人教版高中生物选修三流程图
高中生物选修3人教版1.2《基因工程的基本操作程序》(共60张PPT)优质课件
四 个 基 本 步 骤:
步骤一:目的基因的获取
目的基因是人们所需要转移或改 造的基因,
获取目的基因是实施基因工程的 第一步 。
• 目的基因的提取方法
直接分离基因
人工合成基因
反转录法
根据已知的氨基酸序列 合成DNA
(补充知识)基因的结构 1、原核细胞的基因结构
非编码区
过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂
交带,表明目的基因转录出了mRNA.
③检测目的基因是否翻译成蛋白质
方法: 抗原---抗体杂交
鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
例:用棉铃饲喂棉 铃虫,如虫吃后不出现 中毒症状,说明未摄入 目的基因或摄入目的基 因未表达。如虫吃后中 毒死亡,则说明摄入了 抗虫基因并得到表达。
化学合成
目的基因
• 哪些新技术能大大简化基因工程的操作技术?
1)DNA序列自动测序仪:
对提取出来的基因进 行核苷酸序列分析。
2)PCR技术:
使目的基因的片段 在短时间内成百万倍 地扩增。
利用PCR技术扩增目的基因
• 又称聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) 通过模拟体内 DNA 复制的方 :
根据已知蛋白质 的氨基酸序列,推测 出相应的信使RNA序 列,然后按照碱基互 补配对原则,推测出 它的结构基因的核苷 酸序列,再通过化学 方法,以单核苷酸为 原料合成目的基因。
蛋白质的氨基酸序列
推测
mRNA的核苷酸序列
推测
结构基因的核苷酸序列
段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:
95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物
人教版高中生物选修三流程图
选修三流程图一、基因工程流程图1、转基因植物的培育流程:2、转基因动物的培育流程:1、基因工程的操作工具有:。
2、基因工程的操作流程是:(1);(2);(3);(4)。
其中核心步骤是:。
3、获取目的基因的方法有:;为了获得更多的目的基因,可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有;构建基因表达载体的目的是:。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是;导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞,原因是。
6、基因表达载体的组成:。
其中启动子的作用是;标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是:(1)分子水平的检测:用放射性同位素标记的片段做探针进行分子杂交,检测目的基因是否成功转录出mRNA或用技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
(2)个体水平的检测:。
二、蛋白质工程流程图:1、工程是蛋白质工程的基础,从本质上看蛋白质工程是通过改造 , 从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图:1、植物组织培养的理论依据是: 。
2、植物细胞表现出全能性的条件: 。
3、植物组织培养的核心技术: 。
4、愈伤组织的结构特点是: 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外,还需要添加 ,目的是 。
同时在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,操作过程中还必须保证 。
6、植物组织培养技术有哪些应用? (写出三种)7、若要制作人工种子,应进行到哪一阶段? 。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇,应进行到哪一阶段? 。
四、植物体细胞杂交流程图: 1、如何去除细胞壁?2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是: 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是: 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是 。
五、动物细胞培养流程图:1、依据的原理是: 。
2、常选用的材料: 原因是 。
3、在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时,通常需加入 等天然成分。
人教版高中生物选修3全套高中精选PPT课件
比较:基因工程和蛋白质工程
23
32.用转基因技术培育出了抗TMV的 烟草,主要流程如图-21所示。
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(1)经过程②获得的目的基因两侧除应含有相 关 限制酶 的酶切位点外,目的基因的两端还必 须有 。 启运子和终止子
(2)由图分析,构建的重组质粒上含有的标记 基因是卡那霉素抗性基因。
(3)过程⑤采用的是植物组织培养技术,培养 基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成 分外,还必须添加 植物激素 ,以保证受体细胞 能培养再生成植株。
❖ 1、基因的剪刀——限制酶 ❖ 2、基因的针线——DNA连接酶 ❖ 3、基因的运输工具——运载体
4
2、基因的的针线——DNA连接酶
连接的部位: 磷酸二酯键(在“梯子”的扶手处), 不是氢键(在“梯子”的踏板处)。
结果:两个相同的黏性末端的连接。
思考
(1)用DNA连接酶连接两个相同的黏性末端要连接
❖基因工程药品的生产 ❖基因诊断 ❖基因治疗
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蛋白质工程
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与 生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成, 对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满 足人类的生产和生活的需求。
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蛋白质工程流程图
1. 从预期的蛋白质功能出发 2. 设计预期的蛋白质结构 3. 推测应用的氨基酸序列 4. 找到相应的脱氧核苷酸序列
它们有什么作用?
