急性毒性实验内容 ppt课件
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急性毒性实验内容
实验动物的标记
方法一：
6
按右前肢、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左
前肢、左肋、左后肢，顺序编号为1～9号，不染色 为10号。在动物相同部位涂染另一种颜色染料表示 十位，两种颜色可编1～99号。 方法二：
以头部为1号，顺时针方向依次从右耳、右前肢、右
后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢 染色，分别为2～10号。
同一品系的实验动物、用相同染毒条件所得 到的LD50值相同或相似，但其毒作用带或致 死剂量范围却有明显的不同，表明化学物的 实际毒性存在差异。
急性毒性试验不等于LD50测定
可用少量动物测定ALD，并进行临床观 察、化验检查和病理学检查 当口服剂量大于5g/kg或注射剂量大于 2g/kg时，不产生急性毒性或死亡，则不 必准确的测定LD50
20只小鼠按随机区组设计分组表
随机分配到各组的动物
剂量选择及分组
剂量选择
广泛查阅文献资料，估计毒性中值
预试，求出待测化学物0 %~100 %或
10 %~90 %的大致致死剂量范围 设计正式试验的剂量和分组
剂量分组
i＝lgLD100-lgLD0/n-1 或i＝lgLD90-lgLD10/n-1 n：设计的剂量组数
实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响；
原则：按统计学原则随机分组，使非处理
因素最大限度地保持一致，提高每组实验
动物间的均衡性。 常用方法：完全随机和随机区组
完全随机设计
将实验动物编号，从随机数字表上任意横 行或纵行的任意数字开始，顺序取下数字， 标于每个动物号下，然后用计划组数去除 随机数字，所得余数即为所属组别。如将 ２０只动物分为４组，从随机数字表的第 １１行开始，顺序取２０个数字，用４除 的余数即为组别。
《急性毒性试验》课件
食品安全性评价
急性毒性试验：评 估食品中化学物质 的急性毒性
应用：用于食品添 加剂、农药残留、 食品包装材料等安 全性评价
意义：保障食品安 全，降低食品安全 风险
法规要求：各国食 品安全法规对急性 毒性试验有明确要 求
Part Six
急性毒性试验的局 限性
实验动物和人体的差异
物种差异：实验动物与人类在生理、 生化、遗传等方面存在差异
急性毒性与其他毒性试验的整合
整合目的：提高毒性试验的准确性和效率 整合方法：采用多学科、多领域的交叉研究 整合优势：降低试验成本，提高试验质量 整合挑战：需要解决不同毒性试验之间的差异和矛盾
急性毒性试验在特殊领域的应用
药物研发：评估药物的毒 性和副作用
环境监测：评估化学物质 对环境的影响
食品安全：评估食品添加 剂的安全性
代谢差异：不同物种对同一种物质的代谢能力可能不同 生理差异：不同物种的生理结构、功能可能不同，对同一种物质的反应可 能不同
实验条件和实际条件的差异
单击添加项标题
实验条件：实验室环境，可控因素较多
单击添加项标题
实验条件：单一剂量，单一时间
单击添加项标题
实验条件：单一物种，单一环境
单击添加项标题
实验条件：短期观察，短期影响
毒性反应的机制分析
毒性反应的类型：急性、亚急性、慢性 毒性反应的机制：细胞毒性、组织毒性、器官毒性 毒性反应的影响因素：剂量、时间、个体差异 毒性反应的检测方法：生物标志物、病理学检查、生理学检查
Part Five
急性毒性试验的应 用和意义
药物研发和安全性评价
药物研发：急性 毒性试验是药物 研发过程中的重 要环节，用于评 估药物的安全性 和有效性
急性毒性试验PPT课件
编辑版pppt
12
(二)安全性评价
(1)根据急性毒性试验结果判断供试药物毒性的强弱、类型。国内尚无统—规 定。
(2)急性毒性试验结果对临床研究有指导意义，可以为临床研究时探索安全有 效剂量避免出现急性不良反应提供依据。
但是，鉴于人体与各种动物对各类化合物的吸收、分布、代谢、排泄以及各 类型毒性反应的差异，尚无规律可循，现有化学药品统计数据表明，在进行临 床研究时，仍应根据实验结果参考文献资料报道进行由低到高的安全治疗剂量 的探索。
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10
三、近似致死量试验
国外近年来有采用少量动物进行近似致死量测定的方法。其中有的类似 LD50的预试验或霍恩氏法。每组用3—4只动物，设多组，详细观察并汜 录动物毒性反应井进行血液学，血液生化以及病理组织学观察。有的采用 剂量递增法即—只动物一个剂量以几何级数递增，根据前个剂量的反应， 决定下—个剂量。或采用剂量累积法，同一批动物间隔一定时间、剂量由 小到大给药，观察毒性反应，同时结合血药浓度的测定，确定动物的急性 毒性反应、靶器官、中毒或致死剂量、毒性反应时的血药浓度。剂量递增 法类似于LD50测定的阶梯法(或称序贯法、上下法)，适用小动物而且毒性 反应出现快的试验，10—20只动物即可测定。剂量累积法则适用大动物， 利用大约6只合格动物即可进行急性毒性试验的全面观察。另外，国外还 有采用固定剂量给药观察近似致死剂量，以决定药物毒性大小者。
