引起犬子宫蓄脓细菌的分离鉴定

作 用 。（） １提高动 物体 内及 血液 中ｐ Ｈ值 ，改善 胃肠功 能， 提 高饲料 的利用 率 。（） ２ 改善动物 消化功 能 ，提 高饲料 的 适 口性 、预 防腹 泻和 胃肠臌 气发 生。（） ３提高 奶的数量 和 质量 ，降低仔 畜 的死 亡率 ，从而提 高仔畜 的成活 率 。（） ４ 可 以吸收肠 内异物 ，消 除排 泄物 的恶臭 ，减少 污染 ，有 利于健康。 ３ 麦饭石 富含矿物 质和微 量元素 ． ２ 经沈 阳地 质矿 产 中心实验 室分 析 ，麦饭石 中含 有纯 天然 常量 和微量 元素４ 多种 ，因此 、麦 饭石 添加 于饲料 ０ 中对动物具有 良好的作用 。
发 新 的 抗 生 素 难 度 大 ， 耗 资 高 ， 周 期 长 ， 投 入 使 用 不 久
灭菌器 、高压消毒器 、干 燥箱 、培养 、 Ｐ ＧＸ型 多段 可编 程光 照培 养箱 、Ｓ Ｃ 一Ｆ Ｗ— Ｊ１ Ｄ型 单人 单面 超 净工作 台、镊 子 、接种环 、酒 精灯 、锥形 瓶 （ Ｏ ｍｌ Ｏ ０ ） １Ｏ ，ｌ０ ｍ１ ，载 玻 片 、染色缸 、染色架 、涂抹棒等 。 １１ ．． 主要 材料 与试 剂 子宫蓄脓犬 的子宫脓 液（ 宫内 ２ 子 容物）份 ，普通琼脂 、营养 琼脂、营养 肉汤 、血液 琼脂、 ６ 麦康凯 琼脂 、三铁糖 培养基 及按 实验 室常 规方法 自制 的
一
所有 分 离株进 行抗 茵药物 的敏 感性试 验 。药物 纸片包 括
氨 苄 西 林 、庆 大 霉 素 、 阿米 卡 星 、头 孢 唑啉 、头 孢 拉 定 、头孢 曲松 、头孢 哌酮 、痢 特灵 、恩诺 沙星 、诺氟 沙 星 、环 丙沙 星 、 四环 素 、 氯霉 素 、强 力 霉素 、阿 奇 霉 素 、青霉 素 、红霉 素和氧 氟沙 星 ，共 １种 。不 同种属 根 ９
总之 ，细 菌为革 兰 氏阴性 杆菌 ，营养 琼脂 上呈 现乳 白色 、圆 形、 隆起的 中等大 小菌落 ，血琼脂 上菌落 灰 白 色 、 圆形 隆起 、湿 润 、不溶 血 ，则转接 种于 麦康 凯培养 基 ，３ ￣ ７Ｃ培养 ２ｈ ，如长 出粉红色 中等大小菌 落，则挑 ４后 取 菌落 按常 规法做 氧化 酶及 葡萄糖 发酵试 验 ，如 为氧化
得单 一茵 落后 ，革 兰 氏染 色镜 检 ，并根据 细菌 特征 做鉴 别培养 、生化鉴 定试验和 药敏试验 。 （ ）鉴别培养 。麦 ２
康凯 和伊 红美 蓝琼 脂培养 基培 养法 ：该方 法是 为 了鉴别 肠杆 菌科 细菌 。大肠 杆 菌在麦 康凯 琼脂 培养基 上呈 粉红 色菌 落 为阳性 ，伊 红美蓝 琼脂 培养 基上 呈铁锈 色菌 落为 阳性 ，不生长 为阴性 。Ｃ ＭＰ Ａ 实验 ：在血平板 上 ，先接种 １ 条金黄色 葡萄球 菌的划线 ，与此垂直 接种被检 细菌 ，培 养２ ｈ 出现 明显 的１ 血现象 证实 为金 黄色葡 萄球 菌球 ４后 ３ 溶 菌 。（ ）细菌鉴定 。染色镜 检：试验采 用的是细菌学广 ３ 泛使 用 的鉴 别染色 法． 革兰 氏染色 。首先将 细菌 在干燥 的
据 《 抗菌 药物 敏感 性试验 的执 行标准 》推 荐抗 菌药物 ，
并 结 合 临 床抗 菌 药 物 使 用情 况 ，选 取 不 同 的药 敏 纸 片
糖 、七叶苷 、半乳糖 、果糖 、山犁 醇。
３
２１ ０ ２年第 ３期 （ 总第 １ ２ ８
表３ 金黄 色葡 萄球 菌药 敏试 验结 果 药物
酶 阴性 ，发酵葡 萄糖 ，则按 肠杆 菌科 细菌接 种于肠 杆菌
科 细菌生 化鉴定试 剂盒 ，３ ＂ 养２ ｈ ７Ｃ培 ４ 。根据 反应结果 ， 查表确 定细 菌类 型 ；如为革 兰 氏阴性杆 菌 ，氧 化 酶试验
阳性 ，葡 萄糖 发酵试验 阴性 ，则接种 于非 发酵革 兰 氏阴