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3、将目的基因导入受体细胞
• 常用的受体细胞: 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、
酵母菌和动植物细胞等。 • 将目的基因导入受体细胞的原理
借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。
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(1)将目的基因导入植物细胞
人教版高二生物选修三1.2基因工程的基本操作程序课件 (共44张PPT)
7.基因工程的核心步骤是什么,目的是什么?
8.一个基因表达载体有哪几部分构成?分别什么 作用?
(二)利用PCR技术扩增目的基因
1、概念:PCR全称为__多__聚__酶__链__式__反__应__,是一项在生 物_体__外_复制_特__定__D_N__A_片__段__的核酸合成技术
检测,又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株
的耐盐性。
答案:(1)a a (2)基因枪 法(花粉管通道法) (3)植物组织培养(1分) 脱分化 (去分化) 再分化 (4)耐盐基因(目的基因) 一定 浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中)
练习
4)有关基因工程的叙述正确的是 ( D )
A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供 资料
DNA
mRNA
多肽链
转录 翻译
三维结构 折叠
预期功能 生物功能
2、目标P26:
根据人们对 蛋白质功能 的特定需求, 对蛋白质的 结构 进行分子设计。
3、实质: 基因改造
蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其 与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因 合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白 质,以满足人类对生产和生活的需求。
原核生物基因结构
非编码区 编码区上游
启动子
编码区
非编码区
编码区下游 终止子
编码区 :能转录相应的信使RNA,能 编码蛋白质
①不能转录为信使RNA,不能 非编码区 编码蛋白质。
②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列.包括启动子和终止子
基因结构
非编码区 编码区上游
人教版高中生物选修3课件1.2基因工程的基本操作程序-(共35张PPT)
精选ppt
7
非编码区 启动子
编码区
非编码区 终止子
启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能 起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。
RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结 合的一种蛋白质.
终止子:终止转录。
精选ppt
8
非编码区 启动子
RNA聚合酶
编码区
非编码区
AGGTCACGTCG TCCAGTGCAGC
推测
目推的测基因
化学 合成
精选ppt
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3’ 55’’
引物Ⅰ
高温 变性
低温 复性
1.目的基因DNA受热变性,解链; 2.引物与单链互补结合; 3.合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸。
中温 延伸
精选ppt
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PCR技术
低温 退火 复性
加热 变性
PCR循环
精选ppt
延伸
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蛋白质的氨基酸序列
mRNA的核苷酸序列
3、人工合成结构基因的核苷酸序列
用适当的限制酶酶切
一定大小的DNA片段
将DNA片段与运载体连法二:反转录法--cDNA的合成流程图 解 某种生物的单链mRNA
反(逆)转录酶
单链互补DNA
DNA聚合酶
双链cDNA片段
与运载体连接、利用PCR技术扩增目的基因
检测对象 目的基因是否导入
方法 DNA分子杂交法
分子水 平
目的基因是否转录
DNDAN-RAN分A子分杂子交杂法交法
目的基因是否翻译 抗原-抗体杂交法
