长期施药果园中的苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性
防治苹果树斑点落叶病的高效杀菌剂戊唑醇
樊宝红， 华北制药集团爱诺有限 公 司 ， 邮 编 ０５２１６５ （ 河北省石家庄经济技术开发区） 。
旬， 重点喷施地面， 杀灭越冬幼虫， 第 ２ 次在 ６ 月中 下旬到 ７ 月上旬， 以果实为主， 杀灭第 １ 代卵及初 孵幼虫。５ 月下旬至 ６ 月上旬喷 ６５％代森锰锌 ５００ 倍 液 防 细 菌 性 穿 孔 病 。 每 隔 １０ 天 喷 １ 次 ， 共 ３～ ４２００８．１０
防治苹果树斑点落叶病的高效杀菌剂戊唑醇
樊宝红
戊唑醇是华北制药集团爱诺有限公司生产的 高 效 杀 菌 剂 ， 剂 型 为 １２．５％微 乳 剂 ， 主 要 成 分 为 戊 唑醇， 防病机理主要是抑制病原菌麦角甾醇的生 物合成。可广泛用于防治白粉属 、丙 锈 菌 属 、核 腔 菌属和壳针孢属菌引起的病害。农药登记证号为 ＬＳ２００１１２９１。农业部登记： 喷雾使用 ２ ０００～３ ０００ 倍 液 （ ４１．７～６２．５ ｍｇ／ｈｍ２） ， 可 有 效 防 治 苹 果 树 斑 点 落叶病。 １ 主要特点
戊唑醇属于新型三唑类杀菌剂， 内吸性强， 在 植物体内向顶和向上传导， 可广泛应用于种子处 理和茎叶喷雾。在树体高大的苹果树上， 用来防治 斑点落叶病和白粉病效果显著。其剂型为微乳剂， 喷后不会影响果实品质， 在推荐浓度下使用对蜜蜂 安全。 ２ 使用方法
在发病初期喷 ２ ０００～３ ０００ 倍液， 隔 ７ 天喷 １ 次。建议易发病果区春梢期连喷 ３ 次， 秋梢期连喷 ２ 次， 可有效控制全年病害发生。 ３ 应用效果
9种杀菌剂对苹果炭疽病菌的毒力比较
9种杀菌剂对苹果炭疽病菌的毒力比较摘要：采用菌丝生长速率法测定了9种杀菌剂对苹果炭疽病菌的抑制活性。
结果表明，苹果炭疽病菌对三唑类杀菌剂戊唑醇、己唑醇、氟硅唑、苯醚甲环唑、腈菌唑的敏感性依次下降，EC50值均在2.2μg/ml以下EC50值均低于21μg/ml；甲基硫菌灵对苹果炭疽病菌毒力EC50值为1.9008μg/ml，与腈菌唑毒力相当；而福美锌、醚菌酯和代森联抑制病菌生长的毒力显著低于三唑类杀菌剂。
关键词：杀菌剂；毒力；苹果炭疽病菌中图分类号：S482.2文献标识号：A文章编号：1001-4942(2012)01-0091-03苹果炭疽病又称苦腐病、晚腐病，由苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)引起，主要危害苹果果实，是引起果实斑点或腐烂的一种真菌病。
我国大部分苹果产区均有发生，在夏季高温、多雨、潮湿的地区发病尤为严重，在果实近成熟时开始发病，采收后在贮藏期继续发病，成为采前和采后贮运期的重要病害，且此病在苹果的整个生长期有多次再侵染和潜伏侵染现象，近年发病又有上升的势头，一般不易有效防治。
目前防治上多采用代森锰锌、百菌清、代森联等保护剂等，预防效果较好，但治疗效果差，施药周期短。
三唑类杀菌剂是一类广谱、高效、内吸性杀菌剂，对丝核菌属真菌具很高的生物活性，其作用机理为影响甾醇类生物合成，使菌体细胞膜功能受到破坏，其重要品种戊唑醇对小麦散黑穗病、小麦条锈病、大豆锈病、花生叶斑病、豇豆锈病、苹果轮纹病等病害都具有很好的防治效果。
为了评价不同药剂防治苹果炭疽病的可行性，笔者测定了9种杀菌剂对苹果炭疽病菌的毒力，以期为筛选防治苹果炭疽病的杀菌剂提供参考。
1.材料与方法1.1供试菌种苹果炭疽病菌(GlomereIla cingulata)由泰安郊区新鲜发病材料上分离得到。
1.2供试杀菌剂95％己唑醇原药(江苏常州市丰登农药厂提供)；96％戊唑醇原药(山东华阳农药科技股份有限公司提供)；93％氟硅唑原药(江苏建农农药化工有限公司提供)；95％醚菌酯原药(山东京博农化有限公司提供)；92％苯醚甲环唑原药(山东联合农药有限公司提供)；92％甲基硫菌灵原药(江西省海利贵溪化工农药有限公司)；90％福美锌原药(河北冠龙农化有限公司)；85％代森联原药(江苏省南通宝叶化工有限公司)；95％腈菌唑原药(浙江一帆农化有限公司)。
不同诱导因子对苹果轮纹病菌抗药性的影响
摘 要 为 了明确 苹果 轮 纹病 茵的 生长规 律和 抗 药性 。 有代表 性 的苹 果种植 区采 集并分 离 了 ２ 从 ６个苹 果轮 纹病 菌 茵株 ． 用 不 同因子 利 进行 诱 导处理 ， 然后 采 用茵 丝生 长速 率 法测 定其 对戊 唑醇 的抗 药性 。 果表 明 ： Ｚ ２ Ｙ ＩＸ ３ Ｈ １ 、 Ｃ 结 Ｚ ４ 、 Ｔ 、 Ｘ 、 Ｘ １ Ｙ ６和 ５ ２菌株在 戊唑 醇 的长 期处 Ｓ 理下 Ｅ Ｃ∞值 有 明 显 变化 ； 紫外 线 照射 下 ，Ｓ 、 Ｚ 、 Ｓ 、 ５和 ＲＳ 在 Ｓ １Ｚ ２ Ｒ ２ ＹＣ １菌株 的 Ｅ ５值被 改 变 ； 电磁 波 处 理 下 ，Ｓ Ｌ ０、 Ｙ ０ ＹＣ Ｃ０ 在 Ｓ ２、 Ｙ１ Ｌ ２ 、 ５和 Ｐ ９茵株 的 Ｅ ∞值 有 变化 ； 水 杨酸 处理 下 ， ｌＬ ０ ＹＣ 、 Ｙ 、 Ｘ３和 Ｓ １茵株 的 Ｅ 值 被 改 变 。 同 因子 对 同一 菌株 的影 响不 同， Ｙ１ Ｃ 在 ＲＳ 、 Ｙ２ 、 ５ Ｌ ２ Ｘ Ｓ Ｃ 不 同一 因子 的不 同浓度 或强度 对 同一 菌株 的影 响也 不一样 ， 但有 些 因子在 一定 浓度或 强度 下 ． 病 菌抗性有 明 显的影 响。 对 关键 词 苹 果轮 纹 病 茵； 诱导 因子 ； 戊唑 醇 ； 紫外 线 ； 电磁 波 ； 水杨 酸 中图分 类号 ￥ ３ ．１ 文 献标识 码 Ａ ４ ６６ １ 文 章编 号 １０ — ７ ９ ２ １ １ — ｌ一 ２ ０ ７ ５ ３ （０ ２）８ ０ｌ０ Ｏ
