人免疫球蛋白 G 糖基化的高灵敏度高重现性分析

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免疫球蛋白g4定量检测试剂盒技术要求

免疫球蛋白g4定量检测试剂盒技术要求

免疫球蛋白g4定量检测试剂盒技术要求以免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术要求为标题的文章免疫球蛋白G4(IgG4)是一种免疫球蛋白的亚型,它在人体中具有重要的免疫调节功能。

为了准确地检测和定量IgG4水平,科学家们开发了免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术。

本文将介绍这项技术的要求和特点。

免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术要求具备以下几个方面的要求:1. 高灵敏度:免疫球蛋白G4的浓度范围较广,因此检测方法需要具备高灵敏度,能够准确地检测出低浓度的IgG4。

这可以通过优化抗体的选择和检测方法的条件来实现。

2. 高特异性:免疫球蛋白G4与其他免疫球蛋白亚型具有高度的相似性,因此检测方法需要具备高特异性,能够准确地区分出IgG4与其他亚型的差异。

这可以通过选择具有高亲和力的特异性抗体来实现。

3. 准确性:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术需要具备高准确性,能够保证测量结果的可靠性和稳定性。

这可以通过校准曲线的建立和质控样品的使用来实现。

4. 简便快速:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术需要具备简便快速的特点,能够在较短的时间内完成样品的检测和定量。

这可以通过优化实验步骤和缩短反应时间来实现。

5. 自动化:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术可以与自动化仪器配合使用,实现检测过程的自动化和高通量。

这可以提高实验的效率和减少操作的人为误差。

除了以上的基本要求之外,免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术还需要具备以下特点:1. 多样性:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术应具备多样性,能够适应不同样品类型和检测需求。

例如,可以适用于血清、血浆、尿液等多种样品类型的检测。

2. 稳定性:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术应具备良好的稳定性,能够保证试剂盒的保存期限和使用期限,以及在不同环境条件下的稳定性。

3. 可重复性:免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术应具备良好的可重复性,能够保证不同实验室、不同操作者之间的测量结果的一致性。

免疫球蛋白G4定量检测试剂盒技术是一项重要的免疫学检测技术,具备高灵敏度、高特异性、准确性、简便快速、自动化等特点。

蛋白A高效亲和膜色谱法测定人血浆中免疫球蛋白G的含量

蛋白A高效亲和膜色谱法测定人血浆中免疫球蛋白G的含量

标样 次重复进样的相对标准偏差为 人血浆样品
次重复进样的相对标准偏差为 所测得的定量标定曲线的线性相关系数达到
不含己二胺间隔臂
的亲和介质的非特异性吸附极低 基本检测不出来∀快速实验中 一次分析可在 内完成∀实验表明 利用
所建立的方法对人血浆中的
进行定量测定可以得到较为满意的结果∀
关键词 高效亲和膜色谱法 蛋白 人免疫球蛋白



Ù
标准曲线的制作
按上述方法在不含间隔臂的膜亲和柱上进行标
准曲线的测定∀将所得的
标准样的峰面积 Σ
对进样量 进行线性拟合 所得的定量标定曲线
见图 它的线性方程为 Σ ≅

ρ

表 方法的重复性
Ταβλε Ρ ε ροδυχιβιλιτψ οφ τηε ετηοδ
样 品 进样量
峰面积 Λ≅
第 卷第 期 年月


蛋白 Α 高效亲和膜色谱法测定 人血浆中免疫球蛋白 Γ 的含量Ξ
周冬梅 邹汉法 杨 利 贾凌云 张玉奎
中国科学院大连化学物理研究所 国家色谱研究分析中心 大连
提 要 研究了蛋白 高效亲和膜色谱对水溶液及人血浆中人免疫球蛋白
的特异性吸附和定量测
定∀ 方法具有较高的精确度和较好的重复性
具有简便 快速 可靠等优点 分析一次只需
快速分析只需
而且血浆样品不需预处理
这是通常的免疫学方法所无法比拟的∀
膜色谱柱为

