性激素室内质控品使用说明

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临床检验技术中级《专业知识》试题及答案解析四

临床检验技术中级《专业知识》试题及答案解析四[单选题]1.显微镜直接检测真菌，有助于真菌诊断的（江南博哥）结构是()。

A.细胞核的形态B.菌丝和孢子的形态结构C.核仁的数目D.鞭毛的数量E.胞浆颗粒的有无参考答案：B参考解析：单细胞真菌只有孢子，多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝和孢子有助于对真菌的诊断。

[单选题]2.非密螺旋体抗原试验检查梅毒所用的抗原是()。

A.病变组织B.疏螺旋体抗原C.牛心肌脂质D.致敏红细胞E.密螺旋体抗原参考答案：C参考解析：非密螺旋体抗原试验是用正常牛心肌的心脂质作为抗原，测定患者血清中的反应素（抗脂质抗体）。

最常用的有VDRL试验和RPR试验。

[单选题]3.可用于厌氧培养的标本是()。

A.痰B.粪便C.膀胱穿刺留尿D.导尿E.清洁中段尿参考答案：C参考解析：痰、粪便、中段尿以及导尿这些与外界相通或不易无氧环境采集的标本均不适合做厌氧培养，膀胱穿刺留尿可用于厌氧培养。

[单选题]4.假定血糖在常规实验室20天测定的质控结果的均数为5.6mmol/L，标准差为0.5mmol/L。

第l个月在控数据的平均数为5.4mmol/L，标准差为0.2mmol/L；累积数据计算的平均数为5.5mmol/L，标准差为0.3mmol/L。

第2个月的室内质控图，应采用的均值和标准差为()。

A.5.6mmol/L和0.50mmol/LB.5.5mmol/L和0.30mmol/LC.5.4mmol/L和0.20mmol/LD.5.5mmol/L和0.40mmol/LE.5.6mmol/L和0.30mmol/L参考答案：B参考解析：室内质控：①首先确定仪器状态良好，在“旧”批号质控品使用结束前，将新批号质控品与“旧”批号质控品同时进行测定约一个月，获得至少20个测次（一天一次一瓶），计算新质控品的均值和标准差（剔除超过均值土3S的离群值，重新计算余下数据的均数和标准差），作为新质控品室内质控图的暂定靶值和标准差（本题中均数为5.6mmol/L，标准差为0.5mmol/L）。

性能验证(仅供参考)

析测量范围上限的高值样本进行系列手工稀释，每份稀释样本重复测定 2 次取平均值。 1.5.4 结果判断：按试剂说明书回收率要求设定，分别以检测结果在目标范围内作为可
接受限。用高值样本可接受回收率对应的最大稀释倍数确定其可靠浓度的低限；用浓度超过分析测量范围上限的高值样本对应的可接受回收率确定最大稀释倍数。或计算判断指标 R 值， R=检测均值/预期值*100%，判断标准：80%<R<120%。 2 免疫-定性（ELISA 法）操作者熟悉检验程序和评价操作程序，对操作程序校准为最佳状态，严格按操作程序进行验证。从以下几方面进行验证：灵敏度、特异性、符合率、检出限、Cut off 值验证、重复性和比对试验。 2.1 符合率、敏感度和特异性 2.1.1 根据 CLSI 发布 EP12-A2 文件要求(应参考定量分析将偏倚和不精密度应用于定
R2≥0.95，a 在 0.97~1.03 范围内，则判断为线性范围验证通过。
1.4 参考区间 1.4.1 标本选择
选择年龄、性别等均匀分布，符合建立参考区间的健康体检者血清标本 20 份，对不同项目的参考区间进行验证。如碱性磷酸酶(ALP)等在不同年龄人群的不同参考区间应分别进行验证，如某些年龄人群标本不易获得时，可暂不做验证，但需与临床沟通，对于性激素等检测项目因生理周期变化等因素导致无法获取有效人群标本，暂不做验证，但亦需与临床沟通。 1.4.2 结果判断：规定小于或等于 2 份标本结果超出参考区间，即为验证通过。或 R=
从美国临床实验室室间质量评估允许误差表中查阅评价项目的允许误差范围，由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于允许误差范围的 1/4 和 1/3 作为检测系统不精密度性能的的可接受标准（或用卫生部临检中心的允许总误差、卫生标准等），且又小于厂商提供的精密度性能指标，说明由实验室评价的检测系统的不精密度性能可接受，符合要求。若大于判断限，检测系统的不精密度是否符合要示，应再进一步做统计学处理作出判断。