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四、急毒试验结果评价 (一)可靠性评价
为保证急毒结果，实验条件应符合GLP的要求，供试品质量稳定， 动物合格，实验方案，实验原始记录，标准操作规程，总结报告应 符合要求。总结报告中应包括摘要、供试品、试验动物，试验环境、 给药方法、观察方法、毒性反应症状、体重变化、病理组织学变化、 雄性反应和死亡出现的时间、LD50和LD5及其可信限的计算方法、 结果讨论等。根据试验结果对急性毒性进行全面评价。
发光细菌法急性毒性实验课件
实验目的与内容
一、实验目的
1.掌握发光细菌毒性测试的标准方法； 2.根据发光细菌发光强度的变化判断
受试化合物的毒性； 3.初步了解发光细菌毒性测试的影响因素。
二、实验内容
1.发光细菌的复苏； 2.发光细菌发光强度的测定； 3.受试化合物毒性的计算。
实验目的与内容
发光细菌是一种非致病性的普通细菌，具有发光能力，在正 常条件下经培养后能发出肉眼可见的兰绿色光，这种发光过程 是细菌体内一种新陈代谢反应，是氧化呼吸链上的一个侧支。 发光细菌的发光反应模式图(1)所示。发光细菌发光反应途径可 简单概述为:
3. 仪器： 生物发光光度计，配制2或5 ml测试管，当氯化汞标
准液浓度为0.10 mg/L时，发光细菌的相对发光度为50 ％，其误差不超过10％。2或5 ml 测试样品管，具标准 磨口塞，为制造比色管的玻璃料制作，由专业玻璃仪 器厂制造，分别适用于相应型号的生物放光光度计。 注射器(1 ml)、微量注射器(10 μl)、定量加液瓶(5 ml)、 吸管(2.10、25 ml)、试剂瓶(100 ml)、量桶(100、500 ml)、棕色容量瓶(50、250、1000 ml)、半微量滴定管 (配磨口试液瓶，全套仪器均为棕色，10 ml)等若干。
发光细菌的复苏 从冰箱内取出含有0.5 g 发光细菌冻干粉和氯化钠
溶液, 置于含有冰块的小号保温瓶, 用1 ml注射器吸取 0.5 ml冷的氯化钠2.0 g/100 ml溶液(适用于5ml的测试 管)或1 ml 冷的氯化钠2.5％溶液(适用于2 ml的测试管) 注入冻干粉中, 充分混匀。2 min后菌即复苏发光, 可在 暗室观察, 肉眼可见微光。备用。
简介
采用现代光电检测手段(生物发光光度计)的发光菌生物 毒性实验是毒理学中生物测定的方法之一。 该方法快速、 简便、灵敏、廉价,在有毒物质的筛选, 环境污染生物学评 价等方面有重要的意义, 因而备受各国有关研究者的关注。
急性毒性试验
三、给药方法
(一)动物禁食
动物购入后应在实验室观察1星期，口服给药前，为减少吸收差异和大容量 给药造成胃急性扩张，小鼠和大鼠至少应停食4 -6h，要求一夜停食(不停水)， 投药后再停食3-4h。
(二)给药途径
中药新药除临床给药途径外，—、二类新药还希望其他给药途径，水溶性 药
物应同时采用静脉给药途径，其他如油剂，混悬剂之类可采用皮下给药途径。 腹腔汁射在人体极少用，中药粗制剂成分复杂，动物毒性试验中也尽可能少 用，以避免腹腔刺激性的干扰。
(一)观察指标
不能把求得致死剂量看作是急性毒性实验的唯一要求。发现毒性症状及毒性反应 的靶器官同样是急毒实验非常重要的目的。给药前后应观察体重、进食、进水的状 况，密切观察异常毒性症状，特别是给药后的一、二日。以后1日至少观察1次，观 察7 日观察症状包括①行动：不安定、多动、发声；②神经系统反应：举尾、振颤、 痉挛、运动失调、姿态异常；③自主神经系统反应：眼球突出、流涎、流汨、排尿、 下泻、竖毛、皮肤变色、呼吸；④死亡。应每日记录体重、毒性反应和死亡情况， 濒死动物应单独饲养，死后及时解削进行肉眼观察和病理组织学观察。试验结束存 活动物也进行解剖，如有病变进行组织学观察。
(二}致死剂量计算
可用Bliss点斜法、简化机率法、改进寇氏序贯法等计算最小致死量或半数致死量。 Bliss法严谨精确，缺点是计算非常繁复。但近代有计算机软件，汁算方法可推荐 Bliss法。各种方法原则基本相同，如：①剂量刘数值应为等差，即剂量应按等比级 数排列；②各组动物数应相等；③死亡率应在50％上下基本对称分布等。但各种方 法还各有特殊设计要求，如有的要求Dm和Dn必须为100％和0％死亡率等，可参考有 关专著，此处不赘述。如受试物毒性低，测不出LD50，可求得最大给药量。
PPT课件-急性中毒
9
中毒的途径
呼吸道 消化道 皮肤、粘膜 注射等途径摄人体 内。
10
中毒的原因
(1)生产性中毒 主要发生在毒物的生产、贮存、转运过程中毒 (2)生活性中毒 毒物污染了食物、水源、空气所造成的中毒 (3)自杀与投毒 因身患顽疾、情感破裂等因素所致的自我服毒 和敌视者的人为投毒。 (4)医源性中毒 医务人员在治疗患者疾患时超大剂量用药时所 致的中毒。 (5)各种恐怖性袭击 (6)误食、误服有毒动植物所致的中毒。
