对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果

西北农业学报 2024,33(1):8-14
A c t a A g
r i c u l t u r a e B o r e a l i -o c c i d e n t a l i s S i n i c a d o i :10.7606/j
.i s s n .1004-1389.2024.01.002h t t p s ://d o i .o r g /10.7606/j
.i s s n .1004-1389.2024.01.002对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩
艾美耳球虫卵囊的抑杀效果
收稿日期:2022-06-09 修回日期:2022-07-14
基金项目:2022分类发展定额项目;北京农学院青年教师科研创新能力提升计划(Q J K C 2022029
)㊂第一作者:何学柏,女,硕士研究生,研究方向为预防兽医学㊂E -m a i l :y a t o u x i n 19@163.c o m 通信作者:李秋明,女,博士,讲师,研究方向为寄生虫病学㊂E -m a i l :l i q i u m i n g 007@q q .c o m 杜孟泽,男,博士,讲师,研究方向为临床兽医学㊂E -m a i l :549878730@q q
.c o m 何学柏,迟依明,梁圣杰,李 澍,杜孟泽,李秋明
(北京农学院动物科学技术学院,动物类国家级实验教学示范中心,北京 102206
)摘 要 为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用,采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与
未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育,检测其对卵囊孢子化率的影响;与孢子囊共同孵育,通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰㊂孢子化卵囊经过不同浓度消毒剂直接浸泡㊁粪便干扰下浸泡或喷雾处理后经口接种雏鸡,通过O P G 和盲肠病变记分探究消毒剂处理对卵囊的繁殖力和鸡的致病性的影响㊂结果显示,2
种消毒剂均可使孢子化率和子孢子脱囊率显著下降,且3种浓度的复方对氯间甲酚与3%氨水对照组(P C )的消毒效果无显著差异㊂直接浸泡处理试验结果显示,2%和3%复方对氯间甲酚(H T S 2和H T S 3)
具有更为显著的抑杀效果,与P C 无显著差异;粪便干扰试验结果显示,粪便作用下这两种消毒剂对球虫卵囊仍有理想的抑杀效果;喷雾处理试验结果显示,3%对氯间甲酚(H T 3)对球虫卵囊抑杀效果最好,显著优于P C 组(P <
0.05),而2%对氯间甲酚(H T 2)㊁H T S 2和H T S 3组的抑杀效果与P C 组无显著差异㊂研究结果表明,不同浓度下这2种消毒剂对孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用,综合比较,复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀球虫卵囊效果,具有代替氨水成为鸡球虫消毒剂的潜能㊂关键词 对氯间甲酚;柔嫩艾美耳球虫;O P G ;
卵囊孢子化率;子孢子脱囊率 球虫病是目前养禽业常见的㊁
危害严重的传染性寄生虫病,可以造成巨大的经济损失[
1
]㊂据估计,2016年全球因鸡球虫病造成的经济损失超过了10.4亿英镑,
其主要包括治疗㊁死亡和控制成本[2]
㊂一直以来,控制该疾病的策略包括疫苗
接种和药物预防,虽然疫苗和药物在控制球虫病方面发挥了巨大作用,然而,持续使用不同的抗球虫药已导致球虫产生抗药性
[3]
,且中国已禁止在
饲料中添加抗生素类药物;另外,由于传统疫苗的局限性,至今仍未在中国小日龄出栏肉鸡中广泛使用,这为防治球虫病带来了很大困难
[4
]㊂若能
筛选或开发一种有效的球虫卵囊消毒剂,对禽舍进行有效的环境消毒,将是一种防控球虫病的有效举措㊂然而,目前关于球虫卵囊消毒剂的研究资料十分有限,尚未见有一种临床上可直接用于
鸡球虫卵囊消毒的消毒剂[5]
㊂为了寻找廉价㊁高
