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楮实子化学成分及药理作用研究进展
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 楮实子化学成分及药理作用研究进展
 【关键词】楮实子;化学成分;药理作用;综述
 楮实子为桑科植物构树Broussonetia papyrifera(L.)Vent.的干燥成熟果实,秋季果实成熟时采收,洗净,晒干,除去灰白色膜状宿萼及杂质[1]。

楮实子的药用始于《名医别录》,被载为上品,味甘,性寒,无毒,后历年版《中华人民共和国药典》(一部)均有记载。

楮实子在全国大部分地区有分布,主产于河南、湖北、湖南、山西、甘肃等地。

楮实子具有补肾清肝、明目、利尿的功效,多用于腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目眩、目生翳膜、水肿胀满等症。

笔者现对近年来楮实子化学成分和药理作用的研究进行综述。

 1 化学成分
 1.1 矿质元素
 楮实子中含有多种矿质元素,人体必需且具有重要药理活性的微量元素铁(Fe)、锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)、钼(Mo)均含有。

据报道,Fe、Mn、Cu、Zn、Mo等元素对人体有直接的作用,并参与新陈代谢过程。

Mn和Mo两种元素是多种癌细胞的克星;Fe为人体合成血红蛋白所必需;Zn和Cu包含在许多金属蛋白和酶中;而且楮实子高K、低Na 特点明显。

有毒元素镉、砷、汞的含量较低[5]。

 1.2 氨基酸
 楮实子中含有丰富的氨基酸,黄氏等[4]研究发现,楮实子中至少含有16种以上的氨基酸,以天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、缬氨酸、脯氨酸、赖氨酸等为主,其中7种为人体必需氨基酸;以100 g干燥样品计,楮实子总氨基酸含量合计为12.44 g,其中人体必需氨基酸为3.92 g(31.5%)。

林氏等[5]从楮实子中分离出17种氨基酸,分别为天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、色氨酸、甘氨酸和脯氨酸,包含了8种必需氨基酸,约占总氨基酸含量的22.46%,非必需氨基酸中谷氨酸含量最高。

 1.3 脂肪油
 楮实子中含有大量的脂肪油,其含量达到31.7%。

脂肪油中含有非皂化物2.67%、饱和脂肪酸8.0%、油酸15.0%、亚油酸76.0%[2]。

袁氏等[3]采用超临界二氧化碳萃取技术,从楮实子中分离出60种脂肪油成分,主要成分见表1。

黄氏等[4]共分离鉴定了17个脂肪酸成分,主要有亚油酸、棕榈酸、硬脂酸等,其中不饱和脂肪酸占80%以上。

林氏等[5]测定了楮实子脂肪酸中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸以及亚麻酸的含量,结果显示,楮实子中所含的必需脂肪酸明显高于其他常见食用油。

表1 楮实子油的化学成分分析(略)
 1.4 生物碱
 庞氏等[6]从构树果实中分离得到4个生物碱,包括1个新化合物broussonpapyrine和3个已知化合物,它们分别是nitidine、oxyavicine和liriodenine。

 1.5 色素
 林氏等[7]研究表明,楮实子色素易溶于水,能溶于甲醇、乙酸等强极性溶剂,不溶于无水乙醇、氯仿、苯、乙醚等弱极性有机溶剂。

用UV-2000紫外-可见分光光度仪对构树
果色素水溶液扫描,其特征吸收峰分别为266、205、484 nm。

经红外光谱测试,判断该色素为一种含羰基和羟基的芳环化合物,根据构树果色素的理化特性及光谱分析,初步推测该色素属黄酮醇类的天然色素,具有吡酮环、羰基组成生色团的基本结构。

罗氏[8]用乙醇从楮实子中提取红色素,结果表明,所得色素对光、热、蔗糖、葡萄糖、淀粉和绝大多数金属离子都是稳定的。

 2 药理作用
 2.1 促进记忆
 复杂迷宫趋食反应实验结果表明,楮实子提取液对正常小鼠的学习和记忆功能有显著促进作用,普遍有缩短小鼠走迷宫取食所需时间、减少错误次数的趋势。

采用一次训练被动回避性条件反应跳台法,用楮实子对4种化学药品所致记忆障碍的改善实验,结果表明,楮实子提取液对东莨菪碱造成的记忆获得障碍具有明显的改善作用,可能是楮实子直接影响神经递质达到目的的;楮实子提取液对氯霉素造成的记忆巩固缺损有明显改善,使小鼠测验时的错误次数显著减少,潜伏期显著延长;对亚硝酸钠造成的记忆巩固不良有明显的改善作用,表明楮实子对小鼠学习和记忆的促进与提高机体耐缺氧能力、改善脑部氧代谢、促进需氧代谢等多种途径来实现;楮实子提取液对低浓度乙醇造成的记忆再现缺损有显著拮抗作用[9]。