人教版高中生物选修3课件:基因工程的基本操作程序11PPTPPT下载
巩固例题
图1为某种质粒简图,图2表示某外源DNA上的目的基因,小箭头所指分别为限制性核酸内 切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
B
A.在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割,则可选EcoRⅠ B.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后,再用DNA连接酶连接,形成 一个含有目的基因的重组DNA,此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个 C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ 两种限制酶同时处理 D.一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后,含有2个游离的磷酸基团
人教版高中生物选修3课件:基因工程 的基本 操作程 序11PP TPPT下 载
人教版高中生物选修3课件:基因工程 的基本 操作程 序11PP TPPT下 载
•
1应该认识到,阅读是学校教育的重要 组成部 分,一 个孩子 如果在 十多年 的教育 历程中 没有养 成阅读 的习惯 、兴趣 和能力 ,一旦 离开校 园,很 可能把 书永远 丢弃在 一边, 这样的 结果一 定是我 们所有 的教育 工作者 不想看 到的。
4.过程
质粒
重组DNA (基因表达载 体、重组限质制粒酶)
目的基因
DNA连接酶
基因表达载体的构建过程就是目的基因与运载体 的结合过程,实际上是不同来源的基因重组的过程。
P11 基因表达载体的构建----基因工程的核心
注意:
①载体与表达载体的区别:二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片 段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分 结构。 ②用到的工具酶:既用到限制酶切割载体,又用到DNA连接酶将目的基 因和载体拼接,两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键。 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少。 ④目的基因不能单独进入受体细胞,必需以表达载体的方式携带进去。
人教版高中生物选修三 1.2.1 基因工程的基本操作程序 (共47张PPT)
解旋酶催化 细胞核内 DNA聚合酶
结果
大量的DNA片段
形成整个DNA分子
3、人工合成的目的基因
1)反转录法:以目的 基因转录成的信使RNA 目的基因的mRNA在酶 单链DNA (cDNA)
的作用下合成双链DNA,
合成
从而获得所需的基因。 双链DNA
(即目的基因)
利用PCR技术扩增目的基因
PCR技术
加热 变性
PCR循环
退
延伸
火
复
性
PCR技术过程(3分钟背会): a、DNA变性(90℃-95℃):双链DNA模板在
热作用下,氢__键___断裂,形成_单__链___D_N_A___
b、退火(复性55℃-65℃):系统温度降低,
引物与DNA模板结合,形成局部___双__链___。
c、延伸(70℃-75℃):在Taq酶的作用下,
合成与模板互补的_D__N_A_链___。
(5)条件:要_有__一__段_已__知__目__的_基__因__的__核__苷_酸_、序列 四__种__脱__氧__核__苷__酸___、一__对__引__物_____ 、
_D_N_A_聚__合__酶___.等
A.PEC
B. PER
C. PDR D. PCR
二、基因表达载体的构建——基因工 程的核心(背会)
1、构建基因表达载体的目的:
使目的基因在受体细胞中稳定 存在,并且可以遗传给下一代, 同时使目的基因能够表达和发挥 作用。
2、基因表达载体的组成:
复制原点+目的基因+启动子+终止子+标 记基因
2.表达载体的功能:使目的基因 在受体细胞中稳定存在,并且遗传 给下一代,同时,使目的基因便于 获得所需的目的基因。
人教版高中生物选修三-1.2基因工程的基本操作程序课件共42张PPT
+
+
标记基因:鉴定和筛选 有目的基因的
受体细胞。
+
复制原点:启动复制
质粒
同一种 一个切口 两个黏性末端
DNA分子
限制酶处理 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶
重组DNA分子(重组质粒)
基因表达载体的组成 复制原点+启动子+目的基因+终止子+标记基因
1. 上述表达载体的启动子、目的基因、终止子、标记 基因的化学成分相同吗?