效和刺激性小的鸡球虫卵囊消毒药,本试验对候
选的酚类消毒剂进行体内体外测试,探究以对氯间甲酚为主要成分的消毒剂对柔嫩艾美耳球虫卵囊的孢子化率㊁孢子化卵囊的脱囊率,以及在鸡体内的繁殖力和致病力的影响,以期为防控球虫病积累相关的数据经验㊂
1 材料与方法
1.1 试验耗材
对氯间甲酚消毒剂(含对氯间甲酚100g /L ,
C A S 编号59-50-7)
㊁复方对氯间甲酚消毒剂(含对氯间甲酚100g /L ,C A S 编号59-50-7;
含苄氯酚50g /L ,C A S 编号59-50-7
)均购自比利时浩卫制药股份有限公司;氨水㊁甲醛㊁重铬酸钾和氯化钠均采自国药集团化学试剂有限公司;生理盐水购于北京索莱宝科技有限公司㊂
1.2 球虫卵囊与实验动物
柔嫩艾美耳球虫亲本株由北京农学院球虫实
验室从河南某鸡场分离㊁纯化和保存㊂经14日龄海兰公雏鸡传代㊁复壮后,收集盲肠组织未孢子化的卵囊,一部分用于研究消毒剂对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化的影响;一部分置于2.5%重铬酸钾中,于28ħ恒温摇床震荡培养48h,至孢子化率达到80%以上,保存于4ħ冰箱㊂1日龄海兰公雏鸡购自北京市华都峪口禽业有限责任公司,于无球虫环境饲养至14日龄㊂
1.3试验设计
每个试验均分为8个处理组,即0.9%生理盐水对照组(N C)㊁1%对氯间甲酚组(H T1)㊁2%对氯间甲酚组(H T2)㊁3%对氯间甲酚组(H T3)㊁1%复方对氯间甲酚组(H T S1)㊁2%复方对氯间甲酚组(H T S2)㊁3%复方对氯间甲酚组(H T S3)㊁3%氨水对照组(P C)㊂
1.4消毒剂对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化的影响
将1ˑ105个新鲜未孢子化的球虫卵囊分别与10m L处理液在15m L离心管中混悬处理18 h,每组3个重复㊂处理后用蒸馏水离心冲洗以除去残余处理液㊂而后将离心沉淀的卵囊加入2.5%重铬酸钾溶液中,于28ħ恒温摇床内孢子化48h㊂显微镜下观察100个以上的卵囊,计算出孢子化率,用于评价不同消毒剂对新鲜卵囊孢子化的抑制效果㊂孢子化率=孢子化卵囊数/(孢子化卵囊数+未孢子化卵囊数)ˑ100%
1.5消毒剂对柔嫩艾美耳球虫子孢子脱囊逸出的影响
将1ˑ105个已孢子化的球虫卵囊分别与各处理液混合,处理方式同 1.4 ㊂将离心沉淀后的卵囊加入200μL P B S缓冲液重悬,再加入50个直径1mm的玻璃珠,使用涡旋振荡器震荡,显微镜下观察并计算卵囊的破壁率,至卵囊破壁率达到70%以上停止震荡㊂将破壁后的球虫卵囊加入胆酸盐消化液中(将0.75%胰蛋白酶和10%鸡胆汁加入配置好的P B S中,混匀),37ħ孵育40m i n㊂孵育完成后在显微镜下计算子孢子的脱囊数量,同时也记录视野中的孢子囊数量,最后计算子孢子的脱囊率[6]㊂
子孢子脱囊率=子孢子数/(子孢子数+孢子囊数ˑ2)ˑ100%
1.6消毒剂对柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的抑杀效果
将已孢子化的球虫卵囊分别与各处理液混合,处理方式同 1.4 ㊂将处理好后的卵囊经口接种14日龄的雏鸡,每组6只,每只接种1ˑ104个卵囊㊂感染后观察血便状态㊂接种第6天清理粪便,收集第7㊁8天的粪便,按照麦克马斯特计数法[7](M c M a s t e r s m e t h o d)计算O P G值,每一组取粪便样品5份,每份计数2次后求平均值㊂第8天剖杀所有试验鸡,进行盲肠病变记分并拍照[8]㊂通过O P G值和盲肠病变记分评价不同消毒剂对孢子化卵囊的感染活性抑杀效果㊂
1.7消毒剂在鸡粪便的影响下对柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的抑杀效果
将1ˑ105个已孢子化的球虫卵囊与3g研磨成粉的鸡粪便混匀,分别加入10m L各处理液搅拌均匀处理18h,用蒸馏水离心冲洗除去残余处理液,经口接种14日龄的雏鸡,每组6只,每只鸡接种1ˑ104个卵囊㊂检测指标同 1.6 ㊂
1.8消毒剂对附着在固体表面上球虫的抑杀效果
