第1节基因工程的基本原理和技术

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《生物技术概论》1基因工程

《生物技术概论》1基因工程

二、目的DNA片段的获得
(三)DNA片段的化学合成 1.合成引物 2.合成DNA寡核苷酸连杆 3.合成基因片段

第二节 DNA重组

三、DNA片段的连接
(一)DNA连接酶 (二)DNA片段之间的连接 1. 互补黏性末端片段之间的连接 2.平末端DNA片段之间的连接 3.DNA片段末端修饰后进行连接 4. DNA片段加连杆或衔接头后连接

(六)基因可以通过复制把遗传信息传递给下 一代
第一节 基因工程概述

三、基因工程操作的基本技术路线
第一节 基因工程概述

四、基因工程研究最突出的优点

打破了常规育种难以突破的物种之间的界限, 可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物 之间,甚至人与其他生物之间的遗传信息进行 相互重组和转移。人的基因可以转移到大肠杆 菌(E.coli)中表达,细菌的基因可以转移到动 植物中表达。
第二章 基因工程
第一节 基因工程概述

一、基因工程的含义

按照人们的愿望,进行严密的设计,通过体外 DNA重组和转移等技术,有目的地改造生物种 性,使现有物种在较短的时间内趋于完善,创 造出新的生物类型,这就是基因工程的基本含 义。
第一节 基因工程概述

二、基因工程研究的理论依据
(一)不同基因具有相同的物质基础 (二)基因是可以切割的 (三)基因是可以转移的 (四)多肽与基因之间存在对应关系 (五)遗传密码是通用的


质粒基因组、病毒(噬菌体)基因组、线粒体 基因组和叶绿体基因组也有少量的基因
第四节 目的基因的制备

二、分离目的基因的途径

(一)利用限制性内切核酸酶酶切法直接分离 目的基因

新教材高中生物第3章基因工程 基因工程的基本工具与聚合酶链式反应PCR技术教师用书苏教版选择性必修3

新教材高中生物第3章基因工程 基因工程的基本工具与聚合酶链式反应PCR技术教师用书苏教版选择性必修3

第一节基因工程及其技术第1课时基因工程的基本工具与聚合酶链式反应(PCR)技术课标内容要求核心素养对接1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的。

2.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。

生命观念:掌握基因工程的基本工具的种类及作用,并能说出它们在基因工程中的应用。

科学思维:掌握PCR技术的过程与原理,并能正确比较PCR技术与体内DNA复制的异同。

社会责任:通过了解基因工程的发展历程,认同新技术的发展是一代又一代科学家前赴后继努力的结果,并会给人类发展带来巨大的经济效益和社会效益。

一、基因工程是在多学科基础上发展而来的1957年:科恩伯格等首次发现DNA聚合酶。

↓1967年:罗思和海林斯基等发现运转工具质粒,同年,科学家发现DNA连接酶。

↓1970年:特明和巴尔的摩各自在RNA病毒中发现逆转录酶。

史密斯等人分离到限制性内切核酸酶。

↓1972年科学家伯格领导的研究小组完成了世界上首次DNA分子体外重组。

↓1973年科学家科恩领导的研究小组利用大肠杆菌质粒进行了另一个体外重组DNA分子实验。

↓接着,科恩和美国博耶证明真核生物的基因可以在原核生物中进行表达。

↓1976年,科学家用质粒为载体,将生长激素释放抑制因子基因转入大肠杆菌,1977年首次生产出治疗肢端肥大症、巨人症的生长激素释放抑制因子。

↓1977年桑格测定了一种噬菌体的基因组序列,这是人类首次对完整基因组的核苷酸顺序进行测定。

二、基因工程的基本工具1.基因工程(1)概念:又称为DNA重组技术,是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,将外源目的基因与载体DNA进行组合形成重组DNA,然后导入受体细胞,并使其在受体细胞中表达,产生人类需要的基因产物的技术。

(2)原理:基因重组。

(3)操作水平:基因(分子)水平。

2.“分子剪刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)(1)作用:识别DNA分子上特定的脱氧核苷酸序列,并使每条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