40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂防治苹果果实主要病害的室内外药效试验
４０％戊唑醇·多菌灵悬浮剂防治苹果果实主要病害的室内外药效试验摘要试验结果表明，40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂对苹果轮纹病、炭疽病具有较好的防治效果。
在发病初期，使用40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂2 500～3 000倍液，防治效果87%～99%，对苹果树及果实安全。
关键词40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂；苹果轮纹病、炭疽病；防治效果苹果轮纹病、炭疽病是我国苹果产区主要果实病害，每年都大量发生。
40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂是山东华阳科技股份有限公司开发的新型复配杀菌剂，为明确该剂对苹果轮纹病、炭疽病的防治效果，我们应用上述复配制剂和其单剂对苹果轮纹病、炭疽病进行了室内药效测定和田间药效试验，现将结果总结如下。
1材料与方法1.1室内生物测定1.1.1供试药剂及浓度。
共设5个处理，分别为：40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂（有效成分：戊唑醇、多菌灵，自产）2 500倍（A）、3 000倍（B）；25%戊唑醇可湿性粉剂（有效成分戊唑醇，自产）1 500倍（C）；50%多菌灵可湿性粉剂（有效成分多菌灵，自产）1 500倍（D）；空白对照（CK）。
1.1.2供试菌株。
苹果轮纹病、苹果炭疽病。
1.1.3测定方法。
采用菌体生长速率法，在无菌条件下，将准确称量的药剂与灭菌的定量培养基混合后，倒入培养皿内，制成平板。
每浓度重复5次。
用直径6mm打孔器在培养好的菌落边缘切下菌盘，用消毒接种针将菌盘反转移植到含药培养基上，置于25℃条件下恒温培养7d后，以直尺交叉测定菌盘扩展直径，与不施药对照菌盘扩展直径相比，求出药剂抑制生长率。
然后将抑制生长率达100%且菌盘表面无新生菌丝的各处理菌盘再移植到不含药的培养基上，求出杀菌效果。
抑（杀）菌效果=1.2田间药效试验1.2.1试验条件。
选取泰安市岱岳区凤凰村高感苹果轮纹病、炭疽病的十一年生红富士果园供做试验。
1.2.2试验设计与安排。
试验设40%戊唑醇·多菌灵悬浮剂（以下简称戊·多可湿性粉剂）2 500倍（A）、3 000倍（B）；25%戊唑醇可湿性粉剂1 500倍（C）；50%多菌灵可湿性粉剂1 500倍（D）和空白对照（CK）5个处理。
甲基硫菌灵使用技术手册
甲基硫菌灵使用技术手册甲基硫菌灵是苯丙咪唑类广谱治疗性、低毒、低残留杀菌剂。
又称甲基托布津、冠托、国光松尔、托管、托布津M。
主要剂型有92％、95％、97％原药，50％、70％、80％可湿性粉剂，40％、50％胶悬剂，10％、36％、50％、500克/升悬浮剂，70％、75％、80％水分散粒剂，4％膏剂，3％糊剂。
产品特点1.甲基硫菌灵为广谱、内吸杀菌剂，具有向植株顶部传导的功能，对多种蔬菜及果树有较好的预防保护和治疗作用，对叶螨和病原线虫有抑制作用。
2.甲基硫菌灵常与硫黄粉、福美双、代森锰锌、乙霉威、腈菌唑、丙环唑、百菌清、氟硅唑、氟环唑、烯唑醇、三唑酮、三环唑、戊唑醇、已唑醇、异菌脲、苯醚甲环唑、醚菌酯、嘧菌酯、烯唑醇、咪鲜胺锰盐、噻呋酰胺、乙醚酚、甲霜灵、噁霉灵、中生菌素等杀菌剂成分混配，生产复配杀菌剂。
防治对象1.使用范围。
适用于西瓜、甜瓜、茄子、辣椒、番茄、芹菜、芦笋、马铃薯等蔬菜，苹果、梨、葡萄、桃、核桃、枣、柿、板栗、石榴、香蕉、柑橘、芒果等果树，水稻、小麦、玉米、花生、大豆、油菜等粮油作物，及甘薯、甜菜、中药材植物、花卉植物等。
2.防治对象。
对番茄叶霉病，蔬菜炭疽病、褐斑病、灰霉病，甜菜褐斑病，瓜类白粉病、炭疽病和灰霉病，豌豆白粉病和褐斑病，水稻稻瘟病和纹枯病，小麦锈病和白粉病，麦类赤霉病、黑穗病，油菜菌核病，花生疮痂病，果树根部病害如根腐病、紫纹羽病、白纹羽病、白绢病等。
苹果和梨树的腐烂病、轮纹病、炭疽病、褐斑病、花腐病、霉心病、褐腐病、黑星病、白粉病、锈病、霉污病，葡萄黑痘病、炭疽病、白粉病、褐斑病等病害均有效。
使用方法可叶面喷雾、拌种、浸种、灌根等。
1.喷雾。
（1）防治蔬菜炭疽病、白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、瓜类蔓枯病、白菜白斑病、茄子黄萎病，空心菜、草莓轮斑病，落葵、草莓蛇眼病，根甜菜、芦笋、罗勒、香椿、莲藕等特菜褐斑病，茭白胡麻叶斑病，小西葫芦根霉腐烂病，十字花科特菜褐腐病等。
对苹果轮纹病的防治试验
ｌ 材料与 方法
１ ． １供 试 材 料 ①５ ０ ％多 菌灵 ： 由威 海 韩 攘 孚 生 化 药 业 有 限 公 司 生 产 ， 农药
登记 证 号 Ｐ Ｄ ８ ５ １ ５ ０ — ２ ５ ， 生产 许 可证 号 Ｘ Ｋ１ ３ — ０ ０ ３ － ０ ０ １ ７ ８ ， 产 品
飞溅而传播 ， 传播距离不超过 １ ０ Ｉ ｌ ｌ ， 病 菌 以皮 孔 侵 入 ， 侵 入 后 约 两周发病 。 主要危害枝干和果实 ， 有 时也 能 危 害 叶 片 。 病 菌 的 寄
苹 果轮纹 病又 名粗皮病 、 疣皮病 ， 在 礼 县 苹 果 产 区特 别 是 验 期 间虫 害发 生 防 治 时 只 喷 对 应 的 杀虫 剂 ， 施肥 、 灌溉 、 叶 面 喷
川 坝 河 谷 地 带 果 园 时 有 发 生 。果 园密 度 大 ， 地 下 水 位 高 的 果 园 苹果 轮纹病 发生严 重 ， 主要 危害枝 干 和果实 ， 有 时 也 能 危 害 叶
