检测项目技术操作标准程序规范文件,血清胆固醇(CHO)测定

xx人民医院检验科
检测项目技术操作标准程序规范文件血清胆固醇(CHO)
测定
文件编号:xxxxx
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1目的
为操作者提供标准操作规程
2适用范围
只适用于此项目的操作
3定义
无
4测定原理和临床意义
4.1 测定原理胆固醇经酶水解和氧化被测定。

在酚和过氧化物酶存在情况下，过氧化氢和4-
氨基安替比林形成有颜色的醌类物质。

4.2 临床意义
长期的高胆固醇、高饱和脂肪和高热量饮食，遗传因素、缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可使胆固醇升高；遗传因素、甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病等可使胆固醇降低。

5 实验室条件
5.1实验室：北京豪迈生物工程有限公司生化实验室
5.2温湿度：温度：15-32℃，湿度：20-85%
6 标本要求
6.1标本种类
6.1.1检体种类：血清
6.1.2检体量：最适量3ml 最小量2 ml
6.1.3分析量：最适量500μl 最小量300μl
6.1.4容器：普通隔离胶管（黄色）
6.1.5采集条件：检查对象生活饮食处于正常状态，避免剧烈运动，避免精神紧张，一般采
用空腹（至少禁食8小时，但不长于16小时），也可根据大夫的要求在饭后的
不同时间段采血（一定要注明时间）。

6.2使用条件
6.2.1保存条件：血清：20 - 25 ℃可稳定2天，4 - 8 ℃可稳定7天，- 20 ℃可稳定3个
月。

试剂：自生产日期起，2-8℃避光保存，可稳定至瓶标日期(18个月)；
15-25℃中可稳定2周。

6.2.2特殊容器：无
6.2.3预防措施：因为检体有感染的危险性，使用时必须戴手套，防止检体飞散污染环境和
器具，应尽快处理。

6.3拒收标准：采血量不足、严重溶血、严重乳糜血等。

7试剂
7、1购入试剂：
试剂名称品牌等
级
保存条
件
有效期限
产品批
号
R1: 磷酸盐缓冲液，4-
氨基安替比林，酚，过氧化物酶，胆固醇酯酶，胆固醇氧化酶HOMA
2-8℃
见试剂盒
标签
见试剂
盒标签
7.2 试剂配制:无需配制，开瓶即用，稳定至瓶标日期(无污染条件下）。

程序规范文件
8仪器
HITACHI 7180全自动生化分析仪
9校准
9.1校准品准备
9.1.1校准品：1）豪迈多项复合校准物；货号13160；4×5ml
2）试剂盒内校准液；1×3ml（液体无需配置）
9.1.2校准品（干粉）配制：
1）器具要求：5ml干净的吸管/移液管1支，洗耳球一个
2）配制方法：将冻干的校准品取出，用吸管（校准专用）或移液管吸纯水（要求水质>15M Ω）5mL溶解，注意余下的水不得吹入瓶内，应在瓶壁停留15秒。