 2.2 增强免疫
 药理实验表明,含楮实子的还少丹能使氢化可的松模型小鼠游泳时间明显延长,能使利血平造模小鼠体温明显升高,具有补肾健脾之功效;并能增加小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的睡眠动物数,具有益智安神的作用[10]。

李氏等[11]在补肾复方益视片对肾阳虚大鼠红细胞免疫功能的影响实验中发现,与肾阳虚模型对照组比较, 益视片治疗组大鼠红细胞C3b受体花环率明显升高(P 0.05),红细胞免疫复合物花环率明显下降(P 0.05),提示补肾复方益视片具有提高肾阳虚大鼠红细胞免疫功能的作用。

 2.3 降血脂
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 寿胎丸对提高体外受精
 【摘要】目的观察寿胎丸加味对提高体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床妊娠率的影响。

方法将2001-2003年中山医科大学深圳泌尿外科医院试管婴儿生殖中心采用IVF-ET助孕术后的有随访条件者80例随机分为2组,治疗组40例,对照组40例,治疗组自胚胎移植后除常规肌注黄体酮外运用中医辨证辅助治疗,对照组仅常规肌注黄体酮,不予其他干预,对2组疗效进行观察和比较。

结果治疗组40例,妊娠23例,临床妊娠率57.5%,平均孕激素水平(22.45 1.31) g/L,妊娠流产率13.0%。

对照组40例,妊娠12例,临床妊娠率30.0%,平均孕激素水平(10.18 0.89) g/L,妊娠流产率25.0%,2组临床妊娠率、平均孕激素水平、妊娠流产率差异有统计学意义(P 0.05,P 0.01,P 0.05)。

结论运用寿胎丸为基础方辨证治疗对提高IVF-ET临床妊娠率、降低妊娠流产率疗效显著优于单纯用黄体酮治疗。

 【关键词】体外受精;胚胎移植;辨证论治;寿胎丸
 Abstract：Objective To observe the effect of Shoutaiwan on improving clinical pregnancy rate of in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET). Method Eighty people, who were easy to be followed up and pregnant with the assistant of IVF-ET by the tube-baby centre of Shenzhen Urology Surgical Hospital of Zhongshan Medical University from 2001 to 2003, were divided into two groups randomly with 40 people for each. Treatment group, after embryo transfer, were normally injected progesterone and auxiliary treated of traditional Chinese Medicine according to syndrome differentiation. The comparing group were only injected progesterone. The curative effect was observed and compared. Result In 40 cases of
treatment group, 23 cases were pregnant, clinical pregnant rate was 57.5%, the average level of progesterone was (22.45 1.31) g/L, pregnant abortion rate was 13.0%. In 40 cases of comparing group, 12 cases were pregnant, clinical pregnant rate was 30.0%, the average level of progesterone was (10.18 0.89) g/L, pregnant abortion rate was 25%. There were significant differences in the clinical pregnant statistical rate, the average level of progesterone and pregnant abortion rate between the two groups. Conclusion It s more effective that the syndrome differentiation method based on Shoutaiwan than progesterone treatment only in improving clinical pregnant rate and reducing pregnant abortion rate of IVF-ET.
 Key words：in vitro fertilization;embryo transfer;syndrome differentiation;Shoutaiwan
 体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术俗称试管婴儿,是指从活体内取出卵子和精子经体外受精、培养,分裂成2～8个分裂球或胚泡期时,再移植到女性子宫内着床,发育成胎儿、分娩。

该技术给许多不孕夫妇带来了福音,但即使形态良好的胚胎移植入子宫腔,IVF-ET 的妊娠率仍很低。

本院妇科与中山医科大学深圳泌尿外科医院试管婴儿生殖中心共同协作,在IVF-ET后运用中药辅助治疗,为提高IVF-ET的临床妊娠率寻找有效途径。

 1 资料与方法
 1.1 体外受精-胚胎移植助孕术
 采用促性腺激素激动剂(GnRH- )降调节的长方案,于黄体中期予GnRH- 1.8 mg肌注,下次月经周期的第3日予肌注重组人促卵泡素(rhFSH)150～450 IU,定期监测B超及尿促黄体生成素(LH),卵子发育成熟时予绒毛膜促性腺激素(HCG) 10 000 IU肌注;肌注HCG 34～36 h后在阴道B超引导下经阴道穿刺负压抽吸取卵术,记录获卵数;女方取卵当天,男方取精,行常规IVF卵子培养4～6 h后受精,16～18 h后去卵丘细胞记录受精情况。