片 。病 菌 的 寄 主 范 围很 广 ， 除苹果外 ， 还能侵害梨 、 挑、 杏 等 多种
果树 。 、
肥等管理正常进行 。
２ 结果与分析
经过 三年对轮 纹病 的调查 、 发生 规律及 防治试验 ， 轮纹病 病 菌 以菌 丝 和 分 生 孢 子 器 在 被 害 枝 上 越 冬 ， 器 孢 子 主 要 随雨 水
Ｈ Ｎ Ｐ ３ ２ ０ ５ ５ 一 Ｄ ３ ９ ４ ５ ，产 品 标 准 号 Ｑ ／ ３ ２ ０ ５ ８ ３ Ｇ Ｌ Ｔ １ ０ ８ — ２ ０ １ １ 。③ 嗯 酮・ 锰 锌 ： 由 上 海 杜 邦 农 化 有 限 公 司 生 产 ， 总 有 效 成 分 含 量
６ ８ ． ７ ５ ％， （ 曝唑菌酮含量 ６ ． ２ ５ ％、 代森锰锌含量 ６ ２ ． ５ ％） 。 分 装 单 位 ： 上 海 生 农 生 化 制 品 有 限 公 司 ， 农 药 分 装 登 记 证 号 Ｐ Ｄ ２ ｏ ｏ ９ ０ ６ ８ ５ Ｆ １ ３ ０ ０ ５ １ ， 农 药 生 产 吧 批 准 证 书 号
甲基硫菌灵治什么病 防治对象有哪些
甲基硫菌灵治什么病防治对象有哪些甲基硫菌灵主要治什么病？甲基硫菌灵防治对象有哪些？甲基硫菌灵特点是什么据悉，甲基硫菌灵拥有很好的预防和治疗等效果，因此在市场中非常的受欢迎，同时市场的发展前景也非常的不错。
今天小编为大家讲述一下甲基硫菌灵的知识点，希望对大家有所帮助！甲基硫菌灵特点是什么甲基硫菌灵又名甲基托布津。
甲基硫菌灵是一种广谱性杀菌剂，具有向植株顶部传导的功能，对蔬菜类、禾谷类、果树上的多种病害有镑好的预防和治疗作用对叶螨和病原线虫有抑制作用。
可对农作物、经济作物进行叶面喷雾、拌种、浸种、灌根等。
甲基硫菌灵主要治疗什么病主要用于蔬菜炭疽病、瓜类白粉病，还可防治苹果、柑橘、梨的常见病，棉花苗期病害及甜菜、小麦、山芋、花生、水稻等稻瘟病、纹枯病、黑穗病、菌核病、赤霉病等。
甲基硫菌灵属低毒性杀菌剂，对人、畜、鸟类、蜜蜂低毒。
甲基硫菌灵使用注意事项：（1）甲塞硫菌灵不能与碱性及无机铜制剂混用。
（2）长期单一使用此药剂病菌易产生抗性，甲基硫菌灵与多菌灵苯菌灵等都属于苯并咪唑类杀菌剂，因此应注意与其他药剂轮用。
（3）药液溅入眼睛可用清水或2%苏打水冲洗甲基硫菌灵的防治对象有哪些：甲基硫菌灵可用于麦类等作物，防治由子囊菌、担子菌、半知菌中多种病原真菌引起的病害。
但对卵菌、链格孢菌、长乳孢菌及病原细菌引起的病害无效，用于种子处理、根部浇灌、叶面喷雾。
甲基硫菌灵可以用于麦类黑穗病的防治。
在播种前，每100千克种子用70%可湿性粉剂143克或50%胶悬剂200毫升拌种处理，然后闷种6小时；或者在播种前，每100千克种子用70%可湿性粉剂223克或50%胶悬剂312毫升浸种处理。
麦类赤霉病的防治。
在麦类始花期，每亩70%可湿性粉剂53.6~71克或50%胶悬剂75~100毫升喷雾，残效期5~7天。
小麦雪腐病的防治，每亩用70%可湿性粉剂20~25克，对水50千克喷雾。
甲基硫菌灵使用方案大全
甲基硫菌灵使用方案大全甲基硫菌灵是苯丙咪唑类广谱治疗性、低毒、低残留杀菌剂，又称甲基托布津,为广谱、内吸杀菌剂，具有向植株顶部传导的功能，对多种蔬菜有较好的预防保护和治疗作用，对叶螨和病原线虫有抑制作用。
产品特点甲基硫菌灵混用性好，常与硫黄粉、福美双、代森锰锌、乙霉威、腈菌唑、丙环唑、百菌清、氟硅唑、氟环唑、烯唑醇、三唑酮、三环唑、戊唑醇、已唑醇、异菌脲、苯醚甲环唑、醚菌酯、嘧菌酯、烯唑醇、咪鲜胺锰盐、噻呋酰胺、乙醚酚、甲霜灵、噁霉灵、中生菌素等杀菌剂成分混配，生产复配杀菌剂。
悬浮剂相对加工颗粒微细、黏着性好、耐雨水冲刷、药效利用率高；使用方便、安全、低毒、低残留；但连续使用易诱使病菌产生抗药性。
防治对象1.使用范围。
适用于西瓜、甜瓜、茄子、辣椒、番茄、芹菜、芦笋、马铃薯等蔬菜，苹果、梨、葡萄、桃、核桃、枣、柿、板栗、石榴、香蕉、柑橘、芒果等果树，水稻、小麦、玉米、花生、大豆、油菜等粮油作物，及甘薯、甜菜、中药材植物、花卉植物等。
2.防治对象。
对番茄叶霉病，蔬菜炭疽病、褐斑病、灰霉病，甜菜褐斑病，瓜类白粉病、炭疽病和灰霉病，豌豆白粉病和褐斑病，水稻稻瘟病和纹枯病，小麦锈病和白粉病，麦类赤霉病、黑穗病，油菜菌核病，花生疮痂病，果树根部病害如根腐病、紫纹羽病、白纹羽病、白绢病等。
苹果和梨树的腐烂病、轮纹病、炭疽病、褐斑病、花腐病、霉心病、褐腐病、黑星病、白粉病、锈病、霉污病，葡萄黑痘病、炭疽病、白粉病、褐斑病等病害均有效。
使用方法可叶面喷雾、拌种、浸种、灌根等。
1、喷雾（1）防治蔬菜炭疽病、白粉病、灰霉病、菌核病、枯萎病、瓜类蔓枯病、白菜白斑病、茄子黄萎病，空心菜、草莓轮斑病，落葵、草莓蛇眼病，根甜菜、芦笋、罗勒、香椿、莲藕等特菜褐斑病，茭白胡麻叶斑病，小西葫芦根霉腐烂病，十字花科特菜褐腐病等。
在发病初期用70％甲基硫菌灵可湿性粉剂800~1000倍液喷雾。
每隔7~10天喷1次，连防2~3次。
（2）防治番茄叶霉病，发病初期每亩用70％甲基硫菌灵可湿性粉剂35~53克。
三唑类农药特性及使用注意事项
病 。对苹果树的 白粉病 、锈病 、炭疽病 、褐斑病 、轮
－
纹病和腐烂病 等病 害有很好的防效 ，对果树具有内吸
治疗 和保护双重作用 。三唑类化合物影响 了植物 中的 赤霉素的合成 具有植物生 长调节剂 的作用 ，对植物有
二、存在问题
… … … … … … … … … ． ．
使用 ，以提高药 剂的防治效果 。 ３ ． 控 制使 用浓度和使 用次数 ：使用浓度应根据药 剂的性 能 、不同果树品种 、不同的生育期和使用方法 确定。如苹果树嘎啦和秦冠抗逆性较差的品种 ，应严 格控制使 刖浓度 以免产生药 害。同时 ，要控制同一 品
生发生药 害。
