4【参考值(参考范围)】......................5【检验结果的解释】........................6【检验方法的局限性】......................7【产品性能指标】..........................7【注意事项】..............................8【参考文献】..............................9【生产企业】.............................10【医疗器械注册证书编号】.................10【产品标准编号】.........................10【说明书批准及修改日期】.. (10)【产品名称】通用名称:高密度脂蛋白胆固醇检测条 英文名称:PTS PANELS HDL Cholesterol Test Strips【包装规格】25人份/盒;6人份/盒;3人份/盒【预期用途】PTS 公司生产的的高密度脂蛋白胆固醇检测 条可对全血中的高密度脂蛋白(HDL )胆固醇进行2.MEMo 记忆芯片 1片 包含特定批号检测条信息。
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测标准操作规程

深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司高密度脂蛋白胆固醇测定方法
2、适用范围
适用于血清高密度脂蛋白胆固醇的测定
3、试剂仪器
试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。
试剂不可以冰冻。
4、操作程序
方法原理
CHE+CHO
(1)LDL、VLDL乳糜微粒————————→胆甾烯酮+H2O2
过氧化氢酶
2H2O2————————→ 2 H2O+ O2
CHE+CHO
(2)HDL————————→胆甾烯酮+H2O2
POD
H2O2 + HDAOS + 4-氨基安替比林—————→醌亚胺染料
样本要求
新鲜血清或肝素血浆,样本收集后应尽快测定,必须避光保存,避免使用溶血样本。
上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2校准程序:每30天需要定标一次。
当有以下情况时需重新定标:
1)换试剂批号或出现质控漂移时;
2)当仪器做完保养后;
3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行定标,定标通过后进行检测。
高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程
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血清高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清高密度脂蛋白胆固醇(缩写HDL-C)测定;组合项目申请:血脂测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2、1标本采集2、1、1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶得真空采血管。
2、1、2检验申请单与血标本试管标上统一且唯一得标识符。
2、1、3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2、1、4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本得接收并记录标本得状态,对不合格标本予以拒收。
2、1、5下列标本为不合格标本2、1、5、1标本量不足:少于0、3ml得全血标本,或少于0、1ml得血清或血浆。
2、1、5、2对反应吸光度有干扰得标本,包括严重溶血、严重浑浊得标本。
2、1、5、3无法确认标本与申请单对应关系得。
2、1、5、4其她如标识涂改、标本试管破裂等。
2、2标本保存2、2、1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2、2、2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定1天,普通冰箱中(2~8℃)稳定7天。
-20℃可保存数月;-70℃至少可保存半年;应避免标本反复冻溶。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天得标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2、2、3已完成测试得标本保持完整得识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2、3标本采集得注意事项2、3、1采血前使受检者保持平静、松弛与空腹状态。
抽血前3天内避免高脂饮食,24小时内不饮酒,2、3、2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐得抗凝剂就是肝素。
EDTANa2(1mg/mL)抗凝2、1、5 抽血前最好停用影响血脂得药物(如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等)数天或数周,否则应记录用药情况。
2、1、6 妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。
3 方法原理1.试剂1使血清中低密度脂蛋白与极低密度脂蛋白经化学反应被消除。
高密度脂蛋白测定
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实验25 高密度脂蛋白测定【实验目的】(1)、掌握高密度脂蛋白测定的基本原理。
(2)、熟悉722S分光光度计使用。
【实验原理】空腹血浆脂蛋白主要为低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL),PTA-Mg2+具有选择性沉淀载脂蛋白为apoB的脂蛋白LDL,则上清液为HDL,HDL以HDL-C表示含量。