RNA链 DNA链
①双链
单链DNA ③
双链DNA
⑤
90~95℃
70~75℃
④
55~60℃
(1)催化①过程的酶是反转录酶(或逆转录酶) ___________ 。 (2)③过程也称为DNA的变性,此过程在温度高达90~95℃时才能 稳定 性。 完成,说明DNA分子具有__________ DNA聚合酶 (3)由图中信息分析可知,催化②⑤过程的酶都是__________ , 催化⑤过程的酶耐高温 两者在作用特性上的区别是___________ 。 (4)如果RNA单链中有碱基100个,其中A占25%,U占15%,则通过 60 个。 该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶______
据图回答: (1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别 用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由 目的基因-运载体连接物 两个DNA片段之间连接形成的产物有 、 运载体-运载体连接物 、 目的基因-目的基因连接物 三种 。若 要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进 分离纯化 . 行 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转 化实验。之后将这些宿主细胞接种到含青霉素的培养基中,能生 长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 运载体-运载体连接物 目的基因-运载体连接物 ;
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人教版高中生物选修三流程图选修三流程图一、基因工程流程图1、转基因植物的培育流程:转基因动物的培育流程:2、。
2、基因工程的操作流程是:(1);(2);(3);(4)。
其中核心步骤是:。
3、获取目的基因的方法有:;为了获得更多的目的基因,可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有;构建基因表达载体的目的是:。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是;导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞,原因是。
6、基因表达载体的组成:。
其中启动子的作用是;标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是:(1)分子水平的检测:用放射性同位素标记的片段做探针进行分子杂交,检测目的基因是否成功转录出mRNA或用技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
(2)个体水平的检测:。
二、蛋白质工程流程图:1、工程是蛋白质工程的基础,从本质上看蛋白质工程是通过改造 ,从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图:1、植物组织培养的理论依据是: 。
2、植物细胞表现出全能性的条件: 。
3、植物组织培养的核心技术: 。
4、愈伤组织的结构特点是: 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外,还需要添加,目的是。
同时在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,操作过程中还必须保证。
6、植物组织培养技术有哪些应用?(写出三种)7、若要制作人工种子,应进行到哪一阶段?。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇,应进行到哪一阶段?。
四、植物体细胞杂交流程图:1、如何去除细胞壁?2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是: 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是: 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是。
五、动物细胞培养流程图:1、依据的原理是:。
2、常选用的材料:原因是。
3、在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时,通常需加入等天然成分。
人教版高中生物选择性必修第3册 第2章 第2节 1 动物细胞培养
【解析】动物细胞培养的条件有适宜的营养、无菌和无毒的环境、 温 度 、 pH 和 渗 透 压 、 气 体 环 境 等 。 其 中 合 成 培 养 基 中 通 常 要 加 入 血 清,温度条件为36.5 ℃±0.5 ℃,所需的气体有O2和CO2,CO2的主要作 用是调节培养液中的pH。
课前·新知导学
课堂·素养初培
()
课前·新知导学
课堂·素养初培
课堂·延伸提分
小练·素养达成
课后提能集训
生物学 选择性必修3 配人教版
第2章 细胞工程
(4)胚胎干细胞具有发育的全能性,能分化为成年动物体内任何一种
组织细胞。
()