第一章 基因工程概述

第一章 基因工程概述

或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。
因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基
本元件。
基因工程的基本概念
B 基因工程的基本定义
基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,
包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的
是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技
术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模
酶工程
基因工程的基本概念
D 基因工程的基本形式
第一代基因工程 蛋白多肽基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白编码基因的定向诱变 蛋白质工程
第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程
第四代基因工程 基因组或染色体的转移
基因组工程
第二节 基因工程的诞生和发展
一、基因
泛基因阶段
孟德尔遗传因子阶段
(如胰岛素)、干扰素、乙肝疫苗等 研制新型疫苗(HIV、霍乱、单纯疱疹病毒等)
生产具有药用价值的生物制剂,如水蛭素等
3. 基因诊断
– 遗传性疾病的分子诊断
– 癌症的分子诊断 – DNA指纹
4. 基因治疗
是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异 常引起的疾病,以达到治疗目的。
3.断裂基因
1个基因被间隔区分成不连续的若干区段,这种编码序列不连续的间断基因被称为 断裂基因。
4.假基因
不能合成出功能蛋白质的失活基因 。
5.重叠基因
不同基因的核苷酸序列有时是可以共用的 即重叠的。
现代对基因的定义是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列, 是遗传物质的最小功能单位。
二、 基因工程的诞生
顺反子阶段
1957 年,本泽尔(Seymour Benzer)以T4噬菌 体为材料,在DNA分子水平上研究基因内部的精细结 构,提出了顺反子(cistron)概念。 顺反子是1个遗传功能单位,1个顺反子决定 1条多肽链。

分子生物学与基因工程

分子生物学与基因工程

分子生物学与基因工程引言:分子生物学与基因工程是现代生物学领域中最为重要和前沿的研究方向之一。

分子生物学研究了生物体内分子的结构、功能和相互作用,而基因工程则利用分子生物学的原理和技术,对生物体内的基因进行操作和改造,以实现对生物体的控制和改良。

本教案将分为三个小节,分别探讨分子生物学的基础知识、基因工程的原理和应用以及分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用。

第一小节:分子生物学的基础知识(700字左右)1. 分子生物学的起源和发展- DNA的发现和双螺旋结构的揭示- 中心法则的提出和基因的概念- 分子生物学的研究方法和技术的发展2. DNA的结构和功能- DNA的化学组成和结构特点- DNA的复制、转录和翻译过程- DNA的遗传信息传递和遗传变异3. RNA的结构和功能- mRNA、tRNA和rRNA的功能和作用- RNA的修饰和调控- RNA在基因表达中的重要性第二小节:基因工程的原理和应用(700字左右)1. 基因工程的基本原理- DNA的重组和修饰技术- 基因的克隆和表达- 基因组编辑和定点突变2. 基因工程在农业领域的应用- 转基因作物的培育和应用- 抗虫、抗病和耐逆性的改良- 农作物品质和产量的提高3. 基因工程在医学领域的应用- 基因治疗和基因药物的研发- 基因诊断和个性化医疗- 基因工程在疾病治疗中的前景第三小节:分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用(700字左右)1. 基因组学和蛋白质组学的发展- 基因组学和蛋白质组学的研究方法和技术- 基因组学和蛋白质组学在疾病研究中的应用2. 疾病基因的发现和研究- 遗传性疾病的基因定位和克隆- 疾病相关基因的功能解析和调控机制研究- 基因工程在疾病治疗中的应用前景3. 基因工程在干细胞和再生医学中的应用- 干细胞的特性和应用前景- 基因工程在干细胞治疗和组织工程中的应用- 基因工程在器官移植和再生医学中的前景结语:分子生物学与基因工程作为现代生物学的重要分支,不仅推动了生物学的发展,也为人类社会的进步和生活质量的提高做出了巨大贡献。