４ ３ ％悬 浮剂 的安 全使用倍 数在３ ０ ０ ０一
～
・
－
三 、使 用注 意事项
１ ． 注意使 用间隔期 ：在生产 中
４ ０ ０ ０ 倍 之 问
氟硅唑 （ 福星 、克菌星 、护矽 ・
－
・ 一 唑类 杀 芮 剂 安 伞 间 隔期 １ ５～２ ０
－
苯醚 甲环唑 （ 世 高 、世泽 ），主要是 １ ０ ％水分散 ・ 粒剂 ，苯醚 甲环唑杀 菌广谱 ，对各类 作物上 的 白粉 －
・ 酮 、腈菌唑 、氟硅唑 、戊唑醇 、 烯 唑醇 、丙环唑 、已 － 唑 醇和苯 醚 甲环 唑等 。除卯 生无效 ，如 ：苹 果疫腐
－
病 、锈病 、黑星病 、 落 叶病等均有较好的防治效 果。 ・ 安全使用倍数 １ ０ ０ ０～１ ５ ０ ０ 倍 左右。苯醚 甲环唑在控制 － 植物长势上作用不明显 ，但仍应注意安令间隔期 ，保 ・
・
－
苹果免套袋技术要点及病虫害绿色防控措施探讨
DOI:10.3969/j.issn.1003-1650.2024.09.051在当前苹果种植产业中，苹果套袋技术属于一项关键技术，此技术早在上世纪末就引入我国，并将此技术推广至今，在苹果病虫害防控、苹果表面光洁度提升、农药残留降低等方面都发挥着巨大作用。
近几年各地不断推进城镇化发展，而农村地区面临着严峻的老龄化问题，在苹果套袋技术在实际种植期间，成本高、雇工难、雇工贵等负效应变的更加显著。
根据相关文献，可了解发现每套1个纸袋，成本费用可达0.25元，其中纸袋成本套袋、工本费用，分别为0.05元、0.10元，摘袋的工本为0.10元。
根据每667m2的果园面积，应用1.5万个袋进行计算，其套袋成本，高达3750元/667m2，同时又因为受到苹果价格倒挂冲击，导致苹果种植效益快速下降，同时增加了种植成本。
另外在进行套袋处理后，苹果会降低自身的糖度，同时会加重黑点病、苦痘病的侵害，还会消耗大量的纸袋资源，摘下纸袋后如果没有做到恰当处理，很可能会造成大量污染，所以这种技术在苹果产业发展中，已逐渐难以满足当前的发展要求，而免套袋种植技术，逐渐得到了种植者高度关注。
对于免套袋栽培来说，苹果失去了纸袋隔离与保护，所以在实际种植中，如何加强病虫害防护，同时对产品质量安全进行保证，成为了苹果生产中的重点。
此情况下针对苹果免套袋技术，以及病虫害绿色防控措施进行探讨具有重要意义。
一、苹果免套袋技术要点1、品种选择对品种进行选择时，种植人员要结合多方面进行考虑，比如苹果的抗病性、外观品质、生长周期等，将其中的侧重点明确，这样才能选择出优质品种进行种植。
结合当前生产实际来看，华硕、烟富系列、瑞香红、瑞阳、秦脆等都属于常见品种。
比如，在苹果种植栽培中，如果要确保果实清脆可口，同时有着严格的生长周期要求，此时就可将烟富系列中3号、10号等品种作为首选，其中的烟富10号，品质属于上乘，而且色相呈片红，其果肉的硬度能实现8.78kg/cm2，有15%左右的可溶性固形物含量，食用起来口感极佳，还对枝干轮纹病、苦痘病等有一定抵抗能力。
苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性测定
苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性测定苹果轮纹病(Botryosphaeria berengriana f.sp.piricola) 是近年来苹果生产上危害最为严重的一种病害，不仅可以危害枝干，造成树势衰弱、枝干枯死，还能造成大量烂果，发病严重时田间病果率为70%〜80%,且贮藏期可持续发病。
给病发病率近年来呈上升趋势，给果农带来严重的经济损失。
施用化学杀菌剂是目前防治苹果轮纹病的有效措施之一。
其中以多菌灵为代表的苯并咪唑类杀菌剂应用最为广泛。
但由于该类药剂作用靶标单一，长期单一使用很容易使病原菌产生抗药性而导致药剂防效降低或丧失。
马志强等监测了河北保定郊区苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性，发现所测定的菌株对多菌灵均已普遍产生不同程度的抗药性，但未发现高抗菌株。
杨炜华等测定了部分县市区苹果轮纹病菌对多菌灵的敏感性，发现多菌灵在0.05 mg?L-1 质量浓度下即能明显抑制菌丝的生长，且测定的菌株均为低水平抗性菌株。
山东省在防治苹果轮纹病上连续多年使用多菌灵，但至今仍缺乏对该病菌抗药性的研究报道。
作者采用菌丝生长速率法，测定了多菌灵对山东不同地理来源的83 个苹果轮纹病菌(Botryosphaeria berengriaria f.sp.piricola) 菌株的毒力，建立了多菌灵对苹果轮纹病菌的敏感性基线，为开展其抗性检测与治理提供依据。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 供试菌株的采集和分离2007 年8－10 月，分别在鲁东地区栖霞(Qx)、蓬莱(PL)、招远(ZY)、鲁中南地区沂源(YY)、蒙阴(MY),鲁西地区肥城(FC)、泰山仃s)、冠县(GX)、东阿(DE), 鲁北地区惠民(HM)、阳信(YX)的不同行政区域且相距一定距离的果园内，随机采集轮纹病果，装入干净的小塑料袋中(每个袋子只装一个标本) ，带回实验室分离纯化后，共获得83 苹果轮纹病菌株(Botryosphaeriaberengriana f.sp.piricola) 。
5种杀菌剂对苹果轮纹病室内毒力测定
甲环 唑、 氟硅 唑 、 甲基硫 菌 灵 、 多菌灵 和戊 唑醇等 。本
研究 收集衡 水 地区 农药 市场 销售 的常 见的 ５种 防治 苹果轮 纹病 的化学 药剂进 行毒 力测 定 ， 以期为苹 果轮 纹病 的防治 提供合 理 的选 择参 考 。
化 学药剂 以其见 效快 、 使用 简单 和省 时 、 省工 的优 点
而 被广 泛 使用 。 目前 生产 上 常用 的化 学药 剂有 苯 醚