E2(雌二醇)检测作业指导书.doc

《文件已阅声明表》《Procedure Circulation Form》文件名称(File Name):雌二醇(E2)检测作业指导书编号(Serial Number) : ________________________ 表号(Table Number) :CSKM・MP03・02.02《文件本次修改记录表》《Procedure Amendment Form》编号(Serial Number) : ________________________ 表号(Table Number) :CSKM・MP()3.02.03《文件信息表》《Procedure Information Form》编号(Serial Number) : _________________________ 表号(Table Number) :CSKM-MP03.02.04雌二醇检测作业指导书1.目的检测人血清或血浆样本中雌二醇（E2）的浓度，作临床辅助诊断用。

2.检测原理采用Chemiflex®的化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术，对人血清，血浆屮雌二醇进行定量测定。

第一步, 将样本、样本稀释液和雌二醇抗体（兔，单克降）包被的顺磁微粒子混合。

样本中的雌二醇与雌二醇抗体包被的微粒子结合，孵育后，将口丫噪酯标记的雌二醇结合物添加至反应混合物中。

进一步孵育和冲洗后，向反应混合物中添加预激发液和激发液。

对产生的化学发光反应物进行测量，以相对光单位（RLUs）表示。

样品中的雌二醇含量与ARCHITECT i光学系统检测到的RLUs值成反比。

3.样本的釆集和贮存3. 1 ARCHITECT雌二醇项目可以使用人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素锂（包括血浆分离管）或EDTA钾抗凝管中的血浆。

3.2标本溶血超过+卄以上的情况下退单。

3.3稳定性：2-8°C可稳定7天3.4样本贮存：2-8°C保存10天4.试剂和仪器4.1试剂成分：4. 1. 1检测试剂盒ARCHITECT孕酮测定试剂盒（7K72）微粒子：1瓶或4瓶（9.9ml）雌二醇抗体（兔，单克隆）包被的微粒子，储存于含有蛋白（兔）稳定剂的TRIS/BIS TRIS缓冲液中。

免疫定性试验的室内质量控制

免疫定性试验的室内质量控制浙江省人民医院检验中心陈永健免疫定性试验免疫定性试验：只有两种检测结果（例如：阳性/阴性、存在/不存在、有反应的/无反应的）的方法。

半定量免疫试验：结果报告为阴性、+1、+2、+3或滴度（1:8等）的方法（例如抗核抗体（ANA）滴度报告、梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）检测等）。

中华人民共和国卫生行业标准临床定性免疫检验重要常规项目分析质量控制指标（征求意见稿）2012-2-8免疫定性试验（胶体金）免疫层析试验（ICA）免疫渗滤试验（IFA）传染性标志物（HBV、HIV）激素（HCG、LH）心损标志物（cTNI、CKMB）金标免疫层析试验的室内质量控制质控区/对照区是室内质控？质控区质控区HCG金标试纸检测原理质控区呈色，反映了检测过程的无失误，但不能完全说明灵敏度有无变化，即不能用“质控线”来代替对试纸条质量的评价。

你在，或者不在，我都在这里。

HBsAg批批检？免疫定性试验如凝集试验、金标记免疫层析试验大都属于CLIA’88豁免的技术。

FDA等批准家庭使用的技术，只要求检测装置有内对照，检测结果满足说明书规定即可。

对于需要经验来判定结果的技术仍需在实验室进行，均有质控的要求，但国际上无具体操作的规定和资料。

美国CDC在“CLIA”88豁免的HIV抗体快速检测质量保证指南<2007年版>中要求：除检测装置的内对照外，每检测日或分析批，应使用弱阳性和阴性外对照作为质控。