分子生物学常用技术及其应用

分子生物学常用技术及其应用

(二)目的基因与载体连接(DNA的重组)
主要通过DNA连接酶和双链DNA粘性末端序列互补结 合。
1、粘性末端连接 利用同种限制性内切酶切开载体和DNA分子,能产生 相同的粘性末端,在T4连接酶作用下遍可互补。
2、同聚物加尾连接 在酶的催化下人为在DNA链3‘末端添加多聚脱氧单核 苷酸,制造粘性末端。
⑵设计的引物是与模板DNA两端序列互补;
⑶引物的量远大于模板分子的量,引物与模板DNA形成双 链的几率远远高于DNA分子自身的复性。
3、适温延伸(72 ℃)
在PCR反应体系中的DNA聚合酶,能够催化反应体系中游 离的单核苷酸(dNTPs)由引物5'→3'方向,按碱基配对 的原则延伸,形成两条与模板DNA互补的复制链。
2、低温退火(模板与引物退火)
PCR通常需要两条寡核苷酸链作为 DNA合成时的引物 (primer),这两个引物分别与待扩增模板DNA的目标片 段两端的序列互补。在降低温度的过程中(一般为70-75 ℃ ,通过控制退火条件,引物就能准确地与扩增区域的两 端配对。
primers
⑴引物短,不易缠绕;
斑点及狭缝印迹杂交
直接将变性核酸固定在载体上,用探针进行杂 交。优点是一张膜同时可用多种不同探针检测
原位杂交
直接用探针和细胞内的核酸进行杂交
三、探针的特征
(一)探针的特征
1、要带有标记物 2、应是ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链 3、具有高度的特异性 4、探针长段不一,短探针杂交速率快且特
异性强
5、标记的探针应具有高度的灵敏性、稳定、 标记方法简便、安全
原核细胞表达的真核基因产物还需要进 DNA芯片技术工作流程主要包括:
逆转录反应在42 ℃进行,随后将反应混合物加热至95 ℃5min,灭活逆转录酶,取2ul反应产物,按DNA为模板的PCR反应步骤,进行 扩增反应。

《基因工程》教案

《基因工程》教案

第一节基因工程【教学目标】1.知识与技能(1)举例说出基因工程的原理,并说明“工程菌”的培育过程。

(2)举例说出基因工程在工农业生产和医疗方面的应用。

(3)能正确认识转基因生物的安全性。

2.过程与方法通过调查活动和动画演示等方法探究基因工程在生产生活中的应用,提高信息整合能力。

3.情感态度和价值观通过学习基因生物技术及产品安全性对人类的影响,培养学生辩证看待生物技术的态度。

【教学重点】(1)“工程菌”的培育过程。

(2)基因工程的应用。

(3)转基因生物的安全性。

【教学难点】(1)基因工程的原理及大致操作过程。

(2)转基因技术和产品的安全性。

【课前准备】多媒体课件【课时安排】1课时【教学过程】一、导入新课播放视频:《美国科学家培育出首批转基因婴儿》据国外媒体报道:美国科学家成功培育出了世界首批转基因婴儿,这些健康宝宝在出生前都经历过一系列基因科学实验。

该事件在美国甚至在全球都激起了关于伦理的激烈争论,一方面体现了科学家希望通过改变人类生殖细胞基因培养出正常、健康的婴儿,另一方面有悖人类的伦理观。

关于转基因技术,你们都有哪些了解呢?这节课,我们就来学习基因工程及其应用。

二、新课学习在美国马里兰州有个小女孩,她体内的某个基因与正常人不同,无法合成有分解氨基毒素功能的酶,导致其免疫功能严重低下,只能生活在无菌的隔离帐内。

1990 年,当小女孩4 岁时,医生们用基因治疗的方法使她的病情大为缓解,由此她成为世界上接受基因治疗的第一人。

基因治疗是基因工程研究的一个重要方面,虽然目前还处于试验阶段,但它已经为我们展现了生物工程的美好前景。

视频:《基因工程与医学》(一)基因工程的原理基因工程的原理:各种生物的DNA 在组成方式上是相同的,基因蕴含的遗传信息在动物、植物和微生物之间也是相通的,一种生物的基因在另一种生物体内同样可以得到表达。