胆固醇酯酶胆固醇酯+H2O————→胆固醇+RCOOH胆固醇氧化酶胆固醇+O2————→△4-胆甾烯酮+H2O2过氧化氢酶H2O2+4-AA+ESPAS————→醌亚胺染料+H2O【实验步骤】1、取三只试管,分别标号为空白管B、标准管S和测定管T2、按照下表向试管中加入试剂并处理试管内的液体空白管B 标准管S 测定管T蒸馏水/μl 200 ——血清/μl ——200标准液/μl —200 —沉淀剂/μl 200 200 200 混匀,置于室温保温10min,再以3000r/min离心15min,吸取上清液上清液/μl 150 150 150工作液/μl 1500 1500 15003、试剂添加完毕后,混匀,置于37℃保温10min。
4、以空白管调零,在546nm波长下比色读取各管A值。
【实验结果】HDL-C含量(mmol/L)=AT/AS*1.29(标准液浓度)=1.33mmol/L【实验讨论】高密度脂蛋白为血清蛋白之一。
缩写为HDL。
亦称为a1脂蛋白。
比较富含磷脂质,在血清中的含量约为300mg/dl。
其蛋白质部分,A-Ⅰ约为75%,A-Ⅱ约为20%。
由于可输出胆固醇促进胆固醇的代谢,所以现在作为动脉硬化预防因子而受到重视。
高密度脂蛋白运载周围组织中的胆固醇,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,动脉造影证明高密度脂蛋白胆固醇含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。
所以高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子。
俗称“血管清道夫”。
(注意事项)(1)沉淀后上清液必须清澈,上清液浑浊时,不得分析测定,应以生理盐水1:1稀释后再重新离心测定,结果乘以2。
高密度脂蛋白HDL-CHOL测定标准操作程序SOP文件

本方法需要带PEG修饰的酶,硫酸-α-环糊精,硫酸葡聚糖。当胆固醇酯酶或胆固醇氧化酶被PEG修饰后,他们表现出对脂蛋白不同片断的选择性的催化活性。其顺序为:LDL<VLDL<乳糜颗粒<HDL。
在反应体系中加入镁离子以及硫酸-α-环糊精可以降低胆固醇的反应性,尤其是乳糜微粒以及极低密度脂蛋白,不需要再沉淀除去。
ASSAY [ 2 POINT END ]
PROZONE LIMIT [ 0/LOWER ]
REACTION TIME [ 10 ]
TECHNICAL LIMIT(LOW) [ -99999 ]
Measurement POINT(1) [ 16 ]
TECHNICAL LIMIT(HIGH) [ 99999 ]
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书,参数设置见附表。
7参考范围
没风险
中度风险
高风险
男性
Mg/dl
>55
35-55
<35
Mmol/l
>1.45
0.90-1.45
<0.90
女性
Mg/dl
>65
45-65
<45
Mmol/l
>1.68
1.15-1.68
<1.15
换算关系式:mg/dl×0.026 = mmol/l
mmol/l×38.66 = mg/dl
ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-33
HDL-CHOL测定
版序:ABCD
高密度胆固醇(HDL) 直接测定法

目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理1. 试剂1使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。
胆固醇酯酶胆固醇酯+ H2O -------------------- 胆固醇+ 脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇+ O2 ------------------------- 胆淄烯酮+ H2O2过氧化氢酶H2O2 ------------------ O2+H2O2. 试剂2中的变性剂释放出高密度脂蛋白后,对HDL进行测量。
胆固醇酯酶胆固醇酯+ H2O -------------------- 胆固醇+ 脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇+ O2 ------------------------- 胆淄烯酮+ H2O2过氧化物酶H2O2 + 4-氨基安替比林+ HDAOS -------------------- 醌染料+ 4H2O在600nm醌染料的吸光度的与胆固醇的含量相关。
2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物,如降血脂药、避孕药等。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为血脂水平有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验,应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
血浆高密度脂蛋白-胆固醇、总胆固醇的测定-菏泽医学专科学校
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课程名称 生物化学
课题
血浆高密度脂蛋白-胆固 醇、总胆固醇的测定
课时
2 学时
课型 实验
教学 目的
1.了解测定胆固醇的原理 2.熟练掌握胆固醇测定的基本操作技术
教学
1.胆固醇测定的原理
重点
2 测定胆固醇的基本操作技术
授课内容
【 原理】
血浆脂蛋白包括高密度(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、乳糜
TCH
2.6-6 豪摩尔/升
【 临床意义】
高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有密切的关系;降低血清胆固醇使冠心病的发病
率降低及停止粥样斑块的进展。血清胆固醇增高多见于继发肾病终合症、甲状腺功能低下、
糖尿病和胆管梗阻等。
课后 思考
1.高脂血症有哪些类型? 2.哪种脂蛋白增高促进动脉粥样斑块的形成?哪种脂蛋白抑制动 脉粥样斑块的形成?其机制是什么?