(5)成体干细胞可以分化成特定的组织或器官,也具有发育成完整个
体的能力。
()
【答案】(1)√ (2)× (3)× (4)√ (5)×
课堂·素养初培
课堂·延伸提分
小练·素养达成
课后提能集训
生物学 选择性必修3 配人教版
第2章 细胞工程
判断下列正误。
(1)干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
()
(2)根据干细胞的分化程度可将干细胞分为全能干细胞、多能干细胞
和造血干细胞。
()
(3)动物胚胎的每一个细胞都是胚胎干细胞。
(3)温度、pH和渗透压 ①适宜的温度条件:_3_6_._5_℃___±0.5 ℃; ②适宜的pH条件:___7_.2_~__7_._4___。 ③CO2的主要作用是维持___培__养__液__的__p_H____。
课前·新知导学
课堂·素养初培
课堂·延伸提分
小练·素养达成
课后提能集训
生物学 选择性必修3 配人教版
课前·新知导学
选修三流程图
高中生物选修三生物工程流程图总结一、基因工程流程图:1、转基因植物旳培育流程:2.转基因动物旳培育流程:1.基因工程旳操作工具有:。
2.基因工程旳操作流程是: (1) ;(2) ;(3) ;(4)。
其中关键环节是: 。
3.获取目旳基因旳措施有: ;为了获得更多旳目旳基因, 可以用 技术使目旳基因在生物体外大量扩增。
4.构建基因体现载体需要旳工具酶有 ;构建基因体现载体旳目旳是: 。
5.将目旳基因导入植物细胞常用旳措施是;导入动物细胞旳常用旳措施是。
一般选用受精卵作为目旳基因旳受体细胞, 原因是。
6.基因体现载体旳构成: 。
其中启动子旳作用是;标识基因旳作用是。
7、检测目旳基因与否成功体现旳措施是:(1)分子水平旳检测:用放射性同位素标识旳片段做探针进行分子杂交, 检测目旳基因与否成功转录出mRNA或用技术检测目旳基因与否翻译出对应旳蛋白质。
(2)个体水平旳检测:。
答案:1、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体2、(1)获取目旳基因(2)基因体现载体旳构建(3)将目旳基因导入受体细胞(4)目旳基因旳检测和鉴定基因体现载体旳构建3、从基因文库中获取、人工合成目旳基因、PCR技术PCR技术4、限制酶、DNA连接酶使目旳基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代, 同步使目旳基因可以体现和发挥作用。
5、农杆菌转化法显微注射法受精卵具有全能性6、启动子、终止子、标识基因、目旳基因能被RNA聚合酶识别并结合, 使目旳基因得以体现有助于对目旳基因与否导入受体细胞进行检测7、目旳基因抗原—抗体杂交看得到旳个体与否体现出目旳基因所控制旳性状。
工程是蛋白质工程旳基础, 从本质上看蛋白质工程是通过改造, 从而到达改造旳目旳。
答案: 基因基因构造蛋白质构造三、植物组织培养:1.植物组织培养旳理论根据是: 。
2.植物细胞体现出全能性旳条件: 。
3.植物组织培养旳关键技术: 。
4.愈伤组织旳构造特点是: 。
5.植物组织培养旳培养基中除多种营养物质外, 还需要添加 , 目旳是 。
人教版高中生物选修三课件:体外受精和早期胚胎培
A.都属于无性生殖
B.都属于细胞工程的技术范畴
C.都不会发生基因重组
D.都体现了分化的细胞具有全能性
精子体外获能
体外受精
良种牛体外受精胚胎 胚胎移植
受体牛
良种犊牛
成熟期牛
采集卵巢中的 屠宰加工厂 卵母细胞
市场
二、体外受精
1.卵母细胞的收集和培养
小型动物或家畜: 用促性腺激素处理 ,然后从输卵管中 冲取卵子,直接与 获能的精子在体外 受精。
大型动物或家畜: 屠宰场已屠宰母畜 的卵巢中采集卵母 细胞;直接从活体 动物卵巢中吸取卵 母细胞。
1.下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述,错误的是 B
A.对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理
B.人工授精后的一定时间内,收集供体原肠胚用于胚胎分割
C.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
D.一次给受体母羊植入多个胚胎,可增加双胞胎和多胞胎的比例
2.老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β淀粉样蛋白体,它
A.在形成早期胚胎的过程中,依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、
原肠胚等几个阶段
B.兔子卵细胞质的作用是激发大熊猫细胞核的全能性
C.克隆出的早期胚胎中,各细胞间具有相同的遗传信息
D.在形成早期胚胎的过程中,尚未出现细胞的分化
5.试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰
出成果,下列对其生物学原理及技术的叙述,正确的是 B
人教版高中生物选修三 课件:体外受精和早期
说起
试管动物: 是指通过人工 操作使卵子和 精子在体外条 件下成熟和受 精,并通过培 养发育成早期 胚胎后,再经 移植产生后代 的技术。
“试管牛”工厂化生产的技术流程图
高中生物选修3流程图(精编)
选修3《现代生物科技专题》中的流程图1.基因工程的基本操作流程图
3.蛋白质工程流程图
4.