相关链接:质粒有些细菌除核区固有的遗传物质以外,其细胞质中还存在一种相对独立的环状DNA 分子,我们称之为质粒。

基因工程及其应用

基因工程及其应用
运用基因工程设计制造的“DNA探 针”检测肝炎病毒等病毒感染及遗传缺 陷,不但准确而且迅速。
通过基因工程给患有遗传病的人 体内导入正常基因可“一次性”解除 病人的疾苦。
3、基因工程与环境保护
⑴ 环境监测: 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地
检测环境中的病毒、细菌等污染。
1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来
质粒是基因工程最常用的运载体。
绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。 有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个。
• 大肠杆菌的运质载粒体:
1.能够在宿主细胞最常内用复的质粒是大肠杆 制并稳定保存菌;的质粒,其中常含有抗药 2.具有多个限基制因酶,如切四点环素的标记基因。
以便与外源基因质相粒连的存;在与否对宿主细 3.具有标记基胞因生,存没便有于决定性作用,但 进行筛选. 复制只能在宿主细胞内成。
转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯
转鱼抗寒基 因的番茄
不会引起过敏的转基因大豆
超级 动物
导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠
特殊 动物
2、基因工程与医药卫生
⑴ 基因工程药品的生产
许多药品的生产
是从生物组织中提取
的。受材料来源限制
产量有限,其价格往 往十分昂贵。
第1节 基因工程及其应用
一、基因工程——分子水平改变生命
1、概念:是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并 通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物新的 遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物 类型和生物产品。
通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种 生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然 后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物 的遗传性状(目的)。

基因工程技术与应用知识点

基因工程技术与应用知识点

基因工程技术与应用知识点
1.基因工程技术的原理
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个物种中剪切并插入到另一个物种
的DNA中。

首先,需要获得目标基因的DNA序列,然后通过PCR扩增得到
足够多的目标基因的DNA片段。

接下来,将目标基因的DNA片段与质粒进
行连接,形成重组质粒。

最后,将重组质粒导入宿主细胞中,使其进行复
制和表达。

这样,目标基因就被克隆到宿主细胞的基因组中。

转基因是指利用基因工程技术将外源基因导入目标细胞中,使其产生
新的功能或性状。

转基因主要通过两种方法实现:直接注射外源基因或利
用载体导入外源基因。

直接注射外源基因常用于转基因动物的制作,而利
用载体导入外源基因则常用于转基因植物的制作。

通过转基因技术,可以
实现农作物的抗虫、抗病、抗逆性增强,以及工业酶的大规模生产等。

2.基因工程技术的应用
农业领域:基因工程技术可以用于农作物的抗虫、抗病和抗逆性提高
等方面。

通过转基因技术,可以使植物表达抗虫蛋白,减少对农药的依赖;也可以导入外源基因,增强植物的抗逆性,使其在恶劣环境下仍能正常生长。

工业领域:基因工程技术可以用于工业酶的生产,如乳酸菌发酵生产
乳酸。

此外,基因工程还可以用于生物燃料的生产,如利用转基因酵母生
产乙醇。

基因工程原理

基因工程原理

绪论第1节 基因概念与基因工程的诞生一、基因工程⒈概念:一般指利用分子生物学的手段,在体外操纵、改造、重建细胞的基因组,从而使生物体的遗传性状发生按人们的意志的定向变异。

⒉特点:基因工程能够打破种属的界限,在基因水平上改变生物遗传性,并通过工程化手段为人类提供有用的产品及服务。

3.理论上的三大发现:DNA遗传物质、DNA双螺旋、遗传密码破译。

4.技术上的三大发明:限制性内切酶、逆转录酶、载体。

T4连接酶。

第二节 基因的现代概念一、移动基因1.概念:在染色体基因组不同位置上移动的基因。

也称跳跃基因。

2.功能:异常基因功能现象的解释。

3.分类:(1)插入序列( insertion sequence,IS):原核生物中存在,长度2Kb以下。

共同结构特点:①分子末端具有一段反向重复序列;②插入位点两侧为同向重复序列;③转位酶的作用:a.催化转化因子(IS)从IR处切离,b.识别插入染色体的靶点。

(2)转位子(transposons):由几个基因组成的特定DNA片段,长度大于2Kb,其中含有一个抗菌素抗性基因,广泛存在于原核与真核生物。

二、断裂基因(split gene)--在真核生物核苷酸序列中插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区,使一个基因分隔成不连续的若干区段,此种编码序列不连续的间断基因即断裂基因。