使用消毒剂喷雾对附着在平皿表面的球虫卵囊进行消毒效果评价,以模拟鸡舍消毒场景㊂室温条件下,每组取1ˑ105个已孢子化的球虫卵囊平铺于塑料培养皿(直径=8.5c m)中,自然风干后,分别用各处理液喷雾6次,一共喷洒液体约0.85g,且每次喷出的液体质量为(0.14ʃ0.02) g㊂处理液作用1h后用蒸馏水冲洗平皿,收集其中的卵囊,经过离心沉淀后将卵囊最终加入2m L 清水混匀,经口接种14日龄雏鸡,每组5只,每只鸡接种1ˑ104个卵囊㊂检测指标同 1.6 ㊂
1.9数据处理与分析
采用E x c e l2019软件绘图以及使用S P S S21软件进行统计学分析处理㊂对于符合正态分布的两组数据,方差不齐时使用带有W e l c h s校正的非配对t检验进行分析,方差等齐时使用非配对t 检验㊂当两组数据不服从正态分布时,使用M a n n-W h i t n e y秩和检验㊂当需要多组比较时,如果数据符合正态分布则使用A N O V A检验,不符合正态分布时使用K r u s k a l-W a l l i s检验㊂当P<0.05时认为数据 平均数ʃ标准差 具有统计学差异㊂
2结果与分析
2.1不同消毒剂对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化的影响
与N C组相比,不同浓度下2种消毒剂对柔
㊃9㊃
1期何学柏等:对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果
嫩艾美耳球虫卵囊孢子化都有较强的抑制作用
(P <0.001)㊂其中H T S 3组孢子化率最低,接近氨水对照组,并且两者无显著差异(P >0.05,
图1
)㊂表明3%复方对氯间甲酚对球虫卵囊孢子化的抑制效果最好
㊂
与N C 组相比,***表示具有极其显著的统计学差异(P <
0.001);与P C 组相比,n s 表示无显著差异(P >0.05
)㊂下同C o m p a r e d w i t h N C g r o u p ,***i n d i c a t e s e x t r e m e l y s i g
n i f -i c a n t s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e s (P <0.001);C o m p a r e d w i t h P C g r o u p ,n s i n d i c a t e s n o s i g
n i f i c a n t d i f f e r e n c e (P >0.05).T h e s a m e b e l o w
图1 不同消毒剂下柔嫩艾美耳球虫卵囊的孢子化率F i g .1 O o c y s t s s p
o r u l a t i o n r a t e o f E i m e r i a t e n e l l a u n d e r d i f f e r e n t t r e a t m e n t s o f d i s i n f e c t a n t s
2.2 不同消毒剂对球虫卵囊子孢子逸出的影响
为检测不同浓度下2种消毒剂对孢子化卵囊的感染是否也有抑杀效果,使用不同浓度的消毒剂与孢子囊孵育,观察其对子孢子释放的干扰㊂结果显示(图2),与N C 对照组相比,H T 2㊁H T 3㊁
H T S 1㊁H T S 2和H T S 3组在一定程度上抑制鸡
柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的脱囊(P <0.001),其中H T S 1㊁H T S 2㊁H T S 3这3个处理组子孢子
脱囊率与氨水对照组相比无显著差异㊂表明同等浓度下,复方对氯间甲酚对孢子化卵囊的体外消毒效果要优于对氯间甲酚,且与氨水效果一致(图3)
㊂图2 不同消毒剂下柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的脱囊率
F i g .2 E x c y s t a t i o n r a t e o f s p o r u l a t e d o o c y
s t s o f E i m e r i a t e n e l l a u n d e r d i f f e r e n t
t r e a t m e n t s o f d i s i n f e c t a n t
s
A.N C 组;B .P C 组;C .H T S 3组;D .H T 3组(20ˑ);S O.孢子化卵囊;S G.孢子囊;S Z .