流动相为
Ù 磷酸缓冲液含
Ù

上样液 和 Ù 甘氨酸盐酸缓冲液

洗脱液 检测波长
灵敏度
∀ 上样
后 先用上样液冲洗
再改用洗脱液冲洗 ∀

免疫球蛋白igg检测原理_概述及解释说明

免疫球蛋白igg检测原理_概述及解释说明

免疫球蛋白igg检测原理概述及解释说明1. 引言1.1 概述免疫球蛋白IgG检测是一种用于评估机体免疫功能的重要方法。

IgG是一种重要的抗体类型,它在免疫应答中发挥着关键的作用。

通过对IgG的检测,我们可以了解机体是否对特定病原体或抗原产生了免疫应答,并从中获取关于免疫系统状态和健康状况的有价值信息。

本文将详细介绍免疫球蛋白IgG检测的原理,包括其概述、检测方法、应用范围以及技术发展和应用前景展望。

同时,我们还将探讨免疫反应原理、抗体结构与功能关系以及IgG在免疫应答中的特点和作用。

1.2 文章结构本文共分为五个部分,各部分内容如下:第二部分将介绍IgG检测的基本概念和背景知识。

我们将探讨IgG的概述,包括其定义、结构和生物学功能;同时,还将介绍常见的IgG检测方法以及其在临床诊断、药物治疗监测和疫苗评估中的应用范围。

第三部分将深入解释IgG检测的原理。

我们将探讨免疫反应的基本原理,包括抗原与抗体之间的特异性识别和结合作用;同时,还将详细介绍抗体结构与功能关系,以及IgG在免疫应答中的特点和作用机制。

第四部分将重点关注IgG检测技术的发展和应用前景。

我们将回顾已有的技术进展和创新,包括高通量检测平台、自动化处理系统等;同时,还将对未来的应用前景进行展望,并讨论相关挑战以及对社会和医学领域所带来的影响和意义。

最后,在第五部分中,我们将对全文内容进行简要总结,并对免疫球蛋白IgG 检测原理进行评价和展望。

通过本文的阐述,我们希望读者能够更加全面地了解免疫球蛋白IgG检测原理及其在临床实践中的重要意义。

1.3 目的本文旨在提供关于免疫球蛋白IgG检测原理的详细解说和解释,以增进读者对该检测方法的认识和理解。

通过对IgG检测的原理和应用进行全面阐述,我们希望能够引起人们对免疫系统功能评估的关注,并为相关领域的科学研究、医学诊断及药物开发提供参考和启示。

通过深入了解IgG检测技术的发展趋势和前景,我们也可以看到未来在这一领域中可能出现的新机遇和挑战。

阿利西尤单抗注射液-详细说明书与重点

阿利西尤单抗注射液-详细说明书与重点

阿利西尤单抗注射液英文名:Alirocumab solution for injection【成份】本品活性成份为阿利西尤单抗。

阿利西尤单抗是一种全人源单克隆抗体(IgG1 同种型),作用靶点为前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)。

阿利西尤单抗是采用中国仓鼠卵巢细胞悬浮培养和重组DNA 技术生产的。

阿利西尤单抗有两个二硫键连接的人重链,这两个重链分别通过二硫键与人κ轻链共价连接。

单个N-糖基化位点位于重链Fc 恒定区的CH2 结构域内。

重链和轻链的可变区结合,形成抗体内的PCSK9 结合位点。

阿利西尤单抗的分子量约为146 kDa。

橙色= 链内和间二硫键部位;绿色=重链;蓝色=轻链;Cyan= Fc结构域糖基化位点;CH = 重链的恒定区;CL = 轻链的恒定区;VH = 重链的可变区;VL = 轻辅料:注射液含组氨酸、蔗糖、聚山梨酯20 和注射用水。

【性状】单剂量预充式注射笔,皮下注射液。

澄清,无色至淡黄色溶液,pH 值为6.0左右。

【适应症】心血管事件预防:在确诊为动脉粥样硬化性心血管疾病的成人患者中,降低心肌梗死、卒中、需要住院的不稳定性心绞痛的风险。

通过:-与最大耐受剂量的他汀类药物联合用药,伴随或不伴随其他降脂疗法,或者-在他汀类药物不耐受或禁忌使用的患者中,单独用药或与其他降脂疗法联合用药。

原发性高胆固醇血症(包括杂合子型家族性和非家族性)和混合型血脂异常。

可作为饮食的辅助疗法,用于成人原发性高胆固醇血症(杂合子型家族性和非家族性)或混合型血脂异常患者的治疗,以降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平:-在接受最大耐受剂量的他汀类药物治疗仍无法达到LDL-C 目标的患者中,与他汀类药物、或者与他汀类药物及其他降脂疗法联合用药,或者-在他汀类药物不耐受或禁忌使用的患者中,单独用药或与其他降脂疗法联合用药。

【规格】单剂量预充式注射笔,每支为1 ml 溶液,含75 mg 或150mg 阿利西尤单抗。

免疫球蛋白的检测方法

免疫球蛋白的检测方法

免疫球蛋白的检测方法免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称Ig)是一类在机体免疫应答中起关键作用的蛋白质,它能够识别和结合抗原,参与免疫反应的调节和执行。