性杆菌 生化鉴定试 剂盒 ，３ ℃培养２ ｈ ７ ４第 ３期 （ １ １ 总第 １ ２ ８
大肠 杆菌 生化鉴 定试 剂 、金黄色 葡萄 球菌 生化 鉴定试 剂
及 生化培养基 。
试验研 究
１１ 药敏 纸 片 庆大 霉 素、恩 诺沙 星 、林 可霉 素 、头 ．． ３ 孢 吡 肟 、菌 必 治 、妥 布 霉素 、链 霉素 、诺 氟 沙 星（ 哌 氟 酸） 、氨苄西林 、 四环 素、氯 霉素 、头孢拉 定、红霉 素和 头孢孟多 ，均购于杭州天和微 生物试 剂有限公司 。
３３ 麦 饭 石 的防 病 作 用 ． 试 验 中 发 现 ，用 于 生 产 母 猪 ， 可 减 少 仔 猪 软 骨 症 、
贫 血、异 食癖 的发生 ，说 明麦饭 石对 畜禽矿 物质 和微量
元素缺乏症有很好补充作用 。
参考 文献
【］将 永 彰 ，张 道 槐 ，李 杰 生 ．快 速 养 猪 法 ［ ．北 京 ：金 盾 出 版 社 ， １ Ｍ］
脓分 为开 放型子 宫蓄脓 和 闭锁型 子宫蓄 脓 ，后者若 不进 行迅速有效 的药物 治疗可发生脓毒血症或 致死亡【。本病 ２ 】
一
１ 材料与方法
１Ｉ 试 验 材 料 ．
年 四季均可发生 ，无 明显 的季 节性 。 子 宫蓄脓 是 由于 继 发或 原 发性 原 因 ，子 宫分泌 增
１ ． 主要 仪 器设备 ．１ １
中图分类号：￥ ５ ．９ ８８ ３ ２
近年 来 ，犬 作为 伴侣动 物和 宠物 ，养殖 数量 逐渐增 加 ，犬的产 科疾病 ，尤其 是子 宫蓄脓 症越 来越 多见 。子 宫蓄 脓症 是犬发 情后 期的一 种急性 或慢 性疾病 ， 多发于
成年犬 ，往往涉及 多个系统【。根据 临床症状 可将 子宫蓄 ”
红美蓝 、和Ｃ ＡＭＰ 试验 ，然后对 纯化 的 菌株做 必要 的生化鉴 定 ，共分 离￣ ３ 个 菌株 ，其 中有２ 株 大肠杆 菌，９ ］ ｔ６ ４ 株金 黄 色
葡萄球 茵和３ 株疑似 疑似棒状杆 菌菌等 。药敏试验表 明，大肠杆 菌的敏感 药物 为恩诺沙 星等 ，金 黄 色葡萄球 菌的敏感 药 物为头孢孟多 、诺 氟沙星等 。
查表确 定 细菌类 型 ；如镜检 为革 兰 氏阳性球 菌 ，按常规
方法 做触 酶试验 。触 酶试 验阳 性者 ，加做 葡萄糖 发酵 试
验 ，如为 阳性 ，则按 葡萄 球菌属 接种 于葡 萄球菌 属细 菌
生化 鉴定试 剂盒 。根 据反应 结 果，查 表确 定细菌类 型 ； 如镜 检为 革兰 氏 阳性 球菌 ，触 酶试验 阴性 ，按链 球菌 鉴 定方 法做 进一 步做甘 露醇 、葡 萄糖 、乳糖 、麦 芽糖 、蔗 糖 、 淀粉 、七 叶 营 、 山梨 醇 、蕈 糖 、血 清 菊 糖 发 酵试 验 ，精氨 酸 、马 尿 酸 盐 、 明胶 水 解 试 验 ，胆 汁 溶 菌 试 验 。根据反应 结果 ，确 定细菌类 型。 １ ＿ 药敏 试验 （ ）纸片 的选 用 。按 照纸片扩 散法 对 ．３ ２ １
关键词 子宫蓄脓 分 离鉴定 药敏试验
文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ —７ ３２ １）３０ ０ －４ ０ ７ １３ （０ ２０ －０ ２０ 病菌 ，然后 通过药 敏试验 对抗 菌药物 的临床治 疗效 果进 行预 测 ，筛 选 出敏感药 物 ，进 行针对 性 治疗 ，以提 高疗 效和 节省 治疗 费用 。试验 中的病 例为 大肠杆 菌 、金 黄色 葡 萄球菌 和疑似 链球 菌混 合感染 ，且 各分离 菌 已对 某 些 抗菌药物产生不 同程度 的耐药性 。
１ ９１ ９ ．
【］黄唯 一，胡今 尧 ． 猪［ ．北京 ： 业 出版 社， ９５ ２ 养 Ｍ】 农 １ ８．
【】霍全 胜 ． ３ 麦饭 石对 产 蛋鸡 疾病 预防 【 ．中国 禽业 导报 ，０ ５２ ）３ Ｊ 】 ２ ０ （３： ６