子孢子A.N C g r o u p ;B .P C g r o u p ;C .H T S 3g r o u p ;D .H T 3g r o u p (20ˑ);S O.S p o r u l a t e d o o c y s t ;S G.S p o r o c y s t ;S Z .S p
o r o z o i t e s 图3 不同消毒剂处理E .t e n e l l a 卵囊子孢子脱囊情况的显微镜观察结果
F i g .3 M i c r o s c o p i c o b s e r v a t i o n r e s u l t s o f s p o r e d e c a p s u l a t i o n o f E .t e n e l l a o o c y
s t s u n d e r t r e a t m e n t o f d i f f e r e n t d i s i n f e c t a n t s ㊃01㊃西 北 农 业 学 报
33卷
2.3 不同消毒剂直接浸泡处理下对球虫卵囊的
抑杀效果
雏鸡感染模型试验进一步评价了这2种消毒
剂对孢子化卵囊的消毒效果,将不同浓度消毒剂与孢子化的球虫卵囊处理18h 后,
经口接种雏鸡㊂结果显示,与N C 组相比,2种消毒剂处理组的O P G 值极显著下降(P <0.001
);与单方相比,H T S 2和H T S 3组具有更为显著的抑杀效果;与P C 组无显著差异㊂盲肠评分结果与O P G 结果相符(表1)㊂表明直接浸泡处理下2%和3%的复方对氯间甲酚对孢子化球虫卵囊的抑杀效果
显著㊂
表1 不同消毒剂直接浸泡处理下各组O P G 值和病变记分结果
T a b l e 1 O P G a n d l e s i o n s c o r e o f e a c h i m m e r s i o n u n d e r
t r e a t m e n t o f i n t e r f e r e n c e o f c h i c k e n f e c e s
组别
G r o u p O P G 值(ˑ105
)
O P G v a l u e s
盲肠病变记分
S c o r e s o f c e c u m l e s i o n s
N C
25.24ʃ1.97
3.0ʃ0.4
H T 110.41ʃ4.34***
1.9ʃ0.5*H T 24.63ʃ0.99
***2.0ʃ0.7
*
H T 314.81ʃ2.58***2.4ʃ0.6**H T S 15.24ʃ1.47
*
2.4ʃ0.6**
H T S 20.97ʃ0.111.3ʃ0.3H T S 30.28ʃ0.051.4ʃ0.3P C 0.19ʃ0.08
0.6ʃ0.5
注:与P C 组相比,***表示具有极其显著的统计学差异(P <0.001),**表示具有显著统计学差异(P <0.01),*表示具有统计学差异(P <0.05
)㊂下表同㊂N o t e :c o m p a r e d w i t h P C g r o u p ,***i n d i c a t e s e x t r e m e l y s i g
n i f -i c a n t s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.001),**i n d i c a t e s s i g n i f i c a n t -l y s
t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.01),*i n d i c a t e s s t a t i s t i c a l d i f f e r -e n c e (P <0.05).T h e s a m e b e l o w.
2.4 不同消毒剂在鸡粪便干扰下浸泡处理对球
虫卵囊的抑杀效果
粪便干扰试验结果显示,与N C 组相比(表2),被消毒剂处理后的所有组O P G 值均显著下降,其中H T S 2㊁H T S 3组具有较为良好的抑杀效
果,与P C 组无显著差异(P >0.05),H T S 2㊁H T S 3组盲肠评分较低㊂试验结果与无鸡粪干扰试验结果趋势一致,表明粪便作用下2%和3%的复方对氯间甲酚对球虫卵囊依然有理想的抑杀
效果㊂2.5 不同消毒剂在喷雾处理下对球虫卵囊的抑杀效果
使用消毒剂对附着在平皿表面的球虫卵囊进
表2 不同消毒剂在鸡粪便干扰下浸泡处理
后各组别O P G 值和病变记分结果
T a b l e 2 O P G a n d l e s i o n s c o r e o f e a c h i m m e r s i o n u n d e r
