清洁验证取样方法和检验方法验证方案及报告

清洁验证取样方法和检验方法验证方案
一、目的：通过对清洁验证取样方法（棉签取样法）的回收率试验，来验证该取样
方法的回收率和重现性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

二、范围：适用于本公司设备清洁验证的取样和检验方法。

三、责任人：验证小组取样人员、检验人员。

四、内容:
1.概述
制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是棉签擦拭取样，本公司目前所有设备均采用的是棉签擦拭取样方法。

棉签擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。

但取样方法需验证其可行性（回收率和重现性），因此须通过取样方法验证确定清洁验证取样方法的有效性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

2.验证目的
本验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。

3.范围
本次验证适合清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）。

4.验证选取的参照物
本次验证选用黄芩苷（C
21H
18
O
11
）来做取样方法回收率试验和检验方法的线性、精密
度（RSD）。

5.验证周期及验证进度安排
验证由起草人和审核人提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分两个阶段完成。

验证小组成员的培训：
试验时间：
6.验证小组成员及职责
验证小组成员所在部门验证小组职务
质量部QA
负责本次验证的取样人员，监督本次验证过程的实
施，异常情况汇报和处理。

质量部QA主管
验证小组组长，验证方案及报告的起草，提供取样
方法验证方案；负责本次验证方案的培训与指导。

质量部QC
负责进行本次验证过程中的检验、数据记录、分析
和报告。

质量部QC主管
验证方案及报告的审核，提供检验方法验证方案；
负责本次验证实施规程中的指导。

质量部部长负责验证方案及报告的审批。

7.棉签取样方法回收率试验
7.1棉签擦拭取样面积：25cm²。

7.2擦拭取样方法验证原理：
通过将已知浓度的样品涂布在相同材质的不锈钢片上的方法，确定表面棉签表面擦拭法的回收率。

验证浓度范围一般是被测物的残留限度的50%～150%。

验证至少要测定3个浓度，每个浓度制备3份溶液，分别参照清洁验证相关分析部分描述进行取样并计算回收率，并同时比较不同的取样人员取样操作的重复性。

7.3擦拭取样所用的棉签的选择：
棉签擦拭法取样要在验证开始前，对棉签做空白对照试验，确定使用的棉签材料类型、擦拭溶剂对试验数据的无影响。

且棉签要耐受一般有机溶剂的溶解，棉签易脱落纤维，在使用前应用取样用溶剂预先清洗润湿，以免纤维遗留在取样表面。

棉签的选择原则：
①能被擦拭溶剂良好的润湿；
②有一定的机械强度和韧性，足以对设备表面设施加一定的压力和摩擦力，并不易脱落纤维；
③能同擦拭和萃取溶剂相兼容，不对检测产生干扰。

综上所述，考虑到擦拭工具的要求，本次验证选择714A型洁净棉签为擦拭工具。

7.3擦拭取样所用的擦拭溶剂的选择：
溶剂用于擦拭时溶解残留物并吸附在擦拭工具上的残留物萃取出来以便检测。

用于擦拭的溶剂可以相同也可不同。

一般为水、有机溶剂或者两者的混合物，也可用有表面活性剂等以帮助残留物质的溶解。

擦拭溶剂的选择原则：
①溶剂不得在设备上遗留有毒物质；
②应使擦拭取样有较高的回收率；
③不得对随后的检测产生干扰。

综上所述，考虑到擦拭溶剂的要求，本次验证黄芩苷（C
21H
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）的溶解剂甲醇为擦
拭溶剂。

7.3棉签擦拭取样的操作过程
7.3.1本次验证取样员由经过培训的人担任，共2名，1#取样员为质量部QAXXX，2#取样员为为质量部QAYYY，分别进行不同的浓度下的取样回收率试验各3次。

目的是在在考察棉签擦拭取样回收率的同时，通过检测不同的取样人员的取样回收率，并于对照品值做对照，来考察取样人员带来的清洁验证取样风险。

7.3.2样品的配制：QC取黄芩苷（C
21H
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）对照品分别配制浓度为10μg/ml、20μ
g/ml、30μg/ml的样品溶液，分别置于容量瓶内定容，做好标识（1#、2#、3#），填写附录1记录，备用；
7.3.31#取样员，用移液管取浓度为10μg/ml的1#样品（黄芩苷（C
21H
18
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11
）溶液）
5ml，均匀地涂抹在5cm×5cm（25cm²）的不锈钢板上（取样表面），吹干；
7.3.4用甲醇溶剂润湿一支棉签，将其靠在溶剂瓶上挤压已除去多余的溶剂；
7.3.5将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲，平稳而缓慢地按照下图“第一步”擦拭取样表面。

在向前移动的同时将其从一边移动到另一边。

擦拭过程应覆盖整个表面。

翻转棉签，让棉签的另一面按照下图“第二步”进行擦拭，擦拭方向与前次擦拭移动方向垂直。

第一步第二步
7.3.6擦拭完成后，将棉签头剪下放入装有25ml甲醇的具塞三角瓶中，盖塞密封，做好标识，填写附录2记录；
7.3.71#取样员再重复“7.3.3～7.3.6”操作2次后，换2#取样员按照“7.3.3～7.3.6”操作3次。