--内含子的一般特点:①不同断裂基因内含子数目差异极大;②不同来源内含子分子大小不同;③内含子长度超过外显子;④并非所有真核生物都有内含子。

--mRNA初级转录本的剪辑:真核细胞mRNA的5'剪辑点GU开始,3'剪辑点AG结尾,为保守序列。

根据生命活动的需要可变剪辑。

三、假基因(pseudogene)--概念:在核苷酸序列上与正常功能基因基本相同,但不具功能活性的失活基因。

--根据假基因序列的特性不同分为:①重复假基因--此类假基因与亲本基因具有较高的同源性,在染色体区段上串联重复而名。

基因工程基础知识

基因工程基础知识

第一章基因工程第一节基因工程概述由于基因工程是在DNA分子水平上进行操作,因此又叫做重组DNA技术。

二.基因工程的基本工具(一)“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶)1.来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

2.功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

3.结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

(二)“分子针线”——DNA连接酶1.分类:根据酶的来源不同,可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类2.功能:恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

★两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键②区别:E.coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能使黏性末端之间连接;T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端之间的效率较低。

(三)“分子运输车”——载体1.载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存;②具有一至多个限制酶切割位点,供外源DNA片段插入;③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。

2.基因工程常用的载体有:质粒、噬菌体和动、植物病毒等。

最早应用的载体是质粒,它是细菌细胞中的一种很小的双链环状DNA分子。

三.基因工程的基本过程(一) 获得目的基因(目的基因的获取)1.获取方法主要有两种:①从自然界中已有的物种中分离出来,如可从基因文库中获取。

②用人工的方法合成。

★获得原核细胞的目的基因可采取直接分离,获取真核细胞的目的基因一般是人工合成。

★人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

2.利用PCR技术扩增目的基因(1)PCR的含义:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。

(2)目的:获取大量的目的基因(3)原理:DNA双链复制(4)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链为单链;第二步:冷却到55~60℃,引物与两条单链DNA结合;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。

基因工程的原理和技术

基因工程的原理和技术

2、形成重组DNA分子
限制性核酸 ①用一定的_________切割 内切酶 质粒,使其出现一个切 粘性末端 口,露出____________ 。 同一种限制性核酸内切酶 ②用_____________切割 含目的基因的DNA ,使其产生_____ 相同 的粘性末端 ____________。
切口 处, ③将切下的目的基因片段插入质粒的______ DNA连接酶 ,形成了一个重组 再加入适量___________ DNA分子(重组质粒)
农杆菌转化法
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,农杆 菌中细胞中含有Ti质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过 侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物染色体 中。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农 杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,然后 通过植物组织培养技术,再生出转基因植株。
5、目的基因的表达
①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 检测 方法—— DNA分子杂交(DNA探针) (分子水平) ②检测目的基因是否转录出了mRNA 方法—— 分子杂交 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法—— 抗原抗体杂交 个体水平 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
程的叙述中,错误的是 ( A ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、限制性核酸内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由载体导入受体细胞 D、人工合成目的基因不用限制性内切酶
2.有关基因工程的叙述正确的是
(
D
)
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可以作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
第一章
第二节
基因工程
基因工程的原理和技术

基因工程原理

基因工程原理

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基因工程原理
基因工程(gene engineering)常和 以下名称混用
• 遗传工程(genetic engineering); • 基因克隆(gene cloning); • 分子克隆(molecular cloning); • 基因操作(gene manipulation); • 重组DNA技术(recombination DNA technique)
义指II型限制酶。
2. 命名:限制酶由三部分构成,即菌种名、菌
系编号、分离顺序。 例如:HindⅢ 前三个字母来自于菌种名称 H. influenzae,“d”表示菌系为d型血清型; “Ⅲ”表示分离到的第三个限制酶。
EcoRI—Escherichia coli RI HindⅢ—Haemophilus influensae d Ⅲ SacI (II)—Streptomyces achromagenes I (Ⅱ)
6、将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主细胞,使之在新 的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。
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基因工程原理
三、基因工程技术及其应用
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基因工程原理
转基因植物
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基因工程原理
转基因动 物作为生 物发生器
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基因工程原理
基因本身也是一个产业
Байду номын сангаас
5)限制酶切后产生两个末端,末端结构是5’-P和3’-O