t r e a t m e n t o f i n t e r f e r e n c e o f c h i c k e n f e c e s
组别
G r o u p O P G 值(ˑ105
)
O P G v a l u e s
盲肠病变记分
S c o r e s o f c e c u m l e s i o n s
N C
11.22ʃ3.12
2.9ʃ0.3
H T 16.78ʃ2.38*1.9ʃ0.5
***
H T 25.84ʃ0.71*2.0ʃ0.3***H T 35.82ʃ1.58*
1.6ʃ0.4
**
H T S 15.9ʃ3.0
*
2ʃ0.4
***
H T S 25.20ʃ1.901.1ʃ0.2H T S 31.58ʃ0.570.9ʃ0.6
P C 0.07ʃ0.03
0.3ʃ0.5
行喷雾处理后,与N C 组相比(
表3),不同浓度下2种消毒剂处理后O P G 值均极显著降低(P <
0.001),其中H T S 2组和H T S 3组的O P G 值与
P C 组相当,无显著差异(P >0.05),而H T 3组显
著低于P C 组(P <0.05)㊂盲肠病变记分显示H T 3㊁H T S 2和H T S 3组评分较低,与P C 组无显
著差异㊂表明喷雾处理下2种消毒剂都具有较为良好的抑杀效果,其中H T S 2组和H T S 3组对球虫的抑杀效果与P C 组相当,而H T 3组抑杀效果优于P C 组㊂
表3 不同消毒剂在喷雾处理下各组别
O P G 值和病变记分结果
T a b l e 3 O P G a n d l e s i o n s c o r e u n d e r e a c h
s p r a y i n g
t r e a t m e n t 组别
G r o u p O P G 值(ˑ105
)
O P G v a l u e s
盲肠病变记分
S c o r e s o f c e c u m l e s i o n s
N C
14.36ʃ2.05
2.6ʃ0.2
H T 15.65ʃ0.82
***
2.1ʃ0.2H T 2
3.67ʃ1.03
2.3ʃ0.3*
H T 30.14ʃ0.03
*
1.6ʃ0.4H T S 16.13ʃ1.49
***2.3ʃ0.3
*
H T S 22.18ʃ0.342.1ʃ0.2H T S 32.37ʃ0.551.9ʃ0.2P C 2.39ʃ0.80
1.7ʃ0.3
3 讨论
鸡感染球虫是由于经口吞食了孢子化的球虫
卵囊,在体外抑制球虫卵囊的孢子化进程或杀灭孢子化卵囊,可从源头上控制球虫病㊂本研究检测对氯间甲酚和复方对氯间甲酚2种消毒剂对球虫卵囊的抑杀效果,结果表明,不同浓度下2种消
㊃
11㊃1期
何学柏等:对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果
毒剂对孢子化的和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用,其中复方对氯间甲酚消毒剂具有较强的抑杀效果,且呈剂量依赖㊂鸡球虫的卵囊壁是一个坚固的化学结构,并且能够耐受机械性损伤,卵囊对于化学制品㊁消化酶㊁洗涤液以及低渗溶液的破坏具有相当的抵抗力,常规的消毒剂很难破坏球虫的卵囊壁结构[9]㊂陈汉忠等[10]经试验证实百毒消㊁七消液和2%的
烧碱均对卵囊无效;安健等[11]的试验也说明卵囊对许多消毒剂,如福尔马林㊁84消毒液㊁来苏儿等具有较强的抵抗力;近期,郝桂英等[12]发现过氧化氢㊁碘酊㊁兽用百毒杀对球虫卵囊孢子化无明显影响;G a d e l h a q等[13]发现艾美耳球虫卵囊在使用D e t t o l㊁T H4㊁苯酚㊁V i r k o nʻR后,能够进行正常的孢子化过程以及显示出完整的卵囊壁;韩利方等[5]研究显示,250m g/L妥曲珠利㊁3%甲醛㊁4%苯酚㊁0.5%过氧乙酸㊁5%N a O H+10%N a C l 和5%N a O H对球虫卵囊活性具有一定的抑制作用,孢子化抑制率超过10%,但是对孢子化卵囊几乎无抑杀作用㊂目前,经过多人反复研究证实合适浓度的氨水对球虫卵囊具有高效的抑杀作用[5,14-15],韩利方等[5]研究发现1%~8%的氨水与未孢子化卵囊作用1h以上,均可100%抑杀球虫卵囊活性;周作勇等[14]发现,7%氨水处理组球虫卵囊的孢子化率仅为2.18%㊂本试验中3%氨水组作为阳性对照,孢子化率为0.33%,极显著降低卵囊产量和病变记分,这都证实氨水对球虫卵囊发育具有极强的抑杀作用㊂然而,氨水强烈的刺激性气味使其在密集的养殖方式下使用显然是不适合的[16]㊂因此,在生产实践中缺少控制球虫的消毒剂㊂各种酚类消毒剂在日常生活中常被使用,但关于它们抑杀艾美耳球虫卵囊效力的信息十分有限[17]㊂因此,本研究选用对氯间甲酚和复方对氯间甲酚两种酚类消毒剂对鸡球虫卵囊进行抑杀试验㊂
