单克隆抗体制备流程

单克隆抗体制备流程
1.鼠标免疫：
选择合适的抗原，并将其注射到小鼠或其他啮齿动物的体内。

这样可以激发小鼠体内的免疫系统产生特异性的抗原抗体。

2.细胞融合：
在小鼠免疫周期结束后，收集其脾细胞，并将其与癌细胞（如骨髓瘤细胞）进行融合。

这一步骤将产生一组称为杂交瘤细胞的细胞群体，具有免疫系统的特异性。

3.筛选和扩增：
将融合细胞在含有抗生素的培养基中进行筛选，以去除非融合细胞和未融合的B细胞。

然后，将融合细胞转移到含有较低抗生素浓度的培养基中，以扩增单克隆细胞株。

4.克隆：
通过稀释稀释法或限稀稀释法，将单个细胞分离成单个细胞，并将其分别培养在微孔板中。

培养一段时间后，进行测序和酶联免疫吸附试验（ELISA）等测试，以筛选出产生特异性抗体的克隆。

5.生产和纯化：
确定产生特异性抗体的克隆后，可以进行大规模的生产和纯化。

将克隆细胞移植到大容量培养器中，进行大规模培养。

然后，通过收集和离心等步骤收集细胞上清液，获取抗体。

6.特性和稳定性测试：
对生产的抗体进行特性和稳定性测试，以确定其特异性、亲和力、稳
定性和纯度等参数。

这些测试通常包括ELISA、Western blot、免疫组织
化学（IHC）等。

7.应用：
将制备好的单克隆抗体用于特定的应用，如免疫组化、免疫印迹、流
式细胞术等。

根据需要，可能需要对抗体进行标记，如荧光标记或酶标记，以便在特定实验中进行检测。

总之，单克隆抗体制备流程是一个复杂而耗时的过程，需要经过多个
步骤来获得特异性和高亲和力的抗体。

这些抗体可以用于研究、诊断和治
疗等领域，对于科学研究和临床应用有着重要的意义。