取卵后72 h评判胚胎分级。

一级胚胎：7个卵裂球,碎片二级胚胎：7个卵裂球6个,20% 碎片三级胚胎：6个卵裂球5个,30% 碎片四级胚胎：卵裂球5个,碎片30%。

一级及二级胚胎为优质胚胎,取卵后7 h进行胚胎移植,取卵日起肌注黄体酮40 mg/d。

 1.2 一般资料
 将2001-2003年中山医科大学深圳泌尿外科医院试管婴儿生殖中心采用IVF-ET助孕术后的有随访条件者80例随机分为2组。

治疗组40例,对照组40例,年龄28～42岁,平均35岁,病程3～13年,均为做过IVF-ET助孕术1次以上未成功者,排除染色体异常、
免疫性不孕及男方因素,2组间临床资料数据比较差异无统计学意义(P 0.05)。

 1.3 治疗方法
 治疗组自胚胎移植后除常规肌注黄体酮外运用中医辨证辅助治疗,予寿胎丸加味以补
肾健脾、益气安胎。

方药为：菟丝子15 g,桑寄生15 g,续断15 g,阿胶15 g,党参30 g,白术15 g,黄芪30 g,黄芩10 g,鹿角霜10 g,熟地黄10 g,砂仁5 g。

腰酸明显者加杜仲10 g;大便秘结可加肉苁蓉10 g;心烦不安、口苦咽干热象明显者去鹿角霜,减党参、黄芪药量,加白芍15 g、生地黄15 g。

对照组仅常规肌注黄体酮,不予其他干预。

 1.4 疗效标准
 胚胎移植后12 d做尿HCG定性检查,阳性者在胚胎移植4周行B超检查,发现孕囊者为临床妊娠,统计2组的临床妊娠率,检测血清平均孕激素(P)、绒毛膜促性腺激素( -HCG),追踪妊娠结局。

 1.5 统计学方法
 采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。

组间临床妊娠率、流产率用2检验,检验水准=0.05;组间P、HCG用x s表示,比较用t检验,检验水准=0.01。

 2 结果
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仅供参阅！张氏等[12]采用生化分析法,测定老年痴呆患者用药前后血液中过氧化脂质(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白(HDL)的含量变化,进行t检验统计分析。

与用药前相比,用楮实子后血清中LPO、TC和TG水平显著下降(P 0.05),而SOD和HDL水平显著升高。

楮实子可能通过提高血中HDL水平和体内SOD活性,直接淬灭体内过多的LPO,降低血中TC和TG水平,使老年痴呆患者病情得到缓解,而达到治疗目的。

另外,楮实子的固本补肾、益气抗衰作用也可通过促进脑血循环、抑制脑老化等过程,改善老年痴呆患者的临床症状和阻止病情进一步发展。

 2.4 抗氧化
 庞氏等[13]采用H2O2和Fe2+系统产生羟基自由基,NADH-PMS-NBT系统产生超氧阴离子自由基,并观察了楮实子红色素(Fructus Broussonetia Haematochrome,FBH)对羟基自由基及超氧阴离子自由基清除效果,以及对H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制和对肝组织匀浆自氧化终产物丙二醛(MDA)及VC-Fe2+系统引起线粒体形态改变的抑制作用。

结果显示,FBH能显著清除超氧阴离子及羟基自由基,抑制H2O2诱导小鼠红细胞溶血和肝匀浆自氧化,对肝线粒体也有保护作用。

因此,FBH有较强的体外抗氧化作用。

 
 2.5 细胞毒作用
 庞氏等[14]对楮实子总生物碱抗肿瘤细胞的活性进行探讨,分别用MTT及集落形成法考察楮实子总生物碱对Hela、BEL- 7402、A375、SMM1990、Saos-2细胞株的细胞毒作用。

当药物浓度在10 g/L以下时,抑制作用不明显。

随着药物浓度升至50 g/L时,药物对肿瘤细胞生长的抑制作用较明显,MTT法测得抑制率在20%以上,集落形成法测得抑制率在30%以上。

而当药物浓度达到100 g/L时,楮实子总生物碱显示出较为显著的肿瘤细胞抑制作用,两种方法的细胞生长抑制率分别在50%和60%以上。

研究结果表明楮实子总生物碱为其抗肿瘤活性成分。

 3 结语
 楮实子在我国的分布非常广泛,资源比较丰富。

近年来,已有一些国内外学者对其进行了研究,但数量有限,并没有受到足够重视,目前尚未得到有效的开发利用,中医也很少在临床应用。

楮实子有潜在的临床应用价值,特别是作为补益药,具有滋肾、清肝、明目之功效。

近几年的药理与临床研究表明,该药具有抗老年痴呆或延缓老年痴呆的作用,其药用价值值得进一步深入研究和开发利用。

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 医药卫生栏目
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