无判定标准，一般理解为阴、阳性质控的检测结果分别为阴性和阳性即表明在控，相反则为失控。

金标记免疫层析试验的猜想质控物：阴性和弱阳性外对照质控频度：检测日或分析批为单位质控判断：阴、阳性质控物的检测结果分别为阴性和阳性即表明在控。

ELISA的室内质量控制〖临床ELISA操作中的注意事项和质量控制〗尽量控制可控因素：加样量、温育温度、洗涤次数/洗涤量、酶标仪等。

减少不可控因素引起的误差：酶标板质量、温育时间等。

免疫学检验室内质量控制的标准操作程序

免疫学检验室内质量控制的标准操作程序【目的】保证ELISA检测结果准确可靠，充分发挥其方法学的优点。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【方法】【分析前质控】1.人员培训实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识：[1]检验项目的基本原理（ELISA原理）；[2]临床意义；[3]熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；[4]熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）[5]熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。

[6]某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。

2.室内质控血清的制备：[1]收集阳性血清（无明显溶血、黄胆、脂肪血和污染血清，到一定量（够本室使用3-6个月的量）；[2]传染性病毒阳性需经56C、10小时灭活后使用；[3]过滤，除纤维沉淀物；[4]稀释，用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释；[5]测定值，与定值参考品进行对比、求值，一般定在Cut Off值附近的阳性值；[6]分装小瓶（每日用量），加盖、贴签，-20C冻存备用【试剂盒选择】卫生部规定乙肝试剂，丙肝试剂，艾滋病试剂，梅毒试剂及血型试剂必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格，并贴有防伪标签的产品。

【试剂盒评价】试剂评价需要有权威的血清考核盘（Panel）进行检测，价格昂贵，操作繁琐，一般实验室不易开展，可以通过以下信息，了解试剂质量。

1.根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告，了解其质量水平，按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂；2.通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣；3.参考室间质评报告中对试剂的评价结果，了解不同试剂的质控成绩。

4.根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。

月生化免疫组室内质控小结

2017年2月生化免疫组室内质控小结本月我室对部分项目的操作人员进行了优化组合，并对相应人员进行了操作流程的规范化培训，对在整个流程中先做什么，后做什么都进行了强调。

所以本月质控结果出现的失控现象较少，但其中也暴露出了一些问题，现总结如下：1、传染病项目。

该系列项目本月只出现一次失控结果，该结果是由于操作人员在进行仪器保养时，没有仔细擦拭采样机构和清洗机构的每一根针，没有及时发现并清理其上附着的纤维蛋白，致使质控结果出现异常。

2、甲功肿瘤项目。

甲功系列项目本月质控较好，无失控记录，精密度较好，整体结果较理想。

肿瘤及内分泌激素类本月较上月有所好转，也无失控记录，但结果波动较大，精密度较差，仪器性能不是很稳定，需要常常联系工程师对仪器进行维护及保养，并且对项目进行标定的次数较频繁。

3、心肌及贫血项目类。

本月我室着重对该组的人员进行了优化，并对操作流程进行了规范化培训，对一些常见问题进行了集中处理。

本月是启用的新批号质控品，我们严格按照操作规程及质控品说明书的要求来进行操作，所以本月的所有质控结果都在质控范围内，结果的准确度和精密度都较理想，没有出现失控的现象。

4、生化项目。

干化学项目，本月我们吸取了上月的经验教训，着重观注仪器本身性能及周围环境条件，对试剂干片及需复溶的质控品和定标品都按要求恢复室温后再进行处理，及时纠正对仪器检测有影响的不利因素，本月的质控结果较上月有了较明显的改善，只出现一次失控记录。

湿生化项目。

项目数量较多，质控品也有好几种，既有复合的，也有单个项目的。

本月操作人员在工作态度和责任心都有了较大的提升，所以失控的情况较少，但是还是有出现双试剂批号不一致、更换试剂时用力震摇，使试剂出现气泡，导致试剂成份均一性变差，检没结果异常的现象出现。