求 出生长抑 制率 并换 算成 抑制机 率值 ， 将 其作 为 依 变量（ ｙ ） ， 药剂 质量 浓度 的对 数值作 为 自变量 （ ｘ ） ， 利
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烂， 常 溢 出褐色 黏液 ， 有 酸臭 气味 。发病后 期少数病 斑 的 中部 产生 黑色 小粒点 ， 散生， 不 突破表皮 。烂 果 失水后干 缩 ， 变 成黑色 僵 果 。 该病 主要 发生在 日本 、 中 国、 朝鲜 、 韩 国等亚洲 国
１ ． ４ 杀 菌剂对 苹 果轮 纹病 的 室 内毒 力测 定
落直径 ， 并记录其 数据 进行 结果 分析 。抑 制作用 计算
公式如 下 ：
该病 严重 影响苹 果产 量和 品质 ， 给苹 果生产 带来 巨大损失 。农 业生 产实践 中通 常采用 栽 培管理 、 果实 套袋 防治和 药剂防 治 的方 法来 控制 该病 的发 生 ， 其 中
抑菌率 （ ％） ＝ （ 对 照菌 落直 径． 处理菌落 直径） ／ 对照 菌落 直径 Ｘ １ ０ ０
业 大学 农业部 苹果 病虫 研究室 提供 。 １ ． ２ 试验 药剂 收集 衡水 地 区农药 市场 销售 的登记
其 有性态 属子囊 菌亚 门葡 萄座腔菌 属 ， 无性 态为轮 纹 大茎点菌（ Ｍａ ｃ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｍａ ｋ ａ ｗ ａ ｔ ｓ ｕ ｋ ａ ｉ Ｈ ａ ｒ ａ ） … 。苹 果轮 纹 病 病 菌在 自然状 况 下主要 发 生 于 苹 果 、梨 和近 缘 植
戊唑醇使用技术
戊唑醇系列产品应用技术戊唑醇属三唑类农药杀菌剂，是甾醇脱甲基抑制剂，是用于重要经济作物的种子处理或叶面喷洒的高效杀菌剂，可有效地防治禾谷类作物的多种锈病、白粉病、网斑病、根腐病、赤霉病，黑穗病及种传轮斑病等。
戊唑醇是一种高效、广谱、内吸性三唑类农药杀菌剂，具有保护、治疗、铲除三大功能，杀菌谱广、持效期长。
不污染果面的水性化制剂、有极强内吸性和上下传导性。
本品用于防治苹果斑点落叶、褐斑病、白粉病。
轮纹病、梨黑星病、葡萄白腐病等多种真菌性病害，生产优质高档出口水果的首选杀菌剂。
对油菜菌核病，水稻病害、棉花苗期病害等，不仅防效好，而且具有抗倒伏，增产作用明显等特点，该产品还可广泛应用于麦类、蔬菜和一些经济作物上(如花生、葡萄、棉花、香蕉、茶叶等)。
本品用于防治油菜菌核病，不仅防效好，而且具有抗倒伏，增产作用明显等特点。
戊唑醇的使用方法1、小麦散黑穗病：小麦播种前每100千克种子用2%戊唑醇湿拌剂商品量100～150克(有效成分2～3克)，或用6%戊唑醇悬浮剂商品量30～45毫升(有效成分1.8～2.7克)拌种。
充分拌均后播种。
2、玉米丝黑穗病：玉米播种前每100千克种子用2%戊唑醇湿拌剂商品量400～600克(有效成分8～12克)拌种。
充分拌匀后播种。
3、高粱丝黑穗病：高粱播种前每100千克种子用2%戊唑醇湿拌剂商品量400～600克(有效成分8～12克)，或用6%戊唑醇悬浮剂商品量100～150克(有效成分6～9克)拌种，充分拌均后播种。
F、43%戊唑醇推荐使用方法：防治对象施药时期推荐剂量(亩用量) 使用方法花生叶斑病发病初期5000－7000倍喷雾葡萄白腐、炭疽病发病初期5000－7000 倍喷雾油菜菌核病发病初期5000－7000倍喷雾苹果斑点落叶病发病初期5000-7000倍喷雾苹果轮纹病发病初期5000-7000倍喷雾梨树黑星病发病初期3000-4000倍喷雾梨树黑斑病发病初期5000－7000倍喷雾防治枣锈病、炭疽病和轮纹烂果病,6月底至7月初喷3000~5000倍液,以后视降雨情况每隔10~15d喷1次。
几种杀菌剂对苹果轮纹病的防治效果比较
几种杀菌剂对苹果轮纹病的防治效果比较作者：刘晓芬来源：《绿色科技》2018年第13期摘要：通过田间试验，采用市面上常见的6种杀菌剂探讨了对苹果轮纹病的防效。
对苹果采收前、储藏期进行了调查，结果发现：10%苯醚甲环唑水分散颗粒稀释1500、2000倍液，250g /L吡唑醚菌酯乳油1000、2000倍液，430 g/L戊唑醇SC3000、4000倍液，250 g/L嘧菌酯悬SC800、1500倍液，400 g/L氟硅唑乳油4000、6000倍液，70%甲基硫菌灵可湿性粉剂的700倍液对苹果轮纹病的防治效果较好，对苹果树果实食用没有危害。
关键词：苹果;苹果轮纹病;杀菌剂;田间药效中图分类号：S431文献标识码：A文章编号：1674-9944（2018）07-0083-021 引言苹果在世界范围内被广泛种植，是最重要一种水果，我国国土面积大，气候和地力条件多样，很适合苹果树的生长。
随着人们生活水平的提高，人们对苹果的需求不仅仅局限于食用果实，也开始开发多种多样的相关产品。
近十年，我国苹果种植面积和产量也随着市场需求逐渐扩大提升，但是还存在单位面积的果实产量低下，品质不高的现象。
苹果轮纹病是苹果种植过程中一个主要病害，在世界范围内广有发生，并且出现逐渐加重的趋势，已经成为制约苹果产业进一步发展的主要限制因素。
苹果轮纹病主要为害果实与枝条，从苹果近成熟期开始发病，造成果实腐烂，导致树势衰弱、产量下降，造成果实大量腐烂，高发期的病害发生率达到70%～80%，且在收获后贮藏期间也能发病。
当前，针对苹果轮纹病防治还主要采用化学药剂防治的手段，所以筛选当地适宜高效药剂十分必要，本研究选用市面上集中低毒、低残留的杀菌剂在田间对苹果进行药效试验，以期筛选适宜当地实际防治苹果轮纹病的最佳化学药剂，为苹果优质高产提供科学依据。
2 材料与方法2.1 供试制剂在当地市场购买8种杀菌剂，分别是10%苯醚甲环唑水分散粒剂，70%甲基硫菌灵可湿性粉剂，250 g/L嘧菌酯悬浮剂，250 g/L吡唑醚菌酯乳油，40%二氰蒽醌悬浮剂，400 g/L氟硅唑乳油，70%代森锰锌可湿性粉剂。