预期功能 生物功能 分子
5.植物体细胞杂交技术操作流程图 原理:细胞膜的流动性;植物细胞的全能性
6.动物细胞培养过程示意图 原理:细胞增殖
培养条件:无菌无毒环境 一定的营养(特别加入血清) 适宜的温度和pH 含95%空气加5%CO 2的气体环境(CO 2主要作用是维持培养液的pH ) 细胞贴壁,接触抑制
胰蛋白酶处理,分瓶
9.单克隆抗体制备过程示意图
7.动物体细胞核移植过程流程图(一):生殖性克隆
8.动物体细胞核移植过程流程图(二):治疗性克隆
10.哺乳动物受精卵的发育
11.胚胎移植示意图
早期胚胎 (发育在
透明带内
进行) 内细胞团
(发育成胎儿的各种组织)
滋养层 ( 发育成胎儿的胎膜和胎盘) 全能细胞
形成内、中、外3个胚层
12.试管动物工厂化生产流程图。
人教版高中生物选修3专题1第2节基因工程的基本操作程序共42张PPT[可修改版ppt]
序共42张PPT
基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 获取的方法?
2、基因表达载体的构建 构建目的?组成?
3、将目的基因导入受体细胞
导入植物细胞、动物细胞、 微生物细胞的方法分别是?
4、目的基因的检测与鉴定
如何判断目的基因是否成功导入受体细胞? 如何判断导入后是否成功表达?
c、终止子 位于基因的末端,终止转录
d、标记基因 检测目的基因是否导入受体细胞
它们有什么作用?
思考: 表达载体为什么一定要有启动子?
• (1)生物之间进行基因交流,只有使用 受体生物自身基因的启动子才能有利于基 导入受体细胞无法 转录。
③转化过程:
Ti质粒
构建
表 达
转入
农 杆
导入
目的基因
载 体
菌
植 物 细 胞
插入
植物细胞 染色体 DNA
表达
新 性 状
(2)基因枪法
适用于单子叶植物
基因枪法又称微 弹轰击法,是利用压 缩气体产生的动力, 将包裹在金属颗粒表 面的表达载体DNA打 入受体细胞中,使目 的基因与其整合并表 达的方法。
(3)花粉通道法 适用于被子植物
植物花粉在柱头 上萌发后,花粉管要 穿过花柱直通胚囊。 花粉管通道法就是在 植物受粉后,花粉形 成的花粉管还未愈合 前,剪去柱头,然后, 滴加DNA(含目的基 因),使目的基因借 助花方法人工合成
二、基因表达载体的构建 —— 核心
1.过程: 用一定的__限__制__酶___切割 质粒,使其出现一个切 口,露出_黏__性__末__端_____。
用_同__一__种__限__制__酶__切断目 的基因,使其产生_____ 相_同__的__黏__性__末__端_。
人教版高中生物选择性必修第3册 基因工程的基本操作程序
复性
延
伸
第二轮结束:此时 目的基因的量是原
始的22倍。
第2轮结束
目的基因的筛选与获取
三、目的基因的获取 —利用PCR获取和扩增目的基因
扩增方式:以指数方式扩增,即__2_n _(n为扩增循环的次数)
(1)若开始只有一个DNA提供模板,则循环n次后获得的子代DNA数
目为 2n 个。
(2)若开始有N个DNA提供模板,则循环n次后获得的子代DNA数目
RNA分子杂交(Northern Blot)流程图
目的基因的检测与鉴定
一、分子水平的检测
(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质
方法:抗原-抗体杂交技术
提取
苏云金芽孢
杆菌
Bt毒蛋白
注射小鼠体内
抗体
标记抗体 杂交
提取蛋白 电泳分离
目的基因的检测与鉴定
二、个体水平的检测 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
没有抗虫基 因的棉植株 接种
三、目的基因的获取 方法:利用PCR获取和扩增目的基因
概念 聚合酶链式反应,根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复
制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
目的基因的筛选与获取
体内DNA复制要点回顾
(1)条件
模板:DNA的两条链 原料:游离的脱氧核苷酸(A、T、G、C) 能量:ATP 酶:DNA解旋酶、DNA聚合酶等
抗原-抗体杂交技术
个体水平鉴定
抗虫或抗病的接种实验抗性以及抗性程度 基因工程产操作程序(4个步骤)
1. 目的基因的筛选和获取-前提
利用PCR获取和扩增 化学方法人工合成
2. 构建基因表达载体-核心
目的基因、启动子、终止子、标记基因
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人教版高中生物选修三
流程图