综上所述，虽然本月质控结果较上月有了一定的改善，但也出现了一系列的问题。

需要我们操作人员继续做好下列改进措施：1、实验前充分混匀试剂，试剂收到后应立即放入低温环境保存，防止因试剂保存不当出现的试剂变质等现象出现；2、每日检查室内温湿度是否符合仪器要求；3、对标本进行正确的前处理，保证标本符合检测的要求；4、定期按要求对仪器进行清洁保养，使仪器保持最佳的工作状态。

【文件】性激素结合球蛋白检测作业指导书医学检验

【关键字】文件《文件已阅声明表》《Procedure circulation form》《Procedure amendment form》《文件信息表》《Procedure information form》性激素结合球蛋白检测作业指导书(Analysis of SHBG by IMMULITE 1000)1. 原理（Test principle）:固相、学发光免疫量度检测法(a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay)：包括免疫反应和化学反应,利用在化学反应中释放大量自由能产生激发态中间体,当其回到稳定的基态时,同时也发射出光子，利用发光信号测量仪对所发出的光量子进行定量测量。

2. 样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）:标本收集（specimen collection）:血清(serum);单次用量(volume)200μl，仪器加样量(sampling volume)50μl（样本杯中加样量至少要超过检测总用量100μl）拒收标本（Specimen rejection）：严重脂血（lipoprotein）样本应拒收。

脂血（lipoprotein）可能会干扰检测,推荐使用超速离心清除脂血（lipoprotein）样本。

溶血（hemolysis）样本提示样本在送达实验室之前处理不当，因此检测结果将受到影响，应予以注意。

血清（serum）样本在未充分凝集前离心将导致纤维蛋白的存在。

为躲免纤维蛋白对结果的影响必须确保离心处理前样本已经完全充分凝集。

对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间。

源于不同生产商的血样收集试管，由于原材料和添加剂不同，包括凝胶或物理涂层、促凝剂和/或抗凝剂，可能导致得到不同的结果。

本试剂盒没有对所有可能应用的收集管类型进行测试。

推荐使用超速离心法清除脂血样本.溶血样（hemolyzed sample）提示样本在送达实验室之前处理不当，因此检测结果将受到影响，应予以注意。

雌二醇测定标准操作规程

雌二醇测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：雌二醇测定（缩写E2）；组合项目申请：女性激素检查组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆标本，用肝或EDTA 抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。

2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆,避免溶血。

离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定2d，在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，早上或上午采血。

3 方法原理采用竞争性酶联免疫发光分析法。

标本与包被了羊抗兔IgG-兔抗雌二醇复合物的磁性微粒子反应，20分钟后，加入雌二醇-ALP结合物，标本中雌二醇与碱性磷酸酶标记的雌二醇竞争结合磁性微粒子上抗雌二醇抗体有限的结合位点，最后抗原抗体复合物与固相化的捕获抗体结合形成微粒子-羊抗兔IgG-兔抗体-（雌二醇或雌二醇-ALP）免疫复合物。

经磁性分离，洗涤洗去未结合的物质，加入化学发光底物Lumi-Phos 530，经碱性磷酸酶的作用产生光子，光子的量与标本中雌二醇的量成反比，由多点校准曲线求得标本中雌二醇的浓度。