甲基硫菌灵作用和使用方法
甲基硫菌灵作用和使用方法甲基硫菌灵可以防治蔬菜病害防治黄瓜白粉病、炭疽病、茄子、葱头、芹菜、番茄、菜豆等灰霉病、炭疽病、菌核病、可用50%可湿性粉剂1000-1500倍液，在发病初期，每隔7-10天喷1次，连续喷3-4次；防治莴苣灰霉病、菌核病，可用50%可湿性粉剂700倍液喷雾。
甲基硫菌灵的用途：防治植物病害甲基硫菌灵可以防治花卉病害对大丽花花腐病、月季褐斑病、海棠灰斑病，君子兰叶斑病都有一定防效。
一般在发病初期，每亩用50%可湿性粉剂83-125克，兑水常规喷雾，共喷3-5次。
甲基硫菌灵可以防治果树类病害苹果轮纹病、炭疽病可用50%可湿性粉剂400-600倍液喷雾，每隔10天喷1次；葡萄褐斑病、炭疽病、灰霉病、桃褐腐病等，可用50%可湿性粉剂600-800倍液喷雾；柑桔贮藏中的青霉、绿霉病，在柑桔采摘后立即用40%胶悬剂400-600倍液，浸果实2-3分钟，捞出晾干装框。
甲基硫菌灵可以防治麦类病害麦类黑穗病，可用50%可湿性粉剂200克加水4公斤拌种100公斤，然后闷种6小时；三麦赤霉病，始花期喷药1次，5-7天后喷第二次每次每亩可用50%可湿性粉剂75-100克。
甲基硫菌灵可以防治其他作物病害烟草、桑树白粉病，可用50%可湿性粉剂300-400毫克/公斤的药液喷雾；花生叶斑病，在病害盛发期，可用50%可湿性粉剂200-250毫克/公斤药液喷药，间隔2周，施药3次；甘薯黑斑病，可用50%可湿性粉剂500-1000毫克/公斤药液浸种薯10分钟。
甲基硫菌灵的作用甲基硫菌灵商品名甲基托布津，是一种广谱性内吸低毒剂，具有内吸、预防和作用。
它初是由日本曹达株式会社研制开发出来的，能够有效防治多种作物的病害。
甲基硫菌灵对多种病害有预防和作用。
对叶螨和病原线虫有抑制作用。
甲基硫菌灵的使用方法：1、蔬菜病害的防治防治黄瓜白粉病、炭疽病、茄子、葱头、芹菜、番茄、菜豆等灰霉病、炭疽病、菌核病、可用50%可湿性粉剂1000-1500倍液，在发病初期，每隔7-10天喷1次，连续喷3-4次；防治莴苣灰霉病、菌核病，可用50%可湿性粉剂700倍液喷雾。
戊唑醇果树使用方法
戊唑醇果树使用方法
戊唑醇是一种有效防治水果树病害的杀菌剂，主要用于防治葡萄，苹果，柑橘等果树上的病害。
具体使用方法如下：
1. 预防性喷洒：在果树开花前，叶片展开之前，或病害盛行期之前，用戊唑醇溶液进行预防性喷洒。
喷洒时要均匀覆盖叶片和果实表面。
2. 病害期喷洒：在果树病害发生期，可用戊唑醇溶液进行喷洒。
喷洒间隔时间根据病害程度和天气条件而定，一般为7-14天一次。
3. 混合使用：戊唑醇可以与其他杀菌剂、肥料、营养剂等混合使用，以增强防治效果。
混合使用前要进行试验，确保互相兼容。
4. 注意事项：使用戊唑醇时应按照产品说明书上的剂量使用，避免超量使用。
使用过程中要注意穿戴防护服，避免直接接触皮肤和呼吸道。
喷洒后，避免人畜进入果园，以免误食污染的果实。
甲基硫菌灵最佳复配,附作用与使用方法
甲基硫菌灵最佳复配，附作用与使用方法甲基硫菌灵一般能与吡唑醚菌酯、甲霜灵、克百威、嘧菌酯等药剂进行复配，但不能与碱性以及无机铜制剂混用，而且不能长期与同一种药物混用，也不能在同一种作物上长期单一使用甲基硫菌灵，避免产生抗性。
甲基硫菌灵需要与其他药剂合理轮用，未使用时需要把它储存在阴凉干燥的地方。
一、甲基硫菌灵最佳复配1、甲基硫菌灵一般能与吡唑醚菌酯、甲霜灵、克百威、嘧菌酯等药剂进行复配，在复配时需要控制药剂的剂量，按照使用说明来执行，不能过多或者过少，避免产生药害或者使用无效。
2、甲基硫菌灵一般不能与碱性、无机铜制剂混用，通常不宜长期在一种农作物上单一的使用甲基硫菌灵，因为容易产生抗性，也不能与同一种药物经常混用，应与其他药剂合理轮用。
3、因为甲基硫菌灵对鱼类有低毒，因此使用过甲基硫菌灵的药具不能放在河塘水体中清洗，避免污染水源。
在贮存时需将该药剂放置在阴凉干燥的地方，应远离火源，防潮湿以及日晒。
二、甲基硫菌灵的作用与使用方法1、作用（1）甲基硫菌灵属于低毒杀菌剂，具有内吸、预防和治疗的作用，能够预防炭疽病、褐斑病、花腐病、霉心病、褐腐病、黑星病、白粉病、锈病等多种作物的病害，持续期一般在7-10天，常将它用在苹果、梨、甘薯、甜菜、茄子等作物上。
（2）甲基硫菌灵特别的地方在于，将它喷在作物的表面上时可被快速吸收，随后在植物体内经过一系列的化学反应后转变成多菌灵，对病原菌的细胞分裂造成一定的影响，使病菌不能正常生长，从而达到杀菌的目的。
2、使用方法（1）用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂800-1000倍液喷雾一般能防治褐斑病、枯萎病、蔓枯病病害。
（2）采收水果后，用40%甲基硫菌灵悬浮剂400-600倍液浸果2-3分钟，随后捞出晾干并装框，一般保鲜期可达15天以上。
（3）在播种前，可用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂50g，加水2500g 浸种10分钟一般能防治花生立枯病等病害。
32%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验报告
32%多菌灵戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验报告程二威
【期刊名称】《乡村科技》
【年(卷),期】2015(000)020
【摘要】本文通过试验评价32%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病的田间防治效果,并确定最佳施药比例,为农药登记和推广应用提供科学依据.