work Information Technology Company.2020YEAR
选修三流程图
一、基因工程流程图
1、转基因植物的培育流程:
2、转基因动物的培育流程:
1、基因工程的操作工具有:。
2、基因工程的操作流程是:(1);(2);
(3);(4)。
其中核心步骤是:。
3、获取目的基因的方法有:;为了获得更多的目的基因,可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有;构建基因表达载体的目的是:。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是;导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞,原因是。
6、基因表达载体的组成:。
其中启动子的作用
是;标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是:
(1)分子水平的检测:用放射性同位素标记的 片段做探针进行分子杂交,检测目的基因是否成功转录出mRNA 或用 技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
(2)个体水平的检测: 。
二、蛋白质工程流程图:
1、 工程是蛋白质工程的基础,从本质上看蛋白质工程是通过改造 , 从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图:
1、植物组织培养的理论依据是: 。
2、植物细胞表现出全能性的条件: 。
3、植物组织培养的核心技术: 。
4、愈伤组织的结构特点是: 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外,还需要添加 ,目的是 。
同时在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,操作过程中还必须保证 。
6、植物组织培养技术有哪些应用?
(写出三种)
7、若要制作人工种子,应进行到哪一阶段?。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇,应进行到哪一阶段?。
四、植物体细胞杂交流程图: 1、如何去除细胞壁?
2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是: 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是: 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是 。
五、动物细胞培养流程图:
1、依据的原理是: 。
2、常选用的材料: 原因是 。
3、在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时,通常需加入 等天然成分。
4、一般用 将组织分散成单个细胞。
处理时应注意处理的。
5、动物细胞培养的条件:(1) ;(2) ;(3) ;(4) 。
6、培养过程中,需要定期用处理使细胞从瓶壁上脱离下来,以便于分装到更多的培养瓶中继续培养。
7、培养过程中,为保证无菌环境,需要向培养液中加入;为保证无毒环境,需要。
( )
六、克隆动物的培养流程图
1、动物细胞核移植的
原理是: 。
2、一般利用未受精的卵细胞去核后作
为受体细胞,
对卵母细胞的去核处理一般选择在 时期进行。
3、通常用去核的卵母细胞作为受
体细胞的
原因: 。
(至少答出三点)
七、单克隆抗体的生产流程图
特定()
()细胞
利用()
筛选
(
)细胞
(
)细胞
1、制备单克隆抗体的原理: 。
2、制备单克隆抗体常用的动物细胞工程技术手段有: 。
3、不同细胞能够融合的原因是:。
4、杂交瘤细胞的特点是:。
5、单克隆抗体的优点是:。
6、诱导动物细胞融合的方法有:。
与植物原生质体融
合相比,特有的诱导方法是。
7、两次筛选的目的是:第一次是筛选;第二次是筛选。
8、经过融合可形成种类型的融合细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。
9、单克隆抗体与抗癌药物结合制成“生物导弹”,可明显减少用药量和副作用,原因是:。
八、胚胎工程流程图:
1.试管动物技术流程图
2.胚胎移植流程图
()
()
()
()
1、促进雌性动物超数排卵的方法:。
获取的卵母细胞需要在体外培养到
期才能完成受精作用。
2、采集的精子需在体外进行后才能完成受精作用。