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。 ②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有 机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、鉛、钡等 。
4
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、铅、钡等 。
40
实验室检查作为辅助诊断
毒物定性定 量检查
毒物体内代谢 产物检查
毒物选择性对器官损 害的机能检查
毒物中毒 机理检查
病情严重程度评估
1
有生命危险
2
3
有症状但 尚稳定
4
症状较轻 无症状
严重且情况 不稳定
急性中毒轻重程度的判断与预测病情危重指标
中毒可产生器官损害，引起多脏器功能失常和衰 竭。如出现下列情况者，说明病人的中毒进入危重期 ，必须严密观察病情变化，积极维持机体器官的功能 ： ①中枢神经系统抑制 出现昏迷、呼吸抑制、 血压下降、惊厥、抽搐。 ②肺水肿 ③严重的心律失常 ④心脏骤停 ⑤发绀 ⑥急性溶血性贫血，血红蛋白尿 ⑦急性肾衰、少尿、尿毒症 ⑧肝性脑病 ⑨烧伤、化学灼伤、眼灼伤 43
中毒的途径
呼吸道 消化道 皮肤、粘膜 注射等途径摄人体 内。
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中毒的原因
(1)生产性中毒 主要发生在毒物的生产、贮存、转运过程中毒 (2)生活性中毒 毒物污染了食物、水源、空气所造成的中毒 (3)自杀与投毒 因身患顽疾、情感破裂等因素所致的自我服毒 和敌视者的人为投毒。 (4)医源性中毒 医务人员在治疗患者疾患时超大剂量用药时所 致的中毒。 (5)各种恐怖性袭击 (6)误食、误服有毒动植物所致的中毒。
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。 ②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有 机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、鉛、钡等 。
4
根据来源和用途将毒物分为以下
1.工业毒物： ①窒息性化合物 氰化物、一氧化碳、硫 化氢 等。②刺激性气体 氮氧化物、氨、氯等。 ③有机化合物 甲醇、四氯化碳、苯、酚等。 ④金属、类金属及其化合物 砷、汞、铅、钡等 。
40
实验室检查作为辅助诊断
毒物定性定 量检查
毒物体内代谢 产物检查
毒物选择性对器官损 害的机能检查
毒物中毒 机理检查
病情严重程度评估
1
有生命危险
2
3
有症状但 尚稳定
4
症状较轻 无症状
严重且情况 不稳定
急性中毒轻重程度的判断与预测病情危重指标
中毒可产生器官损害，引起多脏器功能失常和衰 竭。如出现下列情况者，说明病人的中毒进入危重期 ，必须严密观察病情变化，积极维持机体器官的功能 ： ①中枢神经系统抑制 出现昏迷、呼吸抑制、 血压下降、惊厥、抽搐。 ②肺水肿 ③严重的心律失常 ④心脏骤停 ⑤发绀 ⑥急性溶血性贫血，血红蛋白尿 ⑦急性肾衰、少尿、尿毒症 ⑧肝性脑病 ⑨烧伤、化学灼伤、眼灼伤 43
急性经口毒性实验
（四）灌胃方法：
小鼠灌胃法：左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹部向上，尽量使其体位垂直，注意使动物的上消化道固定成一直线。右手持连着灌胃导针的注射器，将灌胃针由动物口腔侧插入，避牙齿，沿咽后壁缓缓滑人食管。若遇阻力，可轻轻上下滑动探索，一旦感觉阻力消失，即深人至胃部，一般进针深度小鼠2.5～4cm，随后将受试物溶液注入。如遇动物挣扎，应停止进针或将针拔出，千万不能强行插入，以免穿破食管，甚至误入气管，导致动物立即死亡。小鼠一次灌胃体积为10-20ml/kg
灌胃时操作要避免损伤食道或误入气管
正确捉拿动物，防止被咬伤且避免动物损伤
防止操作者中毒。注意通风，不要把药品撒到手、脸部皮肤及身体其他部位，操作过程中要小心。
五、注意事项：
实验动物的种属。
01
实验动物体重和随机分组情况。
02
受试物的名称、性状等情况。
03
受试物的配制和溶剂。
04
描述实验观察的中毒表现和死亡情况等。
LD50的95%可信限=log-1(X + 1.96 SX )
结果评价：
根据实验动物中毒体征、死亡时间、根据得出的LD50及受试物的种类，按相应的国家标准或技术规范中的急性经口毒性分级标准（课本 215页--农药的急性毒性分级）对受试物进行毒性定级，判断受试物的毒性大小。
灌入量计算和操作要准确，否则影响结果
单击此处添加副标题
202X
急性经口毒性实验 （Acute Oral Toxicity Test）
通过本次实验掌握经口灌胃技术，半数致死剂量的意义。