（ 稿 日期 ：２ １— ２ １ ） 收 ０ １ １＿ ３
山东畜牧兽医
２ １ 年 第 ３ 卷 ０２ ３
引起犬子 宫蓄脓细菌 的分离鉴定
徐 文 必 （ 云南省 宣威市格 宜镇 畜牧兽 医站 ６５ ０ ） ５４ ４
沈 学文 （ 云南省红河州动物疫病预防控制中心 蒙 自） 肖 啸水 （ 云南农业大学动物科学技术学院 昆明）
摘要 本试验采 集了患子 宫蓄脓 病犬子宫的 内容物 ，并对所有 细菌进行血 分 离和纯化培养 ，部分 细菌做 麦康 凯、伊
后又可能产生抗 药性『。解决这一 问题 的关键 是在临床诊 ８ 】 疗过 程 中，利用 实验 室进行 细菌 分离 、鉴定 ， 以确 定致
云南 省 高端科 技人 才 引进 计划 项 目子项 目：Ｐ ＨＡ 复 合物对 猪 瘟疫 苗和 猪蓝 耳病 疫苗 免 疫效 果影 响， 目 项 编 号：２０ Ｃ１２—。云 南省 教委 基金 项 目：苦 楝皮 提取 物对 犬蛔 虫驱 虫 效果 的研 究． ０９ ５６ １ 通讯 作者
图２ 生 化 试验接 种 前
１ ． 细菌培 养 、生 化鉴 定 和 药敏 试验 （ ）分 离 培 ．２ ２ １ 养 。在超 净工 作 台中将采 集 的子宫 内容物 用划 线法 接种
于营 养琼 脂 、普通 琼脂 、血琼 脂等 培养 基上 ，置 于３ ＂ ７Ｃ 恒 温 培养箱 培养 ２ ～ ８ ，观 察细 菌 的生长 情况 。如 为混 ４４ ｈ 合菌 落 ，则挑 取不 同菌落 接种 于培 养基进 行纯 培养 。获
冰 箱 、立式 圆形压 力蒸汽 高皿 压
加 、 储 纳恶露而 导致子 宫丧 失正常生理功 能 ，且严重危 害患病 动物 健康 的疾病 。细菌 感染 是子 宫蓄脓 的重要 原 因 。抗菌药 物是预 防和 治疗 细菌性传 染病 的主 要措施 ， 但是 细菌对 抗菌 药物 的耐药 性程度 和频 率越来越 高 ，开
半菌 落接种 于三 糖铁 培养 基 中，在 ３ ＂ ７Ｃ恒温 培养 箱培
养 ２ ｈ ，观察变 化 。从三 糖铁培养基 中挑菌落 到营养 琼 ４后 脂 和血 琼脂 上进行 纯培 养 ，用于进 行 生化试 验及 存种 。
左 起 ：精 氨 酸 、 鼠李 糖 、乳 糖 、水 杨 素 、甘 露 醇 、蔗
２ １ 年３ ５ ０ １ ～ 月农大动物 医院就诊 犬中 ，选择 临床症状 出现
腹 围 增 大 、 阴 户 肿 胀 或 阴 门 流 脓 ，经 Ｂ 腹 部 探 查 ， 子 宫 超
内出现液 性暗 区的犬６ ，确 定为 子宫蓄 脓犬 。 （ ）病 头 ２ 料 的采 集 。选择 临床 症状 符合 子宫蓄 脓 的病例 ，对其 进 行 卵 巢子 宫切 除术获 得子 宫及其 内容 物或 直接用 灭菌 棉 签 通 过 阴道 从 子 宫 采 集 其 内容 物 ，放 入 灭 菌试 管 中送 检 。不能及 时送检 的，暂 时保存 于冰箱之后送检 。
１ 试 验 方 法 ． ２
图１ 生 化试 验接 种 前
试 管架另一侧 的生化 管左起 ：葡 萄糖 、懒氨 酸 、麦 芽糖 、 阿拉伯 糖 、棉 籽 糖 、木糖 、卫 矛醇 、 甲基 红试 验 、Ｖ Ｐ －试验 、吲哚试 验
１ ． 病料 采 集及 保 存 （ ）子 宫蓄 脓 犬 的确 定 。从 ．１ ２ １
载 玻片 上涂匀 并 固定好 ，滴加 草酸 铵结 晶紫作 用２ ｉ后 ｍｎ
水洗 ，然后 滴加革兰 氏碘液媒染２ ｎ ｍｉ后水洗 ，再 以９ ％酒 ５ 精 脱色 ｌ ｎ ｍｉ水洗 ，继而滴加 石碳 酸复红复染 ３ ｓ ０ 后水洗 ， 最 后等 涂片干 燥后 拿于 显微镜 下观 察 ，染色 效果好 的片 子 取照 。革兰 氏染 色颜 色是蓝 紫色 的为 阳性 菌 ，红色 的 为阴性 菌 。生化鉴 定 ：参照 《 医微 生物 学实验 指导 》 兽 第 二版 的方法 进行 细菌 的生化 鉴定 【 。把 用于镜 检 的另 ｌ 们