细胞生物学章细胞增殖与调控
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阶段
从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三 类:①连续分裂细胞,连续进行细胞周期运转因而又 称为周期细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。
②休眠细胞,暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进 入细胞周期,称G0期细胞,如淋巴细胞、肝细胞等。 ③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂 的细胞,又称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞 等等。
Experimental demonstration of the coordinated Synthesis of DNA and hitones.
细胞周期长短测定:
细胞周期的时间长短与细胞类型有关,如: 小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时,人类胃 上皮细胞24小时,骨髓细胞18小时,培养的人成 纤维细胞18小时,CHO细胞14小时,HeLa细胞 21小时。不同类型细胞的G1长短不同,是造成细 胞周期差异的主要原因。
多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分裂,形成多核体。 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化,前者称自然同步化,后者称为人工同步化。 S期:DNA和组蛋白合成,两者立即结合形成核小体。
期(如结缔组织中的成纤维细胞等)。 TG2-G2期时间, TS-S期时间, TC-细胞,
周期中的主要事件
G1期:合成蛋白、糖类、脂类等,但不合成DNA, 是细胞的最初生长期。决定G1期向S期转换的特 定时期称起始点(或限制点,或检验点),受内 外多种因素的控制。 S期:DNA和组蛋白合成,两者立即结合形成核 小体。 G2期:合成大量蛋白质,能否进入M期,受G2期 检验点的控制。 M期:细胞分裂
流式细胞分 选仪检测法 根据DNA含 量分类细胞, 根据类群细 胞的数量推 断时间。
流式细胞仪检测细胞周期
细胞周期的时间
细胞同步化:
细胞同步化(synchronization)是指在自然过 程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化, 前者称自然同步化,后者称为人工同步化。
1、自然同步化 多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分
根据DNA含量分类细胞,根据类群细胞的数量推断时间。 细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定) 有丝分裂选择法:使单层培养的细胞处于对数增殖期,此时分裂活跃。
G0期:细胞暂时离开细胞周期,停止分裂, 某些水生动物的受精卵:如海胆卵可以同时授精,最初的3次细胞分裂是同步的,再如大量海参卵受精后,前9次细胞分裂都是同步化
裂,形成多核体。数量众多的核处于同一细胞质中, 进行同步化分裂,使细胞核达108,体积达6~9cm。
某些水生动物的受精卵:如海胆卵可以同时授精, 最初的3次细胞分裂是同步的,再如大量海参卵受精 后,前9次细胞分裂都是同步化进行的。
增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子 移入适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。
进行的。 多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分裂,形成多核体。 根据DNA含量分类细胞,根据类群细胞的数量推断时间。
去执行一定的功能,称静止期细胞, G0期多发生 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化,前者称自然同步化,后者称为人工同步化。
②S期(synthesis phase),指DNA复制的时期,只有在这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中; 概述:细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程(也称细胞生活周期,或细胞繁殖周期),可分为四个阶段:
在G1期。 G0期一旦得到信号,会迅速返回细胞周 可将几乎所有的细胞同步化。
细胞生物学第十章细胞增殖与调控 其优点是操作简单,同步化程度高,细胞不受药物伤害,缺点是获得的细胞数量较少。 细胞沉降分离法:不同时期的细胞体积不同,而细胞在给定离心场中沉降的速度与其半径的平方成正比,因此可用离心的方法分离。 决定G1期向S期转换的特定时期称起始点(或限制点,或检验点),受内外多种因素的控制。
开始之前的一段时间; G0期一旦得到信号,会迅速返回细胞周期(如结缔组织中的成纤维细胞等)。
③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等等。 优点是同步化程度高,适用于任何培养体系。 数量众多的核处于同一细胞质中,进行同步化分裂,使细胞核达108,体积达6~9cm。
细胞生物学第十章细胞增殖与调控
(优选)细胞生物学第十章细 胞增殖与调控
第一节 细胞周期与细胞分裂
一、细胞周期
概述:细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂
结束所经历的过程(也称细胞生活周期,或细胞繁殖周期), 可分为四个阶段:
①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间 隙时间;
②S期(synthesis phase),指DNA复制的时期,只有在 这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中;
①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间隙时间;
③G2期(gap2),指DNA复制完成到有丝分裂 其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小,因此常用TdR双阻断法诱导细胞同步化。
④M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂开始到结束。 其优点是可用于任何悬浮培养的细胞,缺点是同步化程度较低。 (分裂细胞约占1%~2%)
④M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂 增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子移入适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。
DNA合成阻断法:选用DNA合成的抑制剂,可逆地抑制DNA合成,而不影响其他时期细胞的运转,最终可将细胞群阻断在S期或G/S交 界处。
开始到结束。 细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定)
脉冲标记DNA 复制和细胞分裂 指数观察测定法
H3-TdR标记, 洗涤,培养,定 时取样,放射自 显影分析 BrdU标记,抗 体染色观察
细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定)
TG2-G2期时间, TS-S期时间, TC-细胞, TM-M期时间:(M/总)X 周期时间,TG1= TC -(TG2 + TM + TS )
从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三 类:①连续分裂细胞,连续进行细胞周期运转因而又 称为周期细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。
②休眠细胞,暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进 入细胞周期,称G0期细胞,如淋巴细胞、肝细胞等。 ③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂 的细胞,又称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞 等等。
Experimental demonstration of the coordinated Synthesis of DNA and hitones.