因此,对免疫球蛋白的检测具有重要的临床意义。

本文将介绍免疫球蛋白的检测方法,以及各种方法的优缺点和适用范围。

一、免疫球蛋白的定量检测方法。

1. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)。

ELISA法是一种常用的免疫球蛋白定量检测方法,其原理是利用酶标记抗体与待测血清中的免疫球蛋白结合,再通过底物的反应产生显色反应来定量测定免疫球蛋白的含量。

ELISA法操作简便,灵敏度高,且能够同时检测多个样本,因此被广泛应用于临床诊断和科研领域。

2. 免疫荧光法。

免疫荧光法是利用荧光标记的抗体与待测血清中的免疫球蛋白结合,再通过荧光显微镜观察荧光信号来定量测定免疫球蛋白的含量。

该方法操作简单,对样本的要求较低,且具有较高的特异性和灵敏度,适用于多种免疫球蛋白的检测。

二、免疫球蛋白的定性检测方法。

1. 免疫固定电泳法。

免疫固定电泳法是一种通过电泳分离待测血清中的免疫球蛋白亚型的方法。

该方法操作简便,能够快速、准确地对免疫球蛋白的亚型进行鉴定,对于某些免疫球蛋白病的诊断具有重要意义。

2. 免疫印迹法(Western Blot)。

免疫印迹法是一种通过将待测血清中的免疫球蛋白分离并转移至膜上,再通过特异性抗体的结合来检测免疫球蛋白的方法。

该方法具有高度的特异性和灵敏度,能够对免疫球蛋白进行准确的定性鉴定。

三、各种方法的优缺点和适用范围。

1. ELISA法的优点是操作简便,灵敏度高,适用于大规模样本的检测,但其缺点是对待测物质的亲和性要求较高。

2. 免疫荧光法的优点是具有较高的特异性和灵敏度,适用于多种免疫球蛋白的检测,但其缺点是需要荧光显微镜等专门设备。

3. 免疫固定电泳法的优点是操作简便,能够快速、准确地对免疫球蛋白的亚型进行鉴定,但其缺点是不能进行定量测定。

4. 免疫印迹法的优点是具有高度的特异性和灵敏度,能够对免疫球蛋白进行准确的定性鉴定,但其缺点是操作较为繁琐,且耗时较长。

免疫球蛋白G测定试剂盒技术要求

免疫球蛋白G测定试剂盒技术要求

免疫球蛋白G测定试剂盒技术要求免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)测定试剂盒是一种用于检测患者体内IgG水平的重要试剂盒。

它可以应用在临床诊断、疾病监测、药物疗效评估等领域,对于促进疾病的早期发现和有效治疗具有重要意义。

以下是对免疫球蛋白G测定试剂盒技术要求的介绍。

首先,免疫球蛋白G测定试剂盒应具备高灵敏度。

高灵敏度是保证试剂盒能够准确、及时地检测出低浓度IgG的关键要求。

试剂盒应当能够准确地检测出低至几微克/毫升的IgG浓度,从而提高患者的诊断准确率和疾病监测的灵敏度。

其次,免疫球蛋白G测定试剂盒需要具备高特异性。

高特异性能够保证试剂盒在检测IgG时不受其他蛋白质的干扰,从而减少假阳性或假阴性的发生。

试剂盒需要选择能够与IgG特异结合的抗体,或采用多种抗体检测,以提高特异性。

第三,免疫球蛋白G测定试剂盒需要具备良好的重复性和稳定性。

重复性是指在同一样本中,试剂盒的测定结果应该相近或一致。

稳定性是指试剂盒在储存和使用过程中不发生明显变化。

试剂盒需要在较长的储存期内保持较好的重复性和稳定性,从而保证测定结果的准确性和可靠性。

此外,免疫球蛋白G测定试剂盒应具备较宽的测量范围。

即使在不同的浓度范围内,试剂盒仍然能够准确地测量出IgG的浓度。

这有助于满足不同临床需求和样本类型的测量要求。

另外,免疫球蛋白G测定试剂盒应具备良好的耐受性和安全性。

试剂盒应当抵抗样本中可能存在的干扰物,如蛋白质结合、颜色干扰等,并且不对样本造成伤害。

同时,试剂盒中使用的各种试剂和材料也应符合安全性要求,确保操作人员和患者的安全。

最后,免疫球蛋白G测定试剂盒需要具备方便快捷的操作性和高通量性。

试剂盒应当提供简单、易操作的指南,使得临床医生或实验人员能够快速完成测定。

同时,试剂盒也应当具备较高的通量性,能够同时处理多个样本,提高检测效率。

综上所述,免疫球蛋白G测定试剂盒技术要求涵盖了高灵敏度、高特异性、良好的重复性和稳定性、较宽的测量范围、良好的耐受性和安全性、便捷快捷的操作性以及高通量性等方面。

免疫球蛋白IgM,IgG,IgA,IgD和IgE参考值及临床意义

免疫球蛋白IgM,IgG,IgA,IgD和IgE参考值及临床意义

免疫球蛋白IgM,IgG,IgA,IgD和IgE参考值及临床意义人体的免疫系统,主要由T细胞和B细胞这两种淋巴细胞产生防御作用。

T细胞的作用是直接破坏或抑制;B细胞的作用是产生抗体。

抗体是人体抵抗病原体感染的重要免疫应答效应产物。

在接种疫苗或者自然感染后,人体B细胞接受抗原刺激,增殖分化生成浆细胞,浆细胞产生抗体。

抗体主要存在于血液等体液中,能与相应抗原特异性结合,起到防御作用。

当身体处于正常状态时,如果被细菌或病毒侵入,通过抗体的作用,这些病菌一般可以被及时消除。

抗体的本质是蛋白质,确切地说,它是一种具有免疫功能的球蛋白,存在于血清、体液、外分泌液和一些细胞膜上,也叫做免疫球蛋白。

人体至少有5种免疫球蛋白,各自具有不同的免疫学功能,包括IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。

其中,IgG是最常见的抗体,是人体血清免疫球蛋白的主要成分,占总量的70%~75%。

这些免疫球蛋白由B细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒,广泛存在于人体血液中及B细胞的细胞膜表面。

免疫球蛋白的五大种类:免疫球蛋白对于抵抗外来入侵的病原体或者异物等外来性的抗原,有非常重要的作用。

血清免疫球蛋白的正常参考值:IgM 0.5-2.6g/L;IgG7.0-16.6g/L;IgA 0.7-3.5g/L;IgD 0.01-0.04g/L;IgE0.001-0.009g/L。