有研究报告提出一些针对球虫的消毒策略,这些策略对兽医和人类健康都具有重要意义[18-19]㊂尽管球虫在禽的流行病学中具有重要意义,但关于使用化学消毒剂降低环境中,特别是在被污染表面上的艾美耳卵囊的活力或传染性的报道有限[20]㊂球虫卵囊极小,容易与灰尘一起漂浮在空气中,散布到邻近鸡舍和区域,亦可造成感染[21]㊂因此,本试验用不同浓度消毒剂对物体表面喷洒消毒模拟现场试验,结果表明不同浓度下2种消毒剂对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊都具有一定的抑杀效果,其中H T3组抑杀效果最好,优于氨水对照组㊂本试验中氨水组采用喷洒方式作用鸡球虫卵囊,与直接浸泡处理相比,粪便卵囊排出量要更高,原因可能是氨水易挥发,不易起到确实的消毒效果㊂
本试验结果显示,3%复方对氯间甲酚消毒剂既能很好地抑制卵囊孢子化又能抑制子孢子出囊率,表明该消毒剂可控制环境中球虫卵囊孢子化和抑制子孢子脱囊,用该消毒剂对球虫进行物体表面喷洒消毒效果模拟现场试验时,能够减轻肠道病变,减少粪便中卵囊的排出量,表明通过喷雾可削弱球虫的感染能力,进一步说明复方对氯间甲酚消毒剂可作为球虫消毒剂㊂球虫消毒剂还能与各种抗球虫药联合应用,将环境扑杀与抗球虫药物控制鸡体内球虫卵囊排出的作用结合,减少抗药性的产生,共同防治鸡球虫病㊂而且球虫消毒剂是外用消毒药,它能减轻球虫药所引起的毒副作用和药物残留,提高经济效益,保证人们的生命健康[22]㊂这提示复方对氯间甲酚消毒剂在预防和控制鸡球虫病方面有广阔的应用前景㊂本研究结果表明,不同浓度下对氯间甲酚和复方对氯间甲酚这2种消毒剂对孢子化的和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用,其中复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀效果㊂
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㊃31㊃
1期何学柏等:对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果
㊃41㊃西北农业学报33卷
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m e t a-c r e s o l C o m p o u n d o n E i m e r i a t e n e l l a O o c y s t s
H E X u e b a i,C H I Y i m i n g,L I A N G S h e n g j i e,L I S h u,D U M e n g z e a n d L I Q i u m i n g
(C o l l e g e o f A n i m a l S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y,B e i j i n g U n i v e r s i t y o f A g r i c u l t u r e,N a t i o n a l
A n i m a l E x p e r i m e n t a l T e a c h i n g D e m o n s t r a t i o n C e n t e r,
B e i j i n g102206,
C h i n a)
A b s t r a c t T o i n v e s t i g a t e t h e i n h i b i t o r y e f f e c t o f p h e n o l i c d i s i n f e c t a n t s o n c h i c k e n c o c c i d i a l o o c y s t s, d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f m o n o m e r o r c o m p o u n d f o r m u l a t e d p-c h l o r o-m-c r e s o l d i s i n f e c t a n t s w e r e i n-c u b a t e d w i t h u n-s p o r u l a t e d E i m e r i a t e n e l l a o o c y s t s i n v i t r o,a n d t h e i r e f f e c t s o n t h e s p o r u l a t i o n r a t e o f o o c y s t s w e r e d e t e c t e d.