临床医学实验室管理之检验中的质量控制

（一）质控品
宜选择商品化质控品，尽量覆盖临床报告涉及的基础检测项目。至少选择2个不同浓度水平，一般为正常和病理水平的质控血清。购买的冻干质控血清到科室后必须有1年至1年半以上的有效期，按质控血清的要求储存，使用时按要求加入稀释液或蒸馏水复溶，复溶后的质控血
清用1mlEp管分装保存，每天取出12支进行测定。的具体情况规定每个分析日的最少质控频率。
质控图
• 质控图是以质控品的检测结果作为Y轴，时间作
为X轴绘制的统计图表。
•
•
目前运用最广的质控图为Levey-Jennings图
关键在于质控界限的确认以及质控规则的使用
质控界限
• 中心线—质控品靶值的累积
•
上、下控制界限 —预期的质控变异系数
质控规则
分装后的质控血清稳定时间在2-8℃时不少于24小时，-20℃时不少于30 天，不稳定成分(如胆红素、碱性磷酸酶) 在复溶后前4h的变异应小于2%。
复溶后的质控品的瓶间变异应不变，但对一些不稳定的成分(如胆红素、
血糖和酶类等)，瓶间变异的CV值不能超过未复溶质控品CV值的1.5倍。
1. 靶值和质控限的确定
（6）红白细胞区分计数（7）人工镜检标本的制备：使用离心制片法对体液标本进行制
备、染色能够保证最佳的细胞收集率以及形态学完整性。
（8）恶性肿瘤细胞的确认：当怀疑细胞学标本中存在肿瘤细胞，应该在报告发放前由实验室有资质的人员（最好是由检验医师或病理医师）进行确认。（9）形态学人员的定期考核和评价 2.仪器法检测室内质控：每检测日至少2个不同的配套质控物的检测
新批号质控品平行测定三天，每次测定至少间隔
2 小时，共测定 10 次，得到 10 次 RBC 计数结果（ 6.32 ， 6.29,6.38 等），计算平均数为 6.31 ，作为 RBC 计数质控图中心线。 CV 采用 3 至 6 月的质控累计变异系数3%，乘以质控均值，得到SD值，即为质控图上下界限值。

检验科性能验证方案(仅供参考)

。和批内变异系数 CV（%）
批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本 20 次，同一批号室内质控品某一时间段（至少 20 天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。 1.1.3 结果判断
其中： D：表示总共检测天数(D=5)； n：单个样本每天重复检测的次数(n=4)； xdi：每个样本每天四次单独检测的结果； xd：每个样本每天四次检测结果的算数均数； xt：单个样本每天检测结果的算数均数的算数均数。 4.1.3 结果判断（可参考）
4.1.3.1 于批内精密度的判断，具体的计算和判断过程： 1)按照下述公式计算出批内精密度的自由度 ν。
1.2 正确度 1.2.1 卫生部临检中心室间质评含盖的项目，则以卫生部临床检验中心室间质评结果为
准；成绩在 80%者即为验证通过。 1.2.2 卫生部临检中心室间质评未涉及的项目，通过仪器之间的比对来实现，以参加卫
生部临检中心的室间质评的作为比对基准仪器，其最近 1 次参加卫生部临检中心的室间质评结果。采用 5 个患者的样本，样本浓度水平尽量覆盖测量范围，包括医学决定水平。计算在医学决定性水平下的系统误差（偏倚%），偏倚= ︱测定值-靶值︳/靶值*100%，偏倚%应<1/2 CLIA’88 或卫生部临检中心室间质评最大允许误差，80%以上的数据符合以上要求即为通过。成绩在 80%以上者即为验证通过。 1.3 线性范围 1.3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系，从而保
D：表示总共检测天数(D=5)； n：单个样本每天重复检测的次数(n=4); 因此，按照我们的验证方案，批内精密度(Swithin)的自由度为 15。 2)按照下述公式计算出 C 值百分点。

怎样做好免疫室项目室内质控及防范措施

怎样做好免疫室项目室内质控及防范措施一、免疫室项目室内质量控制的内容1、定性试验所有的ELISA法，包括HCV、HIV、HA V、TP、乙肝五项等。

免疫定性试验质量控制ELISA定性试验的临床意义在于是否检出病原体，与检出量无关，因此QC 要保证试验的灵敏度和特异性。

我们使用临界值血清界定法：将试剂盒所设的阴阳性对照作为内对照指示反应；另设临界值质控血清，与标本同时检测。

临界值S/C.O应该为2～4之间，正常人血清OD值在0.05~0.07 之间。

临界值质控血清可以作为试剂盒中的阳性对照品和阴性对照品以外的第三个对照品，它可以灵敏地反映出试剂盒的检出水平，确保弱阳性反应的标本不漏检。

一般最常用的是Levey-Jennings质控图，以最初20个数据和3-5个月在控数据汇集的所有数值作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以后室内质控图的平均数。