IgMIgM为五聚体,是分子量最大的Ig,又称巨球蛋白,半衰期5-10天。

IgM不能通过血管壁,主要存在于血液和粘膜表面。

是接种疫苗或感染病原体后最先产生的高效抗体,是免疫反应中的先锋部队,对发现早期感染意义非常大。

在个体发育过程和体液免疫应答中IgM均是最早合成和分泌的抗体蛋白,天然抗A与抗B血型凝集素、类风湿因子、冷凝集素等均属于IgM抗体。

IgM增高:见于病毒、细菌、寄生虫感染等早期,类风湿性关节炎、硬皮病、巨球蛋白血症等;IgM降低:见于先天性和获得性免疫缺陷病、蛋白丢失性疾病如肾病综合征、蛋白丢失性肠病、皮肤大面积烧伤等。

免疫球蛋白的检测与临床应用

免疫球蛋白的检测与临床应用
免疫球蛋白的检测与临床应用
免疫球蛋白(Ig)是由浆细胞合成和分泌的一组具 有抗体活性的蛋白质。由两条重链和两条轻链通过 二硫键连接而构成。
重链分为IgG,IgA,IgM,IgD,IgE. 轻链分为κ(kappa),λ(Lambda)两个类别
血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量测定方法一般有 单向环状免疫扩散法,火箭免疫电泳法,ELISA,免 疫比浊法,放射免疫分析法等,但临床常用单向环 状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白 含量。
本周氏蛋白 血清蛋白电泳 免疫固定电泳 免疫比浊法检测游离轻链
高敏感性:可达到5-10mg/L
高特于性
高检测速率 定量检测:可同时检测κ型和λ型轻链的水平以及两者
的比值,有利于鉴别诊断和监测病情的变化
Κ型游离轻链或λ型游离轻链中某一个指标浓度异常 增高和比值异常,常提示有单克隆类疾病,如多发 性骨髓瘤,巨球蛋白血症,原发性淀粉样变性,轻 链沉积病等。
(二)临床意义
1.I型变态反应性疾病,如特发性哮喘、特发性皮炎、过敏 性鼻炎等IgE常升高。
2.非变态反应性疾病,如IgE骨髓瘤、寄生虫感染等IgE升 高。
3.急性或慢性肝炎、SLE、类风湿关节炎等疾病IgE可升高。 4. IgE降低见于原发性无丙种球蛋白血症、肿瘤及化疗药
物应用后。
与重链结合成免链称为游离轻链。
IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体,是机 体抗感染的先头部队,血清中检出IgM,提示新近 发生感染,可用于感染的早期诊断。
分泌型IgM为五聚体,是分子量最大的Ig,沉降系 数为19S,称为巨球蛋白,一般不能通过血管壁, 主要存在于血液中。
16岁以上成年人IgG临床参考范围为: 0.4~3.45g/L

2024年人免疫球蛋白市场调查报告

2024年人免疫球蛋白市场调查报告

2024年人免疫球蛋白市场调查报告1. 简介人免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称Ig)是一种由人体免疫系统产生的多克隆抗体蛋白,能够帮助人体抵御各种病原体的侵袭。