【总页数】2页(P23-24)
【作者】程二威
【作者单位】兰考县农业局,河南兰考 475300
【正文语种】中文
【中图分类】S436.611.1+9
【相关文献】
1.48%甲基硫菌灵窑戊唑醇悬浮剂防治水稻纹枯病田间药效试验 [J], 张汉莉;黄文教;曾庆群
2.论25%戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验 [J], 李朝贵
3.20％烯肟菌胺·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验 [J],
4.30%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验 [J], 孙景文;马洪艳
5.30%多菌灵·戊唑醇悬浮剂防治苹果轮纹病田间药效试验 [J], 孙景文;马洪艳;孔斌
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杜邦杀菌剂在苹果树上也适用果品,栽培技术
杜邦杀菌剂在苹果树上也适用果品,栽培技术遵化市东陵乡早在XX年就开始施用杜邦系列杀菌剂，应用范围主要是在***葡萄上。
当时，正值该乡建立天津王朝***葡萄基地初期，拥有***葡萄种植户900多户，基地1000多亩。
农户在管理时所用的药剂大部分是杜邦系列药剂。
该系列药剂虽然价格高，但耐雨水冲刷，防治*********，可减少全年用药次数，所以总的来说它相对普通药剂成本并不高。
后来，我就把该系列药剂的杀菌剂应用到了我家的苹果树上，发现对苹果腐烂病菌、轮纹病菌、霉心病菌、早期落叶病菌、黑痘病菌等都有很好的防治效果。
具体方法如下：1.在开花前期，用杜邦易保1200倍液加杜邦福星8000倍液，加高效氯氰菊酯和尼索朗，可有效铲除越冬的病虫菌源，为全年防治打好基础。
2.在谢花7天后，用杜邦易保1200倍液加高效氯氰菊酯1000倍液，再混用20%啶虫脒5000倍液和1.8%阿维菌素乳油6000倍液，全园喷施，可有效预防果树的轮纹病、斑点落叶病等******病菌，还可除掉蚜虫、潜叶蛾、金纹细蛾等害虫。
3.在果实套袋前，用杜邦福星8000倍液加水乳制剂杀虫药全园喷施，可保护幼果嫩叶不受伤害，铲除残余的腐烂病菌，预防早期落叶，防治******虫害。
4.套袋以后就不用杜邦杀菌剂了，可选用甲基托布津、甲基硫菌灵、锰酸钾、戊唑醇等低价杀菌剂。
这样既能降低果树的用药成本，也能确保果树叶片不受病菌伤害。
另外，杜邦福星还能防治苹果树的枝干腐烂病。
方法是：轻轻刮掉腐烂病皮，涂抹800-1000倍的药液3-4次，间隔期15-20天。
通过反复试验观察，发现疗效很好。
杜邦系列杀菌剂在我家苹果园里使用后，我感触非常深刻，它对多种病菌防治效果都很好，但周边其他农户使用却较少。
衷心期待该类药剂能得到更广泛的普及推广，也更加希望杜邦系列杀菌剂能够给广大的农户带来更大的收益。
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长期施药果园中的苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性作者：安久栋国立耘 朱小琼宋月凤来源：《植物保护》2016年第02期摘要：为了监测果园中苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵敏感水平的变化，采用菌丝生长速率法测定了采集自山东烟台地区和北京市昌平区，有较长施药史苹果园中的苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性。
结果表明：戊唑醇对连续施用戊唑醇5年、每年施药1～2次的果园中苹果轮纹病菌的EC50为0.017 4～0.114 3 μg/mL，即该类果园中苹果轮纹病菌对此药的敏感性仍然保持在较高水平，与野生菌株的敏感性非常接近，没有出现敏感性分化的抗药亚群体；甲基硫菌灵对连续施用甲基硫菌灵10年、每年施药2次的果园中苹果轮纹病菌的EC50为0.846 4～4.677 4 μg/mL，果园中苹果轮纹病菌与野生菌株相比EC50平均值约上升3.15倍，最低值和最高值分别是已报道敏感性基线的1.19倍和6.59倍，没有出现敏感性发生显著分化的抗药性亚群体。
关键词：苹果轮纹病菌；戊唑醇；甲基硫菌灵；敏感性中图分类号： S 436.611文献标识码： A苹果轮纹病分布广泛，在我国各苹果产区均有发生，且有逐年加重的趋势[1]。
该病是由Botryosphaeria dothidea引起的真菌病害[2]，主要危害果实和枝干，在果实贮藏期仍可致病，不仅造成树势衰弱、枝干枯死，而且造成大量烂果[3]，是制约苹果产量和品质的最为重要的病害之一。
目前，化学防治仍是治理苹果轮纹病的主要措施，其中戊唑醇和甲基硫菌灵是主要推广使用的药剂。
戊唑醇通过抑制麦角甾醇的生物合成而干扰真菌细胞膜的形成[4]，具有广谱、内吸等特点，对苹果轮纹病具有良好的防治效果[5]。
该药自20世纪90年代中期开始在中国苹果树上登记使用，由于当时戊唑醇原药和制剂价格偏高，登记后的十几年中在苹果生产中没有得到广泛的推广应用。
进入21世纪后，戊唑醇首先在山东东部苹果产区迅速推广应用[6]，室内抗药性风险评估认为苹果轮纹病菌对戊唑醇的室内抗药性具有高度至中等风险[7]，因此对田间病菌敏感性进行及时监测十分重要。
以甲基硫菌灵为代表的苯并咪唑类药剂也是防治苹果轮纹病的高效内吸性杀菌剂。
该药被植物体吸收后，经过一系列生化反应最终被分解为多菌灵[8]，多菌灵可以特异性地与病原真菌的β-微管蛋白结合，干扰微管装配，进而影响有丝分裂中纺锤体的形成，使病原菌孢子萌发长出的芽管发生扭曲，从而使病菌不能正常进行有丝分裂而达到杀菌的效果[9]。
室内抗药性风险评估认为甲基硫菌灵具有高抗药风险性[10]，国内外已有研究表明许多病原菌对甲基硫菌灵产生了抗性[9，11]。
在我国各苹果产区，甲基硫菌灵的推广较早且具有较高的施用率。
但是未开展苹果轮纹病菌对该药敏感性水平监测。
综上所述，戊唑醇和甲基硫菌灵是防治苹果轮纹病的主要药剂，在我国苹果产区已推广使用多年，病原菌在这两种药剂持续的选择压力下有可能产生抗药性菌株。
因此，及时进行病原菌敏感性的监测，对于保证防治效果是十分重要的。
本研究采用菌丝生长速率法，分别测定了果园中的苹果轮纹病病原菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性。
1 材料与方法1.1 材料供试菌株：69株苹果轮纹病菌菌株采集于山东烟台地区，其中烟台福山区25株，烟台蓬莱市23株，烟台海阳市21株，果园每年施用戊唑醇1～2次，连续施用5年；34株采集于北京昌平区，果园每年施用甲基硫菌灵2次，连续施用10年。
所有菌株均经过组织分离、单菌丝纯化，鉴定为Botryosphaeria dothidea。
供试药剂为96.7%戊唑醇原药（江苏剑牌农药化工有限公司），98.6%甲基硫菌灵原药（陕西美邦农药有限公司）。