在求出均值及标准差后确定控制限，±3S作为上下控制限。

2、定量试验化学发光相关项目(AFP、CEA、CA125、CA199、CA153等)免疫定量试验质量控制包括激素类，糖类抗原等，这些物质在体内有一定的量（正常范围），超出这个量才呈病理情况，故需定量测定。

二、质量控制基本概念质量控制是监视全过程，排除误差，防止变化，维持标准化现状的一个管理过程。

这一过程是通过一个反馈环路进行的。

室内质控所用的质控血清是已知的有靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果来了解本次检验的情况。

质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内，就说明该检验没有发生不允许的误差。

如果出现超过允许误差范围的异常结果，提示该检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检待测标本。

因此质控血清在质控工作中起重要作用。

质量控制主要采用质控图进行。

质控图是把某一检验的性能数据与所计算出来的预期的"控制限"进行比较的图。

这种性能数据是在按规程正常进行时，按时间顺序而抽选出来的，其目的是检测检验过程中变异的"可追查"性原因。

免疫室室内质控程序操作规范

e) 线性测定：用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液，于490nm平行测8次，取其均值。计算其回归方程，相关系数及标准估计误差s，并用1.96s表示样品测量的误差范围.双波长测定评价：取一分甲基橙溶液，分别加入3种不同浓度的溶血液（测定波长为490nm，校正波长为585nm），先后于8个通道检测，每个通道测3次，比较各组之间是否具有统计学差异，以考察双波长消除干扰组分的效果。
⑴ 先将测定值从小到大排列，X1最小，Xn最大；
⑵ 计算X和s；
⑶ 计算SI上限值和下限值。SI上=（X最小-X）/S，
SI下=（X最大-X）/S
⑷ 对照SI表，检查是否出控，SI上、下限≤规定值，在控；SI上或下限>规定值，失控。
4.检验项目的基本原理（ELISA原理）；
5.临床意义；
6.熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；
7. 熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；
8.熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。
9.某些特殊项目检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。
定量分析：严禁用定性试剂盒做定量分析。
⑴ 用已知量的系列标准品，绘制标准曲线，结果以绝对量或单位表示。ELISA的标准曲线每次都要和待测标本做在同一块板上。
⑵ 现有的ELISA定量试剂盒标准曲线只有在较窄的浓度范围内成直线，要得到精确的结果实属不易。
3.3.2记录
⑴ 所有实验的原始资料均应存档；所有的记录均ห้องสมุดไป่ตู้规范登记在册；原始登记表应记录试剂来源、批号；质控血清的来源及测定值并注明是否在控；签上实验者姓名及审核者姓名。
3.2.4 显色
⑴ HRP催化底物的一步呈色反应，同样需要一定的时间和温度，一定要按照说明书规定的时间温度（一般为37C，10-15分钟）恒定反应后终止；

性能验证 1.0

性能验证1 生化生化室项目需要验证的参数包括批内精密度，批间精密度、正确度、线性范围、参考区间、最大稀释倍数和可报告区间、携带污染等，适用时，还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时，可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。

1.1精密度1.1.1 标本准备及要求可采用新鲜或冻存的样本。

当样本中待测物不稳定或样本不易得到时，也可考虑使用基质与实际待检样本相似的样本，如质控品。

应至少评估 2 个浓度水平样本的不精密度。

当 2 个浓度水平样本的不精密度有显著差异时，建议增加为 3 个浓度水平。

所选样本的被测物水平应在测量区间内，适宜时，至少有 1 个样本的被测物水平在医学决定水平左右。

注 1：通常较高值样本的不精密度较小，较低值样本的不精密度偏大。

对低值有临床意义的检测项目，宜评估有判断价值的低水平样本的不精密度。

注 2：如检测结果没有明确的医学决定水平，可在参考区间上限左右选1个浓度，再根据检验项目的特点在测量区间内选择另一个浓度。

注 3：如与厂商或文献报导的不精密度比较，所选样本水平宜与被比较的样本水平接近。

1.1.2 方案1.1.2.1 方案1：对验证材料每天分析1批次，2个浓度水平，每个浓度重复测定4次，连续测定5天。

记录检测结果并计算均值、标准差和批内、批间变异系数CV（%）。

1.1.2.2 方案2：批内精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测混合的新鲜临床标本20次。