在医学领域,人免疫球蛋白被广泛应用于临床治疗和预防疾病。

2. 市场规模分析根据市场调查数据显示,人免疫球蛋白市场正快速增长。

该市场于2020年达到了X亿美元规模,并预计在未来几年内将以X%的复合年增长率持续增长。

3. 市场驱动因素3.1 人口老龄化随着人口老龄化现象的加剧,老年人免疫系统的功能减弱,导致易受感染和疾病的威胁。

人免疫球蛋白作为一种重要的免疫辅助治疗手段,受到了老年人群体的广泛需求,推动了市场的增长。

3.2 不断增长的疾病负担慢性疾病和自身免疫性疾病的高发率也是推动人免疫球蛋白市场增长的重要因素。

随着疾病负担的增加,需求量不断上升,导致市场规模的扩大。

3.3 技术进步和创新随着生物技术和制药技术的不断进步,人免疫球蛋白的制备和纯化工艺得到了改进和优化。

新的技术创新使得人免疫球蛋白的生产更高效和成本更低,增加了市场的竞争力。

4. 市场挑战和机遇4.1 市场竞争激烈人免疫球蛋白市场竞争激烈,已经存在多家大型制药公司和生物技术公司。

各家企业通过不断创新和扩大生产规模来争夺市场份额。

4.2 条件限制和法规监管人免疫球蛋白的生产和销售受到一系列条件限制和法规监管。

符合规范要求的生产企业更容易获得市场竞争优势,但也需要承担相应的成本。

4.3 新兴市场机遇在发展中国家,人免疫球蛋白市场仍然具有一定的增长空间。

这些国家面临严重的疾病负担和老龄化问题,对高质量的人免疫球蛋白的需求不断增加。

5. 市场前景展望人免疫球蛋白市场前景非常广阔。

随着医疗技术的进步和人口老龄化现象的加剧,市场需求将持续增长。

同时,新兴市场的开拓也为市场提供了新的机遇。

然而,市场竞争激烈和法规监管的限制也需要引起关注。

企业需要不断创新和提高产品质量,以在市场中保持竞争力。

免疫球蛋白G糖基化修饰的质谱分析方法及其应用

免疫球蛋白G糖基化修饰的质谱分析方法及其应用

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免 疫 球 蛋 白 #N[$是 一 类 与 抗 原 特 异 性 结 合!具有免疫 功 能 的 糖 蛋 白" 依 据 重 链 氨 基 酸 序列的不同可 分 为N[?'N[G'N[0'N[.'N[: 五 类!其中!N[? 是人体血液中含量 最高的 免疫 球 蛋白!约 占 免 疫 球 蛋 白 总 量 的 93r !;"r " (2) 当 人 体 受 到 非 己 成 分 入 侵 或 自 身 细 胞 衰 老'损 伤'病变时!N[? 不 仅 可 以 识 别 异 常 细 胞!还 可 以通过抗体依 赖 细 胞 介 导 的 细 胞 毒 作 用 #6*B%< W8X(<XH7H*XH*B MHLL<VHX%6BHX M(B8B8]%M%B(! 0.''$'补体依 赖 的 细 胞 毒 作 用 #M8V7LHVH*B< XH7H*XH*BM(B8B8]%M%B(!'.'$以 及 抗 体 依 赖 细 胞介 导 的 吞 噬 作 用 #6*B%W8X(<XH7H*XH*BMHLL< VHX%6BHX7I6[8M(B8&%&!0.'A$等 效 应 功 能 发 挥免疫效应" 在 过 去 的 几 十 年 间!国 内 外 学 者 利用N[? 的分子结构 特 征!监 测 机 体 内N[? 在 疾 病 发 生 发 展 过 程 中 的 变 化 规 律!探 索 其 作 为 自身免疫性疾病和癌症等疾病的生物标志物的 潜力!并 设 计 了 基 于 靶 向 N[? 的 治 疗 药 物!为 疾病的诊疗提供了新途径 " (2)
摘要N[? 是一种参与体液免疫的关键 糖 蛋 白!其 通 过 识 别 特 定 抗 原 发 挥 清 除 毒 素'激 活 相 应 受 体 和 补 体'调节机体免疫等功能"N[? 糖基化修饰主要为 .<糖基化修饰!其 恒 定 区 的 0&*+>9 上 含 有 2 个 保 守 的 .<糖基 化 修 饰 位 点!N[? 糖 基 化 修 饰 状 态 与 其 理 化 性 质 和 生 物 学 功 能 密 切 相 关"深 入 研 究 糖 基 化 修 饰对认知免疫分子机制!以及在疾病早期诊断'预后评价和抗体药物研发方面具有重 要 意 义" 本 文 主 要 在 糖 链 '糖 肽 和 完 整 蛋 白 方 面 综 述N[? -M.<糖 基 化 修 饰 的 质 谱 分 析 方 法 及 其 应 用 " 关键词质谱分析,免疫球蛋白 ?,糖基化修饰 中图分类号E539Q5! 文献标志码0文章编号2""#<+>>9#+"+2$"3<";9;<2> 16-2"Q93!;*C7]WQ+"+2Q"22>

免疫球蛋白糖基化模式分析[发明专利]

免疫球蛋白糖基化模式分析[发明专利]

专利名称:免疫球蛋白糖基化模式分析
专利类型:发明专利
发明人:H·科尔,J·T·雷古拉,P·松德尔曼,A·策克申请号:CN201080007076.7
申请日:20100205
公开号:CN102308216A
公开日:
20120104
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及确定IgG1或IgG4亚类的人免疫球蛋白、或IgG2a或IgG3亚类的鼠免疫球蛋白的糖基化模式的方法,其包括以下步骤:a)通过用酶IdeS酶消化将所述免疫球蛋白切割为片段;b)通过反相高效液相色谱法分离通过酶消化获得的所述免疫球蛋白的片段;c)对步骤b)中获得的分离的所述免疫球蛋白片段进行质谱分析;以及d)从步骤c)中获得的质谱数据确定所述免疫球蛋白的糖基化模式。

申请人:罗切格利卡特公司
地址:瑞士施利伦
国籍:CH
代理机构:北京市中咨律师事务所
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免疫球蛋白增高鉴别诊断

免疫球蛋白增高鉴别诊断
次要标准☆
骨髓中浆细胞增多(10%~30%) M成分存在但水平低于上述水平 有溶骨性病变 正 常 免 疫 球 蛋 白 减 少 50% 以
上:IgG<6000mg/L,IgA<1000mg/L,IgM<500mg/L
2021/3/30 诊断: ★+ ☆; ☆+ ☆+ ☆
26
小结
球蛋白 增高
单克隆
浆细胞病:
合成或分泌免疫球蛋白 的B淋巴细胞或浆细胞的 克隆增生性疾病。
2021/3/30
20
单克隆免疫球蛋白升高
浆细胞病
1. 多发性骨髓瘤 2. Waldenstrom巨球蛋白血症 3. 重链病 4. 原发性淀粉样变性 5. 意义未明的单克隆免疫球蛋白增高综合症
B细胞淋巴瘤
2021/3/30
21
2021/3/30
14
正常电泳图
+
2021/3/30
-
15
蛋白电泳 M峰
+
2021/3/30
-
16
2021/3/30
17
2021/3/30
18
2021/3/30
19
免疫球蛋白升高
多克隆性(反应性)
肝炎和肝硬化 慢性感染 自身免疫性疾病 实体肿瘤:淋巴系统肿 其它:castleman病
单克隆性(肿瘤性)
2021/3/30
22
2021/3/30
23
2021/3/30
24
2021/3/30
25
多发性骨髓瘤WHO诊断标准
主要标准★
骨髓中浆细胞增多(>30%)
组织活检证实有浆细胞瘤
M 成 分 : 血 清 IgG>35g/L 或 IgA>20g/L 或 尿 本 - 周 蛋 白 >1g/24h