毫升氯化镁溶液,充分混匀,4000 转离心 5 分钟,小心吸取上清液 0.4 毫升于标明 H
的离心管中,作为 HDL-CH 抽提管。
2. TCH 管:离心管中价血清及蒸馏水各 0.2 毫升,标明 T。
3. 向上述两管各加抽提剂 2.0 毫升,充分摇匀,4000 转离心 3 分钟,吸取上清液备用。
4. 取 4 支试管,分别标号,按下表操作:
微粒(CM)。用磷钨酸和氯化镁将血浆中 LDL、VLDL、CM 沉淀除去,即可得上清液中的 HDL。
高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-CH)和总胆固醇(TCH)分别经乙酸乙脂和无水乙醇混合液提取,
再与浓硫酸及三价铁作用,生成较稳定的紫红色化合物。与同样处理的胆固醇标准液进行比
色,可求得其含量
胆固醇测定标准操作程序SOP文件

生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-31
胆固醇测定
版序:ABCD
页码:第1页,共4页
1测定方法
酶法(CHOD-PAP法)。
2测定原理
胆固醇酯+ H2O胆固醇酯酶胆固醇+脂肪酸
胆固醇+ O2胆固醇氧化酶胆甾烯酮+ H2O2
H2O2+ 4-氨基安替比林过氧化物酶醌亚胺+ 4 H2O
溶液粉红色深浅与样品中胆固醇浓度成比例。
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。
准备:直接使用。
ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-31
胆固醇测定
版序:ABCD
页码:第2页,共4页
质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。
Chol>300mg/dl
Trig>200mg/dl
有
Chol
35mg/dl=0.9mmol/l
200mg/dl=5.2mmol/l
300mg/dl=7.8mmol/l
Trig
200mg/dl=2.3mmol/l
换算关系式:mg/dl×0.026 = mmol/L
mmol/l×38.66 = mg/dl
4.2校准物
来源:ROCHE配套校准物,具体如下:
S1:0.9%的NaCl
S2: C.f.a.s(货号:759350)
贮存条件:校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备:直接使用。
定标频率:A更换试剂瓶后需要进行1点定标
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血清高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请:血清高密度脂蛋白胆固醇(缩写HDL-C)测定;组合项目申请:血脂测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2标本采集与处理
2.1标本采集
2.1.1常规静脉采血约 2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本
2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2 标本保存
2.2.1接收标本后在30min将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15〜25 C)下可稳定1天,普通冰箱中(2〜8C)稳定7天。
-20 C
可保存数月;-70 C至少可保存半年;应避免标本反复冻溶。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,
对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4〜8C冰箱保存7天。
2.3标本采集的注意事项
2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
抽血前3天避免高脂饮食,24小时不饮酒, 232 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。
EDTANa2(1mg / mL)抗凝
2.1.5抽血前最好停用影响血脂的药物(如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等)数天或数
周,否则应记录用药情况。
2.1.6妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。
3方法原理
1.试剂1使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。
胆固醇酯酶
胆固醇酯+ H2 0 ----------------- 胆固醇+脂肪酸
胆固醇氧化酶
胆固醇+ 02 ------------------------------ 胆淄烯酮+ H2O2
过氧化氢酶
H20 2 -------------------- 0 2 + H2O
2.试剂2中的变性剂释放出高密度脂蛋白后,对HDL进行测量。
胆固醇酯酶
胆固醇酯+ H20 ------------------ 胆固醇+脂肪酸
胆固醇氧化酶
胆固醇+ 02 ------------------------------ 胆淄烯酮+ H202
过氧化物酶
H20 2 + 4-氨基安替比林+ HDA0S ---------------------- 醌染料+ 4H 20
4试剂及其他用品