7.3.8至此，10μg/ml的样品取样完成。

1#、2#取样员再分别重复“7.3.3～7.3.7”操作，完成20μg/ml、30μg/ml的样品取样，做好标识和附录2记录。

7.3.9另取一支棉签，用溶剂润湿后，将其直接放入装有25ml甲醇的具塞三角瓶中，盖塞密封。

将其与其它样品一起送至QC处检验。

8.检验方法的线性和精密度（RSD）
8.1线性系指在设计的范围内，检测结果和试样中被测物的浓度（量）直接呈线性比例关系的能力。

清洁验证通常选用杂质线性的可接受值R²＞0.98为可接受标准。

8.2本次清洁验证检验方法回收率试验，按照消痤丸含量测定方法（高效液相色谱法）
进行检测，此方法是本公司目前在清洁验证中所采用的检验方法。

8.3由同一QC将上述样品一一检测，计算，并做好检验记录，分析线性关系（附录3），计算精密度（RSD），填写附录1、附录2记录。

9.可接受标准：
9.1平均回收率（%）≥70%；（取样回收率（%）=测得量（棉签中黄芩苷（C
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）
的含量）/加入量（5ml样品溶液中黄芩苷（C
21H
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）的含量）×100%）
9.2线性R²＞0.98；
9.3同一取样人员平均回收率的精密度（RSD）＜10%；不同人员回收率的精密度（RSD）＜5%。

10.验证中出现变更及偏差的处理
10.1验证中出现的偏差参照《偏差处理程序》(SMP-QA-007-02)进行处理。

10.2验证中出现的变更参照《变更控制管理程序》(SMP-QA-019-02)进行处理。

11.附表记录及所有验证资料由质量部QA本次验证的所有资料归档。

12.本次验证的培训记录见附表4。

附录1：
清洁验证取样方法和检验方法验证检验记录
1、样品配制记录：
检验人：检验日期：复核人：复核日期：
2、样品检验记录（含计算，如空格不够，可另附页）：
检验人：检验日期：复核人：复核日期：附录2：
清洁验证取样方法和检验方法验证记录样品取样检验
样品浓度样品编号样品量取样人试样号检验结果检验人回收率
平均回收率
10μg/ml1#5ml1# 5ml2# 5ml3# 5ml4# 5ml5# 5ml6#
20μg/ml2#5ml7# 5ml8# 5ml9# 5ml10# 5ml11# 5ml12#
30μg/ml3#5ml13# 5ml14# 5ml15# 5ml16# 5ml17# 5ml18#
空白对照
同一取样
人员王佳
平均回收率精密度（RSD）王艳
不同人员平均回收率回收率的精密度（RSD）取样人：取样日期：
检验人：检验日期：
复核人：复核日期：
附录3：
线性分析
分析结论：
分析人：分析日期：复核人：复核日期：附表4：
本次验证培训记录
年月日时分——时分培训地点
内容清洁验证取样和检验方法验证方案培训人
被培训人员签名
清洁验证取样方法和检验方法验证报告
1.概述
本次验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。

本次验证取样员由经过培训的人担任，共2名，1#取样员为质量部QAXXX，2#取样员为为质量部QAYYY，分别进行不同的浓度下的取样回收率试验各3次。

目的是在考察棉签擦拭取样回收率的同时，通过检测不同的取样人员的取样回收率，并于对照品值做对照，来考察取样人员带来的清洁验证取样风险。

2.可接受标准：
2.1平均回收率（%）≥70%；（取样回收率（%）=测得量（棉签中黄芩苷（C
21H
18
O
11
）
的含量）/加入量（5ml样品溶液中黄芩苷（C
21H
18
O
11
）的含量）×100%）
2.2线性R²＞0.98；
2.3同一取样人员平均回收率的精密度（RSD）＜10%；不同人员回收率的精密度（RSD）＜5%。

3.验证结果及评价
检测结果检测结果及记录见附录1～4
同一人员1#QA王佳平均
回收率
平均回收率的
精密度（RSD）2#QA王艳
不同人员的平均回收率不同人员的平均回收率的（RSD）线性
评价与建议
评价项目评价结果验证试验是否有遗漏
验证实施过程中对验证方案有无修改、
修改原因。

验证是否经过批准
验证记录是否完整
验证试验结果是否符合标准要求，是否
需要进一步补充试验
是否有偏差，及对偏差的说明是否合理
参加验证人员签名质量部QA（取样人员）质量部QC（检验人员）质量部QA主管
质量部QC主管
质量部部长
本次验证
结论
质量部QA主管/日期：
质量部部长/日期：
备注当清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）变更时，重新进行验证。

后附本次验证过程中的所有记录和报告及分析结果。