免疫球蛋白分析报告

免疫球蛋白分析报告

免疫球蛋白分析报告尊敬的客户:您好!感谢您选择我们的免疫球蛋白分析服务。

为了更好地了解您的体内免疫球蛋白水平,我们针对样本进行了详细的分析及测定。

以下是您的免疫球蛋白分析报告。

一、简介免疫球蛋白是一类重要的免疫系统蛋白,在人体的免疫防御中扮演着重要的角色。

通过检测不同类型的免疫球蛋白含量,我们可以了解您的免疫功能状态,为您的身体健康提供科学的参考。

二、分析结果根据您提供的样本,我们针对免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)进行了测定。

以下是各项指标的具体分析结果:1. 免疫球蛋白A(IgA)样本中免疫球蛋白A的浓度为X g/L。

免疫球蛋白A主要存在于黏膜组织及分泌物中,对保护呼吸道、消化道等黏膜组织起着重要作用。

根据您的测试结果,您体内免疫球蛋白A的水平处于正常范围。

2. 免疫球蛋白G(IgG)样本中免疫球蛋白G的浓度为Y g/L。

免疫球蛋白G是最常见的免疫球蛋白,也是免疫应答中最重要的类型之一。

它在体内起着抗体介导的免疫防御作用。

根据您的测试结果,您体内免疫球蛋白G的水平也处于正常范围。

3. 免疫球蛋白M(IgM)样本中免疫球蛋白M的浓度为Z g/L。

免疫球蛋白M是体内第一次应答病原体感染时生成的免疫球蛋白,具有早期保护作用。

根据您的测试结果,您体内免疫球蛋白M的水平也处于正常范围。

综上所述,根据我们的分析结果,您的免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M的水平均处于正常范围,说明您的免疫系统功能较为健康。

三、建议和注意事项尽管您的免疫球蛋白水平正常,但我们建议您保持良好的生活习惯和饮食习惯,增强免疫力。

请注意以下几点:1. 均衡饮食:合理摄入蛋白质、维生素和矿物质,保持饮食的多样性,以提供充足的养分支持免疫系统的正常功能。

2. 睡眠充足:保持良好的睡眠习惯,充分休息以提高免疫力。

3. 科学运动:适度参与体育锻炼,增强体质,提高免疫力。

4. 预防感染:注意个人卫生,勤洗手,避免接触病原体,保持室内空气清新流通。

人免疫球蛋白 G 糖基化的高灵敏度高重现性分析

人免疫球蛋白 G 糖基化的高灵敏度高重现性分析

人免疫球蛋白 G 糖基化的高灵敏度高重现性分析配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统应用简报生物制药摘要在本应用简报中,我们使用配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统展示了对人免疫球蛋白 G 的 N-连接多糖灵敏而可重现的 HPLC 分析。

利用 N-连接人 IgG 多糖文库,我们测定了分析方法的保留时间和峰面积的精密度。

此外,通过对 5 种多糖标准品(Man5、G2、G2S1、G2FS1 和 G2S2)的混合物分析得知,该方法的检测限和定量限很低,在 0.008 至 1 pmol 的浓度范围内线性良好。

因此,要实现对人免疫球蛋白 G 的 N-糖基 2-AB 衍生物的高灵敏度高重现性分析,配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统是最佳选择。

作者Sonja Schneider Agilent Technologies, Inc. Waldbronn, Germanymin510152025303540LU 012345(1,6)G 1F G 0FG 0b F(1,3)G 1F , (1,6)G 1b F (1,3)G 1b FG 2FG 2F S 1前言作为一大类新型药物,抗体代表了重组产生的治疗性蛋白中最大的一类。

这些治疗剂的疗效与其糖基化模式正确与否高度相关,迄今为止,所有获得许可的治疗性单克隆抗体 (mAb) 均是免疫球蛋白 G (IgG)1。

因此,糖基化模式分析是质量保证/质量控制 (QA/QC) 过程的一个重要部分。

此外,患者血浆中 IgG 的糖基化模式可以反映其健康状态2。

人 IgG 含有一个保守的 N-连接糖基化位点,它位于每条重链 Fc 区的 Asn-297 位3。

这使得每个 IgG 分子含有高度异质性的两个糖基,并会产生至少 30 种糖型的混合物1。

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T2.5μg/ml -80μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。

用纯化的抗-IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G(IgG),再与HRP 标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G(IgG)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G(IgG)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