3、精子顶体内含有能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。
卵细胞阻止多精子入卵的两道屏障是:。
4、受精作用完成的标志是:。
5、受精卵在体外需培养到,才能进行胚胎移植。
该过程称
为。
6、囊胚的结构:、、。
其中,内细胞团将来发育
成;滋养层细胞发育成。
7、若要得到多个相同的胚胎,可采用技术,用于分割的胚胎发育至阶段,对囊胚阶段的胚胎进行分割时需注意。
该技术的意义
是:。
8、胚胎移植的实质是:。
该技术的意义是:。
9、供体选择的个体;受体选择的个体。
10、进行胚胎移植前需对供体和受体进行处理,目的
是。
11、若要对早期胚胎进行长期保存,应将其置于条件下。
12、胚胎在受体内能够存活的生理学基础是:。
13、胚胎干细胞是从胚胎发育至或胎儿的中分离得到的一类细胞。
14、胚胎干细胞的特点是:(1)形态上:;(2)功能上:。
(3)在体外培养的条件下,胚胎干细胞,因此在培养液中加入,可诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化。
专题4 生物技术的安全性和伦理问题
(1)生殖性克隆与治疗性克隆的区别
(2)试管婴儿和设计试管婴儿的区别
专题5 生态工程
一、生态工程的基本原理
答案:1、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体 2、(1)获取目的基因(2)基因表达载体的构建(3)将目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测和鉴定基因表达载体的构建 3、从基因文库中获取、人工合成目的基因、PCR技术 PCR技术 4、限制酶、DNA连接酶使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。
5、农杆菌转化法显微注射法受精卵具有全能性 6、启动子、终止子、标记基因、目的基因能被RNA聚合酶识别并结合,使目的基因得以表达有利于对目的基因是否导入受体细胞进行检测 7、目的基因抗原—抗体杂交看得到的个体是否表现出目的基因所控制的性状。
答案:基因基因结构蛋白质结构
答案:1、植物细胞的全能性 2、脱离母体 3、脱分化和再分化 4、细胞排列疏松、形态不规则、细胞壁薄等 5、植物激素(生长素和细胞分裂素)无菌 6、(1)植物繁殖的新途径:①微型繁殖②作物脱毒③制作人工种子(2)作物新品种的培育:①单倍体育种②突变体的利用③细胞产物的工厂化生产 7、胚状体愈伤组织
答案:1、用纤维素酶和果胶酶处理 2、物理法(包括离心、振动和电激)、化学法(用聚乙二醇处理) 3、杂种细胞产生新的细胞壁 4、植物组织培养脱分化和再分化5、能够克服远缘杂交不亲和障碍
答案:1、细胞增殖 2、胚胎或幼龄动物的组织 3、血浆、血清 4、胰蛋白酶或胶原蛋白酶
处理的时间 5、(1)无菌、无毒的环境(2)一定的营养物质(3)适宜的温度和pH (4)一定的气体环境 6、胰蛋白酶 7、抗生素定期更换培养液
答案:1、动物细胞核的全能性 2、减数第二次分裂中期 3、(1)体积大、易操作(2)营养物质丰富(3)含有促进细胞核的全能性表达的物质
答案:1、一种浆细胞只能产生一种特定的抗体,癌细胞能无限增殖 2、动物细胞融合、动物细胞培养 3、细胞膜具有一定的流动性 4、既能无限增殖,又能产生特异性抗体 5、特异性强、灵敏度高、可大量制备 6、(1)物理法:离心、振动、电激(2)化学法:用聚乙二醇诱导(3)生物方法:用灭火的病毒诱导用灭活低病毒诱导 7、杂交瘤细胞能产生所需抗体的杂交瘤细胞 8、3 9、经过癌细胞抗原免疫产生的单克隆抗体能够与癌细胞特异性结合。
答案:1、用促性腺激素处理减数第二次分裂中期 2、获能 3、顶体酶透明带反应和卵黄膜的封闭作用 4、在卵黄膜和透明带间隙可以看到两个极体 5、桑椹胚或囊胚早期胚胎培养技术 6、内细胞团、滋养层细胞、囊胚腔胎儿的各种组织、器官胎盘和胎膜 7、胚胎分割桑椹胚或囊胚将内细胞团均等分割提高了胚胎的利用率 8、早期胚胎在相同生理环境条件下的空间位置的转移充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 9、遗传性能和生产性能优秀有健康的体质和正常繁殖能力 10、同期发情使供体和受体的生理状态保持相同,从而确保供体的胚胎与受体的子宫建立正常的生理和组织联系11、—196℃液氮 12、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应 13、囊胚的内细胞团原始性腺细胞 14、体积小、细胞核大、核仁明显具有发育的全能性只增殖而不分化分化诱导因子。