4.1试剂:血清高密度脂蛋白胆固醇选择性抑制法测定试剂盒,由利德曼生化股份出品。
4.2试剂盒保存:未启封试剂盒在2〜8C保存,可储存至失效期。
启封使用的试剂置仪器试
剂仓冰箱稳定7天。
开盖后避免污染。
当试剂变混浊,或者试剂出现明显的粉红色,或空白吸光率>0.3时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.3试剂盒准备:液态双试剂型,即开即用,无特殊准备
4.4试剂盒主要成分:
5校准品与校准模式
5.1校准品:使用利德曼生化股份与试剂盒配套的日本第一化学株式会社提供的校准液多项生
化校准品(货号CS00301 )。
5.2校准类型和校准点数目:线性模式,1个校准点。
5.3校准周期:校准间隔时间不限。
但在:①更换试剂或出现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器的重要零件更换后,进行一次校准。
5.4校准液重建方法:校准液为干粉,用时加入5ml生理盐水,室温放置30分钟后轻轻混匀即
可使用。
6质控品与室质控规则
6.1 质控品采用由Beckma n-Coulter 公司提供的两个不同水平未定值质控血清
6.2质控液重建方法:液态质控血清,即开即用,无需特殊准备。
6.3质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。
6.4质控规则:采用Westgard 多规则质控规则,由计算机程序进行检索与判断。
6.5如出现失控情况,按室质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。
7适用仪器
适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。
8标本检测步骤
装载试剂T进行校准T进行质控T输入标本检测项目T加载标本T标本测定T 结果复核T报告。
9主要分析参数
参见说明书。
10结果计算
血清HDL-C浓度(mmol/L ) = "600 700)nm X校准液胆固醇浓度(mmol/L)
校准液A600 700)nm
仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。
11检验结果的报告及围
11.1结果的报告
11.1.1结果经审核后,确认准确无误后发出报告。
11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名,并有与申请单相同的医学信息。
11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
6.1 质控品采用由Beckma n-Coulter 公司提供的两个不同水平未定值质控血清11.2 报告围:0.08〜3.90mmol/L ,超过此围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文
字说明,例如:系根据标本稀释后重复测定的结果。
精密度:批CV <5 %,批间CV <6.0 %;
30mg/ml 、抗坏血酸300mg/ml 对测试结果无明显影响。
0.9-2.15 mmol/
目前我国的血脂异常防治建议将
HDL-C 分为3个水平
糖尿病、肝炎、肝硬变等患者。
高TG 血症往往伴低HDL-C , HDL-C 下降,适量饮酒、长期体力劳动和运动会使 HDL-C 升高。
15结果审核以及分析与相关项目的联系
15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。
12 操作性能
12.1 12.2 灵敏度:高密度胆固醇浓度为: 2.0mmol/L 时,显色吸光度
A600 nm 约 0.219~0.261 12.3 线性围:0.08 〜3.90mmol/L 。
12.4
方法的有限性及干扰因素:源性干扰物溶血为 1000mg/ml 、脂血 2000mg/ml 、黄疸
13 参考围及医学决定水平
13.1 参考围
13.2 医学决定水平
> 1.04mmol/L
为合适围; < 0.91mmol/L
为减低; > 1.56mmol/L 为高HDL-C 血症。
14 临床意义
14.1 高密度胆固醇是动脉粥样硬化性疾病危险性的评估指标。
流行病学与临床研究证明,
HDL-C 与冠心病发病呈负相关, HDL-C 增高(> 1.55mmol/L )被认为是冠心病的“负”危险 因素,在此基础上每增高 0.03mmol/L
,则冠心病危险性降低 2 %〜3 %。
14.2 HDL-C 下降还多见于脑血管病、 肥胖者的HDL-C 也多偏低。
吸烟可使
15.2认真审核每一个测定结果,审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。
15.3相关项目审核与血脂其他指标和与载脂蛋白等的关系,HDL-C浓度一般与apoAl呈正
相关,与TG常成负相关,且HDL-C加LDL-C应略低于TC。
如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。
16威胁生命的“紧急值”及报告规定
通常无威胁生命的“紧急值”。
17有关引用程序与文件
17.1Abbott全自动生化分析仪仪器标准操作规程。
17.2生化检验室质控标准操作程序。
17.3检验结果审核程序。
17.4标本送检和接收程序。
18 参考文献
18.1陆永绥,伟编•临床检验管理与技术规程.:大学,2004.
18.2利德曼生化股份高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒说明书。