细胞周期长短测定:
细胞周期的时间长短与细胞类型有关,如: 小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时,人类胃 上皮细胞24小时,骨髓细胞18小时,培养的人成 纤维细胞18小时,CHO细胞14小时,HeLa细胞 21小时。不同类型细胞的G1长短不同,是造成细 胞周期差异的主要原因。
多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分裂,形成多核体。 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化,前者称自然同步化,后者称为人工同步化。 S期:DNA和组蛋白合成,两者立即结合形成核小体。
期(如结缔组织中的成纤维细胞等)。 TG2-G2期时间, TS-S期时间, TC-细胞,
周期中的主要事件
G1期:合成蛋白、糖类、脂类等,但不合成DNA, 是细胞的最初生长期。决定G1期向S期转换的特 定时期称起始点(或限制点,或检验点),受内 外多种因素的控制。 S期:DNA和组蛋白合成,两者立即结合形成核 小体。 G2期:合成大量蛋白质,能否进入M期,受G2期 检验点的控制。 M期:细胞分裂
流式细胞分 选仪检测法 根据DNA含 量分类细胞, 根据类群细 胞的数量推 断时间。
流式细胞仪检测细胞周期
细胞周期的时间
细胞同步化:
细胞同步化(synchronization)是指在自然过 程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化, 前者称自然同步化,后者称为人工同步化。
1、自然同步化 多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分
根据DNA含量分类细胞,根据类群细胞的数量推断时间。 细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定) 有丝分裂选择法:使单层培养的细胞处于对数增殖期,此时分裂活跃。
G0期:细胞暂时离开细胞周期,停止分裂, 某些水生动物的受精卵:如海胆卵可以同时授精,最初的3次细胞分裂是同步的,再如大量海参卵受精后,前9次细胞分裂都是同步化
裂,形成多核体。数量众多的核处于同一细胞质中, 进行同步化分裂,使细胞核达108,体积达6~9cm。
某些水生动物的受精卵:如海胆卵可以同时授精, 最初的3次细胞分裂是同步的,再如大量海参卵受精 后,前9次细胞分裂都是同步化进行的。
增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子 移入适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。
进行的。 多核体:如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分裂,形成多核体。 根据DNA含量分类细胞,根据类群细胞的数量推断时间。
去执行一定的功能,称静止期细胞, G0期多发生 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化,前者称自然同步化,后者称为人工同步化。
②S期(synthesis phase),指DNA复制的时期,只有在这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中; 概述:细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程(也称细胞生活周期,或细胞繁殖周期),可分为四个阶段:
在G1期。 G0期一旦得到信号,会迅速返回细胞周 可将几乎所有的细胞同步化。
细胞生物学第十章细胞增殖与调控 其优点是操作简单,同步化程度高,细胞不受药物伤害,缺点是获得的细胞数量较少。 细胞沉降分离法:不同时期的细胞体积不同,而细胞在给定离心场中沉降的速度与其半径的平方成正比,因此可用离心的方法分离。 决定G1期向S期转换的特定时期称起始点(或限制点,或检验点),受内外多种因素的控制。
开始之前的一段时间; G0期一旦得到信号,会迅速返回细胞周期(如结缔组织中的成纤维细胞等)。
③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等等。 优点是同步化程度高,适用于任何培养体系。 数量众多的核处于同一细胞质中,进行同步化分裂,使细胞核达108,体积达6~9cm。
细胞生物学第十章细胞增殖与调控
(优选)细胞生物学第十章细 胞增殖与调控
第一节 细胞周期与细胞分裂
一、细胞周期
概述:细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂
结束所经历的过程(也称细胞生活周期,或细胞繁殖周期), 可分为四个阶段:
①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间 隙时间;
②S期(synthesis phase),指DNA复制的时期,只有在 这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中;
①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间隙时间;
③G2期(gap2),指DNA复制完成到有丝分裂 其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小,因此常用TdR双阻断法诱导细胞同步化。
④M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂开始到结束。 其优点是可用于任何悬浮培养的细胞,缺点是同步化程度较低。 (分裂细胞约占1%~2%)
④M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂 增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子移入适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。
DNA合成阻断法:选用DNA合成的抑制剂,可逆地抑制DNA合成,而不影响其他时期细胞的运转,最终可将细胞群阻断在S期或G/S交 界处。
开始到结束。 细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定)
脉冲标记DNA 复制和细胞分裂 指数观察测定法
H3-TdR标记, 洗涤,培养,定 时取样,放射自 显影分析 BrdU标记,抗 体染色观察
细胞周期各阶段的时间(细胞周期测定)
TG2-G2期时间, TS-S期时间, TC-细胞, TM-M期时间:(M/总)X 周期时间,TG1= TC -(TG2 + TM + TS )