B e s i d e s,t h e s p o r o z o i t e o o c y s t s w e r e i n c u b a t e d,a n d t h e i n t e r f e r e n c e o f d i f f e r e n t d i s i n f e c t a n t s o n t h e r e l e a s e o f s p o r o z o i t e s w a s e v a l u a t e d b y s p o r o z o i t e d e c a p s u l a t i o n r a t e.A n d t h e n t h e s p o r u l a t e d o o c y s t s w e r e t r e a t e d w i t h t h r e e d i f f e r e n t w a y s:1)i mm e r s i o n w i t h d i f f e r e n t c o n c e n t r a-t i o n s o f d i s i n f e c t a n t s;2)i mm e r s i o n w i t h f e c e s;3)s p r a y,a n d t h e n i n f e c t c h i c k s b y o r a l a d m i n i s t r a-t i o n.T h e f e c u n d i t y a n d p a t h o g e n i c i t y o f s p o r u l a t e d o o c y s t s t r e a t e d w i t h d i s i n f e c t a n t s w e r e m e a s u r e d b y t w o i n d i c a t o r s:o o c y s t s p e r g r a m o f f e c e s(O P G)a n d c e c a l l e s i o n s c o r e.T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t a p p l i c a t i o n o f e a c h d i s i n f e c t a n t s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d t h e r a t e o f s p o r u l a t i o n a s w e l l a s r e l e a s e o f s p o r o-z o i t e s o f E i m e r i a t e n e l l a,w h i c h h a d c o m p a r a b l e e f f e c t w i t h c h l o r o m-c r e s o l a n d3%a mm o n i a s o l u t i o n (P>0.05).U n d e r t h e o t h e r t w o d i f f e r e n t t r e a t m e n t s,t h e f e c u n d i t y a n d p a t h o g e n i c i t y o f E i m e r i a t e n e l l a o n c h i c k e n s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d.T h e r e w a s n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e b e t w e e n H T S2,H T S3, a n d t h e P
C g r o u p(P>0.05).T h e s p r a y i n g t r e a t m e n t s h o w e d t h a t3%p a r a-c h l o r o-m-c r e s o l(H T3) i n h i b i t e d t h e k i l l i n g a c t i v i t y o f c o c c i d i a l o o c y s t,w h i c h w a s e v e n b e t t e r t h a n P C(P<0.05),w h i l e2% p a r a-c h l o r o-m-c r e s o l(H T2),H T S2,a n d H T S3h a d s i m i l a r i n h i b i t o r y e f f e c t c o m p a r e d w i t h P C,a n d t h e r e w a s n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e(P>0.05).T h i s s t u d y r e v e a l e d t h a t t h e s e t w o d i s i n f e c t a n t s(a t d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s)h a v e n o t a b l e i n h i b i t o r y e f f e c t s o n b o t h s p o r u l a t e d a n d u n s p o r u l a t e d E i m e r i a t e n e l l a o o c y s t s.G e n e r a l l y,t h e c o m p o u n d f o r m u l a h a s b e t t e r e f f e c t t h a n t h e m o n o m e r f o r m u l a r,s u g-g e s t i n g t h a t i t h a s p o t e n t i a l o f c o m p o u n d p-c h l o r o-m-c r e s o l d i s i n f e c t a n t o n c o c c i d i a l o o c y s t s t o t o r e-p l a c e a mm o n i a s o l u t i o n.
K e y w o r d s p-c h l o r o-m e t a-c r e s o l;E i m e r i a t e n e l l a;O P G;S p o r u l a t i o n r a t e s o f o o c y s t s;E x c y s t a t i o n r a t e o f s p o r o z o i t e s
R e c e i v e d2022-06-09R e t u r n e d2022-07-14
F o u n d a t i o n i t e m2022Q u o t a P r o j e c t o f C l a s s i f i e d D e v e l o p m e n t;2022R e s e a r c h a n d I n n o v a t i o n A b i l i t y I m p r o v e m e n t P l a n f o r Y o u n g T e a c h e r s o f B e i j i n g U n i v e r s i t y o f A g r i c u l t u r e(N o.Q J K C2022029).
F i r s t a u t h o r H E X u e b a i,f e m a l e,m a s t e r s t u d e n t.R e s e a r c h a r e a:p r e v e n t i v e v e t e r i n a r y.E-m a i l:y a-t o u x i n19@163.c o m
C o r r e s p o n d i n g a u t h o r L I Q i u m i n g,f e m a l e,P h.D,l e c t u r e r.R e s e a r c h a r e a:p a r a s i t o l o g y.E-m a i l:l i q i-u m i n g007@q q.c o m
D U M e n g z e,m a l e,P h.D,l e c t u r e r.R e s e a r c h a r e a:c l i n i c a l v e t e r i n a r y m e d i c i n e.E-m a i l: 549878730@q q.c o m
(责任编辑:顾玉兰R e s p o n s i b l e e d i t o r:G U Y u l a n)。