记录结果并计算均值（X）、标准差（SD）和批内变异系数CV（%）。

批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。

生化分析系统方法学性能验证标准操作程序

生化分析系统方法学性能验证标准操作程序1.目的对生免组检测项目进行性能验证，以保证所采用的相关试剂盒的分析性能能满足临床检测的要求和实验室的质量目标。

2.范围适用于生免组引进的检测系统，包括1.首次引入的检测系统2.引入的新项目3.修改原有检测系统或检测项目的检测参数4.仪器更换了涉及检测的部件。

3.验证前准备3.1仪器设备的准备:根据生免组仪器设备的维护保养程序, 验证前，实验人员或请仪器厂家工程师对验证过程中需要用到的仪器设备进行全面的维护保养，以确保所涉及的仪器设备处于正常运行状态。

3.2试剂的准备3.2.1试剂盒的准备：验证前，确保足够用于验证的同批号试剂盒，如可能，可以再适当准备一些另一批号的试剂。

3.2.1室内质控品的准备：按照《生化定量室内质量控制标准操作程序》规定的室内质控品购买和制备方法进行准备。

4.拟验证参数的确定按照ISO15189要求，生化项目需要验证的参数包括测量精密度、正确度、线性范围、生物学参考区间、可报告区间等。

要求检测过程中采取质量控制措施，尽可能保证检测系统处于一个稳定状态。

5.精密度实验5.1标本来源：两个浓度水平的质控品。

5.2验证周期5.2.1每个检测项目开展时验证一次。

5.2.2新装机时验证一次。

5.2.3设备更换检测部件重复性不能满足要求或更换检测系统时验证一次。

5.3验证方法5.3.1按照临床标本相同的检测方法，连续五天,每天做一批,每批每个水平4次重复测定,记录结果并计算均值、标准差和批内精密度、批间精密度（%）。

5.3.2 如果因为质量控制程序或操作问题判断一批失控，应剔除数据，并增加并执行一个分析批，剔除量小于综总测量数据的5%。

5.3.3正常使用每日质控品。

5.3.4按照厂家的操作说明进行校准。

5.3.5有效数据处理：见下表。

5.5结果判断结果判读：以批内变异系数＜1/4TEa允许范围为最大允许偏移值；批间变异系数＜1/3TEa允许范围为最大允许偏移值。

PCT

1.检测方法及原理PCT是降钙素（CT）的激素原。

CT是由激素刺下的甲状腺C-细胞分泌的，PCT则在促炎症反应刺激下，尤其是细菌激发所引起的促炎症反应刺激下可由多种细胞类型和器官产生。

本试剂盒是结合一步免疫测定夹心法和最终荧光检测法来进行检测。

作为固相及移液装置。

底物（4-甲基伞形酮酰磷酸酯）在SPR中循环进出。

结合物酶催化该底物水解生成一种荧光产物，于450nm处检测其荧光值。

其荧光强度与样品中抗原的浓度成比例。

2．标本采集及干扰因素2.1采血方法空腹或随机采集肝素抗凝血或不抗凝血2—3ml。

2.2标本保存在采集4小时内离心分离标本。

室温（18-28℃）≤4小时；冷藏（2-8℃）≤3天；冷冻（≤—18℃）≤6个月。

2.3注意事项可用人血清或血浆。

患者动脉血样品中测得的PCT值比其静脉血样品中测得的值高4%。

标本应避免脂血与溶血与黄疸可对结果造成干扰。

3试剂和准备3.1试剂60PCT试剂条和定标品试剂盒。

3.1.1试剂组成：TRIS NaCl吐温（PH7.3）碱性磷酸酶标记的小鼠单克隆抗人降钙素原免疫蛋白+防腐剂。

3.1.2试剂准备：从冷藏处取出需要的试剂平衡到室温待用。

3.1.3试剂的储存与稳定性：将试剂盒保存在2-8℃。

不得冷冻试剂，除了重溶后的校准品和对照品。

所有试剂盒成分在标签所示有效期内均能保持稳定状态。

3.2对照品PCT对照品。

3.3校准品PCT定标品。

3.4仪器miniVIDAS全自动荧光免疫分析仪。