通过本次实验学习半数致死剂量的计算及毒性判定。
一、实验目的：
二、测定方法：
本实验以灌胃方式测定敌敌畏DDV（80g/100ml）的半数致死量（LD50）。
小鼠灌胃法：左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹部向上，尽量使其体位垂直，注意使动物的上消化道固定成一直线。右手持连着灌胃导针的注射器，将灌胃针由动物口腔侧插入，避牙齿，沿咽后壁缓缓滑人食管。若遇阻力，可轻轻上下滑动探索，一旦感觉阻力消失，即深人至胃部，一般进针深度小鼠2.5～4cm，随后将受试物溶液注入。如遇动物挣扎，应停止进针或将针拔出，千万不能强行插入，以免穿破食管，甚至误入气管，导致动物立即死亡。小鼠一次灌胃体积为10-20ml/kg
灌胃时操作要避免损伤食道或误入气管
正确捉拿动物，防止被咬伤且避免动物损伤
防止操作者中毒。注意通风，不要把药品撒到手、脸部皮肤及身体其他部位，操作过程中要小心。
五、注意事项：
实验动物的种属。
01
实验动物体重和随机分组情况。
02
受试物的名称、性状等情况。
03
受试物的配制和溶剂。
04
描述实验观察的中毒表现和死亡情况等。
LD50的95%可信限=log-1(X + 1.96 SX )
结果评价：
根据实验动物中毒体征、死亡时间、根据得出的LD50及受试物的种类，按相应的国家标准或技术规范中的急性经口毒性分级标准（课本 215页--农药的急性毒性分级）对受试物进行毒性定级，判断受试物的毒性大小。
灌入量计算和操作要准确，否则影响结果
单击此处添加副标题
202X
急性经口毒性实验 （Acute Oral Toxicity Test）
通过本次实验掌握经口灌胃技术，半数致死剂量的意义。
通过本次实验学习半数致死剂量的计算及毒性判定。
一、实验目的：
二、测定方法：
本实验以灌胃方式测定敌敌畏DDV（80g/100ml）的半数致死量（LD50）。
急性毒性试验讲解
在化学品安全性评价中的应用
在化学品安全性评价中，急性毒性试验是评估化学品对人体健康和生态环境可能 产生危害的重要步骤。通过急性毒性试验，可以初步了解化学品对生物体的毒性 作用和潜在风险。
急性毒性试验的结果可以为化学品的分类、标签和风险管理提供依据，有助于制 定相应的安全措施和应急预案。
急性毒性试验的局限性
常用动物
大鼠、小鼠、兔子等。
02
急性毒性试验操作流程
实验前准备
明确实验目的
在开始急性毒性试验之前，必须明确 实验的目的，是为了评估化学物质、 药物或其他物质的毒性，还是为了其 他目的。
准备实验材料
准备好所需的化学物质、药物或其他 质，以及实验所需的仪器和设备， 如注射器、秤、笼子等。
选择实验动物
细胞模型
利用特定细胞系或干细胞 分化得到的细胞，模拟体 内环境进行毒性测试。
计算模型
基于已知化合物的毒性数 据，建立预测模型，实现 对新化合物的快速毒性预 测。
微流控技术
模拟体内生理环境，实现 细胞与分子的复杂交互， 为药物筛选和毒性测试提 供新途径。
急性毒性与其他毒性试验的整合
整合多种毒性试验
将急性毒性试验与其他类型的毒性试验（如慢性毒性、生殖毒性 等）相结合，全面评估化合物的潜在危害。
目的
了解受试物质的毒性性质，为后续的 亚急性、慢性毒性试验以及毒理学研 究提供依据，同时为化学品的安全评 估和危险度评估提供重要数据。
试验方法
实验设计
根据受试物质的特点和试验目的，选择合适的实验动物（如大鼠、小 鼠、兔子等），确定受试物质的剂量范围，设置对照组。
给药方式
根据实际情况选择合适的给药途径（如经口、皮肤、吸入等），确保 受试物质能够被动物充分吸收。
急性毒理学实验
体外毒理学试验设计
❖ 1．测定受试物溶解性 应测定受试物在试验介质中的溶解性。 溶解性限度是出现沉淀的最低浓度。 在试验系统暴露期内，由于细胞、血清的存在， 受试物的溶解性可能改变。 在试验开始和结束时评价溶解性有意义。
❖ 2．试验最高剂量的推荐
对可溶性受试物浓度高于10mmol/L时可因高渗透 压在哺乳动物细胞引起损伤或人工假象，对细菌 则无影响。
❖ ①染毒后立即出现惊厥、共济失调和死亡可能是 神经毒性。②经一段潜伏期后的迟发性死亡可能 提示对肾或肝的作用。腹泻和/或竖毛，可能为植 物神经兴奋。
❖ 在观察期内需多次测量动物体重，体重改变可以 反映动物染毒后的整体变化。
❖ 实验动物染毒后的死亡时间应记录、分析。
❖ 急性毒性研究中，应注意观察非致死指标及其可 复性，从而对化学物的急性毒性作全面的了解。
由于受试物的分子量并不一定知道，因此，在大 多数情况下，可溶性受试物的试验上限应该是： (1)对哺乳动物细胞为10mmol/L或5mg/ml。(2)对 细菌试验为5mg/平板。
❖ 对于没有适当溶剂，完全不溶的受试物，则可以 按5mg/平板或10mmol/L(5mg/ml)进行实验以检测 杂质的致突变性。或者，采用生理盐水提取物进 行实验。
体内毒理学试验设计
❖1. 剂量分组 ❖ 毒理学试验的重要目的是研究剂量-反应(效应)关