将盖盖紧，轻
轻颠倒5次，放置10分钟，再轻轻颠倒即可使用。

将溶好的校准品进行分装，用
双层封口膜封好，放入-20℃冰箱保存备用。

3）保存条件
容器：复溶后可分装到仪器样品杯中。

温度：冻干品2-8℃复溶品<-20℃
效期：未开瓶冻干品2-8℃，可在有效期内保持稳定；复溶品<-20℃可稳定1个月。

4）标签：复溶后瓶上应标明溶解日期、品名、效期、配制人。

9.2校准
9.2..1校准频度：一般每周一次，如下列情况发生时，应进行一次校准：
1）改变试剂的批号。

2）仪器进行过一次大的维护或更换灯泡比色杯等重要部件。

3）质控出现异常的趋势或偏移，或超出了实验规定的接受限，采取一般性纠正措施后，
不能识别出纠正问题时。

9.2.2校准方法两点校准
1）将分装好的校准品取出，放在室温自然溶解（约20分钟），待其完全溶解后轻轻颠倒6次即可。

2）将校准品放在校准位上进行校准。

（详见仪器操作规程）
9.2.3校准判定：校准通过后应进行质控验证，若质控在规定的范围内，即可判定校准成功，
若如果质控结果仍不在允许范围内，说明校准可能失败。

9.2.4异常处理：若校准失败，应对校准品、试剂、仪器等进行排查；若校准通过但质控失控，
应对质控品、试剂、仪器进行排查。

10精度管理
10.1质控物质
10.1.1 名称：正常复合质控血清，货号13511/13951；
异常复合质控血清，货号13512/13151。

10.1.2 品牌：豪迈
10.1.3 规格：6×5mL
10.2质控物质的使用和配制（干粉）：
10.2.1器具要求：5ml干净的吸管/移液管1支，洗耳球一个
程序规范文件
10.2.2配制方法：
1）将冻干的质控品取出，用吸管（校准专用）或移液管吸纯水（水质>15MΩ）5ml溶解，注意余下的水不得吹入瓶内，应在瓶壁停留15秒。

2）将盖盖紧，轻轻颠倒5次，放置10分钟，再进行颠倒5次，并颠倒放置 10分钟，再颠倒5次，放置10分钟，轻轻颠倒即可使用。

3）将溶好的质控品放入4-8℃备用（可保存3天）。

如果进行分装，用双层封口膜封好，放入-20℃冰箱保存备用（可保存1个月）。

4）标签：复溶后瓶上应标明溶解日期、品名、效期、配制人。

10.3测定周期：每日早开机后测定质控一次，午后测定一次质控。

10.4保存方法：未开瓶的质控品于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定；复溶的质控品可放置在
4-8℃保存3天；在≤-20℃可稳定1个月。

10.5质控操作方法：
10.5.1 将分装好的质控品取出，放在室温自然溶解（约20分钟），待完全溶解后，将
其上下轻轻颠倒6次即可。

10.5.2把质控品放在质控位上做质控。

（详见仪器操作规程）
10.6 质控规则：根据设定的靶值和标准差绘制Levey—Jennings控制图，一般采用Westgard多规
则质控方法
①1 2S测定值超出x±2S，这是警告规则，要求操作人员检查是否还符合以下其中任一规则。

②1 3S质控值超出x±3S，是失控规则，为随机误差。

③2 2S连续2次结果超出了同方向的 x+2S或x-2S，是失控规则，为系统误差。

④R 4S一个质控值超出x+2S，另外一个超出了x-2S，是失控规则，为随机误差。

⑤10x连续10次质控值在x一侧，是失控规则，为系统误差。

10.7 失控处理：
1）核查所用检测试剂的质量，是否过期或失效；检查校准品是否失效；检查质控品是否失效；
有无仪器维护不良；检查工作人员的操作是否正确；检查当日实验室内温度，湿度等环境因素是否异常；有无特殊影响试验结果的情况。

2）针对查找出的原因采取相应的纠正措施，并重新测定质控,如果质控结果仍不在允许范围内，应对检测仪器进行重新校准，必要时与仪器或试剂厂家联系，以得到技术支持。

3）记录在案：将检查和修正过程详细记录在案；，操作者，组长签字。

10.8 数据记录及保存形式：x质控图（电子版），原始仪器打印记录应由审核者签字。

11操作程序
11.1标本准备
11.1.1容器：普通隔离胶管（黄色）或普通真空采血管（红色）
11.1.2标本核收：按项目分类，按规定进行标本审核。

审核申请单与标本管的项目、姓名、标
本种类。

如果标本不合格，应填写《不合格标本登记》。

11.1.3标本前处理：
1)将标本编号，离心（血清一定要离好），离心3000转/分钟10分钟，两遍。

2)将离心的标本进行检查，如血清不好，应重新离心，按号依次放入盘内，对号入座。

标
本要放正，以免碰针。

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11.2操作程序详见仪器操作规程
11.2.1开机前准备。