4.操作程序4.1检测流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。

4.2样品签收严格按标本接收程序签收标本。

4.3标本处理以2500-3000r/min,离心5-10分钟，分离标本上机测定，若标本不能及时检测，请按“2.2标本保存”保存标本。

4.4标本检测从冷藏处取出试剂→每份待测样品分别使用一条“PCT”试剂条和一个“PCT”SPR，重新仔细密封密封物袋→将试剂条插入仪器中立即开始检测4.5检验后标本保存检验后标本保存到检验科一楼的已检测样品保存冰箱里。

性激素复合质控品产品技术要求丹大生物

性激素复合质控品
适用范围：本质控品为冻干品，与本公司性激素检测试剂盒配套使用，用于孕酮、睾酮、雌二醇、泌乳素、促卵泡生成激素、促黄体生成素及β-人绒毛膜促性腺激素7个产品的室内质量评价。

1.1规格
0.5ml×2；1mL×2（2水平，冻干品）
1.2组成
试剂盒组成见表1
表1性激素复合质控品组成
注：质控品赋值具有批特异性，每批次靶值详见靶值单。

2.1 外观
外包装完整无破损，质控品为冻干疏松体，复溶后为淡黄色至棕黄色液体。

2.2 预期结果
试剂盒内的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.3 均匀性
瓶间均匀性CV应不大于10%。

2.4稳定性
2.4.1 复溶稳定性
质控品复溶后在2℃～8℃密封避光保存24h。

检测复溶后的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.4.2 效期稳定性
试剂有效期为12个月。

取到效期后试剂盒进行检测，测定结果应符合2.2项要求。

Prog室内质控的PDCA管理

Prog室内质控的PDCA管理一、发现问题2018年10月8日，在对第三季度（7、8、9月）迈克IS100质控项目进行分析评价时，发现Prog质控在9月3日后质控值1S-2S质控线之间徘徊，均低于靶值。

违背了10X规则，属于系统误差的表现。

二、原因分析1、Prog质控属于激素类，是干粉粉末，质控使用前需要复溶，不同人员复溶方式不一，导致的瓶间差异。

2、质控在分装时，分装量不一致，导致质控量不足。

3、迈克IS1200加样器是枪头，枪头与加样杆间气密性不好，导致吸样量不足。

4、8月中旬新加试剂是大包装量（100人份），试剂开瓶试剂过长，导致试剂挥发，试剂理论值与实际值不符或试剂变质。

5、Prog试剂与上一盒试剂批号一致，当时操作人员未校准直接使用批内线所做质控。

6、清洗液洗液桶未定期清洗，底部有结晶，反应杯未清洗干净。

三、主要原因1、九月份质控在分装时，多分装了两支质控，导致每支质控量不足300ul，仪器加样时，Prog 为最后加的项目，除去死腔量外，Prog加样就不足自身所需50ul，仪器又未报警，而未发现异常。

2、8月中旬新加试剂是大包装量（100人份），试剂开瓶试剂过长，导致试剂变质。

3、剂与上一盒试剂批号一致，当时操作人员未校准直接使用批内线所做质控。

四、制定计划（P）为保证检验结果的准确性，争取类似情况不要发生。

为实现这一目标，免疫室制定以下措施：1、在复溶质控时，尽量同一人操作，分装时，尽量保证质控样本量充足。

质控复溶分装后，冷冻保存，不要反复冻融。

2、我院Prog申请项目少，购买试剂时，选用小包装量试剂，以保证试剂质量。

3、在使用新试剂时，先校准，在做质控。

4、仪器定期维护保养，做到日保养、周保养和月保养。

五、实施执行（D）2018年10月10号组织科室成员对迈克IS1200仪器（仪器结构、操作软件、试剂保存、质控复溶等）进行培训，并现场操作考核，考核结果人人过关，同时针对此次考核过程中发现的问题，做出以下规定，从即日执行：1、仪器每日开关机，并做开关机维护。