质谱中igg

质谱中igg

质谱中igg
质谱中的IgG指的是免疫球蛋白G(Immunoglobulin G),它是人体免疫系统产生的一种抗体。

质谱(Mass Spectrometry)是一种用于分析化学物质的技术,可以通过测量样品中分子的质量和相对丰度来确定其组成。

在质谱中,使用质谱仪将样品中的化合物分离并离子化,然后将离子引入质谱仪的质量分析器中进行质量分析。

其中一种常见的质谱技术是质谱-质量分析(MS-MS),它可以对复杂混合物进行分子结构鉴定和定量分析。

质谱-质量分析通常用于研究蛋白质、肽段等生物分子。

当涉及到质谱中的IgG时,可能是指对IgG进行质谱分析以了解其质量、结构或相关性质。

这种分析可以提供关于IgG的分子量、修饰位点、连接方式等信息,有助于理解免疫反应的机制以及研究相关疾病的发病机理。

总之,质谱中的IgG是指对免疫球蛋白G进行质谱分析以获取相关信息的研究方法。

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人免疫球蛋白 G 糖基化的高灵敏度高重现性分析配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统应用简报生物制药摘要在本应用简报中,我们使用配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统展示了对人免疫球蛋白 G 的 N-连接多糖灵敏而可重现的 HPLC 分析。

利用 N-连接人 IgG 多糖文库,我们测定了分析方法的保留时间和峰面积的精密度。

此外,通过对 5 种多糖标准品(Man5、G2、G2S1、G2FS1 和 G2S2)的混合物分析得知,该方法的检测限和定量限很低,在 0.008 至 1 pmol 的浓度范围内线性良好。

因此,要实现对人免疫球蛋白 G 的 N-糖基 2-AB 衍生物的高灵敏度高重现性分析,配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统是最佳选择。

作者Sonja Schneider Agilent Technologies, Inc. Waldbronn, Germanymin510152025303540LU 012345(1,6)G 1F G 0FG 0b F(1,3)G 1F , (1,6)G 1b F (1,3)G 1b FG 2FG 2F S 1前言作为一大类新型药物,抗体代表了重组产生的治疗性蛋白中最大的一类。

这些治疗剂的疗效与其糖基化模式正确与否高度相关,迄今为止,所有获得许可的治疗性单克隆抗体 (mAb) 均是免疫球蛋白 G (IgG)1。

因此,糖基化模式分析是质量保证/质量控制 (QA/QC) 过程的一个重要部分。

此外,患者血浆中 IgG 的糖基化模式可以反映其健康状态2。

人 IgG 含有一个保守的 N-连接糖基化位点,它位于每条重链 Fc 区的 Asn-297 位3。

这使得每个 IgG 分子含有高度异质性的两个糖基,并会产生至少 30 种糖型的混合物1。

血浆中的人 IgG N-连接多糖主要为二天线复合型结构,大多数包括核心岩藻糖并具有 0-2 个半乳糖残基和 1-2 个唾液酸。

此外,人 IgG 还携带有少量的二等分 N-乙酰葡糖胺 (GlcNAc) 残基。

一般而言,缺失非岩藻糖化或二等分 GlcNAc 多糖结构,基本不会降低重组单克隆抗体(mAbs) 的模式复杂性4。

同时,还发现了其他更多未成熟结构,例如像 mannose-5 一样的高甘露糖型结构,虽然它们的量大都较低5。

蛋白糖基化模式的分析极具挑战性,特别是因为复杂生物样品中多糖分析物的丰度常常很低。

利用亲水相互作用色谱(HILIC)-HPLC 结合荧光检测器分离 AB 标记的多糖结构是一种稳定、灵敏的多糖分析方法6。

在本应用简报中,我们使用了这种方法并检验了其精密度、线性和灵敏度。

图 1 显示了本应用简报中所用的多糖结构、亚型及命名,它们也曾用于之前的出版物中7。

根据所连的末端半乳糖残基数量,将与 IgG 连接的多糖划分成不同的亚型,如图 1b 所示。

G0、G1 和 G2 分别含有 0、1 和 2 个末端半乳糖残基。

图 1多糖结构和亚型。

a) 多糖的通用命名,b) IgG 中的主要多糖结构。

G 表示半乳糖单元,F 表示岩藻糖单元。

基于文献 Arnold et al.1进行修改所有的多糖标准品均溶于 50 µL 100 mM 的甲酸铵溶液,pH 值为 4.5。

所有的溶剂均为 LC 级。

超纯水由配有 0.22 µm 使用点折叠膜滤芯 (Millipak) 的 Milli-Q Integral 系统现制。

甲酸铵购自西格玛奥德里奇公司(美国圣路易斯)。

AB 标记的多糖标准品购自 Prozyme 公司 (美国海沃德)。

实验部分实验中所用的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统包括以下模块:• Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元泵 (G5611A)• Agilent 1260 Infinity 高性能生物惰性自动进样器 (G5667A)• Agilent 1290 Infinity 自动进样器控温器 (G1330B)• Agilent 1290 Infinity 柱温箱 (G1316C)• Agilent 1260 Infinity 二极管阵列检测器 VL (G1315D),配有生物惰性标准流通池,10 mm • Agilent 1260 Infinity 荧光检测器 (G1312B),配有生物惰性 FLD 流通池色谱柱TOSOH TSK-GEL Amide-80 色谱柱,2 × 150 mm ,3 µm 软件Agilent OpenLAB CDS ,用于 LC 及 LC/MS 系统的 ChemStation 版本,Rev. C.01.02 [14]溶剂及样品缓冲液 A : 100 mM 甲酸铵溶液,pH 4.5缓冲液 B :乙腈多糖标准品• GL YKO 2-AB-(人 IgG N-连接多糖文库), 200 pmol• GLYKO 2-AB-(MAN-5) & Man5,100 pmol • GLYKO 2-AB-(NA2) & G2,100 pmol • GLYKO 2-AB(A1) & G2S1,100 pmol • GLYKO 2-AB-(A1F) & G2FS1,100 pmol • GLYKO 2-AB-(A2) & G2S2,100 pmol色谱条件梯度分钟% B 流速 [mL/min]0 85 0.655 75 1072 3067406440.010.65425042.010.44510050100558555.010.4600.65停止时间:60.01后运行时间:20 分钟进样体积: 2.5 µL 柱温:50 °CFLD:激发波长 260 nm发射波长 430 nm峰宽:峰宽:> 0.05 分钟 (9.26 Hz)PMT:PMT 增益:14结果与讨论AB 标记的人 IgG 标准品 N-多糖的可重现分析图 2 为 AB 标记的人 IgG N-连接多糖文库的色谱分离图。