2. 末端种类
1)3’-端突起,个数为2或4个核苷酸
Pst I 5’-CTGCAG-3’ 5’-CTGCA
G-3’
3’-GACGTC-5’ 3’-G

生物技术概论_基因工程

生物技术概论_基因工程

PvuII等酶切产生的平末端
5’…G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G…3’
3’…C-G-A-G-T-C-G-A-C-C-T-C…5’
PvuII 37℃
5’…G-C-T-C-A-G-OH 3’…C-G-A-G-T-C-P
P-C-T-G-G-A-G…3’ HO-G-A-C-C-T-C…5’
4、限制性内切核酸酶反应系统 反应底物 内切酶 反应缓冲液 适当的温度
5、酶切方法
单酶切方法

一个酶切反应体系 (20μ L): 离心2S→保温1-3h(30 度或37度) →终止反应
无菌重蒸水:13μ L, 缓冲液(10×):2μ L 底物DNA: 4μ L
(65水浴中保温1015min,或乙醇沉淀处 理,或者先用酚处理后再
(2)T4噬菌体的连接酶:连接粘性末端、齐 平末端
功用:DNA重组中促使载体与DNA连接
具互补粘性末端片段之间的连接
具平末端DNA片段之间的连接
DNA片段末端修饰后进行连接
DNA片段加连杆后或加衔接头连接
二、 基因克隆载体
基因克隆载体的含义
能够承载外源基因,并将其带入受体细胞得以相对稳定维持
什么是限制性内切酶?
命名原则?
由1973年H.O Smith和D. Nathans提议的命名系统 由三部分构成,即菌种名、菌系编号、分离顺序。

1、用属名的第一个字母(大写,斜体)和种名的头两个字母 (小写,斜体)组成3个字母的略语表示寄主菌的物种名。
大肠杆菌(Escherichia coli)用Eco表示; 流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)用Hin表示。

(二)基因工程研究的理论依据(为何可对基因进行

北师版高中生物学选择性必修3生物学技术与工程精品课件 第3章 基因工程 第一节 基因工程的原理

北师版高中生物学选择性必修3生物学技术与工程精品课件 第3章 基因工程 第一节 基因工程的原理

合作探究·释疑解惑
知识点一 基因工程是在体外进行的重组DNA技术
【问题引领】 1.试分析基因工程的操作水平和操作环境。 提示:基因工程是在DNA分子水平上操作的。操作环境是体外,在体外完 成基因的剪切、加工和拼接。 2.基因工程使生物体获得新性状,这种变异属于哪种可遗传的变异? 提示:基因重组。
3.重组人胰岛素生产过程
二、遗传学等学科的快速发展为基因工程奠定了理论基础 1.基因工程的学科基础:基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分 子生物学等学科基础上发展而来的。 2.基因工程的发展(连线)
【预习检测】 1.判断正误。 (1)重组人胰岛素生产的环节之一是将编码人胰岛素基因与质粒在体外进 行拼接。( √ ) (2)质粒是细菌细胞内能够独立复制的小型环状DNA分子。( × ) (3)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体是基因工程的三大要素。
【变式训练】 1.下列有关基因工程的叙述,正确的是( )。 A.基因工程是细胞水平上的生物工程 B.基因工程的产物对人类都是有益的 C.基因工程培育的具有新性状的生物体的优点是目的性强 D.基因工程产生的变异属于基因突变 答案:C
2.图Z3-1-1为重组人胰岛素生产过程示意图。 据图分析,下列叙述错误的是( )。 A.该项技术叫重组DNA技术 B.图中质粒的本质是小型环状DNA分子 C.图中大肠杆菌细胞为供体 D.图中重组DNA能在受体细胞内复制和表达 答案:C 解析:题图中大肠杆菌细胞为受体。
根据上述材料,分析回答下列问题。
(1)害虫在喷洒农药进行化学防治后耐药性增强是
的结果。
(2)该抗虫棉的培育利用的工程技术是

(3)该抗虫棉的抗虫变异果在环境保护上的作用是

(5)材料中“毒素蛋白基因导入棉花细胞内,并使其成功表达”中的“成功表
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一、基因工程的工具
二、基因工程的操作步骤
类型检测内容方法结果显示
二、例题及练习
【典例1】►(2011·浙江卷)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。

下列叙述错误的是()。

A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
【训练1】►下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,错误的是()。

A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度影响
C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNA
D.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取。

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