系。剂量-反应(效应)关系的存在是确定外源化学 物与有害作用的因果关系的重要依据，也可证明 实验结果的可靠性。 ❖ 在毒理学试验中，一般至少要设3个剂量组(即高 剂量组、中剂量组、低剂量组)，希望能得到满意 的剂量-反应(效应)关系。
2. 各组动物数
❖ 毒理学安全性评价试验各组动物数取决于很多因 素，如实验目的和设计，要求的敏感度、实验动 物的寿命、生殖能力，经济的考虑及动物的可利 用性。各组动物数的设计应考虑到统计学的要求。
相关主题
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实验动物的标记
方法一：
6
按右前肢、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左
前肢、左肋、左后肢，顺序编号为1～9号，不染色
为10号。在动物相同部位涂染另一种颜色染料表示
十位，两种颜色可编1～99号。
方法二：
以头部为1号，顺时针方向依次从右耳、右前肢、右
后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢
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急性毒性试验项目
急性半数致死量测定 半数耐受限量测定 7d喂养试验 其他：近似致死量试验、固定剂量法、
急性毒性分级法、阶梯法、金字塔法、 限量试验、急性系统毒性试验等。
2020/11/13
10
急性毒性试验设计
▪ 实验动物选择 ▪品种 ▪品系 ▪个体 性别 年龄 体重 生理病理状况
对外源化学物毒性反应与人近似； 原则 易于饲养管理，方便实验操作；
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20只动物的完全随机分配
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完全随机分配后各组所属动物号
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20只动物完全随机分配的结果
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20只动物的完全随机分配
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 随即数字 54 83 80 53 90 75 53 78 93 47 72 09 54 66 95 44 68 67 67 86 除4后余数 2 3 0 1 2 3 1 2 1 3 0 1 2 2 3 0 0 3 3 2 所属组别 二 三 四 一 二 三 一 二 一 三 四 一 二 二 三 四 四 三 三 二
2020/11/13
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用小动物试验可求出外源化学物对一种或几种
实验动物的急性LD50或LC50; 用大动物试验可求出近似致死剂量
（approximate lethal dose, ALD）;
根据LD50（LC50）值可进行急性毒性分级，以 初步评价外源化学物对机体急性毒性大小和急
性毒作用的强度。
2020/11/13
常用方法：完全随机和随机区组
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完全随机设计
将实验动物编号，从随机数字表上任意横 行或纵行的任意数字开始，顺序取下数字， 标于每个动物号下，然后用计划组数去除 随机数字，所得余数即为所属组别。如将 ２０只动物分为４组，从随机数字表的第 １１行开始，顺序取２０个数字，用４除 的余数即为组别。
染色，分别为2～10号。
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染色法
优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。
缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
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耳缘孔口法：
在耳缘先用针穿孔和用剪刀剪口，再用酒精墨 汁涂抹，使黑色渗入孔口，伤口愈合后不易脱 落，这种标号亦可标号１～９９。
急性毒性试验方法
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1
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h 之内多次接触外源化学物后，在短
期内所发生的毒性效应，包括致死 效应。
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精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯
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急性毒性试验目的
了解外源化学物急性毒性的强度，求出LD50 了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征
及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险 性。
探求外源化学物的剂量-反应（效应）关系， 为亚慢性毒性、蓄积毒性和慢性毒性及特殊毒
性试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供 参考。
性别：雌雄各半，也有例外，如， 致畸试验的剂量准备，只作雌性动 物LD50。
年龄：刚成年，未曾受孕、交配
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实验动物的标记
➢ 染色法 ➢ 耳缘孔口法 ➢ 烙印法 ➢ 挂牌法
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染色法
用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位来 表示不同号码，适用于大鼠、小鼠和豚鼠。 常用染料： 3％～5％苦味酸酒精饱和液，呈黄色； 甲基紫酒精饱和液，呈紫色； 0.5％中性红或品红溶液，呈红色等。
易于获得，品系纯化，价格低廉。
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实验动物的年龄与体重的关系
动物
大鼠 小鼠 豚鼠 兔 犬 猫
成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4
体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg
寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12
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初步了解动物致死的原因，为研究毒作用的机
制提供线索，进而为制定中毒急救治疗措施提
供依据。
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由急性毒性试验可得到两类毒性参数
上限参数 是以死亡为终点的毒性，包 括绝对致死量、半数致死量、最小致 死量、最大耐受量等；
下限参数 是以非致死性急性毒作用 为终点的毒性，包括急性阈剂量和无 作用剂量等。
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
一次：指瞬间给实验动物染毒，如经 口、经静脉注射染毒。
24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
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急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强 度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小 有关。
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急性毒性试验的动物体重
大鼠 120～150ｇ
小鼠 18～22ｇ
豚鼠 200～250ｇ
家兔 2～2.5 kg
犬 10～15kg（成年）
变异范围不得超过所用动物平均体 重的10％。
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急性毒性试验的动物要求
动物数量：小动物4～6组，每组至 少10只；犬等大动物每组6只。
适用于大、小鼠。
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烙印法： 将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以 破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。
挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或 系于其颈部。适用于较大动物。
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实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响； 原则：按统计学原则随机分组，使非处理 因素最大限度地保持一致，提高每组实验 动物间的均衡性。