存在于人 IgG 中的所有主要的多糖结构均得到了很好的分离。

对于峰标记,采用多种文献中的命名法 3, 8, 9。

所有主要的多糖均核心岩藻糖化,具有 0、 1 或 2个半乳糖基化结构,具体见表 1。

除了单唾液酸化的 G2FS1(最后一个峰)之外,所有指定的多糖均为中性结构。

min510152025303540LU 012345(1,6)G 1FG 0FG 0b F(1,3)G 1F , (1,6)G 1b F(1,3)G 1b FG 2FG 2F S 1图 2AB 标记的人 IgG N-连接多糖文库的色谱分离图。

基于文献 Omtvedt et al . 2006 进行命名G0FGlcNAc 2Man 3GlcNAc 2FucG0bFGlcNAc 3Man 3GlcNAc 2Fuc(1,6)G1FGalGlcNAc 2Man3GlcNAc 2Fuc(1,6)G1bFGalGlcNAc 3Man 3GlcNAc2Fuc(1,3)G1bFGalGlcNAc 3Man 3GlcNAc 2FucG2FGal 2GlcNAc 2Man3GlcNAc 2Fuc表 1人 IgG 多糖文库中指定的 N-糖基的名称、单糖组成和结构使用人 IgG N-连接多糖文库,我们测定了 5 次连续进样的保留时间和峰面积的精密度。

所有多糖结构的保留时间精密度均低于 0.16%,峰面积精密度在 0.66% 到4.11% 之间,具体见表 2。

所有测得的保留时间和峰面积的 RSD 值均在通常报道的范围内10。

线性将 5 种多糖标准品(Man5、G2、G2S1、G2FS1 及 G2S2)的混合物按 1:3 比例连续稀释,得到 0.008 至 1 pmol 的浓度范围,然后计算线性。

图 3 为 5 种 N-多糖混合物的色谱分离图,其中柱上样量为1 pmol。

G0F0.1350.74G0bF0.146 4.11G1F0.1420.66G1bF0.153 1.03G20.149 1.92G2F0.155 2.44G2FS10.151 1.82表 2人 IgG N-连接多糖文库 5 次连续进样的保留时间及峰面积精密度图 35 种 AB 标记的 N-连接多糖标准品的混合物G2FS1G2S2G2S1G2Man5min 010******** LU0.511.522.5信噪比 (S/N) 为 3 时,检测限 (LOD) 在 10 到 15 fmol 之间。

信噪比 (S/N) 为 10 时,定量限 (LOQ) 在 34 到 51 fmol 之间。

所有校正曲线均具有良好的线性,相关系数均大于 0.999,具体见表 3。

FLD 检测器的光电倍增管 (PMT) 增益设为 14 以最大程度提高灵敏度。

此外,使用 Agilent 1260 Infinity 荧光检测器分析多达 4 种不同的激发和发射波长时,需要对方法进行优化,最终设置激发波长为260 nm,发射波长为 430 nm。

这种组合波长相比多糖分析中常用的波长(例如Anumula 200511中所推荐的)所得的峰强度要高得多。

结论本应用简报证实了对于AB 标记的人 IgG N-连接多糖,配有荧光检测器的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统是实现其高灵敏度高重现性 HPLC 分析的理想系统。

人 IgG N-连接多糖文库的分析表明,所有主要的多糖结构均得到了良好的分离。

保留时间精密度低于 0.16%,峰面积精密度在 0.66% 和 4.11% 之间。

所有测得的保留时间和峰面积的 RSD 值均在通常报道的范围内10。

根据 Campbell 等人12 提出的结构指认软件可知,保留时间的高精密度对于正确指认多糖结构具有极其重要的意义。

表 35 种 AB-标记的 N-连接多糖标准品的线性、LOD 及LOQMan510340.9994 G2 (NA2)11370.9997 G2S1 (A1)13450.9998 G2FS1 (A1F)14470.9997 G2S2 (A2)15510.9993将 5 种多糖标准品(Man5、G2、G2S1、G2FS1 及 G2S2)的混合物按 1:3 的比例连续稀释,得到 0.008 至 1 pmol 的浓度范围,然后计算线性。

所有校正曲线均具有良好的线性,相关系数均大于 0.999。

检测限 (LOD) 在 10 到 15 fmol 之间,定量限 (LOQ) 在 34 到 51 fmol 之间。

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