1.2 方法1.2.1 含药培养基的制备用电子天平称取0.1 g戊唑醇原药，溶于约9 mL异丙醇（99.7%），用10 mL容量瓶定容，配成浓度为104 μg/mL的母液，于4℃冰箱中保存备用。
制备含药培养基时，用异丙醇按一定比例将母液稀释到所需的质量浓度，加入培养基千分之一体积的稀释液[12]，得到如下终浓度的含药PDA平板：0、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1、2 μg/mL，对照培养基加入等量异丙醇。
用电子天平称取0.1 g甲基硫菌灵原药，溶于约9 mL丙酮（99.5%），用10 mL容量瓶定容，配成浓度为104 μg/mL的母液，于4℃冰箱中保存备用。
制备含药培养基时，用丙酮按一定比例稀释母液到所需的质量浓度，加入培养基千分之一体积的稀释液，得到如下终浓度的含药PDA平板：0、0.1、0.25、0.5、1、2、4 μg/mL，对照培养基加入等量丙酮。
1.2.2 菌丝生长速率法测定供试药剂对苹果轮纹病菌的EC50将供试菌株转接到PDA培养基中培养4 d左右，用直径5 mm打孔器在菌落边缘打取直径为5 mm的菌饼，用接种针挑取菌饼菌丝面朝下接种于各个浓度平板的中央，26℃黑暗培养，每个处理3次重复。
3 d后，用十字交叉法测量各个平板的菌落直径，计算平均菌落直径，按下列公式计算菌丝生长抑制率：抑菌率（%）=对照平板菌落直径-含药平板菌落直径对照平板菌落直径-5×100通过Excel软件进行药剂浓度对数值和菌丝生长抑制率几率值之间的线性回归分析，将菌丝生长抑制率转化为几率值，药剂浓度转换为对数值，以X（药剂浓度的对数值）和Y（抑制率几率值）做线性回归分析得到回归方程Y=a+bX，当Y=5 时，求出X 的反对数[5]即为供试药剂对各供试苹果轮纹病菌菌株的EC50。
1.2.3 不同甲基硫菌灵敏感性菌株的β-tubulin基因序列分析采用OligoCalc（Oligonucleotide Properties Calculator， http：///biotools/oligocalc.html）设计扩增苹果轮纹病菌β-tubulin基因的特异性引物TubF：5′-GTCAGGAGTCGCAGTCAGTAATTAG-3′和TubR：5′-CTTCATTTTGTCGCATGTCTGGCTC-3′，扩增片段长度约为2.1 kb。
选择5株对甲基硫菌灵敏感性不同的苹果轮纹病菌菌株，在PDA培养基上培养5～6 d，收集菌丝，用试剂盒SP Fungal DNA Kit提取DNA，用引物TubF/TubR扩增β-tubulin基因。
PCR反应总体积为50μL：10×LA PCR buffer（Mg2+Plus）5 μL，dNTPs（2.5 mmol/L）5 μL，TubF/TubR（20μmol/L）各1 μL，LA Taq DNA聚合酶（1.5 U/μL，TaKaRa）0.5 μL，模板DNA 2 μL，ddH2O 补至50 μL。
反应程序为：95℃预变性9 min；94℃变性1 min，61℃退火1 min，72℃延伸2 min，共35个循环；72℃延伸10 min。
扩增产物在1%的琼脂糖凝胶、0.5×TBE中电泳30 min，电压为100 V，然后用溴化乙锭染色，并用凝胶成像仪观察、拍照。
电泳检测后的PCR产物交由北京三博远志生物技术有限责任公司用正反向引物进行序列测定。
用ClustalW 1.82软件（http：///clustalw/）对所测序列与从NCBI上下载的β-tubulin基因序列进行比对，根据NCBI上登录的β-tubulin基因相关序列的编码区，截取所测序列的编码区，用EMBOSS软件（http：///emboss/transeq）将DNA序列翻译为蛋白质序列，用ClustalW 1.82软件比较不同敏感性的苹果轮纹病菌菌株β-tubulin基因对应的蛋白质序列，确定是否有氨基酸突变。
2 结果与分析2.1 苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性采用菌丝生长速率法测定了从山东烟台地区施用戊唑醇5年的果园中采集的69株苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性。
结果表明戊唑醇对苹果轮纹病菌菌丝生长具有明显的抑制作用，EC50为0.017 4～0.114 3 μg/mL，最高值约是最低值的6.57倍，EC50平均值为（0.0578±0.018 3）μg/mL（表1）。
根据 EC50极差 R=Xmax-Xmin=0.114 3-0.017 4=0.096 9 μg/mL，将EC50数据分成6组，EC50的频数分布见图1。
戊唑醇对69株苹果轮纹病菌菌株EC50的频数分布呈现单峰曲线，符合正态分布，表明苹果轮纹病菌菌株对戊唑醇的敏感性没有产生分化，未出现敏感性下降的抗药性亚群体（图1）。
王英姿等[6]采集山东地区未施用过戊唑醇的野生轮纹病菌菌株建立的敏感性基线为（0.111 5±0.048 5）μg/mL，相比可知，烟台地区施用戊唑醇5年果园中的苹果轮纹病菌的EC50平均值是已报道敏感性基线的0.52倍，最低值和最高值分别是已报道敏感性基线的0.16倍和1.03倍。
2.2 苹果轮纹病菌对甲基硫菌灵的敏感性采用菌丝生长速率法测定了来自北京市昌平区的34株苹果轮纹病菌对甲基硫菌灵的敏感性。
结果显示，随着甲基硫菌灵浓度升高，对苹果轮纹病菌菌丝生长的抑制作用逐渐增强。
EC50为0.846 4～4.677 4 μg/mL，最高值约是最低值的5.53倍，EC50平均值是（2.2356±0.857 5）μg/mL（图2，表2）。
根据EC50极差R=Xmax-Xmin=4.677 4-0.846 4=3.831μg/mL，将EC50数据分成8组，EC50的频数分布见图2。
有94.12%的菌株集中于主峰范围内，58.8%的供试菌株的EC50小于平均值。
杨炜华等[11]采集山东泰安的野生轮纹病菌菌株建立的敏感性基线为0.710 2 μg/mL，相比可知，采集于北京昌平区施用甲基硫菌灵10年果园中的苹果轮纹病菌的EC50平均值是已报道敏感性基线的3.15倍，最低值和最高值分别是已报道敏感性基线的1.19倍和6.59倍。
2.3 β-tubulin基因序列分析结果选择对甲基硫菌灵敏感性不同的5株菌SB2-3、LC4-2、SB0-5、SA0-2和LB3-1，用TubF 和TubR均扩增出2.1 kb的DNA片段。
测序后去掉内含子，将序列重新拼接并进行比对，发现不同敏感性菌株β-tubulin基因序列存在碱基的差异，菌株SA0-2第183位、第291位、第597位、第696位碱基对发生突变（图3）；将不同敏感性菌株的β-tubulin基因序列翻译为蛋白序列，并进行比对，发现氨基酸序列完全相同，均没有发生变化（图4），说明对甲基硫菌灵敏感性不同的苹果轮纹病菌β-微管蛋白基因未出现引起β-微管蛋白氨基酸序列发生变化的突变。
3 讨论戊唑醇为新一代三唑类杀菌剂，具有高效、广谱、内吸、低毒等特性，对大田作物、果树、蔬菜和重要的经济作物上由子囊菌、担子菌和半知菌引起的重要病害具有极好的治疗和铲除作用，且用量低[13]。