11.2.2清理数据。

11.2.3校准（必要时）
11.2.4做质控。

11.2.5输机。

11.2.6放标本。

11.2.7开始分析。

11.2.8数据传送
11.2.9试验完毕后维护工作。

11.2.10关机。

11.2.11保存标本
11.2.12登记并记录当日仪器的状况，并签字。

11.3仪器分析条件分析方法：终点法
R1 空白A + 样品37℃读取吸光度A
（300μl）（3μl）孵育5min
11.4危险品管理：
11.5.1标本可能有感染性，因此检验需戴手套，轻拿轻放，避免标本溅洒污染。

11.5.2对废弃的标本及废液处理，必须遵守废弃物管理办法进行处理。

11.5.3保护和安全的提示：标本均视为有潜在传染性。

12计算：
方程式：
A标本-A空白
总胆固醇浓度（ mmol/L） = ×标准液浓度（mmol/L）
A标准－A空白
标准液浓度: 5.17mmol/L (200 mg/dl)(可另购)
换算: CHO(mmol/L) =CHO(mg/dl)×0.02586
13结果报告
13.1参考范围的种类：
13.1.1参考范围：
1）正常值： 3.1- 5.17 mmol/L(200 mg/dl)
边缘水平：5.17-6.21 mmol/L(200 - 240 mg/dl)
危险水平：＞6.21 mmol/L(240 mg/dl)
* 建议各实验室建立自己的参考范围。

2）设定依据：《血清胆固醇测定试剂盒(酶学终点比色法)说明书》，北京豪迈生物工程有限公司.YZB/京0300-2009 。

根据临床试验正常人的结果，经过统计学计算得来。

13.1.2 影响因素（生理变动）：一般检查常采用空腹一定要禁食8小时，已不能空腹时间过长
不能超过16小时。

此时间一定要严格执行.。

13.1.3不确定因素：严重乳糜血（乳糜血中的微脂肪颗粒能够导致大量的光反射和散射，严
重的可导致整个光路被遮断，从而引起极大的测试误差）；严重溶血（溶血会导致测试
血清的透光性差，影响测试。

而且导致血球内的成分进入到血清中从而引起较大的测
试误差）；样本放置太久。

13.2异常结果处理
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1)复查范围：>19mmol/L超出此范围必须复查，用生理盐水稀释血清重测，结果乘以稀释倍数。

2)危急值：**（*建议各个检测单位根据自身实际情况自行建立危急值的范围。

）
3)异常结果的处理和联系方式：按《危急结果处理程序》、《报告单审核制度》进行处理。

13.3报告形式
报告样式：CHO ** mmol/L
14性能检测
1)线性1- 19mmol/L
2)检出界限1- 19mmol/L
3)检出灵敏度1mmol/L
4)特异性期待测值的90-110%
5)精密度批内五次重复批内CV<5%（高值）或CV<10%（低值）
6)批间相对极差：CV<10%
7)准确度检测结果与其他方法基本一致。

15影响因素
1)干扰物质：血红蛋白，抗坏血酸，胆红素。

2)药物：不详
16注意事项
1.血红蛋白≤200 mg/dl，抗坏血酸≤5mg/dl，胆红素≤40mg/dl，不影响测试。

2.试剂中含0.095%叠氮化钠，请注意防护。

17参考文献
1.WS/T124-1999《临床化学体外诊断试剂盒质量检验总则》.
2. GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂(盒)通用技术要求》.
3. 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第三版.中华人民共和国卫生部医政司编.
南京：东南大学出版社，2006.
4.郑铁生，鄢盛恺.临床生物化学检验.第2版.北京：中国医药科技出版社，2010.
5.Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4th ed. Washington DC：AACC Press，
1995.
编写：审核：批